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香烟提取物损伤人脐静脉血管内皮细胞及阿托伐他汀的干预

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第50期15卷 9339-9343页

作者：黄旭代远斌吴田方王立维汤为学重庆医科大学附属第一医院血管外科重庆市400016 重庆医科大学附属第一医院神经病学重点实验室重庆市400016

背景:吸烟是诸多血管缺血性疾病如动脉硬化闭塞、血栓闭塞性脉管炎等疾病的重要危险因素,但其确切机制尚不清楚。目的:探讨香烟提取物对人脐静脉内皮细胞的影响以及阿托伐他汀对该作用的干预。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞分为3组... 详细信息

背景:吸烟是诸多血管缺血性疾病如动脉硬化闭塞、血栓闭塞性脉管炎等疾病的重要危险因素,但其确切机制尚不清楚。目的:探讨香烟提取物对人脐静脉内皮细胞的影响以及阿托伐他汀对该作用的干预。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞分为3组,分别以含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基对照组、体积分数10%胎牛血清+10%香烟提取物的DMEM培养基、含体积分数10%胎牛血清+10%香烟提取物+10μmol/L阿托伐他汀的DMEM培养基培养。结果与结论:香烟提取物组人脐静脉内皮细胞形态较对照组不规则,存活率、细胞上清液中的一氧化氮水平和细胞一氧化氮合酶活性降低(P香烟提取物+阿托伐他汀组使人脐静脉内皮细胞形态改善,存活率、细胞上清液中的一氧化氮水平和细胞一氧化氮合酶活性升高(P香烟提取物对血管内皮细胞的损伤作用,其机制可能与内皮细胞的生长、一氧化氮合成酶活性及一氧化氮释放有关。

关键词：香烟提取物血管内皮细胞一氧化氮一氧化氮合成酶阿托伐他汀

香烟提取物对支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

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中国病理生理杂志 2009年第10期25卷 1969-1974页

作者：张晓宇徐永健刘先胜张珍祥倪望陈仕新华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科卫生部呼吸疾病重点实验室湖北武汉430030

目的:探讨香烟提取物(CSE)对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖作用及可能机制。方法:16只SD大鼠随机分为对照组和哮喘组,各8只。原代培养大鼠ASMCs,取第3-6代细胞,分为对照组、对照+CSE组、哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+... 详细信息

目的:探讨香烟提取物(CSE)对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖作用及可能机制。方法:16只SD大鼠随机分为对照组和哮喘组,各8只。原代培养大鼠ASMCs,取第3-6代细胞,分为对照组、对照+CSE组、哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+嘧啶基-苯磺酰胺(GW8510,细胞周期蛋白依赖激酶-4抑制剂)组、哮喘+GW8510组。用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐(MTT)法及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫细胞化学技术检测ASMCs增殖;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Westernblotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达。结果:(1)哮喘组ASMCs与对照组ASMCs相比,在S+G2/M期比例、吸光度(A)值和PCNA表达率上明显增高,差异显著(P<0.01)。(2)哮喘组ASMCsS+G2/M期比例、吸光度(A)值和PCNA表达率分别为(18.30±1.12)%、0.512±0.110、(55.1±3.7)%;哮喘+CSE组分别为(32.12±1.17)%、0.801±0.210、(90.2±7.3)%;哮喘+CSE+GW8510组分别为(17.21±0.95)%、0.508±0.009、(54.3±4.8)%;哮喘+GW8510组分别为(11.16±1.48)%、0.345±0.078、(40.6±5.4)%。除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外,其余两两比较差异均显著(P<0.01)。(3)哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+GW8510组、哮喘+GW8510组ASMCscyclinD1mRNAA值比值和蛋白表达A值比值分别为0.236±0.045、0.271±0.002;0.369±0.124、0.379±0.002;0.231±0.075、0.261±0.002;0.165±0.064、0.193±0.002。除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外,其余两两比较差异均显著(P<0.01)。结论:正常与哮喘大鼠ASMCs在CSE干预后增殖明显加快,cyclinD1表达明显增加。CSE可能是通过cyclinD1参与调控哮喘大鼠ASMCs的增殖。

关键词：香烟提取物哮喘气道平滑肌细胞细胞周期蛋白D1

香烟提取物通过减少HDAC2表达诱导小鼠C2C12成肌细胞衰老

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中国病理生理杂志 2015年第4期31卷 738-743页

