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β连环素信号通路介导甲状旁腺素诱导的人近曲小管上皮细胞转分化

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中华肾脏病杂志 2014年第10期30卷 763-769页

作者：郭云珊张爱平王艳侠张磊李宏栋李震丁尧海济南军区总医院肾内科济南250031

目的观察甲状旁腺素（PTH）对人肾小管上皮细胞转分化的影响,并探讨β连环素（β-catenin）信号通路在此过程中的作用.方法应用实时定量PCR、Western印迹、免疫荧光等方法,观察PTH诱导人近曲小管上皮细胞（HK-2细胞）α平滑肌肌动蛋... 详细信息

目的观察甲状旁腺素（PTH）对人肾小管上皮细胞转分化的影响,并探讨β连环素（β-catenin）信号通路在此过程中的作用.方法应用实时定量PCR、Western印迹、免疫荧光等方法,观察PTH诱导人近曲小管上皮细胞（HK-2细胞）α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E钙黏蛋白（E-cadherin）和β-catenin的表达情况.采用siRNA阻断β-catenin信号通路以明确PTH发挥作用的信号途径.结果 10-10 mol/LPTH刺激HK-2细胞48 h时α-SMA mRNA和蛋白表达显著增加（P＜ 0.01）,E-cadherin表达下降（P＜0.01）.10-10 mol/L PTH作用HK-2细胞48 h后,免疫荧光检测结果显示细胞胞质中α-SMA表达增多,E-cadherin表达减少.PTH可激活β-catenin信号通路;β-catenin siRNA干预细胞后,α-SMA mRNA和蛋白表达均下调（P＜0.05）,而E-cadhenn表达上调（P＜0.05）.结论 PTH可诱导HK-2细胞间充质转分化,其作用可能是通过β-catenin信号通路来实现的.

关键词： β连环素纤维化甲状旁腺素间充质转分化肾小管上皮细胞

β﹣连环素核易位在甲状腺肿瘤干细胞向钠碘转运体功能性表达细胞分化中的抑制作用

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中华医学杂志 2019年第24期99卷 1904-1910页

作者：兰玲邓微崔岱陈海翎霍丽丽左庆瑶李伟张国英罗勇北京积水潭医院内分泌科北京100035 南京医科大学第一附属医院内分泌科南京210029 首都医科大学附属北京安贞医院泌尿外科北京100029

目的确认肿瘤干细胞(CSC)发生β-连环素(0-catenin)核易位能否分化出钠碘转运体(NIS)膜表达缺失、对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。方法从人甲状腺滤泡癌细胞KrC 133中分选侧群干细胞(SP),并进行细胞“干性”鉴定;对FTC133来源的SP细胞进行β... 详细信息

目的确认肿瘤干细胞(CSC)发生β-连环素(0-catenin)核易位能否分化出钠碘转运体(NIS)膜表达缺失、对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。方法从人甲状腺滤泡癌细胞KrC 133中分选侧群干细胞(SP),并进行细胞“干性”鉴定;对FTC133来源的SP细胞进行β-catenin转染,再将其促分化培养,并收集分化细胞。应用Western印迹、Transwell、MTT方法,验证分化细胞的上皮细胞间质转化(EMT)属性及体外增殖侵袭能力的变化;应用免疫荧光染色和细胞摄碘试验,观察分化细胞的N1S功能性表达及摄碘能力的变化;应用分化细胞建立严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠皮下瘤模型,观察瘤体对"T体内治疗的反应,并应用免疫组化技术初步检测治疗相关功能蛋白的表达变化。结果FTC133中侧群干细胞约0.03%。应用3-catenin转染FTC133源SP细胞后.其分化细胞中出现了典型EMT转化,其中上皮属性蛋白(E钙黏素和细胞角蛋白18)表达缺失,间质属性蛋白(波形蛋白、纤连蛋白、尿激酶型纤溶酶原激活因子)反常表达;与未转染组和空质粒转染组相比,转染组SP细胞分化细胞体外增殖能力分别增强了约85.4%和81.0%(均P<0.01),侵袭能力则上升了78.8%和84.4%(均戸<0.01)0免疫荧光染色显示,β-catenin转染SP细胞后,其分化细胞出现明显的B-catenin核易位,同时伴随NIS蛋白由膜表达向浆表达的显著转变;体外摄碘率则分别下降约52.8%和45.2%(均P<0.01)。动物实验进一步显示,β-catenin转染SP细胞后,其分化细胞体现了很强的肿瘤生长促进能力和对抗治疗的能力(均P<0.05)。结论干细胞发生β-catenin核易位可能分化为对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。

