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犬面中份缝牵引成骨过程中骨形成蛋白-2的表达

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第二军医大学学报 2007年第12期28卷 1356-1360页

作者：金增强刘昌发马骁柳春明解放军总医院口腔科北京100853 郑州铁路职业技术学院郑州450052

目的:研究骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-2在犬面中份缝牵引成骨过程中的表达,探讨缝牵引成骨的机制。方法:18只12周龄杂种犬随机分为牵引成骨组12只和正常对照组6只,在牵引5、10、15d,固定10、20d,去固定1个月分别处死... 详细信息

目的:研究骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-2在犬面中份缝牵引成骨过程中的表达,探讨缝牵引成骨的机制。方法:18只12周龄杂种犬随机分为牵引成骨组12只和正常对照组6只,在牵引5、10、15d,固定10、20d,去固定1个月分别处死实验犬2只和对照犬1只,免疫组化法观察BMP-2在各骨缝的表达情况。结果:牵引期和固定期,BMP-2在实验犬各骨缝边缘大量增殖的未成熟成骨细胞、间充质细胞以及新生骨基质中呈阳性表达,对照犬也有少量表达。随着机械应力牵引,BMP-2在各骨缝表达量逐渐上升,在牵引15d阳性表达最强,以后逐渐下降,到去固定1个月时表达水平接近正常。结论:机械牵张力刺激可以导致内源性BMP-2产生,BMP-2可能在缝牵引新骨生成过程中扮演重要的角色。

关键词：骨形成蛋白2 面中份缝牵引成骨术免疫组织化学

骨形成蛋白-2基因修饰的β磷酸三钙/胶原复合材料修复颅骨缺损

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材料科学与工程学报 2013年第2期31卷 248-252页

作者：李娟郑闱颖卢岩俞兰林军浙江大学医学院附属第一医院浙江杭州310003

目的构建骨形成蛋白2(Bone morphogenetic proteins2,BMP-2)基因修饰的β磷酸三钙(βtricalcium phosphate,β-TCP)/胶原复合支架材料,探讨其体内修复大鼠临界颅骨缺损的效果,评价其作为骨缺损修复材料的性能。方法制备纳米级多孔β-TCP... 详细信息

目的构建骨形成蛋白2(Bone morphogenetic proteins2,BMP-2)基因修饰的β磷酸三钙(βtricalcium phosphate,β-TCP)/胶原复合支架材料,探讨其体内修复大鼠临界颅骨缺损的效果,评价其作为骨缺损修复材料的性能。方法制备纳米级多孔β-TCP/胶原支架,并负载100μg BMP-2质粒DNA形成基因修饰的支架材料。将24只成年雄性SD大鼠随机分为BMP-2基因修饰的β-TCP/胶原支架组(n=8),β-TCP/胶原支架组(n=8),空白组(n=8)。在大鼠颅骨顶部建立两个直径5mm的临界性骨缺损,植入材料后6周、12周取样本大体观察,组织学观察,免疫组织化学检测,并进行骨组织测量分析。结果组织学观察可见12周时,材料已完全降解。BMP-2基因修饰支架组6周时,骨缺损区成骨活跃形成编织骨;12周时,骨缺损已基本愈合,新生骨组织逐渐成熟呈板层状,与宿主骨形成骨性连接。而单纯支架组6周时,骨缺损中心区为少量岛状骨组织;12周时,新生骨组织连接呈片状,骨缺损未完全愈合。免疫组化检测显示:6周和12周时,BMP-2基因修饰支架组中BMP-2表达均强于单纯支架组和空白组。骨组织形态计量分析显示BMP-2基因修饰支架组成骨质量和成骨效率明显高于单纯支架组和空白组(P2基因修饰的β-TCP/胶原复合材料具有良好的生物相容性,骨诱导和骨传导性佳,是很有潜力的新型骨缺损修复材料。

关键词： β磷酸三钙胶原骨形成蛋白2 质粒骨缺损

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人骨形成蛋白2噬菌粒表达载体的构建与鉴定

细胞与分子免疫学杂志 1998年第2期14卷 141-141页

作者：司晓辉杨连甲金岩陈梅红第四军医大学口腔医学院病理科

人骨形成蛋白２噬菌粒表达载体的构建与鉴定司晓辉杨连甲金岩陈梅红１（第四军医大学口腔医学院病理科１生化教研室，西安７１００３２）骨形成蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＢＭＰ）具有广泛的生物学作... 详细信息

人骨形成蛋白２噬菌粒表达载体的构建与鉴定司晓辉杨连甲金岩陈梅红１（第四军医大学口腔医学院病理科１生化教研室，西安７１００３２）骨形成蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＢＭＰ）具有广泛的生物学作用，特别是在形态发生和细胞分化两个...

