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三叶青内生真菌Phomopsis ***-7的化学成分研究

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中草药 2017年第15期48卷 3032-3036页

作者：黄艳萍吴学谦胡玲帅永鑫况燚杨胜祥浙江农林大学浙江省林业生物质化学利用重点实验室浙江临安311300 宁波卫生职业技术学院浙江宁波315100

目的研究三叶青Tetrastigma hemsleyanum内生真菌Phomopsis ***-7发酵产物中的化学成分。方法采用色谱分离技术进行分离和纯化,并根据谱学数据鉴定化合物的结构。结果从Phomopsis ***-7的发酵产物中分离得到15个化合物,包括13个芳基苯... 详细信息

目的研究三叶青Tetrastigma hemsleyanum内生真菌Phomopsis ***-7发酵产物中的化学成分。方法采用色谱分离技术进行分离和纯化,并根据谱学数据鉴定化合物的结构。结果从Phomopsis ***-7的发酵产物中分离得到15个化合物,包括13个芳基苯并呋喃类化合物和2个甾体类化合物,分别鉴定为wittifuran X(1)、4-hydroxy-2-(4′-hydroxy-2′-methoxyphenyl)-6-methoxybenzofuran-3-carbaldehyde(2)、erypoegin J(3)、桑辛素S(4)、桑辛素T(5)、桑辛素C(6)、wiffifuran E(7)、iteafuranal A(8)、burttinol D(9)、7-methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-3-methyl-5-(3-prenyl)-benzofuran(10)、桑辛素N(11)、桑辛素P(12)、桑辛素M(13)、过氧麦角甾醇(14)和25-hydroxy-ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one(15)。结论化合物1~9为首次从该属真菌中分离得到。

关键词：三叶青内生真菌苯并呋喃类化合物甾体桑辛素

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三叶青的化学成分及其体外抗肿瘤活性研究

中国药学杂志 2015年第8期50卷 658-663页

作者：林婧纪明妹黄泽豪于虹敏许文范世明福建中医药大学中西医结合研究院福州350122 福建中医药大学药学院福州350122 福建中医药大学生物医药研发中心福州350122

目的研究三叶青全草的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法运用多种色谱技术分离三叶青中化学成分，采用^1H—NMR、^13C—NMR、MS、HR-MS等波谱技术确定化合物结构。以噻唑蓝法，测试各黄酮化合物对HepG2，HCT-8，A5493种肿瘤细胞的体外... 详细信息

目的研究三叶青全草的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法运用多种色谱技术分离三叶青中化学成分，采用^1H—NMR、^13C—NMR、MS、HR-MS等波谱技术确定化合物结构。以噻唑蓝法，测试各黄酮化合物对HepG2，HCT-8，A5493种肿瘤细胞的体外抑制作用。结果分离鉴定13个化合物，分别为β-谷甾醇（1）、十六烷酸（2）、十七烷酸（3）、芹菜素（4）、槲皮苷（5）、山柰酚-3，7-O-L-二鼠李糖苷（6）、山柰酚-3-O-新橙皮糖苷（7）、芹菜素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）、芹菜素-8-C—α—L-吡喃鼠李糖-（1—2）-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、芹菜素-8-C-β-D-吡喃葡萄糖苷（10）、芹菜素-8-C-β-D-吡喃葡萄糖-（1-4）-β-D-吡喃葡萄糖苷（11）、荭草素（12）、异荭草素（13）。结论化合物4～6，8～13系首次从该植物中分离得到，体外噻唑蓝活性筛选表明三叶青黄酮类化合物具有一定的抗肿瘤细胞增殖作用。

关键词：三叶青化学成分抗肿瘤活性

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三叶青原花青素结构分析

食品科学 2018年第16期39卷 247-255页

作者：李鑫刘景玲李彦郭万里王大巾梁宗锁西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100 浙江理工大学生命科学学院浙江杭州310018

利用核磁共振碳谱、反相高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术对三叶青根、茎及叶原花青素进行... 详细信息

利用核磁共振碳谱、反相高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术对三叶青根、茎及叶原花青素进行结构分析。结果表明,三叶青原花青素主要由原花青定和原翠雀定构成,末端单元以儿茶素为主,延伸单元以表儿茶素和表没食子儿茶素为主。三叶青根、茎及叶原花青素的平均聚合度分别为4.89±0.33、3.77±0.19及4.45±0.48。利用MALDI-TOF MS检测出三叶青根、茎原花青素的三聚体到十聚体,叶原花青素的三聚体到十一聚体。每个聚体内部普遍存在(表)儿茶素和(表)没食子儿茶素结构单元,没食子酰基化以及A型连接。三叶青根、茎及叶原花青素在结构上具有一定的相似性。本研究结果可为三叶青原花青素的基础研究和开发利用提供一定参考。

关键词：三叶青原花青素核磁共振碳谱反相高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS和质量亏损过滤技术的三叶青黄酮类化合物定性分析

