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作者：黄荣凤重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:环境污染物双酚A(Bisphenol A,BPA)是一种典型的内分泌干扰物(Endocrine disruptors compounds,EDCs),在生活生产过程中易暴露于人群并通过下丘脑-垂体-性腺轴(Hypothalamus-pituitary gonadal,HPG)导致生殖功能紊乱。研究表明肥胖也会对生殖功能产生不良影响。尽管环境污染物或营养失衡对生殖功能的影响已有广泛研究,但结合当今生活方式与习惯,母代高能量饮食诱导发生肥胖并同时暴露环境污染物对雌性生殖系统的影响却鲜有报道,尤其对雌性子一代、子二代甚至多代成年后的影响更值得关注。母代高脂饮食和暴露于不利环境因素都是影响后代生长发育的重要原因,为进一步探讨母代高脂饮食联合环境污染物BPA暴露对雌性后代生殖功能和关键作用分子的影响,本研究利用ICR雌性小鼠作为母代(F0),分别建立以低脂饮食(Low-fat diet,LFD)和高脂饮食(High-fat diet,HFD)喂养并同时通过灌胃给予BPA或溶媒的动物模型,通过与正常适龄雄性小鼠交配得到子一代(F1),雌性子一代成年后与正常适龄的雄性小鼠交配得到子二代(F2),F1、F2均正常喂养直至成年。观察母代高脂饮食合并BPA暴露的生殖特征及其对雌性后代F1、F2生殖功能的影响,探讨母代复合多种不利因素暴露引起雌性后代生殖功能异常的关键作用分子,以期深入了解其复杂的作用途径。方法:选取6周龄雌性ICR小鼠适应一周后转入SPF(Specific Pathogen Free)动物房,分别喂以低脂(10%fat,LFD)和高脂饲料(60%fat,HFD)并同时灌胃给予BPA(500μg/kg body weight/day)或溶媒,BPA溶于含0.02%无水乙醇的PBS溶液(即溶媒)且每天新鲜配制,连续干预16周(孕前10周+孕期3周+哺乳期3周),建立母代F0高脂饮食复合BPA暴露的小鼠模型。F0代小鼠分别标示为:LFD(正常组,低脂饮食+溶媒)、BPA(低脂饮食+BPA暴露)、HFD(高脂饮食+溶媒)、HFD+BPA(高脂饮食+BPA暴露),分别与适龄健康雄性小鼠交配,检查到阴栓或阴道液涂片有精子,则记录为妊娠第0.5天,相应的雌性子一代(F1)标示为:O-LFD(F0代为正常组)、O-BPA(F0代为BPA暴露组)、O-HFD(F0代为高脂组)、O-HFD+BPA(F0代为高脂复合BPA暴露组)。子一代出生后21天(Postnatal day 21,PND21)离乳,离乳后持续给以正常饲料喂养。雌性子一代在12周龄时与适龄健康雄鼠交配,得到相应的雌性子二代(F2),分别标示为:O-LFD(F0代为正常组)、O-BPA(F0代为BPA暴露组)、O-HFD(F0代为高脂组)、O-HFD+BPA(F0代为高脂复合BPA暴露组)。雌性子二代同样给以正常饲料喂养直至实验最后。结果:液相色谱-串联质谱(Liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)结果显示,母代直接暴露双酚A的BPA组(1.923±0.569μg/ml)、HFD+BPA组(2.493±1.151μg/ml)小鼠尿液BPA浓度明显高于未直接暴露双酚A的LFD组(0.474±0.147μg/ml)、HFD组(0.544±0.133μg/ml)小鼠;且母代高脂饮食联合双酚A暴露显著增加雌性F1、F2代小鼠尿液BPA浓度:O-HFD+BPA组(39.888±20.236ng/ml)>O-HFD组(20.183±6.683ng/ml)>O-BPA组(1.799±3.659ng/ml)>O-LFD组(0.047±0 ng/ml);O-HFD+BPA组(59.328±15.921ng/ml)>O-HFD组(23.215±21.714ng/ml)>O-BPA组(9.328±11.733ng/ml)>O-LFD组(1.949±2.536 ng/ml)。母代高脂饮食联合双酚A暴露的小鼠孕期明显延长,发生不良妊娠结局的窝数增加,且增加新生儿F1代出生体重,而仅双酚A暴露的小鼠表现出新生儿F1代数量减少;当雌性F1代O-HFD+BPA组、O-HFD组小鼠成年后作为母代时也表现出难产的现象,但对新生儿F2代的出生体重和产子数量没有差异。母代高脂饮食联合BPA暴露的雌性F1、F2代小鼠离乳后阴道开口时间提前,即青春期提前;性成熟后动情周期紊乱,尤其间期显著延长;发育期卵泡数量减少而黄体数量增加;血清FSH水平显著降低。同时发现O-HFD+BPA小鼠卵巢组织Esr1表达水平增加而O-HFD+BPA小鼠卵巢组织Esr2表达水平增加;O-HFD+BPA小鼠下丘脑组织Kiss1表达水平降低而O-HFD+BPA小鼠下丘脑组织Ki