作者：苏文燕刘文婷杨霞白晶何志义广西医科大学第一附属医院呼吸内科广西南宁530021

目的:探讨香烟提取物(CSE)能否引起小鼠C2C12成肌细胞衰老,并研究成肌细胞衰老与组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的关系。方法:培养C2C12细胞株,分化为成熟成肌细胞,观察CSE干预对成肌细胞衰老和HDAC2表达的影响,采用real-time PCR和Western b... 详细信息

目的:探讨香烟提取物(CSE)能否引起小鼠C2C12成肌细胞衰老,并研究成肌细胞衰老与组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的关系。方法:培养C2C12细胞株,分化为成熟成肌细胞,观察CSE干预对成肌细胞衰老和HDAC2表达的影响,采用real-time PCR和Western blot方法分别检测HDAC2 mRNA和蛋白的表达;β-半乳糖苷酶染色检测衰老细胞的百分率。结果:MTT法测定最佳CSE浓度与干预时间分别为60 m L/L和24 h。CSE干预后β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,同时伴有HDAC2 mRNA和蛋白表达的减少。四溴苯三唑(TBB)在促进HDAC2 mRNA和蛋白表达的同时,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少;用HDAC2的特异性阻滞剂丙戊酸抑制HDAC2 mRNA和蛋白的表达时,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加。结论:香烟提取物可通过减少小鼠C2C12成肌细胞HDAC2的表达促进细胞老化。

关键词：香烟提取物 C2C12成肌细胞衰老组蛋白去乙酰化酶2

香烟提取物影响大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子的表达

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第37期15卷 6901-6904页

作者：王朋朋刘闺男彭霞中国医科大学附属第一医院心血管内科辽宁省沈阳市110001

背景:血管平滑肌细胞增殖是心血管系统组织变化的基础。目的:观察不同浓度香烟提取物对大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法:取第3代大鼠主动脉平滑肌细胞,分别用体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物进行干预。结果... 详细信息

背景:血管平滑肌细胞增殖是心血管系统组织变化的基础。目的:观察不同浓度香烟提取物对大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法:取第3代大鼠主动脉平滑肌细胞,分别用体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物进行干预。结果与结论:实时定量RT-PCR结果显示,体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物作用12h均可促进大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,以体积分数5%香烟提取物的作用最明显,且其刺激大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达在24h内呈时间依赖性。提示香烟提取物可上调大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,导致大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖。

关键词：香烟提取物主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子增殖心血管疾病

香烟提取物经级联反应促进支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖

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中华结核和呼吸杂志 2009年第5期32卷 390-393页

作者：张晓宇徐永健刘先胜张珍祥倪望陈仕新华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸科卫生部呼吸疾病重点实验室武汉430030

吸烟是影响支气管哮喘（简称哮喘）发生、发展的重要危险因素。香烟烟雾能增加卵清白蛋白（OVA）致敏豚鼠气道急性变应性炎症。我们既往的研究结果证实蛋白激酶C（PKC）信号通路在香烟提取物（CSE）促哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）... 详细信息

吸烟是影响支气管哮喘（简称哮喘）发生、发展的重要危险因素。香烟烟雾能增加卵清白蛋白（OVA）致敏豚鼠气道急性变应性炎症。我们既往的研究结果证实蛋白激酶C（PKC）信号通路在香烟提取物（CSE）促哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）的增殖过程中起重要作用。细胞周期蛋白（cyclin）D1是调节细胞周期G1期向S期转变的关键因子，但是目前尚不清楚PKC在参与CSE促哮喘大鼠ASMCs的增殖过程中是否涉及cyclinD1。

关键词：气道平滑肌细胞增殖支气管哮喘香烟提取物大鼠级联反应 cyclinD1 细胞周期蛋白增殖过程

香烟提取物对大鼠肺泡巨噬细胞活性及基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1平衡的影响

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中华结核和呼吸杂志 2005年第9期28卷 648-649页

作者：李亚清张珍祥徐永健倪望陈仕新马丹杨朝华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸病研究室武汉430030

自1963年Laurell及Eriksson报道α1抗胰蛋白酶(α1-AT)与肺气肿的关系以来,蛋白酶/抗蛋白酶失衡在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用成为研究热点.近年研究表明,中性粒细胞弹性蛋白酶主要在α1-AT缺乏的COPD中起作用,而吸烟相关的COP... 详细信息

自1963年Laurell及Eriksson报道α1抗胰蛋白酶(α1-AT)与肺气肿的关系以来,蛋白酶/抗蛋白酶失衡在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用成为研究热点.近年研究表明,中性粒细胞弹性蛋白酶主要在α1-AT缺乏的COPD中起作用,而吸烟相关的COPD发病机制则有待于深入研究.

