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静水压调节hUC-MSCs在全肝脱细胞支架内肝样分化的实验研究

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静水压调节hUC-MSCs在全肝脱细胞支架内肝样分化的实验研究

作者：施文雯昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]利用体外灌流生物反应器及大鼠全肝脱细胞支架,为hUC-MSCs提供体外培养和诱导分化微环境,通过检测肝细胞相关分子表达以及肝细胞相关功能来评估hUC-MSCs的肝向分化情况,以探索静水压对hUC-MSCs肝向分化的影响,寻找hUC-MSCs肝向... 详细信息

[目的]利用体外灌流生物反应器及大鼠全肝脱细胞支架,为hUC-MSCs提供体外培养和诱导分化微环境,通过检测肝细胞相关分子表达以及肝细胞相关功能来评估hUC-MSCs的肝向分化情况,以探索静水压对hUC-MSCs肝向分化的影响,寻找hUC-MSCs肝向分化的最适条件。[方法]1、hUC-MSCs体外培养与鉴定:无菌条件下,组织贴壁法分离培养hUC-MSCs,细胞培养至第四代,用流式细胞术检测细胞特异分子CD34、CD90、CD45、CD105、OCT4表达情况;采用成脂、成骨分化鉴定细胞多向分化能力。2、用SDS法制备大鼠全肝脱细胞支架,并检测脱细胞支架的质量。检测静水压对脱细胞支架内hUC-MSCs肝样分化的影响,实验分组为阴性对照组、二维诱导组(常规细胞培养板培养)、三维静止诱导组(细胞种植在脱细胞支架上,不施加压力)和三维持续灌流培养诱导组(细胞种植在脱细胞支架上,持续施加10cmH2O压力),培养21天后收集细胞检测肝细胞相关因子(ALB、AFP、CK18、CK19、CYP3A5)的表达情况、肝细胞功能、力学-整合素信号通路相关分子(整合素β1、p-FAK、LamininA/C)的表达情况。[结果]1、组织贴壁法分离培养得到hUC-MSCs,经流式细胞术检测细胞高表达CD105(98.9%± 1.35%)、CD90(99.17%±0.94%),极低表达 CD34(0.06%±0.04%)、CD45(0.19%±0.27%),部分表达 OCT4(65.7%±3.25%),符合hUC-MSCs的特点;成脂分化后,油红O染色可见细胞内脂滴形成,成骨分化后茜素红染色可见钙结节形成,说明hUC-MSCs可分化为成脂和成骨细胞。2、用SDS法制备全肝脱细胞支架,残余DNA含量(12.79±0.90 ng/mg组织)显著低于正常肝组织(4987.60±310.29 ng/mg组织),H&E及电镜检测未见残余细胞,能够为MSCs的体外培养提供良好生长环境。3、与二维培养条件相比,三维培养条件下的细胞在mRNA及蛋白水平均表达更高的肝细胞相关标志物(ALB、AFP、CK18、CK19、CYP3A5),且具有更强的肝细胞相关功能(糖原合成、分泌ALB、ALP)。另外,三维持续灌流培养诱导条件下的肝样细胞相关因子的表达及肝细胞相关功能显著高于三维静态培养。4、在hUC-MSCs的肝向分化过程中,力学-整合素信号通路相关分子(整合素β1、p-FAK、LamininA/C)的表达降低,与二维培养条件相比,在三维培养条件下的信号通路相关分子表达显著降低。[结论]1、利用组织块贴壁法成功分离培养出符合hUC-MSCs特点的细胞。2、hUC-MSCs可在3D及3D10 cmH2O静水压的条件下诱导分化为肝样细胞,全肝脱细胞支架能够为hUC-MSCs的体外培养和肝向诱导分化提供良好的三维生长环境,促进hUC-MSCs的肝样分化。3、10 cmH2O的静水压能够促进hUC-MSCs在3D条件下的肝样分化,使其分化为更成熟、更接近肝细胞功能的肝样细胞。4、在hUC-MSCs肝样分化过程中,力学-整合素信号通路受到抑制。