关键词：甲状腺肿瘤肿瘤干细胞 β连环素上皮细胞-间充质细胞转换钠碘转运体

β－连环素通路对转化生长因子β1致肺纤维化的调控作

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中华医学杂志 2016年第24期96卷 1929-1933页

作者：田新瑞田新利王慧芳常琴霍如婕殷得莉郑国平山西医科大学第二医院呼吸与危重症医学科太原030001 北京军区总医院心肺中心山西大同市第五人民医院呼吸内科山西医科大学生物化学与分子生物学系

目的探讨β－连环素通路对转化生长因子β1（TGF－β1）致肺纤维化的调控作用。方法体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（RLE－6TN细胞）分为四组：A1.对照组；B1.加5 μg/L TGF－β1的TGF－β1组；C1.转染真核表达载体pcDNA3.0（pcDNA）后... 详细信息

目的探讨β－连环素通路对转化生长因子β1（TGF－β1）致肺纤维化的调控作用。方法体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（RLE－6TN细胞）分为四组：A1.对照组；B1.加5 μg/L TGF－β1的TGF－β1组；C1.转染真核表达载体pcDNA3.0（pcDNA）后加5 μg/L TGF－β1的pcDNA＋TGF－β1组；D1.转染β－连环素敲除载体[F－（β－TrCP）－Ecad]后加5 μg/L TGF－β1的F－（β－TrCP）－Ecad＋TGF－β1组。24 h后，显微镜下观察各组细胞形态，Western印迹法检测各组细胞上皮钙黏素、α－平滑肌肌动蛋白（α－SMA）和纤维连接蛋白（Fn）表达；实时荧光定量－聚合酶链反应（RT－PCR）检测各组细胞培养上清液中促纤维化转录产物Snail mRNA的表达。体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞（CRL－2192细胞）分为五组：A2.对照组；B2.加20 μg/L干扰素γ的干扰素γ组；C2.加10 μg/L TGF－β1和20 μg/L干扰素γ的TGF－β1＋干扰素γ组；D2.转染F－（β－TrCP）－Ecad后加入C2组相同试剂的F－（β－TrCP）－Ecad＋TGF－β1＋干扰素γ组；E2.转染野生型β－连环素表达载体（WTβ－连环素）后加入C2组相同试剂的WTβ－连环素＋TGF－β1＋干扰素γ组。24 h后，Western印迹法检测A2、B2、C2组中β－连环素蛋白的表达；RT－PCR检测各组细胞培养上清液诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA的表达。结果B1、C1组RLE－6TN细胞形态变为梭形，D1组细胞形态基本呈铺路石样；B1、C1组RLE－6TN细胞纤维细胞特征蛋白α－SMA、Fn蛋白及下游促纤维化转录产物Snail mRNA表达均显著高于A1组，而上皮细胞特征蛋白上皮钙黏素蛋白表达显著低于A1组；D1组细胞α－SMA、Fn蛋白、Snail mRNA表达均显著低于C1组（0.352±0.076比0.937±0.303、0.319±0.072比0.903±0.211、3.675±0.642比9.708±2.031），而上皮钙黏素蛋白表达显著高于C1组（1.482±0.227比0.604±0.121）（均P〈0.05）。CRL－2192细胞中，β－连环素蛋白表达水平低且A2、B2、C2组β－连环素蛋白表达差异无统计学意义；B2组iNOS mRNA表达显著高于A2、C2、D2、E2组（64.95±4.47比9.87±0.73、21.32±2.41、18.35±3.61、22.87±3.14）（均P〈0.01），C2、D2、E2组iNOS表达均高于A2组（均P〈0.05），而C2、D2、E2三组间比较差异无统计学意义。结论阻断β－连环素通路可抑制TGF－β1诱导的上皮细胞间质转化而不影响其抗炎作用，从而实现β－连环素通路对TGF－β1致肺纤维化作用的调控。

关键词：肺纤维化 β连环素转化生长因子β1 上皮细胞-间质转化巨噬细胞

β连环素、核因子κB表达水平与尖锐湿疣患者角质形成细胞增殖能力的关联性分析

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皮肤病与性病 2021年第4期43卷 603-604,608页

