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α-微管蛋白乙酰化调控NLRP3炎症小体活化的研究进展

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中国免疫学杂志 2023年第2期39卷 427-433页

作者：李陈广吴晓君肖礼祖(指导) 华中科技大学协和深圳医院深圳518052

NLRP3炎症小体在固有免疫系统中发挥重要作用,介导caspase-1激活并促进炎症因子IL-1β分泌应答机体的病原微生物感染和细胞损伤,但异常活化的NLRP3炎症小体也会导致多种炎症性疾病的发生。NLRP3炎症小体的激活涉及多种细胞内分子和信号... 详细信息

NLRP3炎症小体在固有免疫系统中发挥重要作用,介导caspase-1激活并促进炎症因子IL-1β分泌应答机体的病原微生物感染和细胞损伤,但异常活化的NLRP3炎症小体也会导致多种炎症性疾病的发生。NLRP3炎症小体的激活涉及多种细胞内分子和信号通路,导致细胞内离子流动变化、线粒体功能紊乱和溶酶体损伤等一系列事件发生,然而NLRP3炎症小体组装的详细调控机制尚不清楚。本综述着重介绍α-微管蛋白的乙酰化介导线粒体通过动力蛋白转运到内质网附近,从而促进线粒体上的ASC与内质网上的NLRP3接触,诱导NLRP3炎症小体组装。

关键词： α-微管蛋白乙酰化 NLRP3炎症小体固有免疫

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玉米根细胞中类整合素蛋白与α-微管蛋白的共定位及其可能的相互作用(英文)

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植物生理与分子生物学学报 2007年第2期33卷 115-122页

作者：吕冰陈枫龚忠华梁建生扬州大学生物科学与技术学院江苏省作物遗传与生理重点实验室扬州225009

采用间接免疫荧光标记法对玉米根细胞中的类整合素蛋白和细胞骨架主要组分之一的α-微管蛋白进行了荧光定位。结果表明:类整合素蛋白主要分布在质膜上。与对照相比,用与类整合素蛋白特异结合的5肽GRGDS处理后,质膜上类整合素的分布更为... 详细信息

采用间接免疫荧光标记法对玉米根细胞中的类整合素蛋白和细胞骨架主要组分之一的α-微管蛋白进行了荧光定位。结果表明:类整合素蛋白主要分布在质膜上。与对照相比,用与类整合素蛋白特异结合的5肽GRGDS处理后,质膜上类整合素的分布更为均匀,微管的排列密度降低,而用不与类整合素蛋白特异结合的GRGDS类似物SDGRG处理则对类整合素蛋白分布和微管蛋白的排列均无明显影响。微管蛋白解聚剂或稳定剂处理改变类整合素在质膜上的分布。这些结果表明类整合素蛋白与微管蛋白间有复杂的相互作用。

关键词：共定位间接免疫荧光类整合素蛋白相互作用 α-微管蛋白玉米

毛白杨α-微管蛋白基因家族的克隆与序列分析

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林业科学研究 2015年第1期25卷 44-49页

作者：饶国栋睢金凯张建国南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 国家林业局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091

采用本地化软件Blast P对杨树全基因组数据库和Gen Bank数据进行搜索,根据搜索结果对毛白杨TUA基因家族进行克隆,并利用软件Clustal W和MEGA对TUA基因进行了核酸和氨基酸序列的比对分析和系统进化分析;利用SWISS-MODEL服务器对TUA的蛋... 详细信息

采用本地化软件Blast P对杨树全基因组数据库和Gen Bank数据进行搜索,根据搜索结果对毛白杨TUA基因家族进行克隆,并利用软件Clustal W和MEGA对TUA基因进行了核酸和氨基酸序列的比对分析和系统进化分析;利用SWISS-MODEL服务器对TUA的蛋白质三维结构进行模拟。结果显示:毛白杨α-微管蛋白由8个成员构成,8个成员的氨基酸序列和其它植物α-微管蛋白序列的相似性在80%以上;TUA基因可分为2个家族,每个家族成员都有其独特的内含子外显子特征;TUA蛋白的三维结构表现出极高的相似性。毛白杨TUA基因在序列和结构上都十分保守;8个TUA基因起源于2个祖先TUA基因。

关键词： α-微管蛋白生物信息学系统进化三维结构模拟

刺激隐核虫α-微管蛋白基因的克隆、原核表达及在生活史不同阶段的mRNA表达

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中国水产科学 2018年第6期25卷 1172-1182页

作者：孙嘉阳张子平朱友芳邹志华韩坤煌葛辉王艺磊集美大学水产学院福建农林大学动物科学学院莆田市水产科学研究所福建省水产研究所

从本实验室已有刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)转录组数据中筛选获得α-微管蛋白基因片段,利用5’RACE和3’RACE技术首次克隆获得其cDNA,全长为1602 bp,包含1356 bp的开放阅读框,编码451个氨基酸,预测蛋白质分子量为49.78 kD。生物... 详细信息