关键词：香烟提取物大鼠肺泡巨噬细胞细胞活性基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶组织抑制剂1

香烟提取物对气道平滑肌细胞增殖中ERKs及NF-κB表达的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2007年第4期36卷 544-547页

作者：陈宏斌徐永健谢俊刚张宁张珍祥崔江禹杨士芳华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科武汉430030

目的探讨香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖中细胞外信号调节蛋白激酶(ERKs)及核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法体外培养Wistar大鼠的气道平滑肌细胞,给予不同浓度的... 详细信息

目的探讨香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖中细胞外信号调节蛋白激酶(ERKs)及核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法体外培养Wistar大鼠的气道平滑肌细胞,给予不同浓度的CSE刺激24 h后,MTT法检测细胞增殖情况,采用Western blot方法检测ERKs、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)和NF-κB p65的表达。结果1/32 CSE组、1/16 CSE组及1/8 CSE组的细胞增殖和ERKs、p-ERK、NF-κB p65的表达均逐渐增高,且与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05,n=4)。NF-κB p65的表达水平与p-ERK的表达水平呈明显正相关(r=0.858,P<0.05,n=4)。结论一定浓度的CSE作用于平滑肌细胞后引起ERKs及ERKs磷酸化的增加,磷酸化激活后的ERKs可能与NF-κB的活化和ASMCs的增殖有关。

关键词：平滑肌气道香烟提取物细胞增殖细胞外信号调节蛋白激酶核因子-κB

香烟提取物和脂多糖对人胚肺成纤维细胞TGF-β_1 mRNA及蛋白表达的影响

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中国病理生理杂志 2003年第10期19卷 1345-1348,T003页

作者：葛晓娜熊密黄召华中科技大学同济医学院病理学系华中科技大学同济医学院附属协和医院湖北武汉430030

目的 :探讨香烟提取物 (CSE)和脂多糖 (LPS)对体外培养的人胚肺成纤维细胞 (HELF)转化生长因子- β1(TGF - β1)mRNA及其蛋白表达的影响。方法 :应用不同浓度的CSE(1∶5 0、1∶2 5和 1∶10 )、LPS(0 1mg/L、1mg/L和 10mg/L)及CSE(1∶2 ... 详细信息

目的 :探讨香烟提取物 (CSE)和脂多糖 (LPS)对体外培养的人胚肺成纤维细胞 (HELF)转化生长因子- β1(TGF - β1)mRNA及其蛋白表达的影响。方法 :应用不同浓度的CSE(1∶5 0、1∶2 5和 1∶10 )、LPS(0 1mg/L、1mg/L和 10mg/L)及CSE(1∶2 5 )与LPS(1mg/L)联合作用于HELF ,37℃作用 2 4h后 ,提取细胞总RNA ,应用逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)及免疫细胞化学技术检测TGF - β1mRNA和蛋白表达的变化。结果 :CSE低浓度 (1∶5 0和 1∶2 5 )时可增加HELFTGF - β1mRNA及蛋白的表达 (P 0 0 5 )。不同浓度的LPS均引起HELFTGF - β1mRNA及蛋白表达增强 (P <0 0 5 )。CSE与LPS联合作用也可增加HELFTGF - β1mRNA及蛋白的表达 (P <0 0 5 )。结论 :一定浓度的CSE和LPS可上调肺成纤维细胞TGF - β1mRNA及蛋白表达。

关键词：香烟提取物脂多糖类人胚肺成纤维细胞转化生长因子β mRNA

香烟提取物对人内皮细胞基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1分泌的影响

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中华结核和呼吸杂志 2006年第10期29卷 715-716页

作者：谢丽华陈平陈芳向旭东周锐吴尚洁中南大学湘雅二医院呼吸内科

研究结果表明吸烟能引起炎症细胞在肺内的聚集,释放蛋白酶增加,引起蛋白酶/抗蛋白酶失衡,我们在此基础上进一步探讨香烟提取物（CSE）对人内皮细胞释放基质金属蛋白酶9（MMP-9）和组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）分泌的影响,探讨内皮... 详细信息

研究结果表明吸烟能引起炎症细胞在肺内的聚集,释放蛋白酶增加,引起蛋白酶/抗蛋白酶失衡,我们在此基础上进一步探讨香烟提取物（CSE）对人内皮细胞释放基质金属蛋白酶9（MMP-9）和组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）分泌的影响,探讨内皮细胞在吸烟相关性肺部疾病中的意义.

关键词：组织金属蛋白酶抑制剂1 基质金属蛋白酶9 人内皮细胞香烟提取物分泌炎症细胞抗蛋白酶细胞释放