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碳源对丝孢酵母(Trichosporon cutaneum ST_(851))生长和β-木聚糖酶诱导形成的影响

山东大学学报（自然科学版） 1997年第1期32卷 108-112页

作者：张玉臻马桂荣吕艳玲孔健山东大学微生物技术国家重点实验室

以单糖、双糖和多糖等８种有机化合物为碳源，培养丝孢酵母ＳＴ８５１，结果发现该菌株在上述各种碳源中均生长良好，但只有在木糖和木聚糖碳源中培养时，才呈现β－木聚糖酶活性；该菌株所产生的β－木聚糖酶是诱导酶，木糖和木聚糖是... 详细信息

以单糖、双糖和多糖等８种有机化合物为碳源，培养丝孢酵母ＳＴ８５１，结果发现该菌株在上述各种碳源中均生长良好，但只有在木糖和木聚糖碳源中培养时，才呈现β－木聚糖酶活性；该菌株所产生的β－木聚糖酶是诱导酶，木糖和木聚糖是良好的诱导物；麸皮和半纤维素可大幅度提高酶活力．在液体或固态培养中，酶活力可分别达到１４．４ＩＵ／ｍｌ和７３．６ＩＵ／ｇ曲．

关键词：丝孢酵母 β-木聚糖酶诱导形成碳源

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鞘氨醇单胞菌ATCC 31461的三个糖基水解酶的功能鉴定

鞘氨醇单胞菌ATCC 31461的三个糖基水解酶的功能鉴定

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作者：寇力丹广西大学

学位级别：硕士

木聚糖酶与葡聚糖酶均为糖基水解酶,属于半纤维素酶类,在酿造、饲料、洗涤、生物质能源等行业有着广泛的应用。本研究在大肠杆菌（Escherichia coli）中克隆了来源于鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas elodea）ATCC 31461中的3个基因xyn10A、e... 详细信息

木聚糖酶与葡聚糖酶均为糖基水解酶,属于半纤维素酶类,在酿造、饲料、洗涤、生物质能源等行业有着广泛的应用。本研究在大肠杆菌（Escherichia coli）中克隆了来源于鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas elodea）ATCC 31461中的3个基因xyn10A、eg5A、eg16A,并成功表达。初步检测粗酶的底物特异性发现xyn10A编码的是GH10家族的β-内切木聚糖酶,eg5A编码的是GH5家族的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,eg16A编码的是GH16家族的β-1,3（4）-葡聚糖酶。采用镍亲和层析法纯化Xyn10A、EG5A、EG16A,并对这三个糖基水解酶的酶学性质进行研究。在pH7.0、37℃条件下,Xyn10A能够水解山毛榉木聚糖、桦木木聚糖、玉米芯木聚糖、小麦阿拉伯木聚糖、燕麦木聚糖、甘蔗渣木聚糖、p NPC,其对山毛榉木聚糖的水解活力最高。以山毛榉木聚糖为底物,测得Xyn10A的最适反应pH为6.5,最适反应温度为45℃,其能在pH4.5-10.5和温度25℃-40℃间保持稳定;Xyn10A的K值和V值分别为13.26±1.813 g/L和138.3±8.648μmol*min*mg;醇类等有机试剂均不同程度抑制Xyn10A的活力。Xyn10A水解木寡糖、木聚糖类底物最终生成木糖和木二糖,同时Xyn10A具有微弱的转糖苷活力。在pH7.0、37℃条件下,EG5A能够水解大麦葡聚糖、燕麦葡聚糖、地衣多糖、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、山毛榉木聚糖、p NPC,其对大麦葡聚糖的水解活力最高。以大麦葡聚糖为底物,测得EG5A的最适反应pH为6.0,最适反应温度为45℃,其能在pH4.5-10.5和温度45℃-50℃间保持稳定;EG5A的Km值和Vmax值分别为2.034±0.189 g/L和515.3±17.79μmol*min*mg;醇类等有机试剂均不同程度抑制EG5A的活力。EG5A水解大麦葡聚糖、燕麦葡聚糖、地衣多糖的产物相同,都是葡萄糖、纤维二糖、3-O-纤维二糖基-葡萄糖（G4G3G）、3-O-纤维三糖基-葡萄糖（G4G4G3G）;水解微晶纤维素、羧甲基纤维素钠生成的终产物主要为葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖;水解山毛榉木聚糖主要生成木二糖、木三糖、木四糖。同时,EG5A能够水解纤维寡糖。在pH7.0、37℃条件下,EG16A能够水解大麦葡聚糖、燕麦葡聚糖、地衣多糖、昆布多糖、酵母葡聚糖、β-1,3-葡聚糖,其对大麦葡聚糖的水解活力最高。以大麦葡聚糖为底物,测得EG16A的最适反应pH为7.0,最适反应温度为40℃,其能在pH3.0-7.0和温度25℃-40℃间保持稳定;EG16A的Km值和Vmax值分别为4.363±0.230 g/L和15.94±0.320μmol*min*mg;醇类等有机试剂均不同程度抑制EG16A的活力。EG16A水解大麦葡聚糖、燕麦葡聚糖、地衣多糖生成的终产物为葡萄糖、纤维二糖、昆布二糖、4-O-昆布二糖基-葡萄糖（G3G4G）、4-O-昆布二糖基-纤维二糖（G3G4G4G）;水解昆布多糖、酵母葡聚糖时,生成的产物类型主要是三糖、四糖。

关键词： β-木聚糖酶 β-1,3-1,4-葡聚糖酶 β-1,3(4)-葡聚糖酶酶学性质水解产物

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