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马甲子对大鼠炎性肠病的干预及基于转录组学的机制研究

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中药药理与临床 2023年第5期39卷 69-75页

作者：谢林碧郑文浩赵欢白筱璐胡竟一雷玲余悦吴瑕李东晓成都中医药大学药学院成都610041 四川省中医药科学院中药材品质及创新中药研究四川省重点实验室成都610041

目的:评价马甲子提取物对大鼠实验性炎性肠病(Inflammatory bowel disease, IBD)的干预作用,探讨其作用机制。方法:以2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)为致炎剂复制大鼠IBD模型,灌胃给予马甲子,观察疾病活动指数(DAI)、结肠粘膜损伤指数(CMDI)... 详细信息

目的:评价马甲子提取物对大鼠实验性炎性肠病(Inflammatory bowel disease, IBD)的干预作用,探讨其作用机制。方法:以2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)为致炎剂复制大鼠IBD模型,灌胃给予马甲子,观察疾病活动指数(DAI)、结肠粘膜损伤指数(CMDI)、结肠长度、结肠组织病理、血清炎症相关因子白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)、环氧合酶2(Cyclooxygenase 2,COX2)等指标;采用转录组测序(RNA-Seq)筛选差异基因,免疫蛋白印迹法(Western blot, WB)检测相关基因的蛋白表达。结果:马甲子820 mg/kg组可减轻IBD大鼠结肠组织炎症,显著增加结肠长度(P马甲子820 mg/kg组共筛选出514个差异基因(|lg2 Fold change|≥1.5,P马甲子820 mg/kg组可下调CCATT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/Ebpb)、丝裂原活化蛋白激酶家族(Mitogen active protein kinases,Mapks)以及下游炎症因子IL-1β、C-C趋化因子7(C-C motif chemokine 7,Ccl7)、S100钙结合蛋白A8(S100 Calcium Binding Protein A8,S100a8)、Cox2基因的表达;WB结果显示马甲子820 mg/kg组干预后IL-17信号通路中糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)蛋白表达上调(P马甲子能明显改善IBD大鼠的结肠炎性损伤,其作用机制可能与上调GSK3β蛋白表达,下调C/EBPβ的表达,从而影响下游炎症因子COX2、IL-6、IL-1β、TNF-α、CCL7、S100A8水平有关。

关键词：马甲子炎性肠病 IL-17信号通路 CCATT/增强子结合蛋白β 糖原合成酶激酶3β

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马甲子叶中两个新化合物

有机化学 2017年第2期37卷 520-525页

作者：卢辛未谢莹王京谭镭詹雁阮佳徐超群成都中医药大学药学院成都610075 四川省中医药科学院成都610041

研究马甲子Paliurus ramosissimus(Lour.)Poir叶子乙醇提取物的化学成分.采用硅胶、高效液相制备色谱进行分离纯化得到6个化合物,根据理化性质及NMR、HR-ESIMS等波谱技术鉴定上述化合物的结构分别为2α-O-顺式对羟基肉桂酰基-3α-羟基-2... 详细信息

研究马甲子Paliurus ramosissimus(Lour.)Poir叶子乙醇提取物的化学成分.采用硅胶、高效液相制备色谱进行分离纯化得到6个化合物,根据理化性质及NMR、HR-ESIMS等波谱技术鉴定上述化合物的结构分别为2α-O-顺式对羟基肉桂酰基-3α-羟基-27-O-反式对羟基肉桂酰基白桦脂酸(1)、2α-O-反式对羟基肉桂酰基-3α-羟基-27-O-顺式对羟基肉桂酰基白桦脂酸(2)、messagenic acid A(3)、messagenic acid B(4)、白桦脂醛(5)、β-谷甾醇(6).其中化合物1和2为新化合物,命名为马甲子素A和马甲子素B,属于白桦脂酸型五环三萜类化合物;化合物3~6首次从该植物中发现.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法对化合物1~3进行体外抗肿瘤活性测试,实验结果表明化合物1~3具有显著的体外肿瘤细胞生长抑制活性.

