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鸡滑液囊支原体的RT-PCR检测及基因序列分析

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贵州畜牧兽医 2019年第1期43卷 45-47页

作者：田浪温贵兰程振涛王开功文明周碧君张升波杨佰启李昌红徐丽张喜懿陈广贵州大学动物科学学院预防兽医实验室贵州贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵州贵阳550016

为确诊某鸡场肉鸡发病死亡的病因,通过临床症状、病理变化、RT-PCR检测、病原S1基因序列分析进行综合诊断。结果:(1)病鸡表现食欲不振、精神沉郁、跛行及无法站立、关节肿大等症状,剖检发现肿大关节内有大量黏液。(2)鸡滑液囊支原体RT-... 详细信息

为确诊某鸡场肉鸡发病死亡的病因,通过临床症状、病理变化、RT-PCR检测、病原S1基因序列分析进行综合诊断。结果:(1)病鸡表现食欲不振、精神沉郁、跛行及无法站立、关节肿大等症状,剖检发现肿大关节内有大量黏液。(2)鸡滑液囊支原体RT-PCR扩增出现207 bp特异性条带,与预期结果一致。(3)病原S1基因序列分析显示与GenBank公布的鸡滑液囊支原体基因序列同源性均达到99%,构建系统进化树分析显示与GenBank公布的参考株聚为1支。综合诊断为鸡滑液囊支原体感染。

关键词：鸡滑液囊支原体 RT-PCR检测基因序列分析鉴别诊断

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鸡滑液囊支原体病的防治

中国禽业导刊 2018年第5期35卷 54-55页

作者：李燕郭龙宗石海春山东益生畜牧兽医科学研究院山东烟台264000

鸡滑液囊支原体病又称鸡霉形体病，是鸡滑液囊支原体（MS）引起鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽等禽类的一种以关节渗出性的滑液囊膜炎及腱鞘滑膜炎为特征的急性或慢性传染病。该病四季均可发生，但主要以气候多变的冬春季多发，早期以气囊炎为特... 详细信息

鸡滑液囊支原体病又称鸡霉形体病，是鸡滑液囊支原体（MS）引起鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽等禽类的一种以关节渗出性的滑液囊膜炎及腱鞘滑膜炎为特征的急性或慢性传染病。该病四季均可发生，但主要以气候多变的冬春季多发，早期以气囊炎为特征，最常表现为亚临床型上呼吸道感染，进而出现急性或慢性滑液囊炎症，影响鸡只运动和采食，妨碍种鸡交配，降低产蛋率、蛋品质和孵化率。与鸡毒支原体（MG）一样，鸡滑液囊支原体感染遍及全球.

关键词：滑液囊支原体病鸡霉形体病鸡滑液囊支原体慢性传染病防治上呼吸道感染鸡毒支原体支原体感染

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鸡滑液囊支原体病的诊治报告

江西畜牧兽医杂志 2018年第5期37卷 45-46页

作者：曾作财袁丽娟刘平陈国强方霞黄翊江西农业工程职业学院江西樟树331200 进贤县畜牧局动物疫病预防控制中心

鸡滑液囊支原体病是由鸡滑液囊支原体（My-coplasma synoviae,MS）引起鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽等的一种以关节渗出性的滑液囊膜炎及腱鞘滑膜炎为特征的急性或慢性传染性疾病.鸡感染MS后可导致明显的跛行.在鸡群中,鸡滑液囊支原体病是普遍... 详细信息

鸡滑液囊支原体病是由鸡滑液囊支原体（My-coplasma synoviae,MS）引起鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽等的一种以关节渗出性的滑液囊膜炎及腱鞘滑膜炎为特征的急性或慢性传染性疾病.鸡感染MS后可导致明显的跛行.在鸡群中,鸡滑液囊支原体病是普遍存在的,该病主要侵害肉鸡、种鸡或蛋鸡,给养鸡业造成非常严重的经济损失.笔者现将1例鸡滑液支原体病发病情况及诊治过程介绍如下,旨在为此类疾病的诊治提供参考.

