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高脂状态下Exendin-4对胰岛βtc6细胞内胰-十二指肠同源盒-1表达、细胞增殖功能及胰岛素分泌能力的干预作用

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中国老年学杂志 2016年第20期36卷 4945-4947页

作者：黄林晶侯毅翰杨立勇严孙杰沈喜妹福建医科大学附属第一医院内分泌科福建医科大学代谢病研究所福建福州350005

目的探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关机制是否涉及胰-十二指肠同源盒（PDX）-1。方法不同浓度的Exendin-4培育βtc6细胞不同时间,再应用1 mmol/L游离脂肪酸（FFA）干预24 h,检测细胞内PDX-1表达及增殖能力和胰岛... 详细信息

目的探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关机制是否涉及胰-十二指肠同源盒（PDX）-1。方法不同浓度的Exendin-4培育βtc6细胞不同时间,再应用1 mmol/L游离脂肪酸（FFA）干预24 h,检测细胞内PDX-1表达及增殖能力和胰岛素分泌功能。结果 1Exendin-4干预6 h,各组细胞PDX-1表达、细胞增殖能力和胰岛素分泌功能均未见明显改善;2当Exendin-4干预延长至12~24 h,随着干预浓度增高,细胞内PDX-1逐渐升高,细胞增殖能力和胰岛素分泌功能明显好转。结论高脂状态下适宜浓度的Exendin-4干预一定时限可上调β细胞内PDX-1的表达,并改善细胞增殖功能及胰岛素分泌能力。

关键词： Exendin-4 胰-十二指肠同源盒-1 胰岛素游离脂肪酸 βtc6细胞

Exendin-4对游离脂肪酸介导的βtc6细胞GK和GLUT2表达改变的干预作用

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中国糖尿病杂志 2013年第9期21卷 832-835页

作者：黄林晶杨立勇严孙杰沈喜妹福建医科大学附属第一医院内分泌科福州350005

目的探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关的机制是否涉及葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖转运蛋白2 （GLUT2）. 方法应用不同浓度Exendin-4（5、10及50 nmol/L）孵育βtc6细胞不同时限（6、12及24 h）,再予1mmol/L FFA作用24... 详细信息

目的探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关的机制是否涉及葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖转运蛋白2 （GLUT2）. 方法应用不同浓度Exendin-4（5、10及50 nmol/L）孵育βtc6细胞不同时限（6、12及24 h）,再予1mmol/L FFA作用24h后,检测细胞内GK和GLUT2表达情况.结果 Exendin-4干预6h,各组细胞内GK、GLUT2表达未见明显改变；当干预延长至12～24 h,随干预浓度增高,细胞内GK、GLUT2表达逐步升高. 结论适宜浓度的Exendin-4干预一定的时限可上调脂毒性状态下胰岛β细胞GK和GLUT2的表达.

关键词： Exendin-4游离脂肪酸 βtc6细胞葡萄糖激酶葡萄糖转运蛋白2

吡格列酮对CXCL10介导的βtc6细胞凋亡及TLR4/NF-κB表达的干预作用

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吡格列酮对CXCL10介导的βTc6细胞凋亡及TLR4/NF-κB表达的干预作...

作者：方彦玲福建医科大学

学位级别：硕士

目的: 1研究CXC趋化因子10(CXC chemokine ligand-10,CXCL10)干预前后,小鼠胰岛素瘤细胞系βtc6细胞TLR4/NF-κB的表达情况及相应的细胞形态、细胞增殖能力以及细胞凋亡情况的变化。 2应用吡格列酮干预CXCL10对胰岛β细胞的作用,观察吡... 详细信息