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质谱学报 2020年第4期41卷 359-367页

作者：孙梦佳王焕军丁富娟容蓉刘江亭蒋海强山东中医药大学药学院山东济南250355 山东中医药大学中医药经典理论教育部重点实验室山东济南250355 山东中医药大学山东省中医药基础研究重点实验室山东济南250355 山东中医药大学实验中心山东济南250355

采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole/exactive Orbitrap mass spectrometry,UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)和质量亏损过滤技术(mass defect filter,MDF)对三叶青黄酮类化合物进行定性分析。通过查阅文献,确定三叶青黄酮类物质母核作为MDF模板,根据取代基的数目和种类确定MDF的质量范围、质量亏损范围,采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS采集—MDF-Orbitrap Traditional Chinese Medicine Library(OTCML)数据库检索—Mass Frontier验证的鉴定策略,对三叶青乙醇冷浸液所含的黄酮类物质进行定性分析,共鉴定出41种黄酮类化合物,其中19个为首次发现。该方法对于准确识别三叶青黄酮类化合物,进而科学评价三叶青质量、促进三叶青合理开发具有一定的指导意义。

关键词：三叶青超高效液相色谱-四极杆-静电轨道阱-高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS) 质量亏损过滤技术(MDF)

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三叶青对呼吸道合胞病毒作用实验研究

天然产物研究与开发 2019年第6期31卷 1070-1074,1100页

作者：王丹丹高荣闫滨山东中医药大学药学院山东宏济堂制药集团有限公司山东中医药大学中医学院济南250355

为探讨三叶青在抗病毒中的作用,本文选取三叶青乙醇提取物正丁醇萃取部分和乙酸乙酯萃取部分,采用细胞病变抑制实验,以治疗指数(TI)为研究指标,研究各溶剂萃取部位、柱分离部分在MA104细胞中对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial vir... 详细信息

为探讨三叶青在抗病毒中的作用,本文选取三叶青乙醇提取物正丁醇萃取部分和乙酸乙酯萃取部分,采用细胞病变抑制实验,以治疗指数(TI)为研究指标,研究各溶剂萃取部位、柱分离部分在MA104细胞中对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的抑制作用,从而筛选出三叶青抗RSV有效部位,分离活性成分。三叶青乙醇提取物正丁醇萃取部分和乙酸乙酯萃取部分的TI值分别为128和64,相对于阳性对照药利巴韦林(TI值为6.25)。说明三叶青乙醇提取物正丁醇萃取部分和乙酸乙酯萃取部分具有抗RSV的活性且明显优于利巴韦林。

关键词：三叶青呼吸道合胞病毒治疗指数体外抗病毒

三叶青三氯甲烷部位化学成分及其抗肿瘤活性研究

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中国药学杂志 2015年第21期50卷 1857-1860页

作者：丁丽章璐幸邱彦王延辉浙江医药高等专科学校药学系浙江宁波315100 厦门大学医学院福建厦门361102

目的研究三叶青三氯甲烷部位的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法利用硅胶,制备薄层板,LH-20等各种色谱技术分离单体化合物,通过NMR和质谱对化合物进行结构鉴定,并采用气-质联用色谱对三叶青三氯甲烷部位的其他成分进行分析,采用MTT法... 详细信息

目的研究三叶青三氯甲烷部位的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法利用硅胶,制备薄层板,LH-20等各种色谱技术分离单体化合物,通过NMR和质谱对化合物进行结构鉴定,并采用气-质联用色谱对三叶青三氯甲烷部位的其他成分进行分析,采用MTT法对分离得到的单体化合物进行抗肿瘤活性评价。结果通过经典色谱法分离得到6个化合物,分析鉴定为β-谷甾醇（1）,4-羟基-3-甲氧基苯甲醛（2）,齐墩果酸（3）,5-羟甲基糠醛（4）,壬二酸（5）和香草酸（6）,并通过GC-MS指认了22个化合物。结论化合物2~6首次从三叶青中分离得到。化合物1和3对Hela229有较强的细胞毒活性,IC50分别为40.78,25.69μg·m L-1。化合物3对A375有较强的细胞毒活性,IC50为69.87μg·m L-1。三叶青三氯甲烷部位的体外抗肿瘤活性由多种成分共同作用产生。

关键词：三叶青气质联用抗肿瘤 4-羟基-3-甲氧基苯甲醛 5-羟甲基糠醛香草酸

三叶青黄酮对肺癌A549细胞生长抑制与MAPKs通路关系的研究

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中国药理学通报 2014年第1期30卷 101-104页

作者：钟良瑞魏克民浙江中医药大学附属省立同德医院肿瘤科浙江杭州310053 浙江省中医药研究院浙江杭州310007

目的探讨三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制。方法采用CCK-8检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜观察Hoechst 33258染色的细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测p-... 详细信息

