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三萜类物质的提取及抗肿瘤活性研究

三萜类物质的提取及抗肿瘤活性研究

作者：孙培龙上海应用技术大学

学位级别：硕士

三萜是一类天然活性物质,灵芝是三萜含量较高的真菌,传统的有机溶剂浸提等提取方法效率较低且有溶剂残留,随着超声、微波和超高压技术应用于三萜的提取,效率有所提高,但超高压对设备条件要求高。三萜类物质具有显著地抑制肿瘤活性,一直... 详细信息

三萜是一类天然活性物质,灵芝是三萜含量较高的真菌,传统的有机溶剂浸提等提取方法效率较低且有溶剂残留,随着超声、微波和超高压技术应用于三萜的提取,效率有所提高,但超高压对设备条件要求高。三萜类物质具有显著地抑制肿瘤活性,一直是研究的热点。目前我国富含三萜类成分的饮料尚未深度开发,三萜类饮料具有广阔的前景。基于此,本课题首先以灵芝(GanodermaLcidum)三萜为研究对象,结合压力和温度两个重要的提取因素,使用高压提取法提取三萜,以降低对设备的要求和提高操作的安全性,并与超声和微波提取法进行对比,以期开发一种高效便捷的三萜提取方法;其次以齐墩果酸和熊果酸等典型三萜为研究材料,处理MGC803、Caco-2以研究其抗肿瘤活性,处理Ana-1细胞以研究其氧化损伤修复作用;最后以提取的三萜为原料,通过对饮料的风味和稳定性进行优化研究,制备富含三萜的饮料。实验结果表明:在三种经单因素优化的提取方法中,高压提取法效率最高,仅30min提取率达到13.31mg/g,超声和微波提取法提取率最高分别为10.08mg/g和12.21mg/g,高压提取法分别提高了 30%和10%。进一步通过响应面优化高压提取法的最佳提取条件为:温度87℃、75%乙醇、压力1MPa、料液比50ml/g、时间30min,提取率达到了 14.21%;其次,MTT实验结果显示齐墩果酸和熊果酸均能显著抑制MGC803和Caco-2细胞的增殖,抑制率具有时间和浓度依赖性,齐墩果酸和熊果酸抑制MGC803和Caco-2细胞的IC50浓度分别为45μg/ml和30μg/ml、85μg/ml和60μg/ml。Western blot实验结果显示熊果酸能显著性下调p53蛋白的表达,表明p53蛋白参与了熊果酸抑制MGC803细胞增殖过程。氧化损伤修复实验结果显示齐墩果酸和熊果酸能显著提高过氧化氢损伤的Ana-1细胞存活率,以上结果表明以齐墩果酸和熊果酸为代表的三萜类物质具有显著性抑制肿瘤和氧化损伤修复活性;最后,饮料的工艺研究表明,糖酸比主要影响饮料的口感,果汁对饮料风味影响较大,胶体能增加饮料的稳定性。经优化后,三萜饮料的主要组分为25ml、0.1M柠檬酸、25ml、0.1M苹果酸、150ml、1M白砂糖溶液;60ml苹果汁,30ml柠檬汁;0.3g三萜;食用胶添加量为1%(胶体复配黄原胶与魔芋胶比例为2:1)。本研究可为三萜的高效提取和深度开发研究提供参考,具有一定的理论和实际价值。

关键词：三萜类物质提取方法抗肿瘤饮料

不同中药水提物对孤苓核生柄孔菌发酵产胞内三萜类物质和胞外多糖的影响

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菌物学报 2017年第12期36卷 1667-1673页

作者：马燕余晓斌江南大学生物工程学院江苏无锡214122

将11种中药水提物分别加入孤苓核生柄孔菌液体发酵中,以生物量、胞外多糖和三萜类物质为指标,从中选出最佳中药、最佳中药浓度以及最佳中药浓度组合。结果表明,对孤苓核生柄孔菌生长与发酵产物影响最大的中药是何首乌和菊花2种。菊花对... 详细信息