目的: 1研究CXC趋化因子10(CXC chemokine ligand-10,CXCL10)干预前后,小鼠胰岛素瘤细胞系βtc6细胞TLR4/NF-κB的表达情况及相应的细胞形态、细胞增殖能力以及细胞凋亡情况的变化。 2应用吡格列酮干预CXCL10对胰岛β细胞的作用,观察吡格列酮干预后上述研究指标的改变,探讨吡格列酮对CXCL10作用下的胰岛β细胞的影响。方法: 1体外培养βtc6细胞,不同浓度CXCL10(0.1ng/ml、1.0ng/ml、10.0ng/ml)分别孵育细胞不同时限(30分钟～48小时)后,应用RT-PCR和Western Blot检测TLR4和NF-κB表达活化情况,CCK-8法检测βtc6细胞的增殖能力,流式细胞仪和DNA LADDER检测细胞凋亡情况。 2不同浓度吡格列酮(0.1umol/L、1.0umol/L、10.0umol/L)预孵育βtc6细胞24小时后,再予10.0ng/ml CXCL10共同孵育细胞不同时限(30分钟～48小时)后,应用RT-PCR和Western Blot检测TLR4和NF-κB表达活化情况,CCK-8法检测βtc6细胞的增殖能力,流式细胞仪和DNA LADDER检测细胞凋亡情况。结果: 1经过CXCL10 0.1ng/ml～1.0ng/ml干预12～48小时之后,βtc6细胞形态未见明显变化,但10.0ng/ml CXCL10干预组在干预24～48小时之后,βtc6细胞生长变稀疏,出现脱壁漂浮的细胞,并且细胞增殖活力降低。 2经0.1～1.0ng/ml CXCL10干预12小时后,βtc6细胞TLR4 mRNA及蛋白的表达无明显变化,但10.0ng/ml CXCL10干预组TLR4 mRNA及蛋白的表达已有上升。随着干预时间延长至24小时,1.0ng/ml CXCL10干预组βtc6细胞TLR4 mRNA及蛋白的表达亦高于空白对照组。干预时间进一步延长至48小时,1.0～10.0ng/mlCXCL10干预组TLR4 mRNA及蛋白的表达进一步上调。CXCL10对TLR4表达的上调具有浓度及时间依赖性。 3经1.0～10.0ng/ml CXCL10干预30分钟后,βtc6细胞NF-κB的活化水平明显上调。随着时间延长至24小时,0.1～10.0ng/ml CXCL10干预组细胞NF-κB的活化水平逐渐下调。而10.0ng/ml CXCL10干预组,βtc6细胞的NF-κB活化持续到24小时。干预时间进一步延长至48小时,0.1～10.0ng/ml CXCL10干预组βtc6细胞NF-κB的活化水平接近于空白对照组。CXCL10对NF-κB活化具有浓度及时间依赖性。 4经0.1～10.0ng/ml CXCL10干预12～24小时后,流式细胞术及DNA LADDER显示10.0ng/ml CXCL10干预βtc6细胞24小时后出现细胞凋亡。随着时间延长至48小时,1.0ng/ml CXCL10干预组亦出现细胞凋亡。 5吡格列酮干预对CXCL10作用下βtc6细胞TLR4/NF-κB信号通路及相应细胞凋亡情况的影响: (1)1.0umol/L～10.0umol/L吡格列酮预孵育βtc6细胞24小时后可抵抗CXCL10诱导的细胞凋亡并上调了细胞的增殖活力。而0.1umol/L吡格列酮干预组无明显变化。 (2)1.0umol/L～10.0umol/L吡格列酮预孵育βtc6细胞24小时后,吡格列酮下调了CXCL10诱导的细胞TLR4/NF-κB活化。而0.1umol/L吡格列酮干预组尚不能改变CXCL10诱导的细胞TLR4/NF-κB信号的传导。结论: 1短时间一定浓度的CXCL10作用可促进βtc6细胞内NF-κB的活化,但对细胞内TLR4 mRNA及蛋白的表达无影响,亦对细胞的增殖活性以及凋亡无显著影响。 2长时间高浓度的CXCL10作用将导致TLR4 mRNA及蛋白的表达显著上调,使β细胞的增殖活性受损并诱导β细胞凋亡。 3适宜浓度的吡格列酮干预一定的时限后可以下调CXCL10对β细胞内TLR4表达及NF-κB活化的影响,并明显改善细胞的增殖能力,拮抗CXCL10诱导的β细胞凋亡。

关键词： CXC趋化因子10 吡格列酮 βtc6细胞 Toll样受体4 核因子κB 糖尿病

Exendin-4对游离脂肪酸介导的βtc6细胞GK和GLUT2表达改变的干预作用

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Exendin-4对游离脂肪酸介导的βTc6细胞GK和GLUT2表达改变的干预...