从本实验室已有刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)转录组数据中筛选获得α-微管蛋白基因片段,利用5’RACE和3’RACE技术首次克隆获得其cDNA,全长为1602 bp,包含1356 bp的开放阅读框,编码451个氨基酸,预测蛋白质分子量为49.78 kD。生物信息学分析表明α-微管蛋白为亲水性非跨膜蛋白,氨基酸序列的第142～148位有特异且保守的GTP核苷酸结合位点(GGGTGSG)。对刺激隐核虫α-微管蛋白氨基酸序列进行同源性比对及进化树分析,发现其与间日疟原虫(Trypanosoma vivax)、丹氏锥虫(Trypanosoma danilewskyi)、八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)、尾刺耐格里原虫(Naegleria gruberi)、眼虫(Euglena gracilis)等的序列一致性高达94%～95%,且在系统进化树上聚为一支。采用实时荧光定量PCR技术对α-微管蛋白基因在刺激隐核虫3个生活史阶段的表达进行检测,结果显示α-微管蛋白基因的表达量在纤毛虫时期显著高于包囊和滋养体时期(Pα-微管蛋白重组表达载体,并转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)和Rosetta(DE3)中进行原核表达,SDS-PAGE分析表明,诱导表达的重组蛋白分子量约为50 kD,与预测的结果一致,即成功诱导表达α-微管蛋白。本实验结果为后续制备α-微管蛋白有效亚单位疫苗防治刺激隐核虫病奠定了基础。

关键词：刺激隐核虫 α-微管蛋白原核表达生活史实时荧光定量PCR

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α-微管蛋白基因在玉米CMS中的表达调控

云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 163-164页

作者：许莉郑文竹周以侹孙晟厦门大学生物学系厦门361005

乳腺癌及癌前病变α-微管蛋白和γ-微管蛋白免疫荧光定量分析及其意义

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中华肿瘤杂志 2006年第8期28卷 590-593页

作者：牛昀王颖韦丽魏熙胤牛瑞芳天津医科大学附属肿瘤医院国家(教育部)乳腺癌防治重点实验室 300060 南开大学医学院

目的研究人乳腺癌前病变、原位癌及浸润性癌中α-微管蛋白和γ-微管蛋白表达量的变化及其意义,进一步探讨中心体异常与乳腺癌发生发展的关系。方法采用流式细胞术免疫荧光定量分析方法,检测30例乳腺导管上皮不典型增生、30例乳腺导管内... 详细信息

目的研究人乳腺癌前病变、原位癌及浸润性癌中α-微管蛋白和γ-微管蛋白表达量的变化及其意义,进一步探讨中心体异常与乳腺癌发生发展的关系。方法采用流式细胞术免疫荧光定量分析方法,检测30例乳腺导管上皮不典型增生、30例乳腺导管内癌和30例浸润性导管癌的中心体α-微管蛋白和γ-微管蛋白表达水平,另30例正常乳腺组织作为对照组,并与免疫组化检测所得数据进行比较。结果在正常乳腺组织、导管上皮不典型增生、乳腺导管内癌和浸润性导管癌中,α-微管蛋白、γ-微管蛋白的过量表达程度不同(P=0．000),浸润性导管癌组最高。随着导管上皮增生、不典型增生至进展为原位癌和浸润性导管癌的发展变化,α-微管蛋白、γ-微管蛋白表达量呈增高趋势,并与病理组织学上细胞增生和癌细胞生长分化程度明显相关。除不典型增生组和乳腺导管内癌组外,其余各组间差异均有统计学意义(P=0．001)。比较同组病例的α-微管蛋白、γ-微管蛋白表达程度,差异无统计学意义(P蛋白的过度表达,在乳腺癌形成的早期关键性步骤中,中心体异常有可能在促使细胞过度增殖恶性转化的过程中起了重要作用。免疫荧光定量分析和免疫组化检测两种方法结合使用,可相互补充验证。

关键词： α-微管蛋白 γ-微管蛋白乳腺肿瘤癌前病变免疫荧光定量分析

巴西橡胶树α-微管蛋白HbTUA2基因的克隆、表达及生物信息学分析

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植物生理学报 2017年第1期53卷 52-62页

作者：杨洪邓治刘辉代龙军李德军中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州571737

微管蛋白是微管的重要组成部分,参与维持细胞骨架的稳定及延伸。本研究采用RT-PCR和RACE技术从巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)中克隆到一个α-微管蛋白基因,命名为Hb TUA2(Gen Bank登录号:KX809698)。该基因c DNA全长1 940bp,其中开放... 详细信息