关键词：母代高脂饮食双酚A 雌性后代生殖功能

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醋酸铅对妊娠小鼠雌性后代受精和胚胎发育毒性研究

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动物医学进展 2004年第6期25卷 94-96页

作者：马保华王有柱宋小飞郝捷艾小云西北农林科技大学动物科技学院陕西杨陵712100

将妊娠小鼠随机分为高剂量 (1 / 1 0LD50 )、中剂量 (1 / 50LD50 )、低剂量 (1 / 2 50LD50 )和溶剂对照组。高、中、低剂量染毒组和对照组小鼠分别于妊娠的 9,1 1 ,1 3,1 5d和 1 7d腹腔注射 1 .2 g/mL ,0 .2 4g/mL和 0 .0 48g/mL的醋酸... 详细信息

将妊娠小鼠随机分为高剂量 (1 / 1 0LD50 )、中剂量 (1 / 50LD50 )、低剂量 (1 / 2 50LD50 )和溶剂对照组。高、中、低剂量染毒组和对照组小鼠分别于妊娠的 9,1 1 ,1 3,1 5d和 1 7d腹腔注射 1 .2 g/mL ,0 .2 4g/mL和 0 .0 48g/mL的醋酸铅 [Pb(CH3COO) 2 ·3H2 O]溶液和灭菌蒸馏水 ,注射量 0 .0 1mL/ g。研究醋酸铅对染毒妊娠小鼠雌性后代生长发育和卵母细胞受精、受精卵卵裂及早期胚胎发育的影响。试验结果表明 :①各组后代母鼠断奶后体重变化规律类似 ,试验结束时各组小鼠平均体重无统计学差异(P >0 .0 5) ;②各染毒组后代母鼠受精卵比率极显著低于对照组 (P 后代母鼠早期胚胎发育受到显著影响 ,主要表现为回收胚胎中正常发育为囊胚的比例显著降低(P <0 .0 1 ) ,同时发育延迟胚及退化变性胚的综合比例显著升高 (P <0 .0 1 )。

关键词：醋酸铅妊娠小鼠雌性后代受精特点胚胎发育毒性研究

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双酚A会损害猕猴雌性后代生殖系统

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生物学教学 2013年第5期38卷 80-80页

据2012年9月26日《科技日报》援引新华社华盛顿9月24日电，美国华盛顿州立大学等机构的研究人员对猕猴的研究显示，双酚A能损害猕猴雌性后代的生殖系统，可导致卵子染色体异常等问题。研究人员让19只受孕猕猴接触不同剂量的双酚A，观察... 详细信息

据2012年9月26日《科技日报》援引新华社华盛顿9月24日电，美国华盛顿州立大学等机构的研究人员对猕猴的研究显示，双酚A能损害猕猴雌性后代的生殖系统，可导致卵子染色体异常等问题。研究人员让19只受孕猕猴接触不同剂量的双酚A，观察这种物质对猕猴及其雌性后代卵巢的影响。结果显示，在怀孕的早期，接触较多双酚A的猕猴雌性胎儿的卵子分裂异常，这类损害能导致生殖缺陷；在怀孕后期。这些雌性胎儿的卵子在卵泡内“包装”异常。这将限制新生幼猴进入性成熟期后存活卵子的数量，导致不育。猕猴有95％的DNA与人类相同，它们生殖系统所受影响表明，双酚A对人类而言也会带来影响。不过，美国化学理事会认为，目前的研究样本数量过少。还无法证明双酚A会对人类产生影响。