作者：黄林晶福建医科大学

学位级别：硕士

目的: 1.探讨游离脂肪酸(FFA)对小鼠胰岛素瘤细胞系βtc6细胞葡萄糖激酶(GK)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)表达改变的影响。 2.应用Exendin-4干预FFA介导的胰岛β细胞损害,观察Exendin-4干预后上述研究指标的变化,探讨Exendin-4对脂毒性状... 详细信息

目的: 1.探讨游离脂肪酸(FFA)对小鼠胰岛素瘤细胞系βtc6细胞葡萄糖激酶(GK)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)表达改变的影响。 2.应用Exendin-4干预FFA介导的胰岛β细胞损害,观察Exendin-4干预后上述研究指标的变化,探讨Exendin-4对脂毒性状态下的胰岛β细胞是否具有保护作用及其可能的机制。方法: 1.体外培养βtc6细胞,不同浓度FFA(0.25mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L)作用24小时,应用RT-PCR和Western Blot检测GK和GLUT2表达情况,并观察细胞形态变化。 2.应用不同浓度Exendin-4(5nmol/L、10nmol/L、50nmol/L)孵育βtc6细胞不同时限(6小时、12小时、24小时),再予1.0mmol/L FFA作用24小时,应用RT-PCR和Western Blot检测GK和GLUT2表达情况,并观察细胞形态变化。结果: 1.经过0.25mmol/L FFA24h作用后,可见细胞团间凋亡小体逐步增多,但未见细胞形态学上的明显变化。0.50mmol/L～1.00mmol/L FFA 24h作用之后,βtc6细胞呈现凋亡趋势,细胞内可见脂滴积聚,细胞间连接融合明显减少,细胞团有崩解的趋势,随着浓度的增大,上述现象愈加明显。 2.经0.25mmol/L FFA作用24小时,βtc6细胞GK和GLUT2 mRNA及其蛋白产物的表达水平并未发生明显改变,但在0.50～1.00mmol/L FFA作用组βtc6细胞GK和GLUT2 mRNA和蛋白表达水平逐步减低。 3. Exendin-4干预对脂毒性状态下βtc6细胞形态学上的影响: (1)Exendin-4干预时间为6小时时,各浓度组未见脂毒性状态下βtc6细胞形态上的改善。 (2)Exendin-4干预时间延长至12小时,5nmol/L Exendin-4干预组未见细胞形态上的改善,在10nmol/LExendin-4干预组虽然细胞仍呈现出皱缩、变圆、核浓缩的形态,但胞内脂滴积聚减轻,细胞团崩解减少,细胞贴壁的活性部分恢复。将Exendin-4浓度进一步提高至50nmol/L时,βtc6细胞的形态未见进一步改善。 (3)Exendin-4干预时间进一步延长至24小时,5nmol/L Exendin-4干预组细胞形态未见明显改善,但细胞内脂滴积聚减轻。将Exendin-4干预浓度提高到10nmol/L时,细胞出现抱成团的特性以及连接融合的趋势,脂滴进一步减少,部分细胞胞浆内可见颗粒状分泌小泡。我们进一步将Exendin-4预干预浓度提高到50nmol/L,在显微镜下尚未见βtc6细胞形态的进一步改善。 4. Exendin-4干预对脂毒性状态下βtc6细胞GK、GLUT2mRNA和蛋白表达的影响 (1)Exendin-4干预6小时,各浓度组未见脂毒性状态下βtc6细胞GK、GLUT2mRNA和蛋白表达的明显改善。 (2)Exendin-4干预时间延长至12小时,在5nmol/L、10nmol/L和50nmol/L Exendin-4作用下,在脂毒性状态下的βtc6细胞GK、GLUT2mRNA和蛋白表达逐步升高。 (3)Exendin-4干预时间延长至24小时,在5nmol/L和10nmol/L Exendin-4干预组,随着浓度的增加,βtc6细胞GK、GLUT2mRNA和蛋白的表达进一步逐渐升高;但是在50nmol/L Exendin-4干预组,βtc6细胞GK、GLUT2mRNA和蛋白表达水平并没有比10nmol/L Exendin-4干预组有进一步升高。结论: 1.短期低浓度FFA作用时,胰岛β细胞的GK和GLUT2表达未受到影响,但随着FFA作用浓度的增加,β细胞的GK和GLUT2表达水平逐渐下调。 2.短期低浓度FFA作用对胰岛β细胞生长没有产生明显的抑制,但随着FFA浓度的升高,β细胞生长受到明显的抑制。 3.适宜浓度的Exendin-4干预一定的时限可以上调脂毒性状态下β细胞GK和GLUT2的表达,并使脂毒性状态下β细胞形态得以明显改善。