关键词：人脐带间充质干细胞细胞外基质脱细胞基质静水压肝样细胞整合素

静水压下益肾活血通络方对髓核细胞NF-κB信号通路影响的研究

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静水压下益肾活血通络方对髓核细胞NF-κB信号通路影响的研究

作者：肖辉灯北京中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过研究在不同静水压压力下益肾活血通络方含药血清对髓核细胞NF-κ B信号通路的调控作用,以期能从分子生物学角度探讨益肾活血通络方治疗椎间盘退变性疾病的可能疗效机制及作用靶点。方法:无菌环境下取下新西兰大白兔胸腰段髓核... 详细信息

目的:通过研究在不同静水压压力下益肾活血通络方含药血清对髓核细胞NF-κ B信号通路的调控作用,以期能从分子生物学角度探讨益肾活血通络方治疗椎间盘退变性疾病的可能疗效机制及作用靶点。方法:无菌环境下取下新西兰大白兔胸腰段髓核,体外传代培养兔椎间盘髓核细胞至第3代,设置体外不同静水压加载干预模型,随机将其分为空白对照组、单纯压力干预组及压力+中药血清干预组,使用倒置相差显微镜设备观察椎间盘髓核细胞形态及生长状况;使用透视电镜观察椎间盘髓核细胞超微结构的变化及差异性;运用Annexin V-FITC/Propidium Iodide凋亡试剂盒对椎间盘髓核细胞进行双染检测观察髓核细胞凋亡变化;使用Western Blot法检测髓核细胞内NF-κ B p65、Collagen Ⅱ、MMP-13含量的变化。结果:1.倒置相差显微镜观察:①在同一作用时间下,随静水压的不断增加各组髓核细胞体积出现缩小,其中3MPa静水压压力下细胞体积缩小最为明显。②在同一静水压压力下,不同作用时间各组椎间盘髓核细胞的形态学差异并不明显。③在同一压力及作用时间下,压力+中药血清干预组较空白对照组、单纯压力干预组髓核细胞的形态更完整,生长状况更好。2.透射电镜观察:①同一作用时间下,空白对照组椎间盘髓核细胞超微结构完整,单纯压力干预组及压力+中药血清干预组髓核细胞突起结构均出现不同程度的断裂,其中:0.3MPa、1MPa静水压组可见髓核细胞次级突起结构的断裂,然而细胞体两端的主级突起结构是完整的,压力+中药血清干预组较单纯压力干预组椎间盘髓核细胞的结构更为完整;3MPa静水压下髓核细胞的主级突起、次级突起结构均出现断裂痕迹,压力+中药血清干预组与单纯压力干预组髓核细胞的结构未能表现出明显差异。②同一静水压压力下,不同作用时间各组的椎间盘髓核细胞于透射电镜下的超微结构未见明显差异。*** V-FITC/PI法测定不同静水压压力下椎间盘髓核细胞的凋亡率:①在常压(0.1MPa静水压)下,不同作用时间,髓核细胞的凋亡率未见明显差异,差异无统计学意义(P>0.05);压力+中药血清干预组髓核细胞凋亡率低于单纯压力干预组,差异有统计学意义(P静水压作用下,不同作用时间,椎间盘髓核细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);压力+中药血清干预组髓核细胞凋亡率低于单纯压力干预组,差异有统计学意义(P静水压下,不同的作用时间,髓核细胞凋亡率差异有统计学意义(P静水压下,不同的作用时间,髓核细胞凋亡率差异有统计学意义(P静水压压力下单纯压力干预组椎间盘髓核细胞凋亡率低于3MPa静水压下髓核细胞的凋亡率,差异有统计学意义(P静水压及作用时间下,压力+中药血清干预组椎间盘髓核细胞凋亡率低于单纯压力干预组,差异有统计学意义(P静水压(0.1MPa、0.3MPa)作用6h内,髓核细胞凋亡变化并不明显,高静水压(1MPa、3MPa)作用6h内,髓核细胞凋亡的变化显著。3.益肾活血通络方能延缓椎间盘退变趋势,其疗效机制可能与椎间盘

