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不同ω-3pufa含量对绍兴鸭肝脏和脾脏中INF-γ和IL-2基因表达影响的研究

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不同ω-3PUFA含量对绍兴鸭肝脏和脾脏中INF-γ和IL-2基因表达影响...

作者：卢元鹏浙江大学

学位级别：硕士

多不饱和脂肪酸(pufa)是一种重要的营养物质,是所有细胞膜的重要组成成分,具有重要的生理功能。尤其ω-3 pufa同维生素、矿物质一样是人体的必需营养物质,摄入不足容易导致心脏和大脑等重要器官障碍。细胞因子是由细胞产生的小分子可溶... 详细信息

多不饱和脂肪酸(pufa)是一种重要的营养物质,是所有细胞膜的重要组成成分,具有重要的生理功能。尤其ω-3 pufa同维生素、矿物质一样是人体的必需营养物质,摄入不足容易导致心脏和大脑等重要器官障碍。细胞因子是由细胞产生的小分子可溶性蛋白质,影响这些细胞及其他细胞的行为和特征。基于细胞因子的重要作用,自发现后,一直是学者们的研究热点。尤其是INF-γ和IL-2,对于其基因结构、基因工程及体外重组表达的研究已取得了重要突破。本研究选用300日龄商品代绍鸭作为动物模型,研究了日粮ω-3 pufa对脾脏和肝脏中INF-γ、IL-2 mRNA表达的影响;以及在2%亚麻油饲料中添加不同比例的抗氧化剂VE、二氢吡啶及其复合物对两个基因在脾脏和肝脏中的mRNA表达情况的影响;建立并优化了INF-γ、IL-2mRNA表达的实时荧光定量RT-PC方法;从分子方面阐明了ω-3 pufa及不同抗氧化剂对绍鸭免疫的影响机理。为研究揭示饲料中ω-3 pufa在家禽中的生物学特性及其对免疫的影响奠定基础。主要实验结果如下：试验一：(1)饲料中添加1%亚麻油的第2组脾脏INF-γ分子mRNA表达水平极显著(P3组表达水平与对照组差异显著(P3%亚麻油的第4组却与对照组不显著(P>0.05)。在添加不同比例亚麻油的三个试验组之间,随着亚麻油含量的提高,也即ω-3pufa含量的增加,INF-γ分子mRNA表达水平呈下降趋势,但三组之间差异不显著(P>0.05)。(2)INF-γ分子在肝脏中mRNA表达水平相继增加。其中第4组与对照组差异极显著(P3组差异不显著(P>0.05)。而且第2、3组与对照组差异均不显著(P>0.05)。(3)饲喂不同比例(1%、2%和3%)亚麻油饲料对IL-2分子在脾脏中mRNA表达水平无显著差异(P>0.05)。(4)对IL-2分子在肝脏中相对mRNA表达水平都显著(P0.05),第3组与第2、4组差异极显著(P0.05)。试验二：(1)饲喂含有以2%亚麻油为ω-3 pufa饲料源并添加不同量的维生素E、二氢吡啶及其复合物的饲料,各组脾脏中INF-γ基因mRNA相对表达量都显著(P3组与对照组差异极显著(P3组与第4组间差异不显著(P>0.05),与第二组及添加2%亚麻油组之间差异显著(P3、4各组肝脏INF-γ基因的表达都极显著(P0.05)。第2、4组与添加2%亚麻油组差异显著(P3组却与2%亚麻油组差异极显著(P3)饲喂不同饲料对绍鸭IL-2在脾脏中的相对表达,除了第3组与对照组差异显著(P3组与对照组呈显著关系(P3组与第4组、添加2%亚麻油组呈极显著(P3组与对照组差异极显著(P0.05),第3组与第4组差异显著(P3组与第2组及添加2%亚麻油组差异不显著,但在表达量上偏高。本研究表明随着饲料中添加亚麻油含量的逐渐提高,脾脏中的INF-γ基因相对与饲喂基础日粮的对照组mRNA表达水平逐渐下降,其中以添加1%水平最高,但在肝脏中表达量逐渐升高,以3%的添加组表达量最高。而对IL-2在脾脏中的表达影响不显著,在肝脏中的表达水平都极显著提高,但呈下降趋势。在含2%亚麻油的饲料中添加不同抗氧化剂VE、二氢吡啶及其复合物,以添加二氢吡啶对INF-γ、IL-2在脾脏中mRNA表达水平影响最大,其中INF-γ表达量最高,IL-2最低。在肝脏中也是以二氢吡啶添加组影响最高,且INF-γ、IL-2 mRNA表达量都比对照组和2%亚麻油组高。