关键词： Exendin-4 游离脂肪酸 βtc6细胞 GK GLUT2 糖尿病

Exendin-4对游离脂肪酸介导的βtc6细胞PDX-1表达和胰岛素分泌损害的干预作用

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Exendin-4对游离脂肪酸介导的βTc6细胞PDX-1表达和胰岛素分泌损...

作者：侯毅翰福建医科大学

学位级别：硕士

目的:1、研究FFA干预前后,胰岛β细胞PDX-1 mRNA表达以及相应的胰岛素分泌功能、细胞形态和细胞增殖能力的变化。2、应用Exendin-4干预FFA介导的胰岛β细胞损害,观察Exendin-4干预后上述研究指标的变化,探讨Exendin-4对脂毒性状态下胰... 详细信息

目的:1、研究FFA干预前后,胰岛β细胞PDX-1 mRNA表达以及相应的胰岛素分泌功能、细胞形态和细胞增殖能力的变化。2、应用Exendin-4干预FFA介导的胰岛β细胞损害,观察Exendin-4干预后上述研究指标的变化,探讨Exendin-4对脂毒性状态下胰岛β细胞的保护作用,分析可能的分子生物学机制。方法:1、体外培养βtc6细胞,不同浓度FFA(0.25mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L)分别干预24、48小时,观察细胞形态变化, RT-PCR检测PDX-1 mRNA表达的变化,放射免疫法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌,MTT法检测βtc6细胞的增殖能力。2、应用不同浓度Exendin-4(5nmol/L、10nmol/L、50nmol/L)预孵育βtc6细胞不同时限(6小时、12小时、24小时),再予1.0mmol/L FFA干预48小时,观察细胞形态,RT-PCR检测PDX-1 mRNA表达的变化,放射免疫法检测胰岛素浓度,MTT法检测βtc6细胞的增殖能力。结果:1、经0.25～1.00 mmol/L FFA干预24小时,βtc6细胞PDX-1 mRNA的转录逐步增加,但随着干预时间进一步延长至48小时,PDX-1 mRNA的转录逐渐回落,特别是1.00 mmol/L FFA干预48小时βtc6细胞PDX-1 mRNA的表达低于空白对照组。2、经过0.50～1.00 mmol/L FFA 24～48小时的干预之后,βtc6细胞形态学上呈现凋亡趋势,细胞增殖活力以及葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能降低,而0.25 mmol/L FFA 24小时的干预未见此类现象。3、Exendin-4预干预对脂毒性状态下βtc6细胞PDX-1 mRNA表达的影响(1)5nmol/L～50nmol/L Exendin-4预干预6小时尚未见脂毒性状态下βtc6细胞PDX-1 mRNA表达的上调。(2)将Exendin-4预干预时间延长至12小时,在5nmol/L和10nmol/L Exendin-4作用下,βtc6细胞PDX-1 mRNA的表达逐渐升高,将Exendin-4浓度进一步升高至50nmol/L则未见PDX-1 mRNA表达的进一步上调。(3)将Exendin-4预干预时间进一步延长至24小时,在5nmol/L～50nmol/L Exendin-4作用下,处于脂毒性状态的βtc6细胞PDX-1 mRNA的表达明显升高,并且各浓度Exendin-4组间无显著差异。4、Exendin-4预干预对脂毒性状态下βtc6细胞胰岛素分泌能力和增殖能力的影响。(1)5nmol/L Exendin-4 6～12小时的孵育之后尚未见处于脂毒性状态下的βtc6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力的改善。(2)当Exendin-4的孵育浓度一定时(5～50nmol/L),随着孵育时间延长至24小时,Exendin-4明显改善βtc6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力。(3)Exendin-4孵育浓度从10nmol/L进一步提高至50nmol/L,尚未检测到βtc6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力的进一步改善。结论:1、短时间低浓度的游离脂肪酸干预可介导β细胞转录因子PDX-1表达的上调,尚未对β细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力产生显著影响。2、长时间高浓度的游离脂肪酸干预将导致PDX-1 mRNA的表达下调,并使β细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力受损。3、适宜浓度的Exendin-4干预一定的时限可以上调脂毒性状态下β细胞PDX-1 mRNA的表达,并明显改善相应的胰岛素分泌能力和增殖能力。