关键词：马甲子五环三萜马甲子素A 马甲子素B 抗肿瘤活性

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马甲子的三萜类成分研究

中草药 2017年第1期48卷 36-41页

作者：陈晨罗观堤付宏征南京军区南京总医院药理科江苏南京210002 北京大学医学部天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191 广东世信药业有限公司广东揭阳515500

目的研究鼠李科马甲子属植物马甲子Paliurus ramosissimus中三萜类化学成分。方法通过开放硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等多种方法进行分离、纯化、制备,并通过化合物的理化性质、红外光谱、质谱、核磁共振波... 详细信息

目的研究鼠李科马甲子属植物马甲子Paliurus ramosissimus中三萜类化学成分。方法通过开放硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等多种方法进行分离、纯化、制备,并通过化合物的理化性质、红外光谱、质谱、核磁共振波谱等方法对化合物进行结构鉴定和解析。结果从马甲子地上部分的95%乙醇水提取物的醋酸乙酯萃取部分中分离得到6个三萜类化合物,分别鉴定为22β,24-二羟基-A(1)-去甲-2,20(29)-羽扇豆二烯-27,28-二羧酸(1)、大枣烯酸(2)、3-O-原儿茶酰美洲茶酸(3)、美洲茶三酸(4)、2-O-咖啡酰麦珠子酸(5)、3-O-咖啡酰麦珠子酸(6)。结论化合物1为新化合物,命名为马甲子酸A,化合物2~6为首次从该植物中分离得到,且首次报道化合物3的完整核磁数据。

关键词：马甲子三萜 22β,24-二羟基-A(1)-去甲-2,20(29)-羽扇豆二烯-27,28-二羧酸马甲子酸A 大枣烯酸 3-O-原儿茶酰美洲茶酸美洲茶三酸 2-O-咖啡酰麦珠子酸

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马甲子的化学成分研究

中草药 2015年第19期46卷 2834-2838页

作者：武蕊娟宋联强谭镭詹雁阮佳徐超群成都中医药大学四川成都610075 四川省中医药科学院四川成都610041 北京以岭药业有限公司北京102600

目的研究马甲子Paliurus ramosissimus的化学成分。方法马甲子乙醇提取物通过反复硅胶柱色谱和高效液相色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质及NMR、MS等波谱技术对化合物进行结构鉴定。并采用MTT法对新化合物2进行体外抗肿瘤活性实验... 详细信息

目的研究马甲子Paliurus ramosissimus的化学成分。方法马甲子乙醇提取物通过反复硅胶柱色谱和高效液相色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质及NMR、MS等波谱技术对化合物进行结构鉴定。并采用MTT法对新化合物2进行体外抗肿瘤活性实验。结果从马甲子乙醇提取物中分离得到2个化合物,分别鉴定为白桦脂酸(1)和2α,27-二反式对羟基肉桂酰氧基白桦脂酸(2)。化合物2对HepG-2细胞和He La细胞的IC50分别为20.34、14.83μmol/L。结论化合物2为新化合物,命名为马甲子素,属于白桦脂酸型五环三萜类化合物,化合物1和2均为首次从本植物中发现,化合物2表现出显著的体外抗肿瘤活性。

关键词：马甲子白桦脂酸马甲子素五环三萜抗肿瘤活性

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马甲子总三萜中2种成分油水分配系数的测定

中成药 2019年第5期41卷 965-969页

作者：任娟孙兴阮佳谭镭詹雁徐超群成都中医药大学药学院四川成都610075 四川省中医药科学院四川成都610041

目的测定马甲子总三萜中马甲子素、白桦脂酸的油水分配系数。方法饱和法测定2种成分在蒸馏水、40%乙醇、75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、乙腈、乙酸乙酯、正辛醇、0.5%吐温-80、0.5%十二烷基硫酸钠中的溶解度,摇瓶法测定两者在正辛醇-水... 详细信息

目的测定马甲子总三萜中马甲子素、白桦脂酸的油水分配系数。方法饱和法测定2种成分在蒸馏水、40%乙醇、75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、乙腈、乙酸乙酯、正辛醇、0.5%吐温-80、0.5%十二烷基硫酸钠中的溶解度,摇瓶法测定两者在正辛醇-水、磷酸盐溶液、人工胃液、人工肠液中的油水分配系数(pH值2.5、3、4、5、6、7、8)。结果马甲子素、白桦脂酸在有机溶剂中的溶解度明显高于在蒸馏水中,吐温-80、十二烷基硫酸钠也可提高两者溶解度。2种成分在不同pH值下的油水分配系数(lgP值)分别为812.83～1 412.54(2.91～3.15)、90.45～135.34(1.96～2.13)。结论马甲子总三萜中马甲子素、白桦脂酸为亲脂性成分,可用于胃肠道药物吸收。