关键词： ω-3 pufa INF-γ IL-2 mRNA 绍鸭 VE 二氢吡啶肝脏

饲粮中添加不同水平水煮亚麻籽对蛋鸡生长性能、蛋品质、蛋黄脂肪酸沉积和血清生化指标的影响

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动物营养学报 2024年第4期36卷 2370-2382页

作者：米拓杜丽英张凯赵睿张伯池杨春雷郭凯张丽红郭锦龙刘开永宋献艺山西农业大学动物科学学院太谷030800 方山县教育科技事业发展中心吕梁033100 偏关永奥生态农业有限公司忻州036400

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平水煮亚麻籽对蛋鸡生长性能、蛋品质、蛋黄脂肪酸沉积和血清生化指标的影响。采用单因素试验设计,选取产蛋后期(52周龄)、体重[(2.05±0.06)kg]和产蛋率[(72.4±0.5)%]接近的海蓝褐蛋鸡1620只,随机分为6... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平水煮亚麻籽对蛋鸡生长性能、蛋品质、蛋黄脂肪酸沉积和血清生化指标的影响。采用单因素试验设计,选取产蛋后期(52周龄)、体重[(2.05±0.06)kg]和产蛋率[(72.4±0.5)%]接近的海蓝褐蛋鸡1620只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复45只鸡。对照组饲喂基础饲粮,未处理组在基础饲粮中添加4%未处理亚麻籽,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组在基础饲粮中分别添加4%、8%、12%、16%水煮亚麻籽。预试期1周,正试期5周。结果显示:1)饲粮中相同亚麻籽添加水平下,未处理组产蛋率显著低于试验Ⅰ组(P0.05)。与对照组相比,试验Ⅱ组哈氏单位显著提高(P0.05),试验Ⅳ组显著降低(P0.05),试验Ⅰ组显著高于未处理组(P3)与对照组相比,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组蛋黄中ω-3多不饱和脂肪酸(pufa)含量显著提高(Pω-3 pufa值显著降低(Pω-3 pufa值最低。与未处理组相比,试验Ⅰ组蛋黄中DHA、ω-3 pufa含量显著升高(Pω-3 pufa值显著降低(Pω-3 pufa的沉积效率和每枚鸡蛋ω-3 pufa、DHA沉积量均显著低于其他试验组(Pω-3 pufa,且对蛋品质无不良影响,还可提高生长性能,改善产蛋后期蛋鸡(55周龄)血脂指标、肝脏功能。

关键词：蛋鸡水煮亚麻籽蛋品质 ω-3 pufa

内源性ω-3 pufas增加对小鼠体重及肠道益生菌的影响

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内源性ω-3 PUFAs增加对小鼠体重及肠道益生菌的影响

作者：马爽爽青岛大学

学位级别：硕士

目的以fat-1转基因小鼠为模型,提高内源性ω-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,pufas)水平,研究对小鼠体重的影响,及其作用机理。方法采用fat-1转基因小鼠与普通C57/BL6小鼠杂交,获得同窝雄性小鼠。通过基因鉴定,将6周龄小... 详细信息