关键词：游离脂肪酸 βtc6细胞胰-十二指肠同源盒-1 胰岛素分泌 Exendin-4

Exendin-4对抵抗素诱导的胰岛βtc6细胞损害及PDX-1表达的干预作用

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Exendin-4对抵抗素诱导的胰岛βTc6细胞损害及PDX-1表达的干预作用

作者：郑少娟福建医科大学

学位级别：硕士

目的: 1、研究抵抗素干预前后,胰岛β细胞PDX-1 mRNA表达以及相应的胰岛素分泌功能、细胞形态和细胞增殖能力以及细胞凋亡情况的变化。 2、应用Exendin-4干预抵抗素介导的胰岛β细胞损害,观察Exendin-4干预后上述研究指标的变化,探讨Exe... 详细信息

目的: 1、研究抵抗素干预前后,胰岛β细胞PDX-1 mRNA表达以及相应的胰岛素分泌功能、细胞形态和细胞增殖能力以及细胞凋亡情况的变化。 2、应用Exendin-4干预抵抗素介导的胰岛β细胞损害,观察Exendin-4干预后上述研究指标的变化,探讨Exendin-4对在相应的抵抗素干预状态下胰岛β细胞的保护作用,分析可能的分子生物学机制。方法: 1、体外培养βtc6细胞,不同浓度抵抗素(20 ng/ml、40 ng/ml、60 ng/ml、100 ng/ml、200 ng/ml)分别干预6、12、24小时,观察细胞形态变化,CCK-8法检测βtc6细胞的增殖能力, RT-PCR检测PDX-1 mRNA表达的变化,放射免疫法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌,DNA Ladder法初步观察细胞凋亡情况。 2、应用不同浓度Exendin-4(5 nmol/L、10 nmol/L、50 nmol/L)预孵育βtc6细胞不同时限(6小时、12小时、24小时),再予200 ng/ml浓度抵抗素干预24小时,观察细胞形态,CCK-8法检测βtc6细胞的增殖能力,RT-PCR检测PDX-1 mRNA表达的变化,放射免疫法检测胰岛素浓度,再予DNA Ladder法初步观察细胞凋亡情况。结果: 1、经过60～200 ng/ml抵抗素干预6～24小时之后,细胞增殖活力降低,βtc6细胞形态学上呈现凋亡趋势,葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能下降,而20～40 ng/ml干预组的干预均未见此类现象。 2、经60～100 ng/ml抵抗素干预6小时,βtc6细胞PDX-1 mRNA的表达无明显变化,但200 ng/ml抵抗素干预后PDX-1mRNA的表达已有下降。随着干预时间进一步延长,100～200 ng/ml抵抗素干预组PDX-1 mRNA的表达逐渐减少。60 ng/ml抵抗素干预24小时βtc6细胞PDX-1 mRNA的表达亦低于空白对照组。而20 ng/ml和40 ng/ml抵抗素干预组βtc6细胞PDX-1 mRNA的表达无明显变化。 3、20～200 ng/ml抵抗素干预6小时后,βtc6细胞的DNA ladder无显示凋亡迹象。但随着时间延长至12小时,200 ng/ml抵抗素干预组即出现凋亡,而干预时间进一步延长至24小时,100 ng/ml抵抗素干预组和200 ng/ml干预组同时出现了凋亡迹象。 4、Exendin-4干预对抵抗素作用下βtc6细胞胰岛素分泌能力和增殖能力的影响: (1)5 nmol/L Exendin-4 6～12小时的预干预之后未见抵抗素作用下的βtc6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力的改善。当Exendin-4的干预时间延长至24小时,βtc6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力均有所提高。 (2)当Exendin-4的孵育浓度一定时(10～50 nmol/L),Exendin-4在6小时、12小时、24小时均明显改善βtc6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力。 (3)Exendin-4孵育浓度从10 nmol/L进一步提高至50 nmol/L,尚未检测到βtc6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力的进一步改善。 5、Exendin-4干预对抵抗素作用下βtc6细胞PDX-1 mRNA表达的影响: (1)5 nmol/L～50 nmol/L Exendin-4预干预6小时尚不能上调抵抗素诱导的βtc6细胞PDX-1 mRNA表达的下降。 (2)将Exendin-4干预时间延长至12小时,在5 nmol/L和10 nmol/L Exendin-4作用下,βtc6细胞PDX-1 mRNA的表达逐渐升高,将Exendin-4浓度进一步升高至50 nmol/L则未见PDX-1 mRNA表达的进一步上调。 (3)当Exendin-4预干预时间为24小时,在5 nmol/L～50 nmol/L Exendin-4作用下,抵抗素作用下的βtc6细胞PDX-1 mRNA的表达明显升高,并且各浓度Exendin-4组间无显著差异。 6、Exendin-4干预对抵抗素作用下βtc6细胞凋亡的保护作用: (1)5 nmol/L～50 nmol/L Exendin-4预干预6小时未见抗抵抗素诱导的βtc6细胞凋亡明显改善。 (2)将Exendin-4干预时间延长至12小时,在5 nmol/L Exendin-4干预仍不能减少抵抗素诱导的βtc6细胞凋亡,但10～50 nmol/L Exendin-4干预已可对抗抵抗素诱导的βtc6细胞凋亡。 (3)当Exendin-4干预时间调整为24小时,在5 nmol/L～50 nmol/L Exendin-4作用下,抵抗素作用下的βtc6细胞凋亡改善明显。结论: 1、短时间低浓度的抵抗素作用对β细胞转录因子PDX-1