关键词：静水压 NF-κB信号通路髓核细胞益肾活血通络方椎间盘退变

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关于输油管道静水压试验的强度试验压力问题

油气储运 1991年第6期10卷 25-28页

作者：俞乐群管道设计院

通过对国外部分测试资料的分析,对我国《原油长输管道线路设计规范》(SYJ14-85)中强度试验压力问题做了说明,认为该规范规定的强度试验压力是偏低的,是管道试压的最低要求。为了提高我国输油管道建设的水平与质量,建议将强度试验压力提... 详细信息

通过对国外部分测试资料的分析,对我国《原油长输管道线路设计规范》(SYJ14-85)中强度试验压力问题做了说明,认为该规范规定的强度试验压力是偏低的,是管道试压的最低要求。为了提高我国输油管道建设的水平与质量,建议将强度试验压力提高到管子实际屈服值。

关键词：输油管管道静水压试验

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冷休克法和静水压法人工诱导大黄鱼三倍体

中国水产科学 2006年第2期13卷 206-210页

作者：许建和尤锋吴雄飞郑春静石钢德蒋宏雷刘伟健徐永立张培军中国科学院海洋研究所宁波市海洋渔业研究院

同时采用冷休克法和静水压法进行大黄鱼(Pseudosciaena croceaRichardson)三倍体诱导条件研究,同时比较适合条件下两种方法诱导效果差异以及大批量诱导组不同生长阶段三倍体检出率的差别。结果表明:(1)冷休克法和静水压法都可成功诱导... 详细信息

同时采用冷休克法和静水压法进行大黄鱼(Pseudosciaena croceaRichardson)三倍体诱导条件研究,同时比较适合条件下两种方法诱导效果差异以及大批量诱导组不同生长阶段三倍体检出率的差别。结果表明:(1)冷休克法和静水压法都可成功诱导出大黄鱼三倍体。冷休克法适宜诱导条件为20℃培育水温下授精后3 min,在3~4℃海水中处理8~10 min;静水压法适宜诱导条件为同样培育水温下授精后3 min,在静水压450 kg/cm2下处理3 min。三倍体诱导率受处理时刻、处理时间和处理温度(或压力)3因素的影响。(2)综合三倍体诱导率、处理后受精卵原肠期存活率和仔鱼孵化率,静水压法诱导效果要明显优于冷休克法。(3)采用冷休克法进行大黄鱼三倍体大批量诱导,早期胚胎、初孵仔鱼和4月龄幼鱼三倍体检出率分别为34.03%、29.54%和14.81%,表明随生长发育诱导组三倍体检出率有下降趋势。

关键词：三倍体大黄鱼人工诱导冷休克静水压

不同静水压对兔椎体终板软骨细胞相关基因表达的影响

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中国矫形外科杂志 2014年第8期22卷 753-757页

作者：孙旗柳根哲贾育松陈江徐林北京中医药大学东直门医院骨科 100700 首都医科大学附属北京中医医院骨科 100010

[目的]通过静水压加载系统,体外检测兔椎体终板软骨细胞在不同压力及作用时间下炎症因子、分解代谢及合成代谢相关基因表达的差异。[方法]通过体外静水压加载系统,取材并培养兔椎体终板软骨细胞,先期进行形态及功能鉴定。分别暴露于0.01... 详细信息