目的以fat-1转基因小鼠为模型,提高内源性ω-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,pufas)水平,研究对小鼠体重的影响,及其作用机理。方法采用fat-1转基因小鼠与普通C57/BL6小鼠杂交,获得同窝雄性小鼠。通过基因鉴定,将6周龄小鼠分为fat-1转基因组和非转基因组。每周测量小鼠体重和体长,持续8周。实验结束时处死两组小鼠,称量小鼠内脏周围脂肪质量;取血测定各组小鼠血清中血糖(BG)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平;采用荧光定量PCR,对下丘脑饮食相关基因Neuropeptide Y(NPY)、Cocaine and amphetamine regulated transcript(CART)、Agouti-related peptides(Ag RP)、Proopiomelanocortin(POMC)、Ghrelin和Nestifatin-1以及粪便中益生菌Bifidobacteria(Bif)和Lactobacillius(Lac)进行相对定量分析;采用Western blotting,对小肠组织LC3及P62分析。结果转基因小鼠的体重/体长明显低于非转基因小鼠(P3II/I,转基因小鼠均比非转基因小鼠表达量高(Pω-3 pufa脱氢酶增加了其体内内源性ω-3 pufas,从而降低体内ω-6/ω-3 pufas比值,影响了小鼠下丘脑饮食相关基因的表达及小肠组织中自噬的情况,因而降低了小鼠体重并有利于益生菌的增加。

关键词： ω-3 pufa 体重下丘脑饮食相关基因自噬肠道益生菌

ω-3 pufas在新生儿胎粪吸入综合征治疗中的临床疗效观察以及其对免疫功能及细胞因子的影响

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黑龙江医药 2020年第1期33卷 10-13页

作者：钟志远唐建平吴艳红广州市增城区永宁街宁西社区卫生服务中心广东广州511300 广州市增城区妇幼保健院广东广州511300

目的:分析ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3pufa)在新生儿胎粪吸入综合征(MAS)治疗中的临床疗效。方法:选取我院MAS患儿50例(2017年5月-2019年1月),脂肪酸类型不同分为ω-3 pufa组(n=25)与ω-6 pufas组(n=25)。ω-6 pufas组实施ω-6多不饱和脂肪... 详细信息

目的:分析ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3pufa)在新生儿胎粪吸入综合征(MAS)治疗中的临床疗效。方法:选取我院MAS患儿50例(2017年5月-2019年1月),脂肪酸类型不同分为ω-3 pufa组(n=25)与ω-6 pufas组(n=25)。ω-6 pufas组实施ω-6多不饱和脂肪酸(ω-6 pufas)营养支持,ω-3 pufa组实施ω-3 pufa营养支持。对比2组疗效、多脏器功能障碍综合征(MODS)发生率、治疗前后免疫功能[CD4/CD8、白细胞(WBC)计数]及细胞因子[核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)]水平。结果:ω-3 pufa组显著好转率高于ω-6 pufas组(Pω-3 pufa组治疗14天后血清WBC计数较ω-6 pufas组少,CD4/CD8较ω-6 pufas组高(Pω-3 pufa组治疗14天后血清TNF-α、IL-1β、NF-κB水平较ω-6 pufas组低(P0.05)。结论:ω-3pufas治疗MAS,疗效显著,能有效调节免疫功能,抑制炎性因子释放,且MODS少,安全性高。

关键词： ω-3 pufa MAS ω-6 pufas 免疫功能细胞因子

膨化亚麻籽对蛋鸡血液生化、炎症因子及蛋黄pufa比例的影响

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膨化亚麻籽对蛋鸡血液生化、炎症因子及蛋黄PUFA比例的影响

作者：蔡锋隆天津农学院

学位级别：硕士

本试验以富含ω-3 pufa的膨化亚麻籽作为试验材料,在蛋鸡日粮中添加不同含量的膨化亚麻籽,通过对生产性能、血液生化指标及抗氧化指标、血清免疫球蛋白、炎症因子和蛋黄脂肪酸成分组成的检测,综合评价膨化亚麻籽在蛋鸡中的应用,以期为... 详细信息