作者：杨秀玲河南省延津县人民医院病理科河南新乡453200

目的探讨β连环素(β-catenin)、核因子κB(NF-κB)与尖锐湿疣(CA)患者细胞增殖的关联性。方法选取某医院收治的CA患者92例(2019年1月至2021年1月)作为研究对象,按照感染类型分为高危组(n=41)与低危组(n=51),同时选取同期于我院检查的11... 详细信息

目的探讨β连环素(β-catenin)、核因子κB(NF-κB)与尖锐湿疣(CA)患者细胞增殖的关联性。方法选取某医院收治的CA患者92例(2019年1月至2021年1月)作为研究对象,按照感染类型分为高危组(n=41)与低危组(n=51),同时选取同期于我院检查的112例健康体检者作为健康体检组。对比三组β-catenin、NF-κB表达情况、角质形成细胞增殖能力及其关联性。结果高危组、低危组β-catenin、NF-κB阳性率均高于健康体检组(P<0.05);伴随时间延长,高危组、低危组角质形成细胞增殖能力呈升高趋势(P<0.05);经Spearman相关性分析,β-catenin、NF-κB与角质形成细胞增殖能力呈正相关(P<0.05)。结论β-catenin、NF-κB表达水平与CA患者角质形成细胞增殖能力呈正相关,临床可客观评估CA患者病情严重程度,为确定治疗方案提供重要依据。

关键词： β连环素核因子κB 尖锐湿疣角质形成细胞增殖能力关联性

β连环素和Ki-67表达在唾液腺腺样囊性癌和基底细胞腺癌鉴别诊断中的作用

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江苏医药 2021年第3期47卷 230-233,F0003页

作者：夏荣辉王丽珍顾挺张莺钱佳骏薛俊青田臻李江上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科(国家口腔疾病临床医学研究中心) 200011

目的探讨β连环素(β-catenin)和Ki-67表达在唾液腺腺样囊性癌(ACC)和基底细胞腺癌(BCAC)鉴别诊断中的作用。方法回顾性分析56例唾液腺ACC患者(A组)和32例BCAC患者(B组)的临床资料,比较两组组织病理学特征。通过免疫组化染色检测并比较... 详细信息

目的探讨β连环素(β-catenin)和Ki-67表达在唾液腺腺样囊性癌(ACC)和基底细胞腺癌(BCAC)鉴别诊断中的作用。方法回顾性分析56例唾液腺ACC患者(A组)和32例BCAC患者(B组)的临床资料,比较两组组织病理学特征。通过免疫组化染色检测并比较两组β-catenin和Ki-67蛋白的表达。结果 A组神经侵犯比例和肿瘤位于小唾液腺比例高于B组(P0.05)。免疫组化染色结果显示,两组β-catenin染色部位差异明显,A组患者β-catenin均表达于肿瘤细胞膜和细胞质,而B组患者中29例(90.6%)可见β-catenin表达于肿瘤细胞核(P<0.01)。A组Ki-67指数高于B组[(15.5±1.6)%vs.(4.2±0.7)%](P<0.01)。结论β-catenin在细胞内表达定位和Ki-67指数可以作为辅助鉴别诊断唾液腺ACC和BCAC的指标。

关键词：唾液腺腺样囊性癌基底细胞腺癌 β连环素 Ki-67

转化生长因子β1协同基质细胞衍生因子1通过抑制β连环素活性影响肝卵圆细胞增殖

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中华外科杂志 2013年第5期51卷 442-446页

作者：胡荣林黄庆杨学伟彭和平杜军焦兴元广州医学院第二附属医院肝胆外科广东广州510260 中山大学药学院微生物与生化制药实验室中山大学附属第一医院器官移植中心

目的探讨基质细胞衍生因子1（SDF-1）在肝卵圆细胞增殖过程中的效应、影响因素及作用机制。方法流式细胞术检测大鼠肝卯圆细胞株WB-F344细胞表面趋化性细胞受体因子4（CXCR4）的表达情况。Westernblot法检测细胞中β连环素蛋白磷酸化水... 详细信息

