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三丁基氧化锡(TBTO)对太平洋牡蛎性成熟的影响

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青岛海洋大学学报（自然科学版） 2001年第5期31卷 701-706页

作者：李琪尾定诚森胜义王如才青岛海洋大学教育部海水养殖重点实验室青岛266003 日本东北大学农学部海洋生物资源教育研究中心日本东北大学农学部海洋生物系

利用流水饲养法研究了不同浓度的三丁基氧化锡 (0 .5 μg/ L和 1.0 μg/ L TBTO)对太平洋牡蛎卵巢中卵母细胞直径、RNA/ DNA比、蛋白质和卵黄蛋白含量的影响。卵母细胞径的增长在0 .5 μg/ L实验组受到阻碍 ,并随着 TBTO浓度的增大而更... 详细信息

利用流水饲养法研究了不同浓度的三丁基氧化锡 (0 .5 μg/ L和 1.0 μg/ L TBTO)对太平洋牡蛎卵巢中卵母细胞直径、RNA/ DNA比、蛋白质和卵黄蛋白含量的影响。卵母细胞径的增长在0 .5 μg/ L实验组受到阻碍 ,并随着 TBTO浓度的增大而更加明显。TBTO暴露组的 RNA/ DNA比在精巢中无明显变化 ,但在卵巢中显著低于对照组。 TBTO暴露组的卵巢中蛋白质和卵黄蛋白含量显示了与 RNA/ DNA比相同的变化趋势 ,表明 TBTO的积累阻碍卵黄蛋白的合成。TBTO暴露4 2 d采集的牡蛎样品中出现 3个雌雄同体 ,暗示

关键词：三丁基氧化锡太平洋牡蛎性成熟流水饲养法卵巢蛋白质

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三丁基氧化锡对坛紫菜体细胞生长的影响

中国海洋大学学报（自然科学版） 2006年第S2期36卷 67-71页

作者：杨堃峰戴继勋刘红全王娟赵瑞祯中国海洋大学海洋生命学院山东青岛266003 广西民族大学广西南宁530006

研究了不同浓度三丁基氧化锡(Tributyltin oxide,TBTO)对坛紫菜(Porphyra haitanensis)离体细胞生长的影响。结果表明:低浓度(1 nmol/L)的TBTO则只有抑制作用。TBTO对坛紫菜细胞72 h的半数致死浓度约为1.9 nmol/L。

关键词：三丁基氧化锡坛紫菜生长

两种星鲽组织细胞系的建立及三丁基氧化锡对其毒性作用的研究

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两种星鲽组织细胞系的建立及三丁基氧化锡对其毒性作用的研究

作者：郭雪阳中国海洋大学

学位级别：硕士

近年来,由于现代工农业的快速发展和人们保护环境意识的淡漠,包括有机锡化合物在内的大量有害物质通过陆源污染和海上污染等多种途径进入到海水中,给海洋环境造成了极大的破坏。这其中,三丁基氧化锡(TBTO)作为广泛应用于船体和渔网中的... 详细信息