关键词：鸡滑液囊支原体滑液囊支原体病诊治报告传染性疾病发病情况经济损失滑膜炎渗出性

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鸡滑液囊支原体发病特点及治疗措施

畜牧兽医科学（电子版） 2019年第9期 139-140页

作者：刘新妍河北省唐山市迁西县农业农村局唐山064300

近年鸡滑液囊支原体发生频繁,被越来越多的养殖企业及专业技术人员所重视。滑液囊支原体主要发生于蛋鸡、肉鸡各个阶段,危害程度非常大,治疗成本高且治愈时间长,已成为鸡场防控的主要疾病之一。鸡滑液囊支原体(MS)对关节、滑液囊及呼吸... 详细信息

近年鸡滑液囊支原体发生频繁,被越来越多的养殖企业及专业技术人员所重视。滑液囊支原体主要发生于蛋鸡、肉鸡各个阶段,危害程度非常大,治疗成本高且治愈时间长,已成为鸡场防控的主要疾病之一。鸡滑液囊支原体(MS)对关节、滑液囊及呼吸道组织有亲嗜性,不同的毒株其致病力有所差异。该文主要论述了滑液囊支原体的发病特点、流行态势及临床具体表现,以减少经济损失。

关键词：鸡滑液囊支原体发病特点临床诊断防控

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鸡滑液囊支原体感染的流行及其防控措施

养禽与禽病防治 2020年第2期 43-46页

作者：夏道伦黄晓苹湖北省襄阳市襄州区畜牧兽医局湖北襄阳441104 湖北省襄阳市襄城卧龙镇区畜牧兽医服务中心湖北襄阳441101

近年来,鸡滑液囊支原体感染在我国的一些养鸡场中呈现出发病率不断攀升的流行趋势,并给我国的养鸡业带来了较大的危害。为引起养鸡场对鸡滑液囊支原体感染防控的高度重视,现特就鸡滑液囊支原体感染的流行及其防控措施作一介绍,以供养鸡... 详细信息

近年来,鸡滑液囊支原体感染在我国的一些养鸡场中呈现出发病率不断攀升的流行趋势,并给我国的养鸡业带来了较大的危害。为引起养鸡场对鸡滑液囊支原体感染防控的高度重视,现特就鸡滑液囊支原体感染的流行及其防控措施作一介绍,以供养鸡场参考。

关键词：鸡滑液囊支原体养鸡场防控措施流行趋势养鸡业感染发病率

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鸡滑液囊支原体感染诊断与防治对策

畜牧兽医科学（电子版） 2018年第14期 63-64页

作者：杨小萍广州市花都区狮岭畜牧兽医站广州510850

鸡滑液囊支原体病又被称为传染性滑膜炎，病变位置常集中在关节的滑液囊和腱鞘，临床上患病鸡主要表现为关节和脚掌肿大，不能正常站立、跛行、生长发育缓慢，严重的会因机体消耗而死亡。该文主要结合一起实际案例，分析了鸡滑液支原体... 详细信息

鸡滑液囊支原体病又被称为传染性滑膜炎，病变位置常集中在关节的滑液囊和腱鞘，临床上患病鸡主要表现为关节和脚掌肿大，不能正常站立、跛行、生长发育缓慢，严重的会因机体消耗而死亡。该文主要结合一起实际案例，分析了鸡滑液支原体感染的诊断与防治过程。

关键词：鸡滑液囊支原体诊断防治

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鸡滑液囊支原体培养工艺条件优化

鸡滑液囊支原体培养工艺条件优化

鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会暨中国畜牧兽医学会生物制品学分会2021年学术论坛

作者：蔡联燊李凯善于昊孙鑫青岛易邦生物工程有限公司

本文对鸡滑液囊支原体培养工艺进行了研究,主要研究了鸡滑液囊支原体培养中的各工艺条件和参数:pH调节策略、溶氧度控制、搅拌速度选择、培养时长的选择。结果表明:在培养鸡滑液囊支原体时,采用恒pH培养、溶氧度设置30%左右、搅拌速度50... 详细信息

本文对鸡滑液囊支原体培养工艺进行了研究,主要研究了鸡滑液囊支原体培养中的各工艺条件和参数:pH调节策略、溶氧度控制、搅拌速度选择、培养时长的选择。结果表明:在培养鸡滑液囊支原体时,采用恒pH培养、溶氧度设置30%左右、搅拌速度50-100rpm、培养时长选择对数生长后期为宜。我们通过对以上研究,基本确定了鸡滑液囊支原体培养工艺,为实际生产提供了依据。

关键词：鸡滑液囊支原体培养pH值溶氧度搅拌速度

来源： cnki会议评论

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鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重荧光定量PCR检测方法的建立与初...

