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生物法拆分外消旋甲霜灵制备r-甲霜灵

化工学报 2017年第11期68卷 4229-4238页

作者：张朝晖张利坤陆跃乐浙江工业大学生物工程学院浙江杭州310014

从土壤和污泥样品中分离得到一株能不对称水解甲霜灵的革兰阴性菌。通过分子生物学鉴定,命名该菌株为Albibacters sp.zjut528。当底物浓度为50 g·L^(-1),湿菌体(含水量81%):底物=0.3:1(质量比),反应28 h,产物得率为47.1%,主产物为r-甲... 详细信息

从土壤和污泥样品中分离得到一株能不对称水解甲霜灵的革兰阴性菌。通过分子生物学鉴定,命名该菌株为Albibacters sp.zjut528。当底物浓度为50 g·L^(-1),湿菌体(含水量81%):底物=0.3:1(质量比),反应28 h,产物得率为47.1%,主产物为r-甲霜灵酸,对映体过量值eep>99.9%。将菌株细胞破碎得到的粗酶液分离纯化得到一个SDS-PAGE电泳纯的酯酶,分子量约为40×10~3,酶的N端10个氨基酸序列为NH2-Ala-Ala-Lys-Ala-Pro-Leu-Arg-Leu-Lys-Glu。该酶最适温度为40℃,20~40℃稳定性较好。最适pH为9.0,在pH 5.0~10.0范围内稳定。Fe^(2+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)对酶活有促进作用,Fe^(3+)对酶活有一定的抑制作用。在含有20%的乙腈、异丙醇、丙酮、二异丙醚、环己烷、正己烷的水溶液中,酶活均比在纯水相中有明显提高。该酶反应动力学符合米氏方程,Vm为0.18 mmol·L^(-1)·min-1,Km为2.29 mmol·L^(-1),Kcat为0.85 min^(-1)。建立了一条利用Albibacters sp.zjut528细胞作催化剂拆分甲霜灵制备r-甲霜灵的工艺路线,终产品r-甲霜灵的纯度是96.2%,ee值为99.3%。

关键词：生物催化生物过程水解 r S-甲霜灵 r-甲霜灵菌种筛选和鉴定酯酶 Albibacters

0.57、1.0和1.5MeV中子诱发^(235)U裂变的^(99)Mo产额绝对测量

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原子能科学技术 2013年第9期47卷 1473-1478页

作者：冯晶鲍杰杨毅刘世龙张春利杨洋刘永辉中国原子能科学研究院核物理研究所北京102413

用HPGe γ能谱法绝对测量了0.57、1.0和1.5MeV中子诱发235 U裂变产物99 Mo的产额,使用双裂变室测量了样品辐照过程中的裂变率,应用MCNPⅣB模拟了铀样品中的中子能谱,并讨论了非主中子的各种来源对产额数据的影响。得到99 Mo在0.57、1.0... 详细信息

用HPGe γ能谱法绝对测量了0.57、1.0和1.5MeV中子诱发235 U裂变产物99 Mo的产额,使用双裂变室测量了样品辐照过程中的裂变率,应用MCNPⅣB模拟了铀样品中的中子能谱,并讨论了非主中子的各种来源对产额数据的影响。得到99 Mo在0.57、1.0和1.5 MeV的产额分别为6.61%、6.62%和6.28%。本工作与美国阿贡实验室的结果有15%以上的相对偏差,主要是由引用的衰变数据不同引起。对阿贡实验室数据进行校正后,本工作与阿贡实验室数据的相对偏差处于实验不确定度范围内。

关键词：裂变产额99_Mo 235_U r 能谱法

一种降解赭曲霉毒素A的羧肽酶酶原在毕赤酵母中的表达

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中国食品学报 2015年第6期15卷 39-44页

作者：师磊许文涛田晶晶黄昆仑梁志宏中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 营养健康与食品安全北京市重点实验室北京100083

目的:获得能降解赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的重组蛋白羧肽酶A(r CPA)。方法:按照巴斯德毕赤酵母密码子偏爱性合成羧肽酶A酶原(Pro CPA)基因,构建重组质粒p PIC9K/Pro CPA,线性化后电转导入毕赤酵母GS115中,抗生素G418筛选获得高拷... 详细信息