近年来,由于现代工农业的快速发展和人们保护环境意识的淡漠,包括有机锡化合物在内的大量有害物质通过陆源污染和海上污染等多种途径进入到海水中,给海洋环境造成了极大的破坏。这其中,三丁基氧化锡(TBTO)作为广泛应用于船体和渔网中的一种生物防附涂料,被认为是毒性最强的环境污染物和内分泌干扰物之一,其主要对水生生物的生长发育及体内组织和器官的功能造成较大影响,导致其大量死亡及繁殖力下降,严重威胁水生生物的种群资源及水产养殖业的发展,并可通过生物富作用,对人类健康造成极大威害。圆斑星鲽Verasper variegatus (Temminck et Schegel)和条斑星鲽Verasper moseri (Jordan et Gilbert)隶属于硬骨鱼纲(Osteicthys),鲽形目(Pleuronectiformes),鲽科(Pleuronectidae),星鲽属(Verasper),均为大型冷温性底栖名贵鱼种。近年来,其养殖规模逐渐扩大,创造了巨大的经济价值,但同样深受包括TBTO在内的多种污染物的毒害。而鱼类细胞系作为一种细胞毒理学的体外研究工具,广泛应用于对海水中各种污染物进行检测,并且其与利用活体鱼进行的体内检测相比具有经济、灵敏、快速等优点,因此迫切需要建立星鲽的组织细胞系进行细胞毒理学的体外研究。但到目前为止,仍未有成功建立星鲽组织细胞系的研究报道。为了建立星鲽的组织细胞系,本文分别采用0.5%透明质酸酶-0.2%Ⅱ型胶原酶联合消化和0.25%胰蛋白酶消化的方法对圆斑星鲽鳍组织和条斑星鲽鳃组织进行处理,并利用添加有50μg/mLN-乙酰葡萄糖盐酸盐、50μg/mL羧甲基壳寡糖、10ng/mL碱性成纤维样生长因子(bFGF)和40ng/mL I型胰岛素样生长因子(IGF-I)的含20%胎牛血清(FBS)的DMEM/F-12、Leibovitz's L-15和M199培养液(pH7.2)分别在18℃、22℃和26℃下进行了两种组织的体外培养。结果显示,圆斑星鲽鳍组织和条斑星鲽鳃组织的最适培养液均为含有上述添加物的20%FBS-DMEM/F-12 (pH7.2),最适培养温度均为22℃;在此最适条件下启动原代培养的结果显示,圆斑星鲽鳍组织和条斑星鲽鳃组织分别于启动培养7d和10d后便开始有细胞迁出,细胞形态均为成纤维样,生长分裂状态良好,并分别于第20d和第30d形成了汇合细胞单层;经传代后,两种组织细胞均能成功进行继代培养,圆斑星鲽鳍细胞现已传至第110代,条斑星鲽鳃细胞现已传至第70代,已成功建立了圆斑星鲽鳍细胞连续性细胞系(SHF01)和条斑星鲽鳃细胞的连续性细胞系(BFG01)。对两种细胞系细胞的生长特性分析结果显示,第60代圆斑星鲽鳍细胞和条斑星鲽鳃细胞的群体倍增时间分别为41.5h和54.4h,表明其生长分裂状态依然旺盛;对两种细胞系细胞的染色体分析结果显示,第60代两种星鲽组织细胞系细胞的染色体数目虽然出现了非整倍性,但其特征性染色体数仍均为46条。其中,圆斑星鲽鳍细胞系细胞具有46条染色体的比例为57.7%,并具有其典型的二倍体核型特征(46t),而条斑星鲽鳃细胞系细胞具有46条染色体的比例为68.3%,并具有其典型的正常二倍体核型特征(44t+2sm)。上述结果表明,本文所建立的两种细胞系确为圆斑星鲽鳍和条斑星鲽鳃连续性细胞系。为研究三丁基氧化锡(TBTO)对两种星鲽细胞系细胞的毒性作用,本文选取0.5-64 ng/mL的TBTO分别对上述两种细胞系细胞进行了处理,并通过二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法和蛋白含量测定法检测了TBTO对两种细胞系细胞的毒性作用。MTT染色和蛋白含量测定结果显示,0.5ng/mL TBTO即可对两种细胞产生毒性作用,并表现出明显的剂量-效应关系。经计算TBTO对圆斑星鲽鳍细胞的48h半数抑制浓度(48h-IC50值)分别为41.58 ng/mL和44.49 ng/mL,而对条斑星鲽鳃细胞的48h-IC50值分别为37.07 ng/mL和39.48 ng/mL;对TBTO处理的条斑星鲽鳃细胞的酶活性测定结果显示,40ng/mL TBTO可引起条斑星鲽鳃细胞的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性显著变化。上述结果表明,TBTO对两种细胞系细胞的毒性作用具有浓度依赖性,其中条斑星鲽鳃细胞对TBTO的敏感性要高于圆斑星鲽鳍细胞,更适合用于TBTO的毒性作用研究,并且其SOD、GST和GSH-Px酶活性可以用作TBTO毒性作用的检测和评价指标。综上所述,本文成功建立了圆斑星鲽鳍和条斑星鲽鳃的连续性细胞系,发现条斑星鲽鳃细胞对TBTO具有更高的敏感性,其SOD、GST和GSH-Px可以用作T

关键词：圆斑星鲽条斑星鲽鳍细胞系鳃细胞系三丁基氧化锡

蒽、多氯联苯、三丁基氧化锡对坛紫菜生长发育的影响

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蒽、多氯联苯、三丁基氧化锡对坛紫菜生长发育的影响

作者：杨堃峰中国海洋大学

学位级别：硕士

本论文主要是在实验室条件下，研究了不同浓度的蒽、多氯联苯、三丁基氧化锡在不同作用时间对坛紫菜体细胞生长发育以及可溶性糖、可溶性蛋白、超氧化物歧化酶、丙二醛含量的影响，结果表明： 1、低浓度的PCB(＜5μg／L)可抑制细胞... 详细信息