微管蛋白是微管的重要组成部分,参与维持细胞骨架的稳定及延伸。本研究采用RT-PCR和RACE技术从巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)中克隆到一个α-微管蛋白基因,命名为Hb TUA2(Gen Bank登录号:KX809698)。该基因c DNA全长1 940bp,其中开放阅读框1 353 bp,编码含450个氨基酸残基的蛋白质序列。Hb TUA2与其他植物TUA蛋白高度同源,具有TUA蛋白家族保守的GTP结合位点和转录后调控片段。基因结构分析表明,Hb TUA2具有4个外显子和3个内含子,内含子外显子剪切符合"GT-AG"规则。荧光定量PCR分析表明,Hb TUA2在巴西橡胶树叶片、雌花、雄花、茎尖、树皮及胶乳等组织中均有表达,在雌花中表达量最高,其次是茎尖和雄花,在叶片、树皮和胶乳中表达量较低。此外,Hb TUA2的表达还受高盐、干旱、低温、过氧化氢(H_2O_2)、乙烯利和茉莉酸甲酯(Me JA)调控,表明Hb TUA2可能参与巴西橡胶树乙烯和茉莉酸信号途径及逆境胁迫应答过程。

关键词：橡胶树 α-微管蛋白逆境胁迫表达分析

促红细胞生成素对血管性痴呆模型大鼠认知功能、脑保护作用及海马α-微管蛋白表达的影响

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临床神经病学杂志 2008年第2期21卷 119-122页

作者：单培彦高静季燕焉传祝谭东山东大学齐鲁医院神经内科济南250012 广州祈福医院神经内科

目的研究促红细胞生成素(Epo)对血管性痴呆(VD)模型大鼠认知功能、脑保护作用和海马α-微管蛋白(tubulin)表达的影响。方法用"两血管阻断+硝普钠降压"法建立大鼠VD模型,并给予Epo腹腔注射治疗,采用Morris水迷宫试验检测大鼠的认知功能,N... 详细信息

目的研究促红细胞生成素(Epo)对血管性痴呆(VD)模型大鼠认知功能、脑保护作用和海马α-微管蛋白(tubulin)表达的影响。方法用"两血管阻断+硝普钠降压"法建立大鼠VD模型,并给予Epo腹腔注射治疗,采用Morris水迷宫试验检测大鼠的认知功能,Nissle染色、α-tubulin免疫组化染色观察细胞形态和Western blot法检测海马α-tubulin表达水平。并与VD大鼠及假手术组大鼠比较。结果与VD组比较,Epo组大鼠水迷宫试验逃避潜伏期明显缩短(除试验第1d)(均P<0.05);海马神经元形态规则,尼氏小体数量多,α-tubulin阳性轴突数多,α-tubulin含量显著升高(P<0.05)。而Epo组与假手术组水迷宫试验逃避潜伏期及海马α-tubulin含量差异无统计学意义。结论Epo可改善VD大鼠的认知功能,减轻缺血性脑损害,促进海马α-tubulin的表达。

关键词：促红细胞生成素痴呆血管性 Morris水迷宫 α-微管蛋白

小麦赤霉病菌α-微管蛋白原核表达及纯化研究

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植物病理学报 2012年第3期42卷 252-259页

作者：徐建强张聪于金凤彭迪周明国南京农业大学植物保护学院/农业部作物病虫害监测及防控重点开放实验室南京210095 河南科技大学林学院洛阳471003

为了制备小麦赤霉病菌的α-微管蛋白,以小麦赤霉病菌cDNA为模板,PCR扩增出α1-、α2-微管蛋白基因,将其克隆到pET30a+表达载体上,转化到表达宿主菌Rossatta(DE3)pLysS,筛选阳性克隆,进行蛋白诱导表达。SDS-PAGE及Wes-tern-b1ot结果表明... 详细信息

为了制备小麦赤霉病菌的α-微管蛋白,以小麦赤霉病菌cDNA为模板,PCR扩增出α1-、α2-微管蛋白基因,将其克隆到pET30a+表达载体上,转化到表达宿主菌Rossatta(DE3)pLysS,筛选阳性克隆,进行蛋白诱导表达。SDS-PAGE及Wes-tern-b1ot结果表明:融合蛋白主要以包涵体形式存在;融合蛋白分子量约为52.1和55.9 kD;融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应。通过对包涵体洗涤及透析复性后采用HisTrapTMHP Columns对融合蛋白进行纯化,可以得到纯度较高的融合蛋白。该研究为体外筛选以微管蛋白为靶标的杀菌剂提供了物质基础。

关键词：小麦赤霉病菌 α-微管蛋白包涵体融合蛋白纯化