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骨髓间质干细胞体外诱导为心肌细胞的实验研究

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临床心血管病杂志 2006年第6期22卷 354-356页

作者：贾敏曾秋棠卢沛奇王永奎韩雪飞魏经汉华中科技大学协和医院心内科华中科技大学同济医学院心血管病研究所郑州大学医学院郑州大学第一附属医院心内科

目的:探讨骨髓间质干细胞(MSCs)体外诱导分化为心肌细胞的可行性,为心肌梗死治疗提供理想的细胞材料。方法:分离大鼠下肢骨获取MSCs进行培养;5-氮胞苷(5-aza)诱导24h后继续培养;免疫细胞化学检测细胞对连接蛋白-43和α横纹肌肌动蛋白的... 详细信息

目的:探讨骨髓间质干细胞(MSCs)体外诱导分化为心肌细胞的可行性,为心肌梗死治疗提供理想的细胞材料。方法:分离大鼠下肢骨获取MSCs进行培养;5-氮胞苷(5-aza)诱导24h后继续培养;免疫细胞化学检测细胞对连接蛋白-43和α横纹肌肌动蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进一步了解心肌细胞特异性蛋白的表达。结果:MSCs经5-aza诱导后,细胞形态不规则;诱导后3周10μmol/L 5-aza组细胞连接蛋白-43、α横纹肌肌动蛋白表达阳性。RT-PCR显示10μmol/L 5-aza诱导后3周的细胞可表达心肌肌钙蛋白I、α心肌肌动蛋白。结论:MSCs体外经5-aza诱导后可分化为心肌细胞。

关键词：骨髓间质干细胞细胞分化,诱导-5氮胞苷心肌细胞

骨髓间质干细胞诱导为肌样细胞分化相关基因的表达

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中国病理生理杂志 2006年第9期22卷 1665-1668页

作者：曾缨王凌云张成邓宇斌中山大学附属第一医院神经科中山大学附属第二医院消化内科中山大学中山医学院病理生理教研室广东广州510080

目的:研究骨髓间质干细胞向肌样细胞分化前后骨骼肌特异性基因的表达。方法:体外分离成年SD大鼠骨髓干细胞,培养增殖,用5-氮杂胞苷诱导分化,RT-PCR检测分化前和分化后1d、2d、5d和7d骨骼肌特异性转录因子生肌决定因子MyoD、肌细胞生成素... 详细信息

目的:研究骨髓间质干细胞向肌样细胞分化前后骨骼肌特异性基因的表达。方法:体外分离成年SD大鼠骨髓干细胞,培养增殖,用5-氮杂胞苷诱导分化,RT-PCR检测分化前和分化后1d、2d、5d和7d骨骼肌特异性转录因子生肌决定因子MyoD、肌细胞生成素myogenin、MRF4以及肌肉特异性肌酸磷酸激酶MCK的表达。结果:MyoD在诱导前后均有表达,在诱导后1d表达显著上调(P骨髓间质干细胞能表达一定水平的骨骼肌细胞的分化调控基因MyoD,它向肌样细胞的分化可能与MyoD、myogenin和MRF4有关。

关键词：骨髓间质干细胞细胞分化基因表达阿扎胞苷肌样细胞

骨髓间质干细胞对MPP^+损伤离体大鼠纹状体-黑质脑片的作用

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中国病理生理杂志 2007年第4期23卷 729-733页

作者：金莉蓉洪震钟春玖汪洋复旦大学附属中山医院神经内科上海200032 复旦大学附属华山医院神经内科上海200040 复旦大学上海医学院解剖与组织胚胎学系上海200032

目的:探讨骨髓间质干细胞对MPP+损伤的离体黑质-纹状体脑片多巴胺能神经元的保护作用。方法:建立MPP+损伤的离体脑片模型。取成年大鼠骨髓,培养、分离和纯化骨髓间质干细胞。将骨髓间质干细胞与离体脑片联合培养,通过免疫组化和电镜等... 详细信息

目的:探讨骨髓间质干细胞对MPP+损伤的离体黑质-纹状体脑片多巴胺能神经元的保护作用。方法:建立MPP+损伤的离体脑片模型。取成年大鼠骨髓,培养、分离和纯化骨髓间质干细胞。将骨髓间质干细胞与离体脑片联合培养,通过免疫组化和电镜等方法观察骨髓间质干细胞对联合培养的MPP+损伤脑片的保护作用。结果:MPP+可造成离体黑质-纹状体脑片的细胞大量死亡,但与MSCs联合培养7 d,脑片周围神经轴突生长增多,脑片中的细胞死亡减少、超微结构损伤减轻、表达TH阳性的细胞数目增多(P<0.05)。结论:MSCs在体外能促进受损的黑质-纹状体脑片多巴胺能神经元存活,可望用于帕金森病的移植治疗。