目的:获得能降解赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的重组蛋白羧肽酶A(r CPA)。方法:按照巴斯德毕赤酵母密码子偏爱性合成羧肽酶A酶原(Pro CPA)基因,构建重组质粒p PIC9K/Pro CPA,线性化后电转导入毕赤酵母GS115中,抗生素G418筛选获得高拷贝转化子。甲醇诱导表达5 d,上清用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)分析,基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)鉴定。重组羧肽酶A酶原(r Pro CPA)用TPCK处理的胰蛋白酶酶解,酶解产物r CPA降解OTA,高效液相色谱(HPLC)测定降解率。结果:成功构建毕赤酵母重组菌株GS115/p PIC9K/Pro CPA。SDS-PAGE表明r Pro CPA分子质量与理论值一致,MALDI-TOF证实为牛胰脏Pro CPA,甲醇诱导表达5 d后上清的总蛋白含量190 mg/L。Band Scan软件估计r Pro CPA占上清的80%,含量为150 mg/L。酶解产物r CPA能降解OTA,当OTA质量浓度为4μg/m L时,降解率为72.3%。HPLC显示有降解产物OTα产生。

关键词：赭曲霉毒素A r Pro CPA 降解毕赤酵母GS115

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番茄采后病原鉴定及百里香精油生物活性研究

中国食品学报 2016年第2期16卷 224-232页

作者：施俊凤孙常青王潇冉张立新山西省农业科学院农产品贮藏保鲜研究所太原030031 山西省农业科学院作物科学研究所太原030031 山西省科学技术厅太原030001

对引起保护地番茄采后腐烂的4株病原真菌进行形态和分子水平鉴定。以ITS1和ITS4为引物扩增ITS区r DNA片段。经Gen Bank进行BLAST分析,依据邻接法法构建系统发育树,确定4个菌株中SF-1为串珠镰刀菌,SF-2属细极链格孢,SF-3为灰葡萄孢霉,SF-... 详细信息

对引起保护地番茄采后腐烂的4株病原真菌进行形态和分子水平鉴定。以ITS1和ITS4为引物扩增ITS区r DNA片段。经Gen Bank进行BLAST分析,依据邻接法法构建系统发育树,确定4个菌株中SF-1为串珠镰刀菌,SF-2属细极链格孢,SF-3为灰葡萄孢霉,SF-4为粉红单端孢霉。百里香精油对该4株真菌的抑菌活性:4种病原真菌中SF-3和SF-4对百里香精油最敏感,在熏蒸条件下其EC50值分别为22.84μL/L和27.87μL/L。在精油浓度相同时,熏蒸方式较接触方式可获得有更高的抑菌活性。采用扫描电子显微镜(SEM)研究百里香精油对灰葡萄孢霉和粉红单端孢霉的抑制作用,结果表明,对照菌丝光滑,饱满,而经百里香处理的灰葡萄孢霉菌丝表面形态受到严重破坏,发生皱缩,有不正常缢缩,且有大量渗出物,而粉红单端孢霉表面形成许多结节,菌丝粗细不均匀。

关键词：番茄病原菌 r DNA-ITS序列百里香精油抑菌活性

煤系烃源岩有机碳含量测井响应特征与定量预测模型

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煤炭学报 2016年第4期41卷 954-963页

作者：杜文凤王攀梁明星周刘军林朋中国矿业大学(北京)煤炭资源与安全开采国家重点实验室北京100083

煤系地层富含有机岩石,导致测井响应特征复杂。以实测TOC含量数据为基础,分析了煤系烃源岩中煤岩、炭质泥岩和泥岩有机碳含量的测井响应特征,发现电阻率、声波时差、自然伽马、密度和中子孔隙度等测井参数与有机碳含量相关性较高,并基... 详细信息

