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血管内皮生长因子及其受体在人皮肤黑素瘤的组学数据分析

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中国皮肤性病学杂志 2019年第6期33卷 628-633页

作者：姚战非张雪梅马枞内蒙古民族大学附属医院皮肤科

目的研究血管内皮生长因子(VEGFA、VEGFB)及其受体KDR、FLT1在人皮肤黑素瘤中的基因组学、转录组学变异及其与临床预后的相关性。方法利用TC-GA数据库,分析VEGFA、VEGFB及其受体KDR、FLT1的基因组学、转录组学突变频谱及其变化与临床预... 详细信息

目的研究血管内皮生长因子(VEGFA、VEGFB)及其受体KDR、FLT1在人皮肤黑素瘤中的基因组学、转录组学变异及其与临床预后的相关性。方法利用TC-GA数据库,分析VEGFA、VEGFB及其受体KDR、FLT1的基因组学、转录组学突变频谱及其变化与临床预后的相关性;通过生物信息学筛选其共同相关基因,探索其可能的分子机制。结果在TCGA数据库同时具备基因组信息和转录组信息的287例黑素瘤样本中.VEGFA基因突变率为5.92%,VEGFB突变率为2.09%,KDR突变率为16.72%,FLT1突变率为12.54%,其突变与黑素瘤患者生存期无明显关系,转录组数据显示VEGFA mRNA表达上调率为3.48%,VEGFB mRNA表达上调率为3.83%,KDR mRNA表达上调率为2.09%,FLT1 mRNA表达上调率为3.83%,VEGFB表达上调与患者临床预后显著相关,表达上调和表达无变化者生存中位数分别为33.9个月和94.91个月(P=6.870e-4),VEGFA和KDR表达上调对患者预后有影响趋势,但差异无统计学意义。生物信息学分析显示CMTM1、QKI、BACH1可能是影响VEGFA/B作用的关键基因,提示其可能作为抗血管生成治疗的靶位点。结论VEGFA、VEGFB及其受体KDR、FLT1在人黑素瘤中存在着拷贝数扩增和表达量的显著上调,VEGFB的变化与患者临床预后显著相关,提示其可能在黑素瘤的血管生成中发挥着重要作用。本研究为临床黑素瘤的治疗提供了有益线索。

关键词：黑素瘤血管内皮生长因子生物信息学分析突变临床预后

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太田痣并发脉络膜黑素瘤

临床皮肤科杂志 2010年第3期39卷 154-155页

作者：孙青苗蔡林张建中北京大学人民医院皮肤科北京100044

报告1例太田痣并发脉络膜黑素瘤。患者女,58岁。因右眼前黑影飘动、视物遮挡感伴视力下降6个月就诊。患者自14岁起右眼睑下方渐出现一淡青灰色斑片,随年龄增长而缓慢扩大,近5年来颜色明显加深。荧光素眼底血管造影及CT检查符合脉络膜黑... 详细信息

报告1例太田痣并发脉络膜黑素瘤。患者女,58岁。因右眼前黑影飘动、视物遮挡感伴视力下降6个月就诊。患者自14岁起右眼睑下方渐出现一淡青灰色斑片,随年龄增长而缓慢扩大,近5年来颜色明显加深。荧光素眼底血管造影及CT检查符合脉络膜黑素瘤表现,诊断为太田痣并发脉络膜黑素瘤。行^(106)Ru(钌)放射敷贴器置入术治疗。

关键词：太田痣黑素瘤脉络膜

microRNA-136基于Wnt信号通路在黑素瘤EMT中的作用

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中国皮肤性病学杂志 2020年第2期34卷 128-133页

作者：韩昭王久江张伶张建忠牛亮刘钊徐艳艳刘志军李小静河北工程大学附属医院皮肤科河北邯郸056000

目的探讨microRNA-136(miR-136)基于Wnt信号通路在黑素瘤上皮-间充质细胞转化(EMT)中的调控作用。方法常规培养正常小鼠A9细胞(阴性对照组)和小鼠黑素瘤B16细胞,采用脂质体转染法将B16细胞分为空白组(只转染试剂,无转染序列)、NC组(转染... 详细信息