关键词：雌性后代生殖系统双酚A 猕猴损害染色体异常《科技日报》研究人员

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饲喂雌鼠大豆异黄酮对后代雌性生殖性状的影响

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中国实验动物学报 2009年第4期17卷 299-302页

作者：尹艳云刘京威鲍文玉秦国嵩刘云海王晓霞倪和民北京农学院动物科学技术系北京102206

目的研究雌性小鼠饲喂异黄酮后对其后代雌鼠生殖性状的影响。方法分别在雌鼠从断奶到妊娠前和妊娠期间两个不同阶段的日粮中添加不同剂量的大豆异黄酮(0、50、400 mg/kg)。记录F1代的出生窝产仔数、出生窝重、雌鼠的阴道最早开张时间和... 详细信息

目的研究雌性小鼠饲喂异黄酮后对其后代雌鼠生殖性状的影响。方法分别在雌鼠从断奶到妊娠前和妊娠期间两个不同阶段的日粮中添加不同剂量的大豆异黄酮(0、50、400 mg/kg)。记录F1代的出生窝产仔数、出生窝重、雌鼠的阴道最早开张时间和最早见栓时间,以及后代雌鼠性成熟期和体成熟期生殖器官重量、血清雌激素的含量。结果雌鼠妊娠期饲喂含50、400 mg/kg大豆异黄酮的饲料后F1代的窝产仔数显著高于对照组(P后代雌鼠初次配种时间明显延迟(P雌性后代的初情期、生殖器官发育、血清雌激素含量等生殖生理性状,而在非妊娠期饲喂含大豆异黄酮饲料对F1代无显著影响。

关键词： ICR雌鼠大豆异黄酮雌性后代生殖性状

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山楂叶螨雄螨繁殖潜力

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昆虫学报 2017年第5期60卷 562-569页

作者：李定旭权澎琪董钧锋胡镇杰杨海博陈汉杰河南科技大学林学院河南洛阳471023 中国农业科学院郑州果树研究所郑州450009

【目的】山楂叶螨Tetyanychus viennensis Zacher是我国北方落叶果树的重要害虫。本研究旨在探索山楂叶螨雄螨的繁殖潜力。【方法】采用叶碟饲养法,在室内温度25±1℃,相对湿度60%±10%,光周期16L∶8D条件下,研究了山楂叶螨雄螨的交配... 详细信息

【目的】山楂叶螨Tetyanychus viennensis Zacher是我国北方落叶果树的重要害虫。本研究旨在探索山楂叶螨雄螨的繁殖潜力。【方法】采用叶碟饲养法,在室内温度25±1℃,相对湿度60%±10%,光周期16L∶8D条件下,研究了山楂叶螨雄螨的交配次数、交配时间及可繁育的雌性后代数。【结果】雄螨羽化后可立即进行交配,第1次交配的交配时间最长,随后的交配时间明显缩短;足以使雌螨充分受精的最短有效交配时间为50 s,远短于其正常的交配时间;雄螨终生交配授精雌螨数为26~37头,可繁育雌性后代688~989头,且与性比关系密切;雄螨日龄对其交配能力有明显的影响,日均交配次数在3日龄成螨内无明显变化,5日龄则显著减少,但在7日龄后仍可维持较高的交配能力;交配历史能显著地影响雄螨的交配能力,在经历20次交配后,雄螨日均交配次数显著降低,但即使经历30次交配仍可保持足够的授精能力。【结论】山楂叶螨雄螨具有较强的交配和授精能力。

关键词：山楂叶螨繁殖雄螨交配授精雌性后代

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玉米螟赤眼蜂雄性生殖力的研究

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昆虫学报 2006年第5期49卷 800-804页

作者：陈科伟吕燕青潘雪红何余容华南农业大学昆虫学系广州510640

根据膜翅目寄生蜂未受精的卵发育为雄性个体，受精卵发育成雌性个体这一性别决定机制，考察了玉米螟赤眼蜂雄蜂生殖力的大小，探讨了雄蜂授精能力与个体大小、年龄及交配次数之间的关系。结果表明，玉米螟赤眼蜂雄蜂在羽化时或羽化后很... 详细信息