关键词：马甲子总三萜马甲子素白桦脂酸油水分配系数

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马甲子诱导AGS/人胃腺癌细胞凋亡的研究

中药药理与临床 2019年第5期35卷 56-60页

作者：余悦周静陈健雷玲谭镭白筱璐吴瑕胡竟一李东晓徐超群四川省中医药科学院中药材品质及创新中药研究四川省重点实验室成都610041 四川梓潼官药业股份有限公司成都641000

目的:研究马甲子乙酸乙酯提取物对人胃腺癌细胞(AGS细胞)凋亡的影响,探索相关作用机理。方法:CCK-8法检测马甲子乙酸乙酯提取物对体外培养AGS细胞增殖的影响;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡及细胞周期;JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位;... 详细信息

目的:研究马甲子乙酸乙酯提取物对人胃腺癌细胞(AGS细胞)凋亡的影响,探索相关作用机理。方法:CCK-8法检测马甲子乙酸乙酯提取物对体外培养AGS细胞增殖的影响;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡及细胞周期;JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果:马甲子乙酸乙酯提取物能有效抑制体外培养AGS细胞增殖,IC50为20.62μg/ml;与对照组相比,马甲子乙酸乙酯提取物20μg/ml、40μg/ml作用48小时可显著提高AGS细胞凋亡率;40μg/ml则可显著降低AGS细胞线粒体膜电位;与溶剂组和正常组比较,马甲子乙酸乙酯提取物40μg/ml可使Bcl-2蛋白水平降低,Bax蛋白水平增高,从而使Bcl-2/Bax的比率显著降低。结论:马甲子乙酸乙酯提取物可诱导AGS细胞凋亡,且呈剂量依赖;其机制与降低线粒体膜电位,下调bcl-2和上调bax蛋白水平有关。

关键词：马甲子胃腺癌凋亡

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马甲子抗溃疡性结肠炎的实验研究

中药药理与临床 2016年第2期32卷 121-124页

作者：余悦白筱璐雷玲王李晋华晓萍李东晓徐超群张毅四川省中医药科学院成都610041 四川大学华西公共卫生学院成都610015

目的:评估马甲子乙酸乙酯提取物(Ethyl acetate extract of Paliurus ramosissimus,EAEPR)对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)的影响以及抗炎作用。方法:灌胃给予马甲子乙酸乙酯提取物0.8、1.6、3.2 g/kg,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模... 详细信息

目的:评估马甲子乙酸乙酯提取物(Ethyl acetate extract of Paliurus ramosissimus,EAEPR)对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)的影响以及抗炎作用。方法:灌胃给予马甲子乙酸乙酯提取物0.8、1.6、3.2 g/kg,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型和小鼠棉球肉芽肿模型,评价其抗炎作用。以3%硫酸葡聚糖钠(Dextran sulfate sodium salt,DSS)溶液自由饮用7d复制实验性小鼠UC模型,自饮用DSS溶液当天开始灌胃给予马甲子乙酸乙酯提取物,剂量同上,连续7d,观察小鼠的一般状态,并进行结肠炎疾病指数(DAI)评分;第8d眼眶采血后脱颈椎处死动物,测定结肠长度并进行组织病理学观察,ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:马甲子乙酸乙酯提取物各剂量均可显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀和棉球肉芽肿形成;1.6、3.2 g/kg组能改善实验性UC小鼠一般状况,抑制体重降低和DAI评分增高,并能显著改善肠道水肿和肠道组织损伤,减轻炎细胞浸润,显著降低血清TNF-α水平。结论:马甲子乙酸乙酯提取物具有抗炎作用,可减轻DSS所致实验性小鼠UC病变严重程度,其作用可能与下调TNF-α等炎性因子分泌有关,是一种有效的UC治疗药物。