本试验以富含ω-3 pufa的膨化亚麻籽作为试验材料,在蛋鸡日粮中添加不同含量的膨化亚麻籽,通过对生产性能、血液生化指标及抗氧化指标、血清免疫球蛋白、炎症因子和蛋黄脂肪酸成分组成的检测,综合评价膨化亚麻籽在蛋鸡中的应用,以期为富含ω-3 pufa功能性鸡蛋研发提供理论基础。试验选用192只21周龄海兰褐蛋鸡,随机分成4处理组,分别是对照组(CK)、试验一组(T1)、试验二组(T2)、试验三组(T3),每组4个重复,每个重复12只。CK饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加膨化亚麻籽的比例为1.7%、3.4%和5.1%。预饲一周和正式试验八周,分别在第0、2、4、6和8周收集鸡蛋,测定其生产性能,且在试验结束采集血清,分别分析蛋品质及血清中生化指标、抗氧化能力、免疫球蛋白、细胞因子和蛋黄中的脂肪酸构成。检测结果如下:(1)随着日粮中膨化亚麻籽添加量的增加,T3日采食量显著低于CK、T1和T2(P0.05)。鸡蛋品质指标中除蛋白高度和哈氏单位有组间差异以外,其他指标无显著差异(P>0.05)。(2)血液生化指标中,T2和T3的谷丙转氨酶的含量显著高于CK和T1,T1、T2和T3的谷草转氨酶的含量显著低于CK。肌酐、白蛋白、总蛋白、血糖、甘油三酯、总胆固醇的含量及碱性磷酸酶活性各处理组间无显著差异(P>0.05)。T1、T2和T3的高密度脂蛋白显著高于CK(Pω-3 pufa的含量显著高于CK(Ppufa/ω-3 pufa比值(Pω-3 pufa的含量不再增加;各处理组间蛋黄中的ω-6 pufa、pufa、SFA和MUFA含量没有显著影响(P>0.05)。总之,蛋鸡日粮中添加3.4%的膨化亚麻籽能够显著改善蛋鸡生产性能,提高血清免疫球蛋白,增强机体抗炎能力和提高蛋黄中ALA、DHA和ω-3 pufa的含量。

关键词：膨化亚麻籽抗氧化活性免疫活性抗炎能力 ω-3 pufa

气相色谱法测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ALA、EPA和DHA含量

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中国油脂 2021年第7期46卷 148-152页

作者：王姿颐张秋芳杨成庞月红沈晓芳江南大学食品学院江苏无锡214122 淄博市食品药品检验研究院山东淄博255086

建立了一种气相色谱法快速、准确测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ALA、EPA和DHA含量的方法。样品经过乙酰氯甲醇甲酯化处理,采用气相色谱法测定,Agilent DB-FastFAME色谱柱分离脂肪酸甲酯,以十一烷酸甘油三酯为内标物进行定量。结果表明:鸡... 详细信息

建立了一种气相色谱法快速、准确测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ALA、EPA和DHA含量的方法。样品经过乙酰氯甲醇甲酯化处理,采用气相色谱法测定,Agilent DB-FastFAME色谱柱分离脂肪酸甲酯,以十一烷酸甘油三酯为内标物进行定量。结果表明:鸡蛋蛋黄中ω-3 pufa和内标物分离效果良好;ALA甲酯、EPA甲酯和DHA甲酯的色谱峰面积与其质量浓度呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99;样品的加标回收率为87.2%~101.1%,相对标准偏差为1.1%~2.6%。该方法操作方便、快速准确,适合批量测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ω-3 pufa的含量。

关键词： ω-3 pufa ALA EPA DHA 蛋黄气相色谱内标法

短期添加高水平亚麻籽对奶牛生产性能、牛奶脂肪酸组成和瘤胃发酵的影响

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中国畜牧兽医 2021年第11期48卷 3950-3961页

作者：李宁张养东黄国欣刘凯珍郑楠王加启臧长江新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830000 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶产品质量安全风险评估实验室(北京)北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193

