检索结果-南通市图书馆

作者：徐金天津科技大学

学位级别：硕士

聚球藻7002（Synechococcus sp. PCC7002）和鱼腥藻7120（Anabaena PCC7120）是蓝藻中的重要种类,是全球碳氮循环的重要组成部分。本研究以聚球藻7002和鱼腥藻7120为材料为实验材料,分别观察聚球藻7002在MA （+N）和MA（-N）培养基、鱼... 详细信息

聚球藻7002（Synechococcus sp. PCC7002）和鱼腥藻7120（Anabaena PCC7120）是蓝藻中的重要种类,是全球碳氮循环的重要组成部分。本研究以聚球藻7002和鱼腥藻7120为材料为实验材料,分别观察聚球藻7002在MA （+N）和MA（-N）培养基、鱼腥藻7120在BG11和BG110培养基中的生长情况,分别测定藻细胞数、OD750、叶绿素含量、藻内产生的一氧化氮（NO）含量等生理生化指标,研究NO对非固氮蓝藻和固氮蓝藻生长的影响。结果显示：在相同培养条件下,聚球藻7002在氨态氮——MA（-N）培养液中生长得更加旺盛。当培养了20天时,在硝氮环境中培养的聚球藻7002的OD750为0.781,而氨氮环境中的聚球藻7002的OD750为0.828,两者之间差异明显;测定NO含量时发现,在氨态氮中藻内NO含量为2.2168/g,硝态氮的为2.097/g。清除体内的NO降低了聚球藻的生长速率,增加NO的量促进了聚球藻的生长。鱼腥藻7120培养23天时,在缺氮培养基——BG-11（-N）生长得较好,OD750为0.423,在含氮培养基——BG-110（+N）中OD750为0.376。异形胞是固氮蓝藻特有的细胞,当鱼腥藻7120培养在缺氮培养液中时,部分营养细胞会分化为异形胞。我们发现,在含氮培养基中加入NO,部分营养细胞分化为异形胞。前人研究结果表明α-酮戊二酸含量反应了培养基中氮源的含量,缺氮后α-酮戊二酸含量增高,后者诱发异形胞的形成。α-酮戊二酸含量的变化与异形胞的变化正相关,在加入SNP正氮条件下σ-酮戊二酸相对含量为1.2886nmol、负氮条件下为1.1733nmol、正氮条件下为0.4706nmol、加入CPTIO的正氮条件下0.2354nmol。我们发现外源NO可以增加α-酮戊二酸的含量,清除体内的NO减少了α-酮戊二酸的含量,表明NO通过α-酮戊二酸途径调节鱼腥藻7120异形胞的形成。

关键词：聚球藻7002 鱼腥藻7120 一氧化氮异形胞 α-酮戊二酸

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细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂Roscovitine对3种蓝藻生长和活性的影响

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微生物学杂志 2014年第2期34卷 71-76页

作者：周晓潮王春梅北京中医药大学中药学院北京100102

为了明确蓝藻中丝氨酸/苏氨酸激酶的功能是否与调控细胞的生长分裂相关,以丝状鱼腥藻7120、单细胞集胞藻6803和聚球藻7002为对象,利用OD750光吸收测定和MTT方法研究了不同浓度丝氨酸苏氨酸激酶抑制剂roscovitine对其生长和脱氢酶活性的... 详细信息

为了明确蓝藻中丝氨酸/苏氨酸激酶的功能是否与调控细胞的生长分裂相关,以丝状鱼腥藻7120、单细胞集胞藻6803和聚球藻7002为对象,利用OD750光吸收测定和MTT方法研究了不同浓度丝氨酸苏氨酸激酶抑制剂roscovitine对其生长和脱氢酶活性的影响。结果表明:4 h roscovitine处理后对鱼腥藻7120和集胞藻6803生长量影响不大,对聚球藻7002的生长有促进作用。4 h roscovitine的处理对鱼腥藻7120有浓度依赖的显著抑制活性,对集胞藻6803的活性无影响,但是却促进聚球藻7002的活性。药物作用4 d后,7120的生长和活性均显著降低,并有浓度效应;6803的生长量较对照减少,但活性变化不明显;聚球藻7002的生长和活性均未受影响。显微观察结果显示,roscovitine对3种细胞形态没有影响,但药物作用4 d后的7120藻丝体较短。结果表明丝氨酸/苏氨酸抑制剂roscovitine影响丝状藻7120的生长和活性。