关键词：抵抗素 Exendin-4 βtc6细胞胰-十二指肠同源盒-1 胰岛素分泌

游离脂肪酸对胰岛素瘤细胞系βtc6细胞葡萄糖激酶和葡萄糖转运蛋白2表达及胰岛素分泌功能的影响

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中华糖尿病杂志 2011年第3期3卷 247-251页

作者：黄林晶杨立勇沈喜妹严孙杰福建医科大学附属第一医院内分泌科福建医科大学代谢病研究室福州350005

目的探讨游离脂肪酸（FFA）对小鼠胰岛素瘤细胞系βtc6细胞葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）的表达及相应的胰岛素分泌功能变化的影响.方法用不同浓度FFA（0.25、0.50、1.00 mmol/L）干预βtc6细胞24 h,应用逆转录（RT）-PC... 详细信息

目的探讨游离脂肪酸（FFA）对小鼠胰岛素瘤细胞系βtc6细胞葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）的表达及相应的胰岛素分泌功能变化的影响.方法用不同浓度FFA（0.25、0.50、1.00 mmol/L）干预βtc6细胞24 h,应用逆转录（RT）-PCR法和Western Blot法检测GK和GLUT2表达情况,并观察细胞形态及葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能（GSIS）的变化.应用单因素方差分析进行统计学分析.结果（1）经过0.25 mmol/L FFA 作用24 h后,未见细胞形态学及GSIS 明显变化,细胞内GK和GLUT2 mRNA及其蛋白的表达水平与空白对照组（GK对照组0.80±0.12,GLUT2对照组0.72±0.11）比较亦未发生明显改变（均P〉0.05）;（2）0.50～1.00 mmol/L FFA 作用24 h之后,βtc6细胞内可见脂滴积聚,细胞团有崩解的趋势,随着浓度的增大,上述现象愈加明显.细胞GK（GKFFA0.500.32±0.05,GKFFA1.000.24±0.03）和GLUT2 （GLUT2FFA0.500.28±0.04,GLUT2FFA1.000.21±0.03）mRNA表达逐渐减低（均P〈0.05）,相应的蛋白表达水平亦逐步降低,胰岛素分泌也逐渐减少（均P〈0.05）.结论低浓度FFA对胰岛β细胞生存和GK、GLUT2表达以及GSIS没有明显影响,但较高浓度的FFA将损害β细胞,并抑制GK和GLUT2表达以及GSIS.