将11种中药水提物分别加入孤苓核生柄孔菌液体发酵中,以生物量、胞外多糖和三萜类物质为指标,从中选出最佳中药、最佳中药浓度以及最佳中药浓度组合。结果表明,对孤苓核生柄孔菌生长与发酵产物影响最大的中药是何首乌和菊花2种。菊花对三萜类物质的影响较大,何首乌则对孤苓核生柄孔菌生长和发酵胞外多糖影响较大。孤苓核生柄孔菌发酵生物量达到最大(23.97g/L)的条件为添加何首乌水提物浓度15g/L;产胞外多糖的最佳(4.15g/L)条件为添加何首乌水提物浓度5g/L;总三萜类物质产量达到最高值(397.99mg/L)的条件为组合中药水提物:何首乌和菊花水提物浓度均为25g/L。

关键词：孤苓核生柄孔菌三萜类物质胞外多糖生物量中药水提物

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核桃楸外果皮三萜类物质的提取及抑菌活性

森林工程 2020年第3期36卷 37-43页

作者：郭映雪孙墨珑东北林业大学化学化工与资源利用学院哈尔滨150040

为探讨核桃楸外果皮三萜类物质提取方法的响应面优化,研究其抑菌活性,本文采用超声辅助的乙醇溶剂提取法提取核桃楸外果皮三萜类物质,并利用响应面法优化其提取工艺。在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合法设计多因素试验,分... 详细信息

为探讨核桃楸外果皮三萜类物质提取方法的响应面优化,研究其抑菌活性,本文采用超声辅助的乙醇溶剂提取法提取核桃楸外果皮三萜类物质,并利用响应面法优化其提取工艺。在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合法设计多因素试验,分析乙醇体积分数、超声时间和液料比对三萜类物质提取率的影响,确定最佳提取条件。此外,进一步研究三萜类物质对黄孢原毛平革菌(白腐真菌)和绿色木霉菌的抑菌活性。结果表明:核桃楸外果皮三萜类物质的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数为80%、超声时间为44 min、液料比为19∶1(mL/g),此时核桃楸外果皮三萜类物质的提取率为2.62 mg/g。抑菌实验表明,核桃楸外果皮三萜类物质对黄孢原毛平革菌(白腐真菌)和绿色木霉菌均具有抑菌效果,最大抑菌圈直径分别达到18.43 mm和18.92 mm。本研究表明核桃楸外果皮三萜类提取物具有良好的抑菌活性,为核桃楸外果皮的开发和研究提供参考。

关键词：核桃楸三萜类物质超声提取响应面抑菌活性

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陕北红枣中三萜类物质的抗氧化性分析

分子植物育种 2017年第8期15卷 3267-3271页

作者：张向前王贵峰王萌萌王晓东张珊珊赵晓飞田野贺晓龙陕西省红枣重点实验室(延安大学) 延安716000 延安大学生命科学学院延安716000

为了分析陕北红枣中三萜类物质的含量及抗氧化活性,本试验选取狗头枣和木枣为研究对象。以95%乙醇为提取溶剂,采用索氏提取法分别提取枣皮和果肉中的三萜类物质,体外试验法评价红枣中各类三萜提取液对DPPH·和双氧水的清除能力。研究表... 详细信息

为了分析陕北红枣中三萜类物质的含量及抗氧化活性,本试验选取狗头枣和木枣为研究对象。以95%乙醇为提取溶剂,采用索氏提取法分别提取枣皮和果肉中的三萜类物质,体外试验法评价红枣中各类三萜提取液对DPPH·和双氧水的清除能力。研究表明,不同品种间总三萜含量差异较大,其中狗头枣枣皮三萜类物质的含量最高,为0.148 mg/g,木枣果肉总三萜含量最低,为0.136 mg/g。参试红枣品种中提取的三萜类物质在不同的抗氧化体系中都表现出较好的抗氧化活性,红枣三萜类物质含量与各抗氧化指标均呈显著正相关,为陕北红枣的开发利用提供了理论依据。

关键词：狗头枣木枣三萜类物质抗氧化性

同步提取山楂皮中总多酚、总黄酮和三萜类物质的工艺优化

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河南工业大学学报（自然科学版） 2018年第5期39卷 69-75页

