检索结果-南通市图书馆

花生γ-生育酚甲基转移酶基因(γ-TMT)的克隆及序列分析

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作物学报 2012年第10期38卷 1856-1863页

作者：李拴柱万勇善刘风珍山东农业大学/作物生物学国家重点实验室/山东省作物生物学重点实验室山东泰安271018

γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）催化γ-生育酚转变为生物活性最高的α-生育酚,是决定植物中维生素E成分和活性的关键酶。本研究采用电子克隆与PCR相结合的方法获得了花生6个栽培品种（***.）和花生区组4个二倍体野生种中γ-TMT的全长DN... 详细信息

γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）催化γ-生育酚转变为生物活性最高的α-生育酚,是决定植物中维生素E成分和活性的关键酶。本研究采用电子克隆与PCR相结合的方法获得了花生6个栽培品种（***.）和花生区组4个二倍体野生种中γ-TMT的全长DNA序列,定名为AhgTMT;从栽培品种丰花2号中获得γ-TMT的cDNA序列,定名为AhrTMT。同一栽培品种的AhgTMT与AhrTMT的序列完全对应,说明该基因无内含子。AhrTMT编码区长1059bp,编码352个氨基酸残基的AhTMT蛋白。AhTMT分子量为39.09kD,等电点6.72,总平均亲水性–0.12;预测的二级结构中α-螺旋占55.40%,β-折叠占10.51%,无规则卷曲占34.09%;被定位于叶绿体,含有甲基转移酶保守的SAM结构域。AhTMT与已报道植物γ-TMT氨基酸序列的相似性为61.75%~72.80%。栽培品种的AhgTMT与***（BB）、***（BB）、***（AA）、***（AA）4个野生种的核苷酸序列同源性分别是100%、99.91%、99.74%和95.63%。

关键词：花生维生素E γ-生育酚甲基转移酶基因克隆序列分析

大豆γ-生育酚甲基转移酶基因的克隆与表达分析

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大豆科学 2011年第2期30卷 198-204页

作者：胡英考孟宪萍李雅轩蔡民华首都师范大学生命科学学院北京100048

采用电子克隆与实验克隆相结合的方法获得了大豆γ-生育酚甲基转移酶基因的cDNA序列,GenBank登录号为AY960126。序列分析结果表明,该cDNA序列含有1个编码350个氨基酸的完整的开放读码框,5′非翻译区具有2个同框终止密码子,3′端具有2个... 详细信息

采用电子克隆与实验克隆相结合的方法获得了大豆γ-生育酚甲基转移酶基因的cDNA序列,GenBank登录号为AY960126。序列分析结果表明,该cDNA序列含有1个编码350个氨基酸的完整的开放读码框,5′非翻译区具有2个同框终止密码子,3′端具有2个加尾信号和polyA尾巴。启动子区除含有通用核心元件外,还含有许多与光反应有关的作用元件。编码的蛋白质序列含有1个信号肽和γ-生育酚甲基转移酶的特征基序,该蛋白定位于叶绿体中。氨基酸序列比对和系统发育分析结果显示,不同物种之间γ-生育酚甲基转移酶氨基酸序列同源性较高。电子表达分析和RT-PCR组织表达分析结果表明,该基因的表达量与组织中叶绿体含量具有很高的关联,但强光逆境对该基因的表达无影响。

关键词：大豆 γ-生育酚甲基转移酶基因克隆电子表达分析

油棕等植物γ-生育酚甲基转移酶的生物信息学分析

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热带作物学报 2015年第2期36卷 308-315页

作者：石鹏曹红星李东霞王永雷新涛中国热带农业科学院椰子研究所海南文昌571339 海南省热带油料作物生物学重点实验室海南文昌571339

油棕果实中含有丰富的维生素E,而提高其中高活性的维生素E组分是改善棕油品质的关键。油棕γ-生育酚甲基转移酶(Gen Bank登录号为AEU17779)能将低活性的γ-生育酚三烯催化生成高活性的α-生育酚和α-生育酚三烯,是控制油棕维生素E组分... 详细信息

油棕果实中含有丰富的维生素E,而提高其中高活性的维生素E组分是改善棕油品质的关键。油棕γ-生育酚甲基转移酶(Gen Bank登录号为AEU17779)能将低活性的γ-生育酚三烯催化生成高活性的α-生育酚和α-生育酚三烯,是控制油棕维生素E组分和活性的关键酶,其功能在油棕等许多植物中极其保守。本研究利用生物信息学相关软件对以油棕VTE4基因为主要分析对象的一些植物VTE4基因的核酸和相应的氨基酸序列的组成成分、疏水性/亲水性、跨膜结构域以及功能结构域等进行分析。结果表明:VTE4属于不具有信号肽的亲水性蛋白,可能作为转运蛋白在叶绿体中发挥作用,α-螺旋和无规则卷曲大量散布于整个蛋白质二级结构中,具有S-腺苷甲硫氨酸结合位点和PLN02244保守结构域。这一结果可为油棕等植物VTE4的功能和分子机制研究提供更多详细的参考。