目的探讨基质细胞衍生因子1（SDF-1）在肝卵圆细胞增殖过程中的效应、影响因素及作用机制。方法流式细胞术检测大鼠肝卯圆细胞株WB-F344细胞表面趋化性细胞受体因子4（CXCR4）的表达情况。Westernblot法检测细胞中β连环素蛋白磷酸化水平。激光共聚焦显微镜观察细胞内β连环素的分布情况。荧光定量PCR检测经典Wnt通路下游基因Ccndl、c-Myc的表达。将细胞分为对照组、SDF-l组、转化生长因子βl（TGF-β1）组、SDF-1＋TGF-β1组、SDF-1＋TGF-β1＋CXCR4抑制剂组，噻唑蓝法检测各组细胞增殖情况。结果WB-F344细胞中CXCR4的表达量很低，而TGF-β1可上调WB-F344细胞CXCR4的表达（CXCR4阳性率上升39．5％）。SDF-1结合于CXCR4后可促进肝卵圆细胞中β连环素磷酸化，抑制β连环素入核，下调下游基因Ccndl、c-Myc的表达。200μg／L的SDF-1单独作用72h后WB-F344细胞的增殖情况（0．5124-0．010）与对照组（0．513±0．008）相比差异无统计学意义（t=0．337，P〉0．05），5肌∥L的TGF-β1可轻度抑制其增殖（0．393±0．007，t=28．001，P〈0．05），而SDF-1＋TGF-β1组WB-F344细胞增殖能力较TGF-β1组进一步减弱（0．272±0．009，t=32．204，P〈0．05）。结论TGF-131可上调肝卵圆细胞中CXCR4的表达，协同SDF-1通过调控B连环素的功能状态，抑制肝卵圆细胞体外增殖。

关键词：干细胞转化生长因子β1 受体 CXCR4 β连环素

小干扰RNA干扰β连环素表达对肺腺癌A549细胞Wnt信号通路的作用

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中华医学杂志 2010年第14期90卷 988-992页

作者：滕颖王秀问王亚伟王健山东大学齐鲁医院肿瘤中心化疗科济南250012

目的研究小干扰RNA（siRNA）干扰β连环素（β-catenin）表达对肺腺癌A549细胞Wnt／β-catenin信号通路的影响。方法将ASd9细胞分为转染β-catenin干扰质粒PGCsil—CTNNB1-siRNA组（干扰质粒组）、转染阴性对照质粒PGCsil-NC—siRNA组... 详细信息

目的研究小干扰RNA（siRNA）干扰β连环素（β-catenin）表达对肺腺癌A549细胞Wnt／β-catenin信号通路的影响。方法将ASd9细胞分为转染β-catenin干扰质粒PGCsil—CTNNB1-siRNA组（干扰质粒组）、转染阴性对照质粒PGCsil-NC—siRNA组（阴性对照组）和未转染质粒组（空白对照组），对各组细胞用实时PCR法检测β-catenin及Wnt／β-catenin信号通路靶基因细胞周期蛋白（cyclin）D1mRNA的表达，以噻唑蓝法检测细胞增殖能力，流式细胞术进行细胞周期分析，克隆形成试验检测克隆形成率，Millicell小室试验检测细胞迁徙能力。结果干扰质粒组细胞β-cateninmRNA和cyclinD1mRNA表达均明显低于阴性对照组（0．002±0．001比0．023±0．002，P〈0．01；0．005±0．002比0．040±0．020，P〈0．05）和空白对照组（B-cateninmRNA：0．021±0．003，P〈0．01；cyclinD1mRNA：0．042±0．004，P〈0．05）；第5～7天细胞增殖能力明显弱于阴性对照组和空白对照组（P〈0．05，P〈0．01），细胞倍增时间（58．1h）明显长于阴性对照组（37．9h，P〈0．05）和空白对照组（34．2h，P〈0.05）；G0—G1期细胞（86．4％±2．6％）明显多于阴性对照组（73．8％±0．9％，P〈0．01）和空白对照组（75．8％±1．5％，P〈0．01）；细胞克隆形成率（31．6％±7．7％）明显低于阴性对照组（46．9％±7．3％，P〈0．05）和空白对照组（44．2％±2．5％，P〈0．05），穿过Millicell小室底膜的细胞数（16．0±3．8）明显低于阴性对照组（32．7±3．1，P〈0．01）和空白对照组（33．0±2．7，P〈0．01）。结论用siRNA干扰β—catenin的表达可抑制肺腺癌细胞Wnt／β-catenin信号通路，降低细胞的增殖能力、克隆形成能力和迁徙能力。Wnt／β-catenin信号通路可能成为肺癌分子靶向治疗的新靶点。