目的探讨microRNA-136(miR-136)基于Wnt信号通路在黑素瘤上皮-间充质细胞转化(EMT)中的调控作用。方法常规培养正常小鼠A9细胞(阴性对照组)和小鼠黑素瘤B16细胞,采用脂质体转染法将B16细胞分为空白组(只转染试剂,无转染序列)、NC组(转染miR-136 nc)、miR-136模拟组(转染miR-136模拟物)、miR-136抑制组(转染miR-136抑制剂)。通过qRT-PCR法检测各组细胞中miR-136的表达,qRT-PCR及Western blot实验分别检测各组细胞Wnt3a、β-catenin、Ecadherin及N-cadherin mRNA及蛋白表达的差距。结果与阴性对照组相比,其他各组miR-136表达均显著降低,空白组与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。相对于空白组与NC组,miR-136模拟组miR-136表达显著增加(P0.05)。与空白组和NC组相比,miR-136模拟组E-cadherin的mRNA及蛋白表达显著增加(P黑素瘤细胞中miR-136水平较正常细胞降低,过度表达的miR-136通过下调Wnt信号传导途径,抑制黑素瘤细胞的EMT。

关键词： microRNA-136 黑素瘤 Wnt信号通路 EMT

血清特异性miRNA用于恶性黑素瘤诊断的初步探讨

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临床皮肤科杂志 2016年第8期45卷 561-564页

作者：姚战非张雪梅乌云内蒙古民族大学附属医院西医皮肤科内蒙古自治区通辽028000

目的:检测黑素瘤患者血清中miRNA的表达并评估其生物学意义。方法:通过低通量芯片及实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑素瘤患者血清中特异性miRNA的表达,进一步通过聚类分析和风险系数评分评估其特异性及敏感性,并观察mi... 详细信息

目的:检测黑素瘤患者血清中miRNA的表达并评估其生物学意义。方法:通过低通量芯片及实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑素瘤患者血清中特异性miRNA的表达,进一步通过聚类分析和风险系数评分评估其特异性及敏感性,并观察miRNA表达与患者生存的关系。结果:共检测出4个黑素瘤特异性表达的血清miRNA,具有良好的灵敏度(83.3%)及特异度(85.0%),其中miR-222的表达与黑素瘤患者的生存呈负相关。结论:本研究检测出的4个黑素瘤血清miRNA可能是该病的特异性生物标志物。

关键词：黑素瘤 miRNA 血清特异性

重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响

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中华皮肤科杂志 2017年第12期50卷 883-888页

作者：龙剑文罗晶尹绪文卫静贺琪李恒石全皮先明湖北中医药大学第一临床学院皮肤科武汉430061 湖北省中医院皮肤科武汉430061 湖北省中医院皮肤科

目的研究重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法采用CCK8法测定0（对照组）、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞和A375细胞增殖的影响；Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态；流式细胞仪检测... 详细信息

目的研究重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法采用CCK8法测定0（对照组）、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞和A375细胞增殖的影响；Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态；流式细胞仪检测A375细胞周期变化及细胞凋亡水平；荧光染料（DCFH？DA）测定A375细胞内活性氧的变化；罗丹明123染色测定线粒体膜电位变化；利用分光光度法检测重楼皂苷Ⅰ处理后的A375细胞内ATP和上清液中乳酸、葡萄糖含量；Western印迹法检测A375细胞内Bcl？2、Bcl？2相关X蛋白（Bax）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3、细胞周期蛋白D1、丙酮酸激酶同工酶2（PKM2）表达。多组均数比较采用单因素方差分析，组间多重比较采用SNK？q检验。结果在工作浓度内重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞增殖无明显影响，但能明显抑制 A375 细胞的增殖（P 〈 0.01）；荧光显微镜下发现，重楼皂苷Ⅰ处理后的 A375 细胞出现明显的凋亡形态。0（对照组）、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ分别处理A375细胞后，随重楼皂苷Ⅰ浓度增加，细胞凋亡率（分别为4.25% ± 1.27%、10.03% ± 1.49%、36.62% ± 1.97%、44.11% ± 2.47%）逐渐升高（F = 665.7，P 〈 0.01），G0/G1期细胞比例（分别为54.13% ± 2.57%、67.35% ± 3.79%、74.39% ± 3.29%、82.29% ± 3.99%）亦渐增多（F = 71.81，P 〈 0.01）；细胞内活性氧呈明显上升趋势，细胞线粒体膜电位呈明显下降趋势（P 〈 0.01）；细胞内ATP含量下降（P 〈 0.01），培养液中乳酸含量下降，葡萄糖含量上升（P 〈 0.01）；细胞Bax、cleaved？caspase？3蛋白表达增多，但Cyclin D1、Bcl？2和PKM2蛋白表达下降（P 〈 0.01）。结论重楼皂苷Ⅰ可能通过激活细胞内活性氧的产生，引起线粒体膜电位下降，诱导A375细胞凋亡，并通过抑制PKM2、细胞周期蛋白D1表达，使细胞阻滞于G0/G1期。