关键词：骨形成蛋白2 噬菌粒表达载体载体构建鉴定

重组人骨形成蛋白-2对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭迁移能力及间质胶原酶的影响

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重组人骨形成蛋白-2对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭迁移能力及间质胶...

作者：黄龙璋南昌大学

学位级别：硕士

目的:观察重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)对人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响;及rhBMP-2对人肝癌SMMC-7721细胞合成间质胶原酶(MMP-1)的影响。方法:1、将人肝癌SMMC-7721细胞分为4组,各组分别用含不同浓度的rhBMP-2(0、200、400、... 详细信息

目的:观察重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)对人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响;及rhBMP-2对人肝癌SMMC-7721细胞合成间质胶原酶(MMP-1)的影响。方法:1、将人肝癌SMMC-7721细胞分为4组,各组分别用含不同浓度的rhBMP-2(0、200、400、600μg/L)培养12、24、48 h后,用细胞划痕法检测细胞体外迁移能力,Transwell小室测定法检测细胞体外侵袭能力。2、将人肝癌SMMC-7721细胞分为3组,各组分别用含不同浓度的rhBMP-2(0、200、500μg/L)培养48 h后,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测SMMC-7721细胞MMP-1 mRNA的表达,采用western blot法检测MMP-1蛋白的表达。结果:1、rhBMP-2 200、400、600μg/L组12、24、48 h SMMC-7721细胞迁移率与对照组比较差异均有统计学意义(均P2 200、400、600μg/L组各组间差异具有统计学意义(P2 200、400、600μg/L组12、24、48 h SMMC-7721细胞穿膜数与对照组比较差异均有统计学意义(P2 200、400、600μg/L组各组间差异具有统计学意义(P2 200、400、600μg/L组12、24h SMMC-7721细胞迁移率、细胞穿膜数与48 h比较差异具有统计学意义(P2、rhBMP-2 500μg/L组MMP-1 mRNA及蛋白表达最高,rhBMP-2 0μg/L组mRNA及蛋白表达最低,rhBMP-2 200μg/L组mRNA及蛋白表达介于二者之间,各组间差异具有统计学意义(P2可增加人肝癌SMMC-7721细胞的侵袭和迁移能力,且呈时间-浓度依赖性;BMP-2呈浓度依赖性促进MMP-1 mRNA及蛋白的表达,此可能是BMP-2促肝癌浸润和转移的重要机制。

关键词：人肝癌SMMC-7721细胞骨形成蛋白2 侵袭迁移间质胶原酶

重组大鼠骨形成蛋白-2成熟肽编码区cDNA克隆

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口腔医学纵横 2000年第1期16卷 7-9页

作者：张泽兵高文涛欧阳喈白求恩医科大学口腔医学院吉林长春130041

目的 :克隆大鼠骨形成蛋白 - 2成熟肽编码区基因。方法 :由大鼠成骨肉瘤细胞株 (UMR10 6)中提取细胞总RNA ,利用逆转录PCR方法 ,从mRNA中扩增出大鼠骨形成蛋白 - 2成熟肽编码区基因cDNA片段 ;将获得基因片段插入pGEM -T质粒中 ,转化到... 详细信息

目的 :克隆大鼠骨形成蛋白 - 2成熟肽编码区基因。方法 :由大鼠成骨肉瘤细胞株 (UMR10 6)中提取细胞总RNA ,利用逆转录PCR方法 ,从mRNA中扩增出大鼠骨形成蛋白 - 2成熟肽编码区基因cDNA片段 ;将获得基因片段插入pGEM -T质粒中 ,转化到大肠杆菌JM10 9后挑选阳性克隆 ,利用限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定重组质粒。结果 :通过质粒DNA酶切分析及序列测定 ,我们获得的基因片段为大鼠BMP - 2成熟区cDNA序列。结论 :克隆获得大鼠骨形成蛋白 - 2成熟肽编码区基因 ,为表达骨形成蛋白 -

关键词：骨形成蛋白2 基因克隆 cDNA

初级纤毛/鞭毛转运系统介导力学反应性信号通路促骨髓基质干细胞成骨分化

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中国组织工程研究 2024年第25期28卷 3937-3941页