作者：胡欣月华中农业大学

学位级别：硕士

鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是对家禽养殖危害最大的两种支原体。一方面,支原体感染呈慢性经过,很难通过典型症状进行疾病的鉴别诊断;另一方面,疫苗不能对鸡群提供高效的保护作用... 详细信息

鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是对家禽养殖危害最大的两种支原体。一方面,支原体感染呈慢性经过,很难通过典型症状进行疾病的鉴别诊断;另一方面,疫苗不能对鸡群提供高效的保护作用,使用抗生素虽然可以缓解支原体感染的症状,但暂无有效的治疗措施可以彻底消除鸡群内的支原体带毒情况。支原体感染鸡后在鸡群内部迅速传播、持续循环,严重降低鸡群抵抗力,使鸡群并发或继发其他病原感染,加重症状甚至爆发疫病,进一步形成更大的损失。目前的防控方案主要依赖于支原体病原的检测、阳性鸡的隔离淘汰和净化。因此,研发快速、灵敏的检测方案进行支原体感染的早期诊断,是预防和控制支原体病、遏制疾病爆发、降低经济损失的基础。本研究聚焦于临床上对高效支原体检测方法的需求,拟以MG和MS的保守基因为检测靶标,建立MG-MS双重实时荧光定量PCR(MG-MS duplex fluorescence quantitative PCR,MG-MS q PCR)方法,分析建立的检测方法的特异性、灵敏性和重复性,并验证该方法检测已知背景的支原体病料的符合率,然后将建立的检测方法初步应用于临床。具体研究内容及结果如下:1)MG-MS q PCR检测方法的建立本研究参考OIE标准,以编码MG粘附蛋白的基因mg C2和编码MS粘附蛋白的基因vlh A为检测靶标,对收录在Gen Bank数据库的mg C2和vlh A序列进行比对,选择其高度保守且特异的区域设计引物和探针,建立MG-MS q PCR检测方法。对引物、探针浓度以及反应程序的退火温度进行调整,选择Ct值最小且荧光强度最大时的反应条件。将阳性对照质粒十倍倍比稀释,以此为模板用优化后的条件进行扩增,得到该方法的最低检测限度,根据扩增结果绘制标准曲线。结果表明,本方法对MG的最低检测限度为250拷贝/反应,标准曲线的相关系数(R)为0.999,扩增效率(E%)为73%;对MS的最低检测限度为250拷贝/反应,标准曲线的相关系数(R)为0.993,扩增效率(E%)为78%。将已知颜色变化单位的MG和MS纯培养物提基因组,十倍倍比稀释,以此为模板分别进行MG-MS q PCR检测及OIE标准MG、MS普通PCR检测,MG-MS q PCR方法检测MG、MS的灵敏度比OIE标准MG、MS普通PCR分别高100倍、10倍,灵敏性良好。将MG、MS基因组和临床常见的禽病毒性疾病病原(IBDV、IBV、MDV、AIV、ALV、CIAV)和细菌性疾病病原(巴氏杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌)的基因组作为模板进行特异性试验,结果表明,本方法仅针对MG、MS有特异性扩增,对其他病原基因组无扩增,特异性良好。以三个浓度的阳性对照质粒为模板,分别进行三次MG-MS q PCR检测,每次进行扩增时,对每个浓度的模板进行三次重复,不同批次和不同浓度重复性试验的离散系数均小于4%,重复性良好。用建立的MG-MS q PCR方法和三方机构的检测方法同时检测临床样本,进行比对分析,结果显示,检测阳性样品的符合率为97.3%,检测阴性样品的符合率为100%。对15份MG阳性的鸡咽拭子、6份MS阳性的关节囊样品、40份从SPF鸡采集的咽拭子、关节囊拭子进行检测。检测结果均相符,符合率为100%。以上表明,建立的MG-MS q PCR方法灵敏性、特异性、重复性好,能够正确区分阴阳性样品。2)MG-MS q PCR检测方法的初步应用从湖北某土鸡场随机采集181份咽拭子及肛拭子样品,进行MS q PCR扩增,结果显示,该养殖场MG检出率为37%(67/181),MS检出率为50%(91/181)。从181份病料中随机挑选5份检测结果为阳性的病料用商品化试剂盒进行支原体检测,结果均为阳性,说明检测结果准确性高。综上所述,本研究建立的MG-MS q PCR检测方法具有灵敏、特异、高效的特点,检测临床样本的准确度高,是可以用于临床检测、流行病学调查以及支原体根除净化的工具,为临床上支原体快速检测提供了可行性高的替代方案。

关键词：鸡毒支原体鸡滑液囊支原体双重荧光RT-PCR 临床检测流行病学

四省部分地区鸡滑液囊支原体感染的血清学检测及流行菌株遗传变异特性分析

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四省部分地区鸡滑液囊支原体感染的血清学检测及流行菌株遗传变异...