关键词：马甲子结肠炎抗炎肿瘤坏死因子

马甲子总三萜对大鼠炎性肠病的干预作用及相关靶点/通路预测

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中药药理与临床 2021年第5期37卷 38-44页

作者：郑文浩白筱璐胡竟一陈旺谢林碧雷玲余悦吴瑕李东晓徐超群成都中医药大学药学院成都611100 四川省中医药科学院中药材品质及创新中药研究四川省重点实验室成都610041

目的:考察马甲子总三萜对大鼠实验性炎性肠病(IBD)的干预作用,并预测其主要成分白桦脂酸干预IBD的相关靶点和通路。方法:以白桦脂酸为配体分子,利用在线数据库对相关靶点进行基因功能注解(GO)、基因组数据库(KEGG)富集分析和分子对接,... 详细信息

目的:考察马甲子总三萜对大鼠实验性炎性肠病(IBD)的干预作用,并预测其主要成分白桦脂酸干预IBD的相关靶点和通路。方法:以白桦脂酸为配体分子,利用在线数据库对相关靶点进行基因功能注解(GO)、基因组数据库(KEGG)富集分析和分子对接,预测白桦脂酸干预IBD的潜在靶点和通路并对预测结果进行初步验证。以2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠建立大鼠IBD模型,设置模型对照组、阳性对照组(美沙拉嗪315 mg/kg)、白桦脂酸30 mg/kg组、马甲子总三萜50 mg/kg组,灌胃给药10 d,通过疾病活动指数(DAI)、结肠粘膜损伤指数(CMDI)和结肠组织病理评分等指标评价马甲子总三萜对大鼠结肠炎症的干预作用。结果:通过网络药理学方法共筛选出13个与IBD相关的白桦脂酸潜在作用靶点,其中前列腺素氧化环化酶2(PTGS2/COX2)、紧密连接蛋白1(TJP1)等8个关键蛋白靶点与白桦脂酸存在亲和力,涉及4条疾病相关信号通路。与正常对照组比较,模型对照组大鼠DAI、CMDI及病理评分显著升高(P马甲子总三萜50 mg/kg组CMDI评分显著降低(P马甲子总三萜50 mg/kg组血清中COX2、PGE_(2)含量显著降低(P马甲子总三萜及其主要成分白桦脂酸均可抑制TNBS诱导的IBD模型大鼠的结肠炎性损伤;其机制可能与其抑制COX2活性,影响花生四烯酸合成等信号通路,进而抑制PGE_(2)等炎症介质的生成有关。

关键词：马甲子白桦脂酸炎性肠病网络药理学分子对接

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马甲子鲜叶干燥方法及提取工艺参数考察

中国实验方剂学杂志 2016年第8期22卷 32-35页

作者：武蕊娟詹雁谭镭阮佳徐超群成都中医药大学成都610075 四川省中医药科学院成都610041

目的：研究不同干燥方法对马甲子鲜叶中抗肿瘤活性成分的影响,并优化其提取工艺参数。方法：采用HPLCELSD测定马甲子素和白桦脂酸的含量,流动相乙腈（A）-0.1%甲酸溶液（B）梯度洗脱（0~10 min,55%A;10~35 min,55%~100%A）,检测波长320... 详细信息

目的：研究不同干燥方法对马甲子鲜叶中抗肿瘤活性成分的影响,并优化其提取工艺参数。方法：采用HPLCELSD测定马甲子素和白桦脂酸的含量,流动相乙腈（A）-0.1%甲酸溶液（B）梯度洗脱（0~10 min,55%A;10~35 min,55%~100%A）,检测波长320 nm。考察不同干燥方法对马甲子药材中有效成分含量的影响;以马甲子素和白桦脂酸提取量的综合评分为指标,通过正交试验考察乙醇体积分数、乙醇用量和提取时间对有效成分提取工艺的影响。结果：冷冻干燥和阴干法处理时,白桦脂酸和马甲子素的保存效果较好。最佳提取工艺为加4倍量95%乙醇冷浸提取2次,每次48 h;此工艺下测得冷冻干燥样品中白桦脂酸和马甲子素平均质量分数分别为4.61,0.077 4 mg·g-1。结论：马甲子的干燥方法适宜采用冷冻干燥法,但考虑大生产成本,建议选择阴干法。优化的提取工艺稳定合理、有效成分提取率高,为马甲子药材资源的开发利用提供参考。

关键词：马甲子白桦脂酸马甲子素抗肿瘤活性冷冻干燥