关键词：黑素瘤细胞系肿瘤细胞凋亡活性氧细胞增殖重楼皂苷Ⅰ

重楼皂苷Ⅰ通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路诱导人黑素瘤A375细胞凋亡与自噬

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中国皮肤性病学杂志 2019年第8期33卷 863-868页

作者：龙剑文罗晶尹绪文湖北中医药大学第一临床学院湖北武汉430061 湖北省中医院皮肤科湖北武汉430061

目的探讨重楼皂苷Ⅰ(Polyphylin Ⅰ,PPⅠ)对人黑素瘤A375细胞凋亡和自噬的影响以及相关机制,确定PPⅠ诱导的细胞自噬与其促进A375细胞凋亡的相关性。方法 PPⅠ处理 A375 细胞后,采用CCK-8法检测细胞活力;Annexin V-FITC /PI 双标法检测P... 详细信息

目的探讨重楼皂苷Ⅰ(Polyphylin Ⅰ,PPⅠ)对人黑素瘤A375细胞凋亡和自噬的影响以及相关机制,确定PPⅠ诱导的细胞自噬与其促进A375细胞凋亡的相关性。方法 PPⅠ处理 A375 细胞后,采用CCK-8法检测细胞活力;Annexin V-FITC /PI 双标法检测PPⅠ对人黑素瘤细胞凋亡的作用;免疫印迹法检测相关蛋白的表达水平;通过观察细胞内自噬标志分子LC3的分布与表达来确定PPⅠ对自噬的诱导作用;采用氯喹抑制细胞自噬后,观察PPⅠ对细胞凋亡的影响。结果 PPⅠ能抑制A375细胞增殖活力;PPⅠ抑制PI3K/Akt/mTOR通路的活化并促进了A375细胞内 Bax 和 cleaved-caspase 3的表达,抑制Bcl-2表达,诱导人黑素瘤细胞发生凋亡;PPⅠ促进了A375细胞LC-Ⅱ/LC-Ⅰ值和Beclin-1蛋白表达的升高,下调了p62蛋白的水平,促进了细胞自噬;PI3K/Akt/mTOR通路活化剂IGF-1处理A375细胞后抑制了PPⅠ的上述作用;PPⅠ与自噬抑制剂氯喹联用后,A375细胞凋亡数量明显减弱。结论 PPⅠ能抑制A375细胞的增殖,诱导细胞发生凋亡与自噬,抑制自噬减少了PPⅠ诱导的人黑素瘤细胞凋亡。

关键词：重楼皂苷Ⅰ PI3K/Akt/mTOR通路黑素瘤凋亡自噬

趋化因子SLC和免疫佐剂CpG-ODN联合应用对小鼠移植黑素瘤的疗效

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中国肿瘤生物治疗杂志 2010年第1期17卷 25-29页

作者：许相范许振柱唐丽华李安娜徐显辉柳春宝厦门市第二医院病理科福建厦门361021 厦门市第二医院检验科福建厦门361021 厦门市第二医院呼吸科福建厦门361021