关键词：骨髓间质干细胞帕金森病多巴胺能神经元

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骨髓间质干细胞体外定向肌样分化的研究

中华实验外科杂志 2003年第6期20卷 501-502,F003页

作者：郑奇军蔡振杰易定华俞世强王亚云胡巧侠第四军医大学西京医院心脏外科西安710032

目的　研究兔骨髓间质干细胞经 5 氮杂胞苷诱导 ,在体外定向肌样分化的情况。方法　取兔胫骨骨髓 ,分离并培养骨髓间质干细胞 ,用 5 氮杂胞苷 ( 10 μmol/L)定向诱导 ,分别在培养的第 7、14、2 1、2 8天用免疫组织化学的方法检测细胞... 详细信息

目的　研究兔骨髓间质干细胞经 5 氮杂胞苷诱导 ,在体外定向肌样分化的情况。方法　取兔胫骨骨髓 ,分离并培养骨髓间质干细胞 ,用 5 氮杂胞苷 ( 10 μmol/L)定向诱导 ,分别在培养的第 7、14、2 1、2 8天用免疫组织化学的方法检测细胞中的肌球蛋白重链 ,取未经 5 氮杂胞苷诱导正常培养的细胞为对照组。结果　兔骨髓间质干细胞经 5 氮杂胞苷诱导 ,在其培养的第 2 1、2 8天免疫组织化学染色方法检测细胞中的肌球蛋白重链呈阳性 ,而在其培养的第 7、14天以及对照组 ,免疫组织化学染色方法检测细胞中的肌球蛋白重链呈阴性。结论　骨髓间质干细胞是骨髓来源的具有多向分化潜能的干细胞 ,在 5 氮杂胞苷的定向诱导下 ,可以肌样分化。

关键词：骨髓间质干细胞体外定向肌样分化 5—氮杂胞苷免疫组织化学肌球蛋白重链

乙烯基桥联的8-羟基喹啉衍生物的合成、抗氧化活性及促进鼠骨髓间质干细胞增殖的研究

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高等学校化学学报 2010年第1期31卷 74-78页

作者：张培全曾和平广州医学院生物与化学实验中心广州510182 华南理工大学化学科学学院功能分子研究所广州510641

设计合成了2-乙烯基取代的8-羟基喹啉衍生物(6),用IR,UV-Vis,1H NMR,MS和元素分析确认其结构;利用二苯代苦味酰基自由基(DPPH.)法和噻唑蓝比色(MTT)法分别测定了目标产物的抗氧化活性及调控鼠骨髓间质干细胞(MSCs)增殖的作用.结果表明,... 详细信息

设计合成了2-乙烯基取代的8-羟基喹啉衍生物(6),用IR,UV-Vis,1H NMR,MS和元素分析确认其结构;利用二苯代苦味酰基自由基(DPPH.)法和噻唑蓝比色(MTT)法分别测定了目标产物的抗氧化活性及调控鼠骨髓间质干细胞(MSCs)增殖的作用.结果表明,目标产物有较强的抗氧化活性,随着产物浓度的增加,其抗氧化活性先增强后减弱;在低浓度时对鼠骨髓间质干细胞有促进作用.研究发现,化合物6抗氧化活性的提高与其含量相关.

关键词： 8-羟基喹啉衍生物抗氧化活性骨髓间质干细胞

骨髓间质干细胞经静脉注射移植对大鼠脊髓损伤后BDNF、NGFmRNA表达的影响

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中国康复医学杂志 2008年第5期23卷 416-419页

作者：董锋林建华吴朝阳福建医科大学附属第一医院骨科

目的:研究大鼠骨髓间质干细胞(rat mesenchymal stemcells,rMSCs)静脉注射移植对脊髓损伤(spinal cordinjury,SCI)后脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)表达的影响,并探讨骨髓间质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的机制。方法:运用改良Allen法制备大鼠T10脊髓外伤性截瘫模型,假手术组6只,损伤组84只随机分为对照组和rMSCs移植组。rMSCs组、假手术组接受rMSCs单细胞悬液1ml(1×106个rMSCs)自大鼠尾静脉缓慢注射移植,对照组静脉注射PBS1ml。移植后3h、6h、12h、24h、3d、7d、14d,应用RT-PCR方法检测损伤大鼠脊髓BDNF、NGFmRNA表达变化情况。结果:对照组和rMSCs移植组损伤脊髓BDNF、NGFmRNA表达较假手术组有明显增加(P<0.05);rMSCs移植组与对照组比较BDNF、NGFmRNA表达增加更为明显(P<0.05)。结论:脊髓损伤后损伤脊髓局部的BDNF、NGF表达增加,rMSCs静脉注射移植后能促进损伤脊髓局部的BDNF、NGF更进一步的表达,这可能是促进大鼠神经结构及神经功能恢复的因素之一。

关键词：脊髓损伤骨髓间质干细胞脑源性神经营养因子神经生长因子静脉移植

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骨髓间质干细胞修复受损心肌研究进展

中国生物工程杂志 2007年第6期27卷 107-110页

作者：凌树宽李莹辉戴钟铨杨芬聂捷琳中国航天员科研训练中心航天细胞分子生物学实验室北京100094

骨髓间充质干细胞是一种多潜能干细胞。在体外培养时,多种诱导因素可使其分化为心肌细胞等。目前进行的动物实验和临床研究表明骨髓间充质干细胞具有促进血管增生以及改善心肌梗死后心脏功能的作用,为受损心肌的治疗提供了广阔前景。但... 详细信息