作者：马占华严旭姜岩曹争明王永魁李东哲杨腾越靳宜楷付苏张春霖郑州大学第一附属医院骨科河南省郑州市450000

背景:目前已证实力学刺激可以促进骨髓基质干细胞成骨分化,但其机制未完全明了。初级纤毛是重要的力学感受器并调控TGF-β1/BMP-2/SMAD等多种信号通路,很可能是骨髓基质干细胞力学调控的重要靶点。目的:探讨流体剪切力对骨髓基质干细胞... 详细信息

背景:目前已证实力学刺激可以促进骨髓基质干细胞成骨分化,但其机制未完全明了。初级纤毛是重要的力学感受器并调控TGF-β1/BMP-2/SMAD等多种信号通路,很可能是骨髓基质干细胞力学调控的重要靶点。目的:探讨流体剪切力对骨髓基质干细胞成骨分化的影响及机制。方法:将大鼠骨髓基质干细胞分为对照组、力学刺激组(通过摇床施加流体剪切力学干预)、力学刺激+IFT88沉默组(力学刺激+使用siRNA沉默IFT88表达),干预24 h后,采用qRT-PCR检测转化生长因子β1、骨形成蛋白2的表达、Western blot检测磷酸化SMAD2/3蛋白的表达,初级纤毛免疫荧光染色及形态学分析。结果与结论:剪切力刺激可促进骨髓基质干细胞的初级纤毛表达,转化生长因子β1及骨形成蛋白2基因转录激活,提高磷酸化SMAD2/3蛋白表达。siRNA干扰初级纤毛生成后,这一力学反应效应明显减低。骨髓基质干细胞的初级纤毛面积改变比值与转化生长因子β1及骨形成蛋白2基因转录增高比例具有Spearman相关性。结果表明:初级纤毛/鞭毛转运系统介导了流体剪切力反应性的TGF-β1/BMP-2/SMAD信号通路激活,促进骨髓基质干细胞成骨分化。

关键词：骨髓基质干细胞转化生长因子β1 骨形成蛋白2 初级纤毛鞭毛转运系统剪切力学刺激

负载柚皮苷AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型修复中的作用及对BMPs-VEGF信号通路的影响

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中国脊柱脊髓杂志 2024年第2期34卷 186-195页

作者：辛健陈云刚于宁陈文明王卫国山东中医药大学附属医院骨科济南市250014

目的:观察负载柚皮苷的AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型中的修复作用,并基于骨形成蛋白(BMPS)-血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨该生物材料的作用机制。方法:用牙钻在30只新西兰雄兔L5与L6椎间制作一个7mm×5mm×4mm的缺损,建立脊柱骨... 详细信息

目的:观察负载柚皮苷的AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型中的修复作用,并基于骨形成蛋白(BMPS)-血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨该生物材料的作用机制。方法:用牙钻在30只新西兰雄兔L5与L6椎间制作一个7mm×5mm×4mm的缺损,建立脊柱骨缺损模型,制备AKE/GB30网箱。测试负载柚皮苷的AKE/GB30网箱生物力学性能,检测其体外释药行为。将造模成功的新西兰兔随机数字表法分为3组,即空白组、自体骨移植组、骨移植生物材料+柚皮苷联合组,除空白组外分别予以自体骨移植、负载柚皮苷的AKE/GB30网箱进行修复。术后6周、12周每组各取5只兔,微计算机断层扫描(Micro CT)检测骨修复情况[包括骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(***)和骨小梁数目(Tb.N)];实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨形成蛋白2(BMP2)、VEGF、Runt相关转录因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)信使核糖核酸(mRNA)表达;免疫印迹法(WB)检测骨组织BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN蛋白表达。结果:AKE/GB30网箱制作成功,且其特性检测结果符合脊柱骨缺损修复要求;负载柚皮苷的AKE/GB30网箱最大抗压强度为28MPa,最大抗压力为15N,6周时其累积释药率达(98.15±1.47)%;各组术后12周时BV/TV、***和Tb.N,骨组织BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN的mRNA与蛋白表达均高于术后6周时(P0.05)。结论:负载柚皮苷的AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型修复的效果等同于自体骨移植,可能是通过促进BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN表达实现的。

关键词：骨形成蛋白2 血管内皮生长因子柚皮苷脊柱骨缺损

骨形成蛋白家族成员BMP2、BMP4及BMP7对膀胱尿路上皮癌术后复发的预测

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中国临床研究 2018年第5期31卷 605-608页

作者：黄凤鸣陈炜曾翔林圩梁勇自贡市第四人民医院泌尿外科四川自贡643000

目的探讨骨形成蛋白(BMP)家族成员BMP2、BMP4和BMP7对膀胱尿路上皮癌术后复发及TNM分期的预测价值。方法共收集膀胱尿路上皮癌标本及正常膀胱移形上皮标本各30例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测BMP2、BMP4及BMP7 mRNA... 详细信息