本试验旨在研究短期添加高水平亚麻籽对奶牛生产性能、牛奶脂肪酸组成和瘤胃发酵的影响。选取健康、体重相近的荷斯坦牛奶牛30头,随机分为3组,每组10头。分别饲喂牧场基础饲粮(CK组)、添加3000 g/d(13.01%DM)完整亚麻籽饲粮(WF组)和添加... 详细信息

本试验旨在研究短期添加高水平亚麻籽对奶牛生产性能、牛奶脂肪酸组成和瘤胃发酵的影响。选取健康、体重相近的荷斯坦牛奶牛30头,随机分为3组,每组10头。分别饲喂牧场基础饲粮(CK组)、添加3000 g/d(13.01%DM)完整亚麻籽饲粮(WF组)和添加3000 g/d(13.01%DM)粉碎亚麻籽饲粮(GF组)。试验周期为7周,第1周为环境适应期,第2~6周为饲粮适应期,第7周为试验期,记录试验期日采食量和产奶量,于试验最后1天采集奶样和瘤胃液样品,利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)测定乳和瘤胃液中脂肪酸组成。结果表明:①与CK组相比,添加3000 g/d亚麻籽对奶牛干物质采食量和产奶量均无显著影响(P>0.05),GF组乳脂率和乳蛋白率较CK组有降低的趋势(0.053多不饱和脂肪酸(ω-3 pufa)的产量较CK组均显著提高(Pω-3 pufa的产量显著高于WF组(P3)-N)浓度显著高于CK和GF组(P<0.05)。综上所述,饲粮中短期添加高水平完整亚麻籽和粉碎亚麻籽均不影响奶牛干物质采食量和产奶量,但提高了乳中ALA含量,GF组提高效果较WF组更明显。添加高水平粉碎亚麻籽有降低乳蛋白率和乳脂率的趋势,高水平完整亚麻籽影响了奶牛瘤胃内环境。在实际生产中,应控制亚麻籽的添加量及其饲喂形式,在提高乳中ALA含量的同时,减少亚麻籽对瘤胃发酵的影响。

关键词：亚麻籽奶牛 α-亚麻酸 ω-3 pufa 生产性能瘤胃内环境

金鲳鱼内脏脂肪酶的分离纯化、酶学性质及应用研究

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金鲳鱼内脏脂肪酶的分离纯化、酶学性质及应用研究

作者：刘洪霞海南大学

学位级别：硕士

金鲳鱼是我国华南地区一种重要的海水养殖经济鱼类,其加工过程中产生大量的下脚料,内脏是其主要副产物之一,富含各种酶类。由于海洋环境的特殊性,水产动物具有独特的生理机能和饮食习惯,与微生物、陆生动物、植物源脂肪酶相比,水产动物... 详细信息