骨髓间充质干细胞是一种多潜能干细胞。在体外培养时,多种诱导因素可使其分化为心肌细胞等。目前进行的动物实验和临床研究表明骨髓间充质干细胞具有促进血管增生以及改善心肌梗死后心脏功能的作用,为受损心肌的治疗提供了广阔前景。但是其修复受损心肌的机制仍具有很大争议。就以上内容进行综述。

关键词：骨髓间质干细胞细胞移植细胞融合旁分泌作用

骨髓间质干细胞输注对外周血干细胞移植造血恢复的影响

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中国病理生理杂志 2002年第11期18卷 1349-1352页

作者：宫立众孙士红程天民粟永萍罗成基郭朝华第三军医大学预防医学系复合伤研究所重庆400038 第三军医大学附属新桥医院肝胆外科重庆400037

目的 :观察骨髓间质干细胞 (MSCs)输注对外周血干细胞移植 (PBSCT)后造血恢复的影响。方法 :去脾小鼠经粒细胞集落刺激因子动员后收获外周血单个核细胞 (PBMC)和扩增培养的骨髓间质干细胞 (MSCs) ,移植给经放 /化疗预处理的BALB/c小鼠 ... 详细信息

目的 :观察骨髓间质干细胞 (MSCs)输注对外周血干细胞移植 (PBSCT)后造血恢复的影响。方法 :去脾小鼠经粒细胞集落刺激因子动员后收获外周血单个核细胞 (PBMC)和扩增培养的骨髓间质干细胞 (MSCs) ,移植给经放 /化疗预处理的BALB/c小鼠 ,数量分别为 1 0 6 PBMC(PBSCT组 )、1 0 4 MSCs和 1 0 6 PBMC(实验 1组 )、1 0 6 MSCs和1 0 6 PBMC(实验 2组 ) ,观察受体鼠 4周的生存率、骨髓有核细胞 (BMNC)、粒细胞巨噬细胞集落形成单位 (CFU -GM)、成纤维细胞集落形成单位 (CFU -F)、外周血白细胞 (WBC)计数等指标。结果 :实验 2组的生存率、BMNC、CFU -GM、CFU -F显著高于PBSCT组 ,WBC计数恢复较PBSCT组快 (P 骨髓间质干细胞输注有促进外周血干细胞移植造血恢复的作用。

关键词：骨髓间质干细胞外周血干细胞移植造血功能动物实验

骨髓间质干细胞复合多孔磷酸钙陶瓷修复兔颅骨缺损的研究

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中国修复重建外科杂志 2003年第4期17卷 335-338页

作者：薄斌王常勇郭希民赵强段翠密王永红张旭辉卢建熙军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100850 法国地中海大学生物材料与生物技术研究所

目的　探讨以骨髓间质干细胞 (MSCs)作为种子细胞、β-磷酸三钙 (β- TCP)多孔生物陶瓷作为支架材料构建组织工程化人工骨 ,修复兔实验性颅骨标准缺损的可行性。　方法　选择 5月龄新西兰大白兔 34只 ,制作颅骨标准缺损后分成 3组。A组 ... 详细信息

目的　探讨以骨髓间质干细胞 (MSCs)作为种子细胞、β-磷酸三钙 (β- TCP)多孔生物陶瓷作为支架材料构建组织工程化人工骨 ,修复兔实验性颅骨标准缺损的可行性。　方法　选择 5月龄新西兰大白兔 34只 ,制作颅骨标准缺损后分成 3组。A组 (n=2 0 ) :分离培养兔同胎异体 MSCs,体外扩增后接种到预制的 β- TCP多孔生物陶瓷材料上 ,细胞 -材料复合体经体外孵育后 ,无菌条件下植入颅骨缺损 ;B组 (n=10 ) :采用单纯β- TCP材料修复兔颅骨缺损 ;C组(n=4 ) :兔实验性颅骨标准缺损区未做骨修复。术后 6周和 12周分别处死动物、取材 ,进行缺损区大体、组织学、组织化学和免疫组织化学分析。　结果　颅骨缺损处 A组术后 6周表面肉眼可见骨样组织形成 ,组织学提示材料部分降解 ,未降解吸收的材料孔洞内广泛分布着新生骨组织 ,成骨细胞外基质丰富 , 型胶原染色阳性 ;术后 12周 ,支架材料几乎完全降解 ,缺损区被新生骨组织所取代。B组术后 6周 ,可见从缺损区边缘有新生骨组织向支架材料内长入 ,支架材料部分吸收 ;术后 12周 ,可见从缺损区边缘长入到支架材料内的新生骨组织逐渐增多 ,但材料的中心部位未发现新生骨形成。C组术后 12周 ,仅见少量骨组织从缺损区边缘向缺损区内长入 ,缺损中央大部分区域未得到修复。

关键词：颅骨缺损骨髓间质干细胞多孔磷酸钙陶瓷修复组织工程骨