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第十四届全国免疫学学术大会

作者：石雨晴张若旸张牧之李陈铎崔晗刘杰孙英王炜王辰首都医科大学基础医学院免疫学系中国医学科学院北京协和医学院首都医科大学呼吸病学系

研究背景:肺血管重塑是肺动脉高压(Pulmonary Hypertension,PH)的核心环节,而肺动脉内皮细胞(Human Pulmonary Artery Endothelial Cells,HPAECs)功能障碍可能是其始动因素。研究表明HPAECs高表达免疫调节相关基因,参与低氧相关的炎症... 详细信息

研究背景:肺血管重塑是肺动脉高压(Pulmonary Hypertension,PH)的核心环节,而肺动脉内皮细胞(Human Pulmonary Artery Endothelial Cells,HPAECs)功能障碍可能是其始动因素。研究表明HPAECs高表达免疫调节相关基因,参与低氧相关的炎症反应及免疫应答过程。α烯醇酶(Alpha Enolase,ENO1)是血管内皮细胞表达的低氧应激蛋白,其与炎症、自身免疫应答、线粒体/代谢均密切相关,可能参与PH的发生发展。目的:探讨ENO1是否通过靶向线粒体引发代谢重编程影响HPAECs功能,从而参与PH,为深入探讨PH的免疫相关分子机制及寻找PH的临床治疗靶点提供理论依据和实验基础。方法:采用Western blot和免疫组化观察慢阻肺合并PH患者、MCT诱导的特发性PH模型大鼠以及低氧性PH模型小鼠肺组织中ENO1的表达情况;采用雄性8周龄C57BL/6小鼠制备低氧性PH模型,予腹腔注射烯醇酶特异性抑制剂ENOblock或气管内注射过表达ENO1的腺相关病毒进行造模。采集右心相关指标并观察肺小动脉结构改变。检测HPAECs在低氧条件下ENO1的表达情况。通过增殖实验、黏附实验和血管形成实验,检测内源性过表达或敲减ENO1表达以及ENOblock干预对HPAECs功能的影响。检测低氧对HPAECs的ATP产生的影响,以及敲减ENO1表达对HPAECs氧耗率的影响。结果:(1)与对照组相比,在慢性阻塞性肺疾病合并PH患者、PH动物模型的肺组织中,ENO1在血管内皮层的表达明显上调;(2)体内ENOblock干预可显著缓解慢性低氧性PH的形成,而内源性过表达ENO1则促进此过程;(3)低氧可显著上调HPAECs中ENO1的表达水平;(4)内源性过表达ENO1可明显增强与慢性炎症相关的HPAECs的增殖、黏附和血管形成能力;反之,内源性敲减ENO1表达以及ENOblock干预可抑制低氧诱导的炎症相关的细胞功能改变;(5)低氧刺激可导致HPAECs的细胞总ATP产生减少,其中以线粒体呼吸产生的ATP减少为主,炎症相关的糖酵解ATP产生增加。(6)敲减HPAECs中ENO1表达可改善低氧相关炎症造成的细胞氧耗率下降,增加线粒体呼吸水平。结论:靶向ENO1可能通过改善低氧相关炎症导致的线粒体功能障碍调节HPAECs功能,从而减缓PH的发生发展。

关键词： α烯醇酶肺动脉高压肺动脉内皮细胞线粒体代谢重编程低氧炎症

来源： cnki会议评论

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松花粉对于肝癌细胞株SMMC-7721的生物学作用及与α-烯醇酶及其下游PI3K/AKT信号通路蛋白的关联作用

引用

右江民族医学院学报 2023年第1期45卷 15-21页

作者：徐伟鑫王春芳罗艳红右江民族医学院医学检验学院广西百色533000

目的探讨松花粉作用于肝癌细胞株SMMC-7721的增殖和侵袭作用的影响,以及与之相关的磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路蛋白的表达变化。方法首先对松花粉水提液中总多糖、总黄酮和锌离子3种主要抗癌成分的浓度... 详细信息

目的探讨松花粉作用于肝癌细胞株SMMC-7721的增殖和侵袭作用的影响,以及与之相关的磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路蛋白的表达变化。方法首先对松花粉水提液中总多糖、总黄酮和锌离子3种主要抗癌成分的浓度进行检测。再用未加松花粉处理的SMMC-7721细胞作为对照组,分别用一系列浓度的松花粉处理12 h、24 h于SMMC-7721细胞,用CCK8法检测细胞增殖及其最优半抑制浓度(IC50),并且以SMMC-7721细胞的IC50作为松花粉处理组的浓度进行后续Transwell法检测细胞侵袭、Western Blot法检测α-烯醇酶(ENO1)及下游PI3K/AKT信号通路蛋白的表达变化。结果CCK8法检测SMMC-7721细胞在松花粉处理24 h后的IC50为16.78μg/μL,与12 h的23.87μg/μL相比有更好的效果;故后续实验采用松花粉处理24 h后的IC50作为作用浓度。在Transwell实验,加松花粉药液组细胞侵袭数低于未加松花粉药液组,差异有统计学意义(P<0.01)。在Western Blot实验中,ENO1蛋白和下游信号通路蛋白分子PI3K、AKT、C-MYC的表达量大部分呈现出加松花粉药液组低于未加松花粉药液组(P<0.05)。结论松花粉有抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖和侵袭作用,并且其作用机制与抑制ENO1、PI3K、AKT和C-MYC的表达量有关。

关键词： α烯醇酶松花粉肝肿瘤

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