金鲳鱼是我国华南地区一种重要的海水养殖经济鱼类,其加工过程中产生大量的下脚料,内脏是其主要副产物之一,富含各种酶类。由于海洋环境的特殊性,水产动物具有独特的生理机能和饮食习惯,与微生物、陆生动物、植物源脂肪酶相比,水产动物源脂肪酶可能在特定的pH和温度条件下表现出较高的催化活性,或对某些脂肪酸,如长链多不饱和脂肪酸,具有较强的特异性。为了提高金鲳鱼加工下脚料的附加值,探究具有特异活性和较高应用价值的脂肪酶的新来源,本论文以金鲳鱼内脏为原料,分离纯化脂肪酶,研究其酶学性质,以及在鱼皮脱脂、水解鱼油富集ω-3pufa方面的应用,旨在为未来金鲳鱼内脏的深度开发利用提供技术支撑。具体研究内容和结果如下:1.金鲳鱼内脏脂肪酶的分离纯化以金鲳鱼内脏为原料,采用有机试剂脱脂、磷酸盐缓冲液提取、硫酸铵分级沉淀、离子层析和凝胶层析的方法,提取纯化得到一种脂肪酶,记作GPL。以对硝基棕榈酸苯酯（p-NPP）为底物,得到经上述步骤纯化后的脂肪酶比活力为57.20U/mg,纯化倍数为27.50,酶活回收率为18.31%。2.金鲳鱼内脏脂肪酶的酶学性质首先采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE）测定了 GPL分子量,然后以p-NPP为底物,分别分析了 pH、温度、金属离子、酶抑制剂、表面活性剂、胆汁酸、NaCl、有机试剂等对GPL活性的影响,并测定了 GPL的动力学参数。结果表明,GPL的分子量约为14kDa;其最适反应pH值为8.0,在pH6.0～10.0能够维持较高的酶活力;其最适反应温度为40 ℃,在10～40 ℃能够维持较高的酶活力;其Km值为40.16μM,vmax值为769.23μmol/（L·min）;Mn2+对其活性有激活作用,而Cu2+、Zn2+、EDTA、PMSF、Triton X-100 和 Tween-80 有抑制作用,Ca2+对其活性的影响较小;尤其是胆汁酸对其活性具有激活作用;GPL可耐盐浓度高达1M;其对甲醇、乙醇、三氯甲烷和己烷等试剂的耐受性较好;奥利司他对酶活性的抑制作用表明,与所有已知来源的脂肪酶一样,GPL的活性中心存在着丝氨酸残基。3.金鲳鱼内脏脂肪酶的应用研究分别探讨了脂肪酶在鱼皮脱脂和水解鱼油富集ω-3 pufa方面的应用。罗非鱼皮油脂含量高,易氧化酸败。为了提高鱼皮加工适应性,采用75-90%的硫酸铵沉淀的金鲳鱼粗脂肪酶,对罗非鱼皮脱脂,通过单因素实验和响应面法优化,得到最优工艺条件:温度37 ℃、pH值7.5、酶添加量90 U、时间60 min,鱼皮脱脂率达67.02%,结果表明,粗脂肪酶能温和有效地脱除鱼皮脂肪。金鲳鱼内脏鱼油中,EPA和DHA含量较低,不能满足生产鱼油保健品的需要。采用GPL选择性水解金鲳鱼内脏鱼油,在酶添加量3%（w/w）、pH值7.0、温度35 ℃、水解16h后,鱼油pufa的含量浓缩到56.99%,特别是C2O-22ω-3 pufa的含量达到40.90%,与浓缩前相比提高了 3.9倍。富集后EPA+ DHA的含量为36.37%,达到SC/T 3503-2000多烯鱼油制品标准中对于EPA与DHA总含量的要求,说明GPL能够有效富集鱼油中的ω-3 pufa。

关键词：金鲳鱼内脏脂肪酶分离纯化酶学性质鱼皮脱脂 ω-3 pufa

鲟鱼鱼油的提取及对非酒精性脂肪肝病干预作用的研究

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鲟鱼鱼油的提取及对非酒精性脂肪肝病干预作用的研究

作者：虞恒武汉轻工大学

学位级别：硕士

非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指以肝细胞脂肪积累以及变性为特征的临床病理综合征,其中它的特征是引起的原因不包含酒精。由于NAFLD的发病机制尚未完全阐明,故人们对其的了解有限,尚缺乏相对应的治疗... 详细信息