作者：吕丹唐克慧王宇弛张春然王瑛瑛张静霞刘长英成都大学四川抗菌素工业研究所四川成都610052

以山楂皮为材料,采用乙醇溶剂浸提法,考察提取温度、提取时间、液料比、乙醇体积分数对山楂皮中总多酚、总黄酮和三萜类物质提取率的影响,在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验优化山楂皮中3种活性物质的同步提取工艺。确定最优的... 详细信息

以山楂皮为材料,采用乙醇溶剂浸提法,考察提取温度、提取时间、液料比、乙醇体积分数对山楂皮中总多酚、总黄酮和三萜类物质提取率的影响,在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验优化山楂皮中3种活性物质的同步提取工艺。确定最优的提取工艺参数:液料比20∶1(m L/g),在提取温度为75℃下选择体积分数为70%的乙醇浸提2.0 h。在此条件下得到总多酚、总黄酮及三萜类物质的提取率分别为30.31%、11.10%、1.98%。优化的提取工艺稳定可行,可兼顾山楂皮中总多酚、总黄酮和三萜类物质的提取,为更有效地利用山楂皮资源提供参考。

关键词：山楂皮总多酚总黄酮三萜类物质同步提取

超临界CO_2萃取菌草灵芝孢子油中三萜类物质和脂肪酸的测定

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食品与机械 2006年第1期22卷 74-76页

作者：王杉周科勤范青生胡居吾江西省疾病预防控制中心江西南昌330029 南昌大学教育部食品科学重点实验室中德联合研究院江西南昌330047

研究超临界CO2萃取菌草灵芝孢子油中三萜类物质含量和脂肪酸的组成。用分光光度法分析其中三萜类物质含量;用薄层色谱和气质联用分析其中脂肪酸的组成。超临界CO2萃取菌草灵芝孢子油提取率为24.82%;三萜类物质含量为30.25%;菌草灵芝孢... 详细信息

研究超临界CO2萃取菌草灵芝孢子油中三萜类物质含量和脂肪酸的组成。用分光光度法分析其中三萜类物质含量;用薄层色谱和气质联用分析其中脂肪酸的组成。超临界CO2萃取菌草灵芝孢子油提取率为24.82%;三萜类物质含量为30.25%;菌草灵芝孢子油主要以甘油三酯形式存在,检出15种脂肪酸,不饱和脂肪酸占61.15%。超临界CO2萃取菌草灵芝孢子油中三萜类物质的含量较高,不饱和脂肪酸是其脂肪酸的主要组成成分。

关键词：菌草灵芝孢子油超临界CO2 三萜类物质脂肪酸组成气相色谱-质谱

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茶薪菇同时生产多糖和三萜类物质的发酵工艺

中国酿造 2009年第1期28卷 39-42页

作者：高兴喜缪静张桂春刘林德李杏伟鲁东大学生命科学学院山东烟台264025

研究了茶薪菇同时高效生产多糖和三萜类物质的发酵工艺。在摇瓶中考察了培养基种类、初始接种量、初始pH值及不同装液量对茶薪菇菌体生长及多糖和三萜类物质生产的影响。结果表明,以第Ⅰ种培养基,在初始pH值为6.5,初始接种量为400mg/L,... 详细信息

研究了茶薪菇同时高效生产多糖和三萜类物质的发酵工艺。在摇瓶中考察了培养基种类、初始接种量、初始pH值及不同装液量对茶薪菇菌体生长及多糖和三萜类物质生产的影响。结果表明,以第Ⅰ种培养基,在初始pH值为6.5,初始接种量为400mg/L,装液量为200mL时,可同时高效生产茶薪菇多糖和三萜类物质,并且产量分别达到2.10g/L和842.51 mg/L。

关键词：茶薪菇多糖三萜类物质发酵

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灵芝三萜类物质抗高血压实验研究

时珍国医国药 2007年第2期18卷 307-309页

作者：刘冬孙海燕李世敏深圳职业技术学院广东深圳518055

目的研究灵芝三萜类物质对原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)的降压作用。方法以SHR和正常wistar-kyoto(WKY)大鼠为实验对象,1次ig给药,观察灵芝三萜类物质对SHR和WKY血压的影响。结果给药剂量分别为450 mg/kg(体... 详细信息