煤系地层富含有机岩石,导致测井响应特征复杂。以实测TOC含量数据为基础,分析了煤系烃源岩中煤岩、炭质泥岩和泥岩有机碳含量的测井响应特征,发现电阻率、声波时差、自然伽马、密度和中子孔隙度等测井参数与有机碳含量相关性较高,并基于此建立了针对不同岩性煤系烃源岩有机碳含量计算模型,即多元回归模型和Δlog r模型。结合研究层段,分别建立了一元、二元、五元线性回归模型及重叠法模型,进行TOC含量计算并做了误差分析。结果表明:五元回归模型的计算误差最小,但在没有实测TOC含量数据层段计算误差较大;重叠法计算误差最大,但其整个层段的TOC含量预测值更符合岩性特征。煤系地层有机碳预测研究旨在为后续煤系烃源岩综合评价提供参考。

关键词：煤系地层烃源岩有机碳含量测井多元回归 Δlog r

不同PCr引物在根系丛枝菌根真菌群落研究中的应用比较(英文)

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微生物学报 2015年第7期55卷 916-925页

作者：蒋胜竞石国玺毛琳潘建斌安黎哲刘永俊冯虎元兰州大学生命科学学院细胞活动与逆境适应教育部重点实验室甘肃兰州730000 陇东学院生命科学与技术学院甘肃省陇东生物资源保护与利用高校重点实验室甘肃庆阳745000

【目的】基础PCr的各种分子技术已广泛地应用于丛枝菌根真菌(AMF)的群落研究。为探讨不同PCr引物对丛枝菌根真菌群落的特异性差异扩增。【方法】本研究选取4对AMF特异性引物(NS31-AM1,AML1-AML2,NS31-AML2和SSUm Cf-LSUm Br),通过PCr、... 详细信息

【目的】基础PCr的各种分子技术已广泛地应用于丛枝菌根真菌(AMF)的群落研究。为探讨不同PCr引物对丛枝菌根真菌群落的特异性差异扩增。【方法】本研究选取4对AMF特异性引物(NS31-AM1,AML1-AML2,NS31-AML2和SSUm Cf-LSUm Br),通过PCr、克隆及测序技术对AMF的多样性及群落结构进行了分析比较。【结果】不同引物对AMF的扩增特异性及覆盖度均有显著性差异,且不同引物得到的AMF群落结构也存在显著性差异。SSUm Cf-LSUm Br的扩增特异性及覆盖度最高,NS31-AML2和NS31-AM1次之,而AML1-AML2则相对较差。【结论】NS31-AML2的扩增区段能很好地与越来越被认可的AMF VT分类数据库(http://maarjam.***.ut.ee)相匹配,且扩增片段长度也适合于目前的高通量测序技术。基于此,本文推荐NS31-AML2为AMF群落研究中的首选引物。

关键词：菌根球囊菌门群落生态学 r DNA DNA条形码 PCr引物

1株树莓果实采后病原真菌的rDNA ITS序列及碳源代谢指纹图谱分析

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中国食品学报 2015年第8期15卷 224-230页

作者：王友升张燕何欣萌陈玉娟北京工商大学食品学院北京市食品添加剂工程研究中心北京市食品风味化学重点实验室北京100048

为增强对树莓果实采后病害防治的针对性,从采后贮藏期间自然发病的"泼鲁德"树莓果实中分离到1株真菌菌株079#。通过形态学观察以及rDNA ITS序列分析确定为桃吉尔霉(Gilbertellapersicaria)。通过Biolog FF Micro Plate分析桃吉尔霉对95... 详细信息

为增强对树莓果实采后病害防治的针对性,从采后贮藏期间自然发病的"泼鲁德"树莓果实中分离到1株真菌菌株079#。通过形态学观察以及rDNA ITS序列分析确定为桃吉尔霉(Gilbertellapersicaria)。通过Biolog FF Micro Plate分析桃吉尔霉对95种碳源的代谢指纹图谱,发现培养168 h时其最适碳源有蔗糖、D-核糖、阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖醛酸、γ-氨基丁酸、D-苹果酸,癸二酸、琥珀酰胺酸、D-山梨醇、木糖醇、N-乙酰-D-半乳糖胺、L-天冬氨酸、L-丙氨酸、L-谷氨酸等64种,而不可利用碳源主要有N-乙酰-D-葡萄糖胺、N-乙酰-β-D-甘露糖胺、核糖醇、D-阿拉伯糖醇、D-纤维二糖、环式糊精、D-果糖、L-海藻糖、D-半乳糖、D-半乳糖醛酸、龙胆二糖、葡糖醛酰胺、m-肌醇、麦芽糖、β-甲基-D-半乳糖苷、D-阿洛酮糖等19种。

