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中国老年学杂志 2023年第16期43卷 4034-4038页

作者：蔡昭皓张贵金王列万聪郭莉都江堰市第二人民医院四川成都611830

目的探讨铁螯合剂(去铁胺)对脑出血后继发性损伤大鼠模型记忆功能及海马区神经元骨架蛋白表达的影响。方法采用胶原酶Ⅶ注射构建脑出血大鼠模型;成功造模后,对照组以21.6 mg/kg毗拉西坦生理盐水溶液灌胃处理,去铁胺(低、中、高剂量)组... 详细信息

目的探讨铁螯合剂(去铁胺)对脑出血后继发性损伤大鼠模型记忆功能及海马区神经元骨架蛋白表达的影响。方法采用胶原酶Ⅶ注射构建脑出血大鼠模型;成功造模后,对照组以21.6 mg/kg毗拉西坦生理盐水溶液灌胃处理,去铁胺(低、中、高剂量)组分别以50、100、200 mg/kg去铁胺灌胃处理,假手术组和模型组每日以生理盐水灌胃给药,连续4 w。跳台试验仪、避暗自动测试仪检测大鼠的记忆功能;尼式染色检测海马区神经元细胞的活性,末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)缺口末端标记(TUNEL)染色检测脑组织中细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量;Western印迹检测各组脑脏组织中一般调控阻遏蛋白激酶(GCN)2和β-微管蛋白(Tubulin)的表达。结果与假手术组相比,模型组、去铁胺(低、中、高)剂量组、对照组记忆潜伏时间、神经元细胞的活性、β-Tubulin表达明显下降,错误次数、神经元细胞的凋亡率、血清中TNF-α和IL-1β含量、GCN2表达明显升高(均P蛋白β-Tubulin表达,抑制GCN表达,改善实验动物的记忆功能。

关键词：去铁胺脑出血继发性损伤记忆功能 β-微管蛋白一般调控阻遏蛋白激酶2

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创伤性脑损伤对大鼠海马神经元骨架蛋白及学习记忆功能的影响

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中国生物化学与分子生物学报 2019年第11期35卷 1242-1251页

作者：熊翱金戈许建中郑州大学第一附属医院骨科郑州450001 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室郑州450052

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是极为常见的外伤性疾病,致死率和致残率很高。存活者伴随的空间认知功能障碍,给患者家庭和社会造成了极大的负担。目前,对TBI造成的空间记忆障碍缺乏系统研究。脑损伤后海马组织与记忆有关的... 详细信息

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是极为常见的外伤性疾病,致死率和致残率很高。存活者伴随的空间认知功能障碍,给患者家庭和社会造成了极大的负担。目前,对TBI造成的空间记忆障碍缺乏系统研究。脑损伤后海马组织与记忆有关的分子以及组成神经元骨架的分子如何变化研究甚少。本研究采用Wistar大鼠为研究对象,并随机将其分为假手术(sham)组和创伤性脑损伤(TBI)组。TBI组再按致伤后时间长短分为6 h、12 h、24 h、72 h、15 d五个亚组。TBI组应用PinPointTM颅脑撞击器撞击而致伤,sham组不撞击。采用Morris水迷宫评价实验动物空间记忆能力;干湿重法测定脑含水量,评估脑水肿与海马水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP-4)的相关性;海马神经元特异性核蛋白(neuron specific nuclear protein,NeuN)标记和免疫荧光检测评估TBI致大鼠神经元丢失情况;通过Western印迹检测TBI致海马骨架相关蛋白质和记忆相关蛋白质含量变化。本研究证实,与sham组相比,TBI组大鼠潜伏期明显增加[(61.98±12.82)s vs.(28.32±8.52)s,n=5,P蛋白质水平上的表达和脑含水量持续升高,15 d恢复正常;在12 h[(3.78±0.74),(83.78±0.35)%]和72 h[(3.49±0.85),(82.28±0.63)%]均形成两个波峰,n=5,P均蛋白质上的高表达有关。与sham组相比,NeuN标记和免疫荧光检测发现,TBI后24 h致大鼠海马神经元丢失严重[(198.2±8.002)vs.(297.2±6.866)cells/mm2,n=5,P蛋白2(microtubule associated proein 2,MAP2)和突触前终末特异性标记物突触素(synaptophysin,SYN)在蛋白质水平均伤后逐步降低(n=5,P均2 h[(0.55±0.05)vs.(1.27±0.08),(0.52±0.14)vs.(1.06±0.16),n=5,P均2 h[(1.25±0.11)vs.(0.33±0.07),n=5,P2、SYN和过度磷酸化的tau(ser404)检测指标的改变,表明脑损伤致神经元受损,神经元生长和损伤修复能力减弱,最终导致神经元骨架破环,TBI损害了动物的海马空间记忆能力。与sham组相比,TBI组大鼠海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)和磷酸化CREB ser133(phosphorylated CREB Ser133,pCREB Ser133)含量降低明显(n=5,P均一般调控阻遏蛋白激酶2(general control nonderepressible 2 kinase,GCN2)蛋白质升高明显(n=5,P均蛋白质下调,抑制记忆储存的蛋白质(GCN2)上调,促使学习记忆功能障碍。

关键词：创伤性脑损伤水通道蛋白-4 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白微管结合蛋白2 一般调控阻遏蛋白激酶2 突触素

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