根据膜翅目寄生蜂未受精的卵发育为雄性个体，受精卵发育成雌性个体这一性别决定机制，考察了玉米螟赤眼蜂雄蜂生殖力的大小，探讨了雄蜂授精能力与个体大小、年龄及交配次数之间的关系。结果表明，玉米螟赤眼蜂雄蜂在羽化时或羽化后很短的时间内其精巢就已发育成熟，成虫期不再形成新的精子。雄蜂在羽化后立即可与雌蜂进行交配，在雌蜂过量的情况下，24h内就可能将体内的精子或精液消耗尽，24h后的雄蜂虽能与雌蜂继续交尾，但雌蜂所繁育的子代中未见有雌性个体。同一雄蜂能与多头雌蜂进行交尾，授精8～23头雌蜂，平均能繁育出346．15头雌性后代。雄蜂的授精能力与交配次数密切相关，授精量随交配次数增加而逐渐下降。首次交配时，雄蜂能给雌蜂提供较多的精子，约能繁育出58．85头雌性后代，但随着交配次数的增加，雄蜂向雌蜂输送的精子越来越少，10次交配之后，雄蜂所能授精、繁育的子代雌性数将不超过10头。以后足胫节长度表示个体大小时，体型较大的雄性个体进行多次交配的能力强，能繁育更多的雌性后代。

关键词：玉米螟赤眼蜂雄性生殖力个体大小交配次数雌性后代

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科学中国人 2020年第5期 10-21页

性印记为物种形成创造条件。nature封面:草莓箭毒蛙。nature杂志第7776期封面文章报道了母体如何影响草莓箭毒蛙的配偶选择和雄性竞争,以及这种影响如何潜在地推动新物种的形成。印记是指后代从父母身上认识到的特征,会在日后帮助塑造... 详细信息

性印记为物种形成创造条件。nature封面:草莓箭毒蛙。nature杂志第7776期封面文章报道了母体如何影响草莓箭毒蛙的配偶选择和雄性竞争,以及这种影响如何潜在地推动新物种的形成。印记是指后代从父母身上认识到的特征,会在日后帮助塑造其自身行为。研究人员发现,在这些草莓箭毒蛙中,雌性后代更愿意和体色与其母亲一致的雄蛙交配;而雄性后代对于体色与其母亲相同的雄蛙也更加具备攻击性。科学家认为,这种现象最终可能会减少具有不同交配特征的草莓箭毒蛙之间的基因流,从而为性选择驱动的物种形成创造条件!

关键词：体色封面文章物种形成配偶选择基因流雌性后代交配雄性竞争

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蜜蜂人工授精技术(五)--蜜蜂特殊人工授精技术

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中国蜂业 2022年第1期73卷 30-31页

作者：薛运波李志勇(图) 吉林省养蜂科学研究所不详

1.单雄单雌授精用1只雄蜂精液给1只蜂王进行人工授精的方法称为单雄单雌授精,这是研究中常用的一种技术。雄蜂是单倍体,在精子形成时没有进行减数分裂,仍然是16条染色体。因此,1只雄蜂所产生的所有精子在遗传上是一致的,单雄授精蜂王所... 详细信息

1.单雄单雌授精用1只雄蜂精液给1只蜂王进行人工授精的方法称为单雄单雌授精,这是研究中常用的一种技术。雄蜂是单倍体,在精子形成时没有进行减数分裂,仍然是16条染色体。因此,1只雄蜂所产生的所有精子在遗传上是一致的,单雄授精蜂王所产生的雌性后代比多雄授精蜂王产生的雌性后代在亲缘关系上更近一层,属于超同胞。

关键词：人工授精技术亲缘关系雌性后代单倍体蜜蜂精子形成蜂王减数分裂

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蚂蚁王后重女轻男

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科学之友 2013年第4期 48-48页

作者：人民网

蚁后、蜂后通常忙着繁育后代，但它们却没有时间抚养自己的后代。作为补偿，女王们会选择用女儿填充自己的领地，因为这些雌性后代能够充当起照顾者的角色，例如工蚁。

关键词：蚂蚁雌性后代工蚁

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