本论文主要是在实验室条件下，研究了不同浓度的蒽、多氯联苯、三丁基氧化锡在不同作用时间对坛紫菜体细胞生长发育以及可溶性糖、可溶性蛋白、超氧化物歧化酶、丙二醛含量的影响，结果表明： 1、低浓度的PCB(＜5μg／L)可抑制细胞色素体恢复，而低浓度An(＜0.2mg／L)和TBTO(＜0.3μg／L)则影响不大。但在培养的初始几天内，这三种污染物在低浓度时均表现出明显的“兴奋效应”，可加速细胞的分裂。高浓度的An(＞0.4mg／L)、PCB(＞10μg／L)、TBTO(＞0.6μg／L)对坛紫菜体细胞表现出明显的“毒性效应”，能够抑制色素体恢复，阻止细胞分裂，破坏细胞团放散，畸变细胞形态，加速细胞衰亡等。 2、低浓度的An(＜0.2mg／L)、PCB(＜5μg／L)、TBTO(＜0.3μg／L)暴露下，坛紫菜叶状体的可溶性糖含量在72小时内与对照组相比没有显著差异，且随时间增长而升高。而高浓度的An(＞0.4mg／L)、PCB(＞10μg／L)、TBTO(＞0.6μg／L)刺激下，坛紫菜叶状体的可溶性糖含量在72小时内均呈现先上升后下降的趋势。 3、低浓度的An(＜0.4mg／L)、PCB(＜5μg／L)、TBTO(＜0.3μg／L)可以在短时间内促进坛紫菜叶状体的可溶性蛋白含量的增加，随后转变为抑制;而高浓度的An(＞0.8mg／L)、PCB(＞10μg／L)、TBTO(＞0.6μg／L)则使可溶性蛋白含量在72小时内均随时间的延长而下降。 4、低浓度的An(＜0.2mg／L)、PCB(＜5μg／L)、TBTO(＜0.3μg／L)可以在短时间内诱导SOD的产生：高浓度An(＞0.4mg／L)、PCB(＞10μg／L)、TBTO(＞0.6μg／L)和较长时间的暴露会导致SOD活性受抑制;同一种污染物，高浓度组出现抑制的时间要比低浓度组早。 5、无论An、PCB和TBTO的浓度高低，丙二醛(MDA)含量均随时间延长而上升，但高浓度An(＞0.4mg／L)、PCB(＞40μg／L)、TBTO(＞1.2μg／L)的组间变化并不明显。 6、可溶性糖、可溶性蛋白、SOD、丙二醛对污染物的反应是比较复杂的，若要以此为指标监测海洋环境，还需要大量的资料来进行分析比较。

关键词：坛紫菜蒽多氯联苯三丁基氧化锡生长发育

人卵巢颗粒细胞中三丁基氧化锡引起的过量活性氧和DNA损伤导致的细胞凋亡

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青岛农业大学学报（自然科学版） 2020年第3期37卷 206-211页

作者：崔瑛雪尹珅青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 青岛农业大学生命科学学院/生殖科学研究院/山东省高校动物生殖与种质创新重点实验室

三丁基氧化锡被广泛应用于轮船防腐剂中,已有报道三丁基氧化锡对鱼类、哺乳动物有不同程度的损害。卵巢颗粒细胞是一类在卵泡发育和卵母细胞成熟中具有重要作用的细胞。本文研究了三丁基氧化锡对人卵巢颗粒细胞系(simian virus 40 immor... 详细信息

三丁基氧化锡被广泛应用于轮船防腐剂中,已有报道三丁基氧化锡对鱼类、哺乳动物有不同程度的损害。卵巢颗粒细胞是一类在卵泡发育和卵母细胞成熟中具有重要作用的细胞。本文研究了三丁基氧化锡对人卵巢颗粒细胞系(simian virus 40 immortalized human ovarian granulosa,SVOG)细胞的毒性损伤,结果表明,三丁基氧化锡降低了SVOG细胞活力并具有剂量依赖性。荧光探针DCFH-DA和细胞免疫荧光试验分析发现,三丁基氧化锡暴露会使SVOG细胞内产生过量的活性氧,并造成DNA损伤相关蛋白RAD51表达量上升;细胞流式结果显示SVOG细胞发生了细胞凋亡,同时三丁基氧化锡刺激SVOG细胞升高了凋亡相关基因Bax的mRNA表达量,降低了Bcl-2的mRNA表达量。综上所述,三丁基氧化锡暴露可以使SVOG细胞产生过量的活性氧和DNA损伤,诱发细胞凋亡的发生,最终减少细胞活力。

关键词：三丁基氧化锡卵巢颗粒细胞细胞凋亡 DNA损伤活性氧

三丁基氧化锡对菲律宾蛤仔免疫损伤机理的研究

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现代农业科技 2011年第23期 331-331,333页

作者：魏云波王兴民张瑞凌李福伟丁尚志山东省分析测试中心山东济南250014 中国海洋大学海洋生命学院

选用生长在潮间带的重要水产经济物种菲律宾蛤仔,研究了三丁基氧化锡(TBTO)对其在非特异性免疫系统中起关键性作用的血细胞和酚氧化酶的影响作用。结果表明,TBTO能引起菲律宾蛤仔血细胞数量剧烈减少,显著降低其酚氧化酶的合成量、总酶... 详细信息

选用生长在潮间带的重要水产经济物种菲律宾蛤仔,研究了三丁基氧化锡(TBTO)对其在非特异性免疫系统中起关键性作用的血细胞和酚氧化酶的影响作用。结果表明,TBTO能引起菲律宾蛤仔血细胞数量剧烈减少,显著降低其酚氧化酶的合成量、总酶活性和比活性,进而破坏菲律宾蛤仔免疫系统。该项研究为尽早建立海洋环境污染物毒性检测体系创造了条件。

关键词：菲律宾蛤仔三丁基氧化锡血细胞酚氧化酶免疫损伤机理