[目的]通过静水压加载系统,体外检测兔椎体终板软骨细胞在不同压力及作用时间下炎症因子、分解代谢及合成代谢相关基因表达的差异。[方法]通过体外静水压加载系统,取材并培养兔椎体终板软骨细胞,先期进行形态及功能鉴定。分别暴露于0.01 MPa、0.7 MPa、2 MPa及4 MPa静水压下,分别作用时间为4 h及24 h。使用RT-PCR法分析相关标记物基因表达的差异:炎症因子(iNOS,COX-2),基质分解代谢(MMP-3),抗分解代谢(TIMP-1),促合成代谢(aggrecan)。[结果]静水压下各组基因表达呈现"负荷-时间"依赖关系,在低压短时间下,表现出更多的合成及抗分解基因表达,而增加静水压负荷及时间,则表现出更多的分解代谢倾向。[结论]本实验表明适度施压有利于基质内环境稳态,而持续施压则促进分解代谢基因的表达。通过本实验了解到椎体终板软骨细胞"负荷-时间"依赖性,为进一步探索修复椎体终板软骨、预防椎间盘退变提供了新思路。

关键词：静水压椎体终板软骨细胞基因

静水压强对相变材料Ge2Sb2Te5电学性能影响的研究

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静水压强对相变材料Ge2Sb2Te5电学性能影响的研究

作者：苏翼南京大学

学位级别：硕士

近几十年来,随着以集成电路为代表的半导体技术的飞速发展,集成电路中所包含的原件越来越多,传统的存储器件的尺寸越来越小,已经接近于物理极限,进一步减小器件的线宽在技术上难度越来越大,而随着器件的缩小,材料的尺寸效应显现出来,不... 详细信息

近几十年来,随着以集成电路为代表的半导体技术的飞速发展,集成电路中所包含的原件越来越多,传统的存储器件的尺寸越来越小,已经接近于物理极限,进一步减小器件的线宽在技术上难度越来越大,而随着器件的缩小,材料的尺寸效应显现出来,不能再用经典或半经典的理论来描述纳米量级器件的物理性能,同时尺寸的过小将导致量子隧穿效应等的产生,使得器件因为漏电流和功耗的急剧增加而失效。由此,集成电路正面临着理论和工艺两大问题,传统器件将变得不再可靠。因此寻找一种非挥发性、高存储密度、低能耗、数据保持时间长的下一代新型存储技术已经变成当前半导体技术发展中的一个迫切的任务。新型非挥发性相变存储器(PCRAM)由于具有读写速度快、高存储密度、非挥发性、高低阻比值大以及与传统CMOS工艺相兼容等特点,引发了人们的广泛关注。相变存储器是一种基于以硫系化合物为代表的物质的独特物理性质,即其结晶态与非晶态之间所存在的巨大电学或光学差异且能够较快的进行可逆相变而制作的新型存储器。在本项研究工作中,作者重点研究了利用射频磁控溅射制备的Ge2Sb2Te5相变材料薄膜。对材料的性质进行了较深入的探索,重点探究了在高静水压下,Ge2Sb2Te5相变材料的两种结晶态的电学性能的变化。主要工作如下：1、利用射频磁控溅射系统制备了Ge2Sb2Te5相变材料薄膜,并使用X射线衍射仪、原子力显微镜、扫描电子显微镜等对其形貌和性质进行了表征2、实验分别测定了面心立方晶相和六方晶相Ge2Sb2Te5材料薄膜的温度-电阻(R-T)性质。这两个晶相的Ge2Sb2Te5材料的电阻均随温度的增大而减小,展现了这两个晶相的Ge2Sb2Te5材料的半导体特性。3、对面心立方晶相Ge2Sb2Te5薄膜的电阻在静水压环境中的变化进行了测量,面心立方晶相Ge2Sb2Te5材料的电阻随压强的增大而减小,对造成电阻变化的原因进行了初步研究。4、对六方晶相Ge2Sb2Te5薄膜的电阻在静水压环境中的变化进行了测量,六方晶相Ge2Sb2Te5材料的电阻随压强的增大而线性的减小,在压强增大到0.7GPa时,电阻减小了13.5%,利用第一性原理,采用基于广义梯度近似密度泛函理论的全电子投影缀加平面波法计算了六方晶相Ge2Sb2Te5材料的能带结构,其禁带宽度为0.42 eV。并对材料在高压下的电子结构进行了模拟,结果发现,由于六方晶相Ge2Sb2Te5材料的导带底和价带顶均主要与Te原子的p态有关,而在压强将导致Te-Te键键长变小,使得能带展宽,导致禁带宽度变小,进而表现为电阻率的减小。