作者：张博文东北农业大学

学位级别：硕士

鸡滑液嚢支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是鸡滑液嚢炎的病原,主要入侵鸡关节的滑液囊和腱鞘,导致滑膜炎、腱鞘炎和关节肿胀。临床多与大肠杆菌混合感染导致胸囊炎、气囊炎等多种呼吸系统疾病,使病情复杂化,导致肉鸡增重、蛋鸡产蛋、种... 详细信息

鸡滑液嚢支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是鸡滑液嚢炎的病原,主要入侵鸡关节的滑液囊和腱鞘,导致滑膜炎、腱鞘炎和关节肿胀。临床多与大肠杆菌混合感染导致胸囊炎、气囊炎等多种呼吸系统疾病,使病情复杂化,导致肉鸡增重、蛋鸡产蛋、种鸡繁育等生产性能下降,所造成的经济损失巨大。近年来该病在我国流行呈上升趋势,目前我国对鸡滑液囊支原体流行菌株及其遗传变异特性研究较少,不同程度制约了鸡滑液囊支原体疫苗研发和对本病的有效防控。本研究从山东、河北、湖北、宁夏4个省份30个养殖场疑似鸡滑液囊支原体发病鸡群,采集的30份关节腔液进行病原分离,通过菌落形态、镜下形态特征、培养特性、红细胞吸附等试验,初步证明是鸡滑液嚢支原体,对分离株进行了致病性试验,用鸡滑液囊支原体液体培养物腿部肌肉接种4周龄SPF鸡,观察21天,剖检肘关节滑液囊、龙骨滑液囊和跗关节滑液囊表现为典型的滑液嚢炎特征,对分离菌株进行了16S r RNA鉴定,证明所分离支原体均为鸡滑液囊支原体,共获得11株鸡滑液囊支原体菌株,分离率为36.7%。以鸡滑液囊支原体可变脂蛋白血凝素(Variable lipoprotein hemagglutinin,vlhA)基因上下游引物,对11株鸡滑液囊支原体分离株进行vlhA基因PCR扩增,对扩增产物进行测序,结合Gen Bank收录的鸡滑液囊支原体典型株vlhA序列,构建了vlhA基因进化树,进行同源性比对和基因进化分析。经分析证实,目前我国地区主要鸡滑液囊支原体流行株高度同源,具有很强的保守性,在分离的11株鸡滑液囊支原体流行株中,有10株与我国2016～2019年间从山东、河北、湖北、江苏、安徽、黑龙江、宁夏等地区分离到的鸡滑液囊支原体流行株高度同源,属于同一进化分支,与美国、澳大利亚、斯洛文尼亚、印度等地区鸡滑液囊支原体分离株具有显著地区差异。同时经过和目前市场上的疫苗株进行对比,证实本研究中的10株分离株与江苏省农业科学院研制的鸡滑液囊支原体灭活疫苗HN01株(登录号:CP034544.1)属于同一进化分支,同属国内典型鸡滑液囊支原体流行株,为疫苗临床应用和选择提供了有效参考。此外,来源湖北荆州的一株分离株其vlhA序列与当前国内流行株差异较大,且属于不同分支,这也说明目前我国鸡滑液囊支原体流行株正在向着多元分支转变,这一发现对于现行疫苗能否有效阻断鸡滑液囊支原体流行株的感染提出了新的挑战,同时也为鸡滑液囊支原体免疫学的进一步研究提供了参考信息。对山东、江苏、河北、河南、安徽5个省份共17个商品鸡场进行鸡滑液囊支原体血清抗体筛查,结果表明,该17个商品鸡场鸡滑液囊支原体抗体阳性比例在20%～70%之间,平均阳性率为44.1%。表现出阳性率高、抗体水平低的流行特点,为该病的临床研究和控制提供了参考信息。

关键词：鸡滑液囊支原体血清学检测基因进化分析