关键词：树莓果实采后病害桃吉尔霉 r DNAITS序列分析碳源代谢指纹图谱

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城市干线道路交通“拥挤态势指数”的确定

交通运输系统工程与信息 2014年第3期14卷 64-69页

作者：弓晋丽彭贤武中南大学交通运输工程学院长沙410083 长沙理工大学交通运输工程学院长沙410114 三一重工股份有限公司长沙410100

为对道路交通拥挤随着时间发展演化情况作出准确客观的描述,本文研究了城市干线道路交通'拥挤态势指数'的确定方法.以定点检测数据为基础,从定性和定量两个角度分别定义了5个拥挤指标,并按时间顺序将它们排列成交通拥挤态势描述'时间序... 详细信息

为对道路交通拥挤随着时间发展演化情况作出准确客观的描述,本文研究了城市干线道路交通'拥挤态势指数'的确定方法.以定点检测数据为基础,从定性和定量两个角度分别定义了5个拥挤指标,并按时间顺序将它们排列成交通拥挤态势描述'时间序列'.在对上述时间序列使用多元统计'降维'后,使用r/S分析法计算各序列的Hurst指数.据此验证多个指标间的时间序列趋势一致性,找到既能从定性角度又能从定量角度进行综合评价的指标作为'拥挤态势指数'.最后,以上海南北高架东侧上11天的定点检测数据为例进行实证分析,确定了因子1作为'拥挤态势指数'.

关键词：交通工程拥挤态势 r S分析定点检测数据

TECTONIC DEFOrMATION AND STrONG EArTHQUAKE ACTIVITIES ON THE EAST BOrDEr OF TIBET PLATEAU

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地学前缘 2000年第S1期7卷 298-300页

作者： Zhou rongjun,Tang rongchang,Huang Zhuzhi,He Yulin,Yang Tao,Zhou Wei[WT5,5”BX](Engineer Earthquake Institute of Seismological Bureau of Sichuan Province, Chengdu 610041, China)

The tectonic deformation image of Asia Continent can be explained successfully by the model of collision between India secondary continent and Euro\|Asia Plate (P. Molnar and P.Tapponnier, 1975). This paper mainly discusses the characteristics of tectonic deformation and strong earthquake activities on the east border of Tibet Plateau.1\ Characteristics of tectonic deformation on the east border of Tibet Plateau\;Controlled by the flow of the plateau crust material, the movement of the east border of Tibet plateau is mainly horizontal so as to produce two slipping\|block: one results from the slide out of Chuandian rhombus Block along the SSE direction, the other results from the lateral extrusion of Chuanqing Block with the SEE direction. The slip rate of the north part of Chuandian rhombus Block, the west region of Sichuan, is 5～8mm/a;2～3mm/a on the south part (the center part of Yunan); the slip rate of Chuanqing is 3～5mm/a and region (Tang rongchang, 1993). The slipping features of the blocks directly decide the movement characters of different fault systems: the uniform sinistral shear movement on the east boundary fault of Chuandian rhombus Block, from the geological viewpoint, the average horizontal slip rate is about 10mm/a, and 5～8mm/a on the Anninghe, Zemuhe and Xiaojiang faults. The dextral shear movement can be found on the west boundary faults composed by Jinshajiang and Honghe faults. Located at the dextral diagonal region between Honghe and Zhongdian faults, the northwestern region of Yunnan shows a tensile stress field with near EW direction and large graben valleys with near NS direction on the ground due to the dextral slip movements of these two faults and slip of Chuandian rhombus Block along the SSE direction. The normal features of extension tectonic deformation region can be found in this region. Some inner faults (such as Amaniqing, Xiqinglingbeilu) of Chuanqing block show the character of sinistral shear movement with some components of normal slip movement. As the e

关键词： tectonic deformation block slip seismicity the east borde r of Tibet plateau