非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指以肝细胞脂肪积累以及变性为特征的临床病理综合征,其中它的特征是引起的原因不包含酒精。由于NAFLD的发病机制尚未完全阐明,故人们对其的了解有限,尚缺乏相对应的治疗方法。含有两个或两个以上双键且碳链长度为182个碳原子的直链脂肪酸即是多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,pufa),而距羧基最远端的双键在倒数第3个碳原子上的称为ω-3 pufa,主要包括十八碳三烯酸(α-亚麻酸,ALA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA),他们主要是从一些从鱼油中提取的一些营养物质。研究显示,ω-3 pufa不仅可以改善心血管功能与各种炎性症状,还可以干预和缓解NAFLD,恢复肝细胞的损伤。鲟鱼(Sturgeon)是淡水鱼类中寿命最长、个体最大的鱼,具有很高的经济价值:第一,鲟鱼鱼肉含有非常多的必需氨基酸,是不可多得的蛋白质来源;第二,其脂肪酸中DHA和EPA达12.5%;第三,鲟鱼鱼籽酱可以做鱼子酱,可出口各国等等。鲟鱼鱼油中含有的多不饱和脂肪酸比一般陆生动植物高,但未被有效利用,并可能作为废弃物造成环境污染。依托长江流域湖北地区鲟鱼养殖快速发展的独特资源条件,开展鲟鱼下脚料中鱼油提取工艺及健康功效研究,对充分开发鲟鱼鱼油资源有重要意义。研究目的:优化鲟鱼鱼油提取工艺,探讨其对NAFLD的干预效果。本研究第一部分:通过酶解法提取鲟鱼下脚料中的鱼油,用正交试验确定鲟鱼鱼油最佳提取工艺是使用木瓜蛋白酶,料液比1:1,酶解时间2 h,酶的添加量1500 U/g,酶解温度45℃,酶解反应pH 7,在该条件下鱼油的提取率为82.94%。提取的粗鱼油经过精制后无酸败味,颜色为淡黄色、澄清透明,酸价为0.1,过氧化值为0.49,均远低于一级鱼油国家标准;使用气质联用检测其脂肪酸组成与含量为∑SFA为23.56%、∑MFA为39.97%、∑n-3 pufa为12.55%、∑n-6 pufa为23.19%。本研究第二部分:设计动物实验验证鲟鱼鱼油对NAFLD的干预作用,并比较深海鱼油对其的干预作用。目的:高脂饲料喂养雄性C57BL/6J小鼠,建立NAFLD的动物模型,观察鲟鱼鱼油对NAFLD的改善作用。方法:雄性C57BL/6J小鼠120只,随机分为六组,每组20只:正常膳食组(CON)、鲟鱼鱼油(The sturgeon fish oil)干预正常组(SFCON),深海鱼油(sea fish oil)干预正常组(FOCON),高脂模型组(HFD)、鲟鱼鱼油(The sturgeon fish oil)干预高脂组(SF)、深海鱼油(sea fish oil)干预高脂组(FO)。24w试剂盒检测小鼠血清的总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)含量,谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)等等生化指标,并且将肝组织HE染色,并检测肝脏相关细胞因子的mRNA相关表达。结果:正常组三组(CON、FOCON、SFCON)小鼠各项指标均无显著性差异,说明鲟鱼鱼油和深海鱼油起对正常饮食无特殊作用和不良影响;HFD组各项生化指标均显著高于正常组,而两组干预组均有显著性改善;HE染色HFD组肝组织可明显观察到弥漫性大泡小泡混合型脂肪变性,同时在汇管区及组织小叶内可观察到有炎性细胞浸润,而两组鱼油干预均得到了明显的改善;Real-time PCR结果显示在细胞炎性因子、胆固醇代谢有关基因、脂质代谢有关基因中HFD组均较CON组有显著性变化,而两组干预组均能与HFD有显著性差异,表明小鼠的NAFLD能够从不同层面来被富含ω-3 pufa鲟鱼鱼油和深海鱼油缓解与干预。结论:(1)鲟鱼鱼油和深海鱼油对正常饮食无无特殊作用和不良影响;。(2)HFD喂养能引起肝脏严重的脂肪变性,引发NAFLD,而鲟鱼鱼油能对NAFLD能通过调节各项生化指标,对NAFLD起到明显的改善作用。(3)与深海鱼油比较,鲟鱼鱼油对于NAFLD干预作用没有深海鱼油干预效果佳,但鲟鱼鱼油具有成本低、环保、量大、可大量生产的优点,相比较而言可考虑将鲟鱼鱼油作为替代深海鱼油的药物用来缓解与治疗NAFLD。

关键词： NAFLD 鲟鱼鱼油高脂饮食 ω-3 pufa mRNA表达