关键词：油棕 γ-生育酚甲基转移酶生物信息学保守结构域

结球甘蓝γ-生育酚甲基转移酶cDNA的克隆、分析及其异源表达酶蛋白的功能研究

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自然科学进展 2003年第7期13卷 709-715页

作者：欧阳青樊春涛孙卉张玉满白双义蔡文启中国科学院微生物研究所北京100080 北京师范大学生命科学学院北京100875 中国农业大学园林系北京100095

采用3′-和 5′-RACE技术,从结球甘蓝(Brassica oleracea *** L.)幼苗顶芽中克隆了γ-生育酚甲基转移酶的全长cDNA序列(BoTMT),该cDNA长1265bp,包含一个1044bp的开放阅读框,编码包括叶绿体导肽和两个S-腺苷甲硫氨酸结合结构域(SAM-bindn... 详细信息

采用3′-和 5′-RACE技术,从结球甘蓝(Brassica oleracea *** L.)幼苗顶芽中克隆了γ-生育酚甲基转移酶的全长cDNA序列(BoTMT),该cDNA长1265bp,包含一个1044bp的开放阅读框,编码包括叶绿体导肽和两个S-腺苷甲硫氨酸结合结构域(SAM-bindng domain)在内的347个氨基酸组成的蛋白质,序列分析表明该蛋白质与目前已知的γ-生育酚甲基转移酶有41.8％～86.5％的同源性,半定量RT-PCR结果显示BoTMT主要在结球甘蓝的花和叶器官中表达,将BoTMT的成熟蛋白编码区序列克隆至原核表达载体pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达产物占菌体总蛋白的22％,体外酶活性测定结果表明表达的蛋白质具有γ-生育酚甲基转移酶活性,能有效地催化γ-生育酚甲基化生成α-生育酚。

关键词：结球甘蓝 γ-生育酚甲基转移酶 cDNA序列基因克隆基因表达原核表达维生素E 体外酶促反应

辣椒γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)基因克隆和生物信息学分析

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分子植物育种 2019年第9期17卷 2791-2798页

作者：郭娟游文慧彭秋菊佘明明邱浩然贵州师范大学贵阳550025

维生素E包括生育酚和生育三烯酚,是在光合生物中合成的一种脂溶性抗氧化物质。γ-生育酚甲基转移酶(Gamma-tocopherol methyl-transferase,γ-TMT)是决定植物中维生素E成分和活性的关键酶之一,它分别将δ-生育酚和γ-生育酚催化转变为β... 详细信息

维生素E包括生育酚和生育三烯酚,是在光合生物中合成的一种脂溶性抗氧化物质。γ-生育酚甲基转移酶(Gamma-tocopherol methyl-transferase,γ-TMT)是决定植物中维生素E成分和活性的关键酶之一,它分别将δ-生育酚和γ-生育酚催化转变为β-生育酚和α-生育酚,其中α-生育酚的生物活性最高。本实验采用RACE方法从贵州商业辣椒-‘黔椒4号’中克隆出γ-TMT,基因序列全长1 110 bp。利用相关软件对其进行生物信息学分析,结果显示,该基因编码369个氨基酸,是一种不稳定的亲水性非分泌蛋白,并且该蛋白没有信号肽,也没有明显的跨膜结构域,主要在叶绿体基质中行使功能。这些数据为今后利用基因工程研究γ-TMT对辣椒维生素E含量及抗性的影响提供了帮助。

关键词：辣椒 γ-生育酚甲基转移酶基因克隆生物信息学分析

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番茄γ-生育酚甲基转移酶基因的克隆与分析

安徽农业科学 2008年第2期36卷 437-439,525页

作者：邹礼平孝感学院生命科学技术学院湖北孝感432000

[目的]为进一步研究γ-生育酚甲基转移酶(TMT)基因的功能奠定基础。[方法]以拟南芥γ-TMT cDNA为信息探针,在GenBankdbEST数据库中搜索与其高度同源的番茄EST序列,通过人工序列拼接得到番茄γ-TMT的cDNA序列。据此拼接序列设计1对特异引... 详细信息