目的研究灵芝三萜类物质对原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)的降压作用。方法以SHR和正常wistar-kyoto(WKY)大鼠为实验对象,1次ig给药,观察灵芝三萜类物质对SHR和WKY血压的影响。结果给药剂量分别为450 mg/kg(体重)和900 mg/kg(体重)时,灵芝三萜类物质对SHR大鼠具有显著降压效果(P三萜类物质对正常WKY大鼠无明显降压作用。相同质量(45 g)灵芝子实体和菌丝体灵芝三萜提取物喂食SHR大鼠,子实体提取物具有明显降压效果(P三萜类物质对SHR大鼠具有明显的降压作用。

关键词：灵芝三萜类物质降压子实体菌丝体

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白桦树皮三萜类物质的分布规律

白桦树皮三萜类物质的分布规律

作者：王倩东北林业大学

学位级别：硕士

白桦(Betula platyphylla)是桦木科落叶乔木,树皮中含有丰富的三萜类物质桦木酸、桦木醇和羽扇醇。这三种物质及其衍生物大多具有良好的抗癌、抗肿瘤、抗真菌、抗HIV等生物活性,是一类极具发展前景的生物活性物质。本研究建立了一种简... 详细信息

白桦(Betula platyphylla)是桦木科落叶乔木,树皮中含有丰富的三萜类物质桦木酸、桦木醇和羽扇醇。这三种物质及其衍生物大多具有良好的抗癌、抗肿瘤、抗真菌、抗HIV等生物活性,是一类极具发展前景的生物活性物质。本研究建立了一种简便、快速的测定白桦中三萜类物质含量的高效液相色谱分析方法,并对白桦树皮中桦木酸、桦木醇和羽扇醇含量进行了部位差异、季节变化的研究。1、建立了一种简便、快速的测定白桦树皮中三萜类物质含量的高效液相色谱分析方法:采用美国Thermo Hypersil GOLD C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),流速1.2mL/min,检测波长210 nm,进样量20μL,流动相A:水(含0.1%乙酸),流动相B:乙腈(含0.1%乙酸)。梯度洗脱程序:在10 min内流动相B的比例由90%线性升高到100%,并保持13 min,随后在2 min内线性降为90%,平衡5 min后等待再次进样。样品制备采用100%乙醇作为溶剂,超声提取白桦树皮100 min。2、室温下不同存放时间(1～5天)的白桦树皮中主要三萜类成分桦木酸、桦木醇和羽扇醇的含量变化差异并不显著。其中桦木酸含量在9.32 mg/g～10.57 mg/g之间波动;桦木醇含量在225.20 mg/g～238.94 mg/g之间波动;羽扇醇含量在5.77 mg/g～6.61mg/g之间波动。3、白桦不同高度树皮中桦木酸、桦木醇和羽扇醇三种三萜类物质含量的变化较小。桦木酸含量在8.30 mg/g～10.40 mg/g范围内波动。桦木醇含量在176.68 mg/g～216.09 mg/g范围内波动。羽扇醇含量基本稳定,波动范围为11.43 mg/g～13.12 mg/g。4、桦木酸和羽扇醇从外向内随树皮位置变化很小,而桦木醇含量随树皮由外向内略有降低,但差异均不显著。桦木酸含量在31.18 mg/g～32.64 mg/g之间,羽扇醇含量在3.00 mg/g～3.11 mg/g之间,桦木醇含量在树皮不同位置外侧最高,为248.98 mg/g,然后随树皮不同位置向内逐渐降低,最内层为209.93 mg/g。5、桦木酸、桦木醇和羽扇醇三种物质含量的季节变化都不是太大。桦木酸含量全年在7.83 mg/g～9.75 mg/g之间波动,其中7月份含量最低,从8月份起缓慢升高,到10月份含量达到全年最高,11月起到1月,桦木酸含量缓慢下降,1月份起含量稳定在小范围内波动;桦木醇含量全年在151.03 mg/g～174.44mg/g之间波动,7月份含量最低,12月份最高;羽扇醇含量在7.86 mg/g～9.26 mg/g之间波动,2月份含量最低,12月份含量最高。桦木醇和羽扇醇的变化规律较缓。

关键词：白桦三萜类物质高效液相色谱法