关键词：肺肿瘤腺癌 RNA,小分子干扰 β连环素信号传导

Wnt/β连环素和NF-κB信号通路对磷脂酶D的调控作用及其与肿瘤关系的研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2014年第5期28卷 779-783页

作者：洪星辉黄金玲安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230038

随着近几年对Wnt/β连环素和NF-κB信号通路研究的深入,发现磷脂酶D(PLD)作为其下游共有的靶基因与肿瘤的形成和转移密切相关。最新研究表明,Wnt/β连环素和NF-κB信号通路介导PLD表达的同时,也增强了PLD活性。PLD/磷脂酸作为重要的调... 详细信息

随着近几年对Wnt/β连环素和NF-κB信号通路研究的深入,发现磷脂酶D(PLD)作为其下游共有的靶基因与肿瘤的形成和转移密切相关。最新研究表明,Wnt/β连环素和NF-κB信号通路介导PLD表达的同时,也增强了PLD活性。PLD/磷脂酸作为重要的调控因子,通过靶向及正反馈循环调控机制的方式增强β连环素/T细胞因子和NF-κB的转录活性,促进下游靶基因,包括细胞周期蛋白D1、cmyc、存活蛋白、血管内皮生成因子和环氧化酶2的转录和表达,而PLD/磷脂酸的抑制剂可逆转以上作用且表现出显著的抗肿瘤效应。因此,PLD/磷脂酸信号通路有望成为癌症治疗的新靶点。

关键词： Wnt β连环素 NF—κB 信号通路磷脂酶D 肿瘤

三七总皂苷对脑梗死大鼠神经细胞Wnt/β-连环素信号通路的影响

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安徽医药 2022年第12期26卷 2395-2398,I0003页

作者：芦君新汶矿业集团有限责任公司中心医院神经内一科山东泰安271200

目的探究三七总皂苷对脑梗死大鼠神经细胞Wnt/β-连环素(β-catenin)信号通路的影响。方法该研究起止时间为2018年1月至2019年3月。60只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为空白对照组、模型组、低剂量三七总皂苷组(75 mg/kg)和高剂量三... 详细信息

目的探究三七总皂苷对脑梗死大鼠神经细胞Wnt/β-连环素(β-catenin)信号通路的影响。方法该研究起止时间为2018年1月至2019年3月。60只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为空白对照组、模型组、低剂量三七总皂苷组(75 mg/kg)和高剂量三七总皂苷组(150 mg/kg),各15只。将模型组、低剂量三七总皂苷组和高剂量三七总皂苷组大鼠制成脑梗死模型;低剂量、高剂量三七总皂苷组均腹腔注射三七总皂苷,空白对照组和模型组注射等量生理盐水,每日1次,注射3 d。使用改良神经功能缺损评分(mNSS)评价大鼠神经功能;使用Z-Longa评分评价大鼠姿势反射情况;检测各组大鼠脑梗死面积及脑含水率;使用蛋白质印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白及自噬相关蛋白表达情况。结果与空白对照组相比,模型组大鼠mNSS评分、大鼠姿势反射评分、脑梗死率、脑含水率、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达水平升高(P<0.05),自噬蛋白P62表达、Wnt信号通路配体蛋白Wnt3a蛋白表达(0.25±0.09比1.68±0.25)和β-catenin蛋白表达(0.40±0.10比1.55±0.20)降低(P<0.05)。与模型组相比,低、高剂量三七总皂苷组大鼠mNSS评分、大鼠姿势反射评分、脑梗死率、脑含水率降低,LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.05),P62蛋白、Wnt3a蛋白(0.79±0.15,1.26±0.25比0.25±0.09)和β-catenin蛋白表达(1.23±0.25,0.90±0.15比0.40±0.10)升高(P<0.05)。与低剂量三七总皂苷组相比,高剂量三七总皂苷组大鼠mNSS评分、大鼠姿势反射评分、脑梗死率、脑含水率降低,LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.05),P62蛋白、Wnt3a蛋白(1.26±0.25比0.79±0.15)和β-catenin蛋白表达(1.23±0.25比0.90±0.15)升高(P<0.05)。结论三七总皂可以通过促进Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达激活Wnt/β-catenin信号通路,发挥调节大鼠神经元细胞的自噬,改善脑梗死大鼠神经损伤的作用。

关键词：脑梗死人参皂甙类三七 β连环素 Wnt信号通路神经细胞自噬大鼠 Sprague-Dawley