关键词： Roscovitine 鱼腥藻7120 集胞藻6803 聚球藻7002

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转hTNF-α基因在鱼腥藻中表达产物的提取及其初步纯化

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生物技术通报 2006年第2期22卷 88-92页

作者：牛黎莉张芃芃韩睿冉亮赵兴贵宋东辉邓元告张越男郭玉蓉施定基甘肃农业大学食品科学与工程学院兰州730070 中国科学院植物研究所北京100093 天津科技大学海洋科学与工程学院天津300457

研究了转hTNF-α基因鱼腥藻7120(*** 7120)中表达产物的最佳提取条件,并研究目标蛋白hTNF-α对温度耐受度和硫酸铵盐析的条件,对总蛋白和目标蛋白进行了检测。结果表明,hTNF-α的最佳溶出条件为:0.05 mol/L、pH7.5Tris-HCl缓冲液,NaCl... 详细信息

研究了转hTNF-α基因鱼腥藻7120(*** 7120)中表达产物的最佳提取条件,并研究目标蛋白hTNF-α对温度耐受度和硫酸铵盐析的条件,对总蛋白和目标蛋白进行了检测。结果表明,hTNF-α的最佳溶出条件为:0.05 mol/L、pH7.5Tris-HCl缓冲液,NaCl的浓度为0.2 mol/L;当温度为55℃时,处理30min,其hTNF-α提取量下降不明显,回收率达到92.08%,可除去约40%的杂蛋白;先用饱和度为30%的硫酸铵沉淀杂蛋白,再用60%的硫酸铵沉淀目标蛋白,又可除去部分杂蛋白。

关键词：人肿瘤坏死因子α 鱼腥藻7120 提取缓冲液温度处理硫酸铵沉淀处理

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人肝金属硫蛋白-I_A基因在鱼腥藻中的克隆与表达

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中国生物化学与分子生物学报 1998年第4期14卷 365-371页

作者：任黎邵强施定基戴继勋茹炳根北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室青岛海洋大学海洋生命学院中国科学院植物研究所

将人工合成的人肝金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，简称ＭＴ）－ＩＡ基因插入至中间载体ｐＲＬ－４３９上强启动子ｐｓｂＡ后，再将其与穿梭载体ｐＫＴ－２１０相连，得到大肠杆菌－蓝藻穿梭表达载体ｐＫＴ－ＭＴ，用三亲接... 详细信息

将人工合成的人肝金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，简称ＭＴ）－ＩＡ基因插入至中间载体ｐＲＬ－４３９上强启动子ｐｓｂＡ后，再将其与穿梭载体ｐＫＴ－２１０相连，得到大肠杆菌－蓝藻穿梭表达载体ｐＫＴ－ＭＴ，用三亲接合转移法将ｐＫＴ－ＭＴ转入丝状体蓝藻－鱼腥藻７１２０，经链霉素筛选，得到了稳定的转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻．纯化单藻落，液体扩大培养．从鱼腥藻中提取的质粒经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析，确定人肝ＭＴ－ＩＡ基因已转入鱼腥藻７１２０中，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析表明，金属硫蛋白在转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻中得到了表达．经原子吸收光谱法测定表达量约为７００μｇＭＴ／ｇ鲜藻，重金属耐受性实验表明，得到了能耐受重金属－镉的转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻，它将在清除水域中重金属污染和医药研究方面发挥重要作用．

关键词：转基因蓝藻鱼腥藻7120 转移表达 MT-IA基因

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