关键词：脂肪酸类,非酯化葡萄糖转运体2 胰岛素分泌葡萄糖激酶 βtc6细胞

游离脂肪酸对βtc6细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响及吡格列酮的干预作用

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中国医药导报 2010年第27期7卷 20-22页

作者：吴佩文杨立勇刘东晖福建医科大学附属第一医院内分泌科福建福州350005

目的:观察游离脂肪酸(FFA)对体外培养的βtc6细胞胰岛素分泌功能的影响及盐酸吡格列酮作用的干预。方法:体外培养βtc6细胞,0.5mmol/LFFA分别干预1h、48h,放射免疫法检测胰岛素。不同浓度的吡格列酮(0.1、1.0、10.0μmol/L)与FFA共同干... 详细信息

目的:观察游离脂肪酸(FFA)对体外培养的βtc6细胞胰岛素分泌功能的影响及盐酸吡格列酮作用的干预。方法:体外培养βtc6细胞,0.5mmol/LFFA分别干预1h、48h,放射免疫法检测胰岛素。不同浓度的吡格列酮(0.1、1.0、10.0μmol/L)与FFA共同干预βtc6细胞48h,放射免疫法检测胰岛素浓度。结果:FFA干预1h后,βtc6细胞的葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)增加(Pβtc6细胞的GSIS较干预前下降(P细胞具有短期刺激作用及脂毒性作用,吡格列酮可以部分改善脂毒性作用。

关键词：游离脂肪酸 βtc6细胞胰岛素分泌吡格列酮

游离脂肪酸对βtc6细胞PDX-1表达及胰岛素分泌能力的影响

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国际内分泌代谢杂志 2009年第6期29卷 381-384页

作者：杨立勇侯毅翰沈喜妹严孙杰福建医科大学附属第一医院内分泌科福建医科大学代谢病研究室福州 350005

目的探讨游离脂肪酸对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1（PDX-1）的表达及相应的β细胞增殖活性和胰岛素分泌功能变化的影响。方法0．25—1．00mmol／L游离脂肪酸干预小鼠胰岛素瘤细胞系βtc6细胞24～48h，应用RT—PCR法检测转录因子P... 详细信息

目的探讨游离脂肪酸对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1（PDX-1）的表达及相应的β细胞增殖活性和胰岛素分泌功能变化的影响。方法0．25—1．00mmol／L游离脂肪酸干预小鼠胰岛素瘤细胞系βtc6细胞24～48h，应用RT—PCR法检测转录因子PDX-1mRNA表达，四甲基偶氮唑盐法检测细胞的增殖活性，放射免疫法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平，并观察细胞形态变化。结果经0．25～1．00mmol／L游离脂肪酸干预24h，βtc6细胞PDX-1mRNA的转录逐步增加，但随着干预时间进一步延长至48h，PDX-1mRNA的转录逐渐回落，特别是用1．00mmol／L游离脂肪酸干预48h后，βtc6细胞PDX-1mRNA的表达低于空白对照组。经过0．50～1．00mmol／L游离脂肪酸24—48h的干预之后，βtc6细胞形态学上呈现凋亡趋势，细胞增殖活力以及葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能降低，而0．25mmoL／L游离脂肪酸24h的干预未见此类现象。结论短时间低浓度的游离脂肪酸干预可介导β细胞转录因子PDX-1的表达上调，对β细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力无明显影响；而长时间高浓度的游离脂肪酸干预则将导致PDX-1mRNA的表达下调，并使β细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力受损。

关键词：游离脂肪酸 βtc6细胞胰-十二指肠同源盒因子-1 胰岛素