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三重实时荧光聚合酶链反应
构建黄牛和牦牛源性成分同步检测方法
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食品安全质量检测学报
2023年 第16期14卷 187-195页
作者:
木其勒
Bayarmaa Gun-Aajav
刘国强
呼日
特格希巴雅尔
牛慧敏
郭梁
锡林郭勒职业学院锡林郭勒生物工程研究院
锡林浩特026000
Department of Biology
School of Arts and SciencesNational University of MongoliaUlaanbaatar 14201
锡林郭勒盟食品科学与检测实验中心(锡林郭勒盟农畜产品检验检测中心)
锡林浩特026000
目的建立一种拥有内源质控的
三重实时荧光聚合酶链反应
(polymerase chain reaction,PCR)技术,用以快速鉴定肉和乳中黄牛和牦牛的源性成分。方法首先对黄牛肉、牦牛肉、黄牛奶、牦牛奶等7种动物产品进行特异性检测,同时通过稀释梯度方法...
详细信息
目的建立一种拥有内源质控的三重实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,用以快速鉴定肉和乳中黄牛和牦牛的源性成分。方法首先对黄牛肉、牦牛肉、黄牛奶、牦牛奶等7种动物产品进行特异性检测,同时通过稀释梯度方法验证此方法的绝对检出限(limit of detection,LOD),最后通过黄牛和牦牛肉掺假模拟试验确定该方法的相对灵敏度。结果该方法的特异性强,能特异性地检测到来源于黄牛和牦牛肉和乳的DNA,稳定扩增的内源质控有效地避免了假阴性结果,本方法针对黄牛奶的绝对LOD为2.5×10^(-3)5.0×10‒3 ng,针对牦牛奶的绝对LOD为2.5×10^(-3)5.0×10^(‒2)ng,本方法对黄牛肉和牦牛肉混合肉的相对灵敏度可达0.1%牦牛肉。结论所建立的三重实时荧光PCR方法特异性强、灵敏度高,可实现黄牛和牦牛源性以及内源质控的同步检测,又能通过内源质控排除实验假阴性结果。
关键词:
三重实时荧光聚合酶链反应
黄牛
牦牛
内源质控
特异性
灵敏度
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