关键词：硫系化合物相变材料静水压第一性原理

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给排水工程中的静水压和动水压探究

给水排水 2011年第10期37卷 71-74页

作者：赵世明中国建筑设计研究院北京100044

静水压是静止水的压强,动水压是流动水的压强。用水柱高度为单位表示时二者均称为压强水头,水流速度转化的水压称为速度水头。对于渐变流,过水断面上动水压和静水压的分布规律相同,但沿流动方向上并不遵从静水压强分布规律。供水系统中... 详细信息

静水压是静止水的压强,动水压是流动水的压强。用水柱高度为单位表示时二者均称为压强水头,水流速度转化的水压称为速度水头。对于渐变流,过水断面上动水压和静水压的分布规律相同,但沿流动方向上并不遵从静水压强分布规律。供水系统中有些点的动水压和静水压存在着非常大的差异,需要区分应对。空气动力学中的动压是指气流速度产生的压强,不可与动水压混同。

关键词：动水压静水压空气动压

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浮力材料的静水压性能研究

化工新型材料 2020年第7期48卷 188-190页

作者：梁小杰梁宁宁王庆颖周媛刘志翟晓康海洋化工研究院有限公司青岛266071 海洋涂料国家重点实验室青岛266071 烟台工程职业技术学院机械工程系烟台264006

浮力材料具有密度低、机械强度高等优点,在航空航天和深海等工程领域的应用越来越广泛。采用3种空心玻璃微珠制备了一系列浮力材料,研究了在不同静水压环境下(6~26MPa)浮力材料的吸水率和体积形变。结果表明:随着静水压力的升高,浮力材... 详细信息

浮力材料具有密度低、机械强度高等优点,在航空航天和深海等工程领域的应用越来越广泛。采用3种空心玻璃微珠制备了一系列浮力材料,研究了在不同静水压环境下(6~26MPa)浮力材料的吸水率和体积形变。结果表明:随着静水压力的升高,浮力材料的吸水率增大;表面未被涂料包覆的浮力材料体积基本不变,表面被涂料包覆的浮力材料体积先保持不变后急剧缩少。

关键词：浮力材料静水压吸水率体积形变

深海环境中静水压对2205钢腐蚀电化学行为的影响

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腐蚀与防护 2018年第11期39卷 815-819,877页

作者：程柏璋屈少鹏董丽华尹衍升上海海事大学海洋科学与工程学院上海201306 上海海事大学商船学院上海201306

利用电化学阻抗谱、动电位极化法及Mott-Schottky分析法分别研究了无载荷及U型加载状态下2205钢在不同静水压3.5%(质量分数,下同)NaCl溶液中的腐蚀行为,通过扫描电镜(SEM)和能谱仪(EDS)观察和分析了电化学测试后2205钢的腐蚀形貌及腐蚀... 详细信息

利用电化学阻抗谱、动电位极化法及Mott-Schottky分析法分别研究了无载荷及U型加载状态下2205钢在不同静水压3.5%(质量分数,下同)NaCl溶液中的腐蚀行为,通过扫描电镜(SEM)和能谱仪(EDS)观察和分析了电化学测试后2205钢的腐蚀形貌及腐蚀产物成分。结果表明:2205钢在3.5%NaCl溶液中有较好的耐点蚀性能;随着静水压力的增加,其自腐蚀电位降低,自腐蚀电流密度增加,电化学阻抗降低;U型加载会降低2205钢的点蚀电位;在20MPa静水压条件下生成的钝化膜载流子密度最大,常压环境中的钝化膜载流子密度最小。

关键词： 2205钢静水压电化学腐蚀