目的探讨骨形成蛋白(BMP)家族成员BMP2、BMP4和BMP7对膀胱尿路上皮癌术后复发及TNM分期的预测价值。方法共收集膀胱尿路上皮癌标本及正常膀胱移形上皮标本各30例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测BMP2、BMP4及BMP7 mRNA表达水平。所有患者术后均随访1年,分析BMPS表达与复发情况及TNM分期相关性。结果 BMP4 mRNA在膀胱尿路上皮癌组织中表达水平显著低于正常膀胱移行上皮组织,差异有统计学意义(t=32.47,P2及BMP7 mRNA在膀胱浸润性尿路上皮癌中呈现低表达(BMP2:t=18.59,P2.67,P2,P=0.005),BMP2、BMP7 mRNA低表达患者的复发率低于高表达患者(P=0.01,P=0.03)。结论低表达BMP2、BMP7与膀胱尿路上皮癌复发时间缩短成正相关,而与其TNM分期未见明显相关性。

关键词：骨形成蛋白骨形成蛋白2 骨形成蛋白7 膀胱尿路上皮癌复发

聚乳酸/聚己内酯生物可降解人工骨复合骨形态发生蛋白2基因转染骨髓基质干细胞修复骨缺损的血管化过程(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第19期12卷 3761-3764页

作者：于威李建军中国医科大学附属盛京医院骨科辽宁省沈阳市110003

学术背景：组织工程骨植入体内后，再血管化是关系其能否充分发挥成骨作用，有效修复骨缺损的关键环节。目的：评价经骨形成蛋白2基因修饰的骨髓间充质干细胞复合聚乳酸／聚己内酯人工骨修复兔桡骨缺损的血管化过程，观察骨形成蛋白2基... 详细信息

学术背景：组织工程骨植入体内后，再血管化是关系其能否充分发挥成骨作用，有效修复骨缺损的关键环节。目的：评价经骨形成蛋白2基因修饰的骨髓间充质干细胞复合聚乳酸／聚己内酯人工骨修复兔桡骨缺损的血管化过程，观察骨形成蛋白2基因对促进移植骨血管化的影响。设计：随机对照动物实验。单位：实验于2005-01／12在中国医科大学中心实验室完成。材料：聚乳酸／聚己内酯生物可降解材料块由中国科学院长春应用化学研究所提供，孔隙直径150～250μm，孔隙率90％以上；实验动物为3月龄新西兰大耳白兔60只。方法：60只新西兰大耳白兔双侧桡骨中段制成1．5cm骨缺损模型，随机分为4组，每组15只（30侧），植入经不同处理的人工骨。①AD-BMP-2组：转染骨形成蛋白2基因的细胞＋聚乳酸／聚己内酯。②对照基因组：转染β-半乳糖酐酶基因的细胞＋聚乳酸／聚己内酯。③未转染组：未转染细胞＋聚乳酸／聚己内酯。④单纯聚乳酸／聚己内酯组：植入单纯聚乳酸，聚己内酯支架。主要观察指标：于术后4，8和12周行X射线片观察新骨形成情况，立体显微镜观察微血管分布，苏木精．伊红染色观察微血管与骨形成关系，透射电镜观察成骨细胞和血管内皮细胞间的联系，并行血管内皮生长因子表达检测及微血管计数。结果：①AD-BMP-2组术后4周时见移植骨内片状成骨影，有较多新生血管长入，支架孔隙内充满软骨痂，功能活跃的成骨细胞围绕微血管生长，血管内皮生长因子表达及微血管数均明显高于其他各组；术后8周时移植骨内成骨逐渐增多，微血管迂曲扩张并相互连接，软骨痂转变为小梁骨；术后12周时皮质骨连续，髓腔再通，微血管呈规则地纵向排列。②对照基因组和未转染组成骨能力较弱，血管再生缓慢，12周时骨缺损得到初步修复，微血管沿新生骨小梁孔隙分布。③单纯聚乳酚聚己内酯组各时间点新生血管少见，术后12周时骨端硬化，缺损区被纤维组织填充。结论：骨形成蛋白2基因转染可通过上调血管内皮生长因子表达，间接诱导移植骨血管化，促进种子细胞的成活，加速新骨形成。

关键词：骨形成蛋白2 基因修饰骨缺损血管化