目的探讨三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制。方法采用CCK-8检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜观察Hoechst 33258染色的细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测p-p38、p-ERK,p-JNK蛋白表达变化。结果体外实验CCK-8检测显示三叶青黄酮各浓度组作用不同时间点细胞的抑制率比较,差异有显著性;呈剂量、时间依赖性。荧光显微镜观察经Hoechst 33258染色的细胞凋亡形态变化,显示细胞减少,细胞核改变和凋亡小体形成。流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率呈明显的量-效关系。Western blot法检测表明三叶青黄酮可以上调A549细胞中p-p38和p-ERK蛋白表达,且与浓度呈正相关。结论三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞具有明显抑制增殖,促进凋亡作用,其机制可能与激活p38MAPK途径和ERK途径有关。

关键词：三叶青人肺癌细胞凋亡 MAPKs通路 p38MAPK ERK

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三叶青种质资源遗传多样性的SRAP分析

植物遗传资源学报 2018年第6期19卷 1222-1228页

作者：尹明华石光禹郁雪婷陈茂光廖玉万志庭蔡红陈荣华上饶师范学院生命科学学院江西上饶334001 上饶市红日农业开发有限公司江西上饶334700

对我国三叶青种质资源64个样本的遗传多样性进行SRAP分析。结果表明,从30条引物中筛选出10条条带清晰、重复性好的引物对64份供试材料的基因组DNA进行扩增.扩增出了57个多态位点,多态百分数为66. 67%~100%(均值为90. 38%),每条引物扩增... 详细信息

对我国三叶青种质资源64个样本的遗传多样性进行SRAP分析。结果表明,从30条引物中筛选出10条条带清晰、重复性好的引物对64份供试材料的基因组DNA进行扩增.扩增出了57个多态位点,多态百分数为66. 67%~100%(均值为90. 38%),每条引物扩增得到的多态位点为4~10(均值为5. 7);平均检测等位基因数(Na)、平均有效等位基因数(Ne)、平均Nei's基因多样性指数(H)、平均Shannon多样性指数(I)分别为1. 9038、1. 5150、0. 3009和0. 45259;遗传相似系数的变异范围为0. 4603~0. 9206。通过UPGMA法聚类,在遗传相似性系数为0. 7256处,64份供试材料可分为9组;在江西三叶青种质中,既可与湖北、湖南、福建、广西等地三叶青种质聚为一类,也可与浙江三叶青种质聚为一类。此外,根据引物EM3ME3、EM13ME13和EM14ME14构建了64个基因型的指纹图谱。这些数据可为我国三叶青种质资源的评价、鉴定和新品种选育提供参考。

关键词：三叶青种质资源遗传多样性 SRAP分析

三叶青地上部分显微结构多样性与总黄酮含量相关性

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西北农业学报 2023年第11期32卷 1754-1766页

作者：程薪宇郭梦桥王靖茹徐璐珂张彩霞曾荧洪森荣上饶师范学院生命科学学院江西上饶334001 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院哈尔滨150025 黑龙江省分子细胞遗传与遗传育种重点实验室哈尔滨150025 赣东北特色植物资源保育与生态修复重点实验室江西上饶334001

为揭示不同种源地三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels&Gilg)茎、叶显微结构多样性,及其与地上部分总黄酮含量的相关性,以49个三叶青种质资源(简称“资源”)为研究对象,对各资源茎、叶的16个比例性状进行比较,采用相关性分析对茎叶比... 详细信息

为揭示不同种源地三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels&Gilg)茎、叶显微结构多样性,及其与地上部分总黄酮含量的相关性,以49个三叶青种质资源(简称“资源”)为研究对象,对各资源茎、叶的16个比例性状进行比较,采用相关性分析对茎叶比例性状及其与种源地位置和地上部分总黄酮含量关系进行统计分析。结果表明:茎维系数(NSB/LSL)、茎韧纤比(SPF/LSL)、茎维宽比(SXW/LSS)和茎木比(TSL/LSS)等,以及叶部的柄翅高比(PWL/PH)、柄翅宽比(DPW/PW)、柄皮层比(PCT/PH)和气孔密度(SD)等性状资源间变异系数较大,可作为资源间鉴别的解剖学依据。各资源比例性状与种源地地理位置相关性分析结果显示:随着种源地的南移,茎维管组织越来越发达,叶柄两翅逐渐变得不明显,皮层发达;随着种源地由东向西推移,叶气孔密度逐渐降低,叶柄两翅逐渐靠近,髓部变得发达。组织化学定位及相关性分析结果表明:三叶青地上部分黄酮类化合物主要分布于茎部薄壁组织中,地上部分总黄酮含量与茎长宽比(LSL/LSS)、茎皮层比(SCT/LSL)、茎韧纤比(SPF/LSL)和茎木比(TSL/LSS)存在极显著相关性,这些茎性状可作为高黄酮三叶青品种的形态学筛选依据。

关键词：三叶青显微结构总黄酮含量相关性