[目的]为进一步研究γ-生育酚甲基转移酶(TMT)基因的功能奠定基础。[方法]以拟南芥γ-TMT cDNA为信息探针,在GenBankdbEST数据库中搜索与其高度同源的番茄EST序列,通过人工序列拼接得到番茄γ-TMT的cDNA序列。据此拼接序列设计1对特异引物,以番茄叶片cDNA第1链产物为模板进行RT-PCR,回收目的片段,转化到大肠杆菌DH5α进行TA克隆。最后对获得的阳性克隆进行测序,分析测序结果与其他物种中该基因之间的同源性,进行氨基酸序列比对及系统进化分析。[结果]经RT-PCR扩增出1300bp左右的片段,成功克隆了番茄γ-TMT基因。克隆片段全长1354bp,包含1个1089bp的完整开放读码框,与拼接序列完全一致。番茄γ-TMT基因编码的氨基酸序列与马铃薯、小麦、玉米和拟南芥的γ-TMT基因的同源性分别达89%、75%、75%和70%。系统进化分析表明,番茄与马铃薯的γ-TMT基因有较近的亲缘关系。[结论]该试验中克隆的番茄γ-TMT基因编码的蛋白质分子量为39.8kD,等电点为8.28。

关键词：番茄 γ-生育酚甲基转移酶维生素E 生物合成基因克隆

棉花γ-生育酚甲基转移酶基因全长cDNA的克隆与序列分析

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江苏农业学报 2009年第3期25卷 490-493页

作者：邹礼平高和平孝感学院生命科学技术学院湖北孝感432000

γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）是植物维生素E生物合成途径中的关键酶。通过RACE—PCR得到了棉花γ-TMT基因的cDNA序列，全长1384bp，包含一个长为1035bp的完整开放读码框，推导的氨基酸序列与番茄、大豆、拟南芥、向日葵、玉米等植物的... 详细信息

γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）是植物维生素E生物合成途径中的关键酶。通过RACE—PCR得到了棉花γ-TMT基因的cDNA序列，全长1384bp，包含一个长为1035bp的完整开放读码框，推导的氨基酸序列与番茄、大豆、拟南芥、向日葵、玉米等植物的γ-生育酚甲基转移酶基因编码的氨基酸序列的同源性较高，序列的一致率为68％～81％；与莱茵衣藻的序列同源性较低，一致率只有54％。系统进化分析结果表明不同来源的γ-TMT基因聚为3类。

关键词：棉花 γ-生育酚甲基转移酶维生素E 生物合成基因克隆序列分析

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玉米γ-生育酚甲基转移酶基因的克隆与分析

安徽农业科学 2011年第33期39卷 20316-20317,20321页

作者：邹礼平孝感学院生命科学技术学院湖北孝感432000

[目的]对玉米γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)基因进行克隆和分析研究。[方法]通过RT-PCR扩增得到玉米γ-TMT基因的cDNA序列,同时对序列进行同源性分析、氨基酸序列比对和系统进化分析。[结果]玉米γ-TMT基因cDNA全长1 310 bp,包含一个长为... 详细信息

[目的]对玉米γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)基因进行克隆和分析研究。[方法]通过RT-PCR扩增得到玉米γ-TMT基因的cDNA序列,同时对序列进行同源性分析、氨基酸序列比对和系统进化分析。[结果]玉米γ-TMT基因cDNA全长1 310 bp,包含一个长为1 059bp的完整开放读码框,推导的氨基酸序列与小麦和水稻等高等植物的γ-TMT基因同源性较高,序列一致率为69%～87%;与低等生物褐藻的序列同源性较低,一致率只有56%。系统进化分析表明不同来源的γ-TMT基因可聚为3类。[结论]为进一步研究γ-TMT基因的功能奠定了基础。

关键词：玉米 γ-生育酚甲基转移酶维生素E 生物合成基因克隆

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水稻γ-生育酚甲基转移酶基因全长cDNA的克隆与分析

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湖北农业科学 2008年第11期47卷 1221-1224页

作者：邹礼平蒋卉孝感学院生命科学技术学院湖北孝感432000

γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是植物维生素E生物合成途径中的关键酶。通过RACE-PCR得到了水稻γ-TMT基因的cDNA序列,该基因的cDNA全长1 432 bp,包含一个长为1 089 bp的完整开放读码框,推导的氨基酸序列与小麦、玉米、向日葵、番茄、大... 详细信息

γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是植物维生素E生物合成途径中的关键酶。通过RACE-PCR得到了水稻γ-TMT基因的cDNA序列,该基因的cDNA全长1 432 bp,包含一个长为1 089 bp的完整开放读码框,推导的氨基酸序列与小麦、玉米、向日葵、番茄、大豆、拟南芥的γ-生育酚甲基转移酶基因的同源性分别为90%、87%、76%、75%、74%、70%。

关键词：水稻 γ-生育酚甲基转移酶维生素E 生物合成基因克隆