目的:探讨次级淋巴组织趋化因子(seccondary lymphoid tissue chemokine,SLC)和CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)联合应用对小鼠移植黑素瘤的治疗效果及其可能机制。方法:制备SLC-Fc融合蛋白,体外检测SLC-Fc对小鼠淋巴细胞的趋化效应。建立小鼠黑素瘤移植模型,随机分生理盐水对照组、CpG-ODN组、SLC-Fc组以及SLC-Fc+CpG-ODN组共4组。观察治疗后各组小鼠肿瘤的生长情况,流式细胞术检测移植瘤组织中淋巴细胞的种类和浸润情况。结果:成功制备SLC-Fc蛋白,SLC-Fc对小鼠淋巴细胞具有剂量依赖性(0.03、0.3和3μg/L)趋化作用。瘤内注射SLC-Fc和(或)CpG-ODN明显抑制肿瘤的生长,联合治疗组瘤体明显小于对照组(P瘤体内CD4+、CD8+T淋巴细胞和CD11c+树突状细胞较对照组显著增多(P瘤引流淋巴结也明显增大。结论:SLC和CpG-ODN联合应用对小鼠移植黑素瘤有抑制作用,其机制与趋化CD4+T、CD8+T细胞和促进DCs增殖有关。

关键词：次级淋巴组织趋化因子 CpG寡聚脱氧核苷酸黑素瘤抗肿瘤免疫

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KPNA2基因在皮肤黑素瘤中的表达及功能

中国皮肤性病学杂志 2020年第1期34卷 15-20页

作者：黄风云胡凯章媛华孙孜孜鲁文芳孟祖东武汉市第四医院华中科技大学同济医学院附属武汉普爱医院皮肤科湖北武汉430030 十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)皮肤科湖北十堰442000

目的研究KPNA2基因在皮肤黑素瘤中的生物学功能。方法基因芯片分析KPNA2在皮肤黑素瘤中的表达,Real time PCR检测KPNA2基因在皮肤黑素瘤组织及细胞中的表达水平。小干扰RNA转染A375细胞株,平板克隆、MTT法检测KPNA2基因敲低组、对照组... 详细信息

目的研究KPNA2基因在皮肤黑素瘤中的生物学功能。方法基因芯片分析KPNA2在皮肤黑素瘤中的表达,Real time PCR检测KPNA2基因在皮肤黑素瘤组织及细胞中的表达水平。小干扰RNA转染A375细胞株,平板克隆、MTT法检测KPNA2基因敲低组、对照组皮肤黑素瘤细胞的增殖活性。Transwell实验计算皮肤黑素瘤细胞过膜数量,研究KPNA2与皮肤黑素瘤细胞迁移作用的关系。结果 KPNA2在皮肤黑素瘤组织中的表达显著高于癌旁皮肤组织,表达随着病理分级的恶性程度的升级而增高。高表达KPNA2组患者预后明显比KPNA2组患者差。平板克隆及MTT实验结果显示si-KPNA2组的细胞活性及增殖明显受抑制(P均黑素瘤组织表达升高,促进黑素瘤细胞的增殖和迁移,其可作为黑素瘤的潜在临床诊治靶点及预后标志物。

关键词： KPNA2基因黑素瘤细胞增殖预后

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黑素瘤免疫学研究的某些进展

国外医学（皮肤性病学分册） 1992年第3期18卷 134-138页

作者：田方金伯泉第四军医大学免疫学教研室

随着免疫学的发展,肿瘤与免疫的关系日益受到重视。本文对常见黑素瘤相关抗原的种类及特点,黑素瘤细胞主要组织相容性抗原调变以及细胞因子对黑素瘤患者免疫状态的调节作用等方面的进展作一简要综述,以期为黑素瘤免疫学基础研究及临床... 详细信息

随着免疫学的发展,肿瘤与免疫的关系日益受到重视。本文对常见黑素瘤相关抗原的种类及特点,黑素瘤细胞主要组织相容性抗原调变以及细胞因子对黑素瘤患者免疫状态的调节作用等方面的进展作一简要综述,以期为黑素瘤免疫学基础研究及临床上免疫学诊断、治疗提供参考。

关键词：黑素瘤免疫学研究