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链霉菌小质粒pDYM4.3k的复制与接合转移

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微生物学报 2012年第7期52卷 916-920页

作者：周敏代玉梅钟莉覃重军中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所合成生物学重点实验室上海200032

【目的】链霉菌(Streptomyces)X335是从西藏高原活拉山口分离到的,其中含有一个大小为4.3 kb的环型质粒pDYM4.3k。克隆、测序和分析pDYM4.3k,以及鉴定复制和接合转移的基因。【方法】通过克隆和引物延伸获得pDYM4.3k的全序列,利用比对... 详细信息

【目的】链霉菌(Streptomyces)X335是从西藏高原活拉山口分离到的,其中含有一个大小为4.3 kb的环型质粒pDYM4.3k。克隆、测序和分析pDYM4.3k,以及鉴定复制和接合转移的基因。【方法】通过克隆和引物延伸获得pDYM4.3k的全序列,利用比对分析推测基因的功能,通过Southern杂交检测复制中间体,利用平板杂交实验证明接合转移功能。【结果】克隆和测序获得了全长为4346 bp的pDYM4.3k序列,预测仅有3个基因,其中1个基因与链霉菌主要接合转移基因同源,另外2个为功能未知。鉴定新的基因orf1及其上游的约300 bp构成了质粒的基本复制区域。检测到质粒存在单链的复制中间体,表明它以滚环方式进行复制。实验证明pDYM4.3k在变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)中具有接合转移功能。【结论】质粒pDYM4.3k可以滚环方式进行复制和在链霉菌之间进行接合转移。这是目前报道的最小的、具有游离复制和接合转移功能的链霉菌质粒。

关键词：链霉菌质粒复制接合转移

链霉菌产生的新型纤溶酶的纤溶性质和溶栓作用

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药学学报 1998年第7期33卷 481-485页

作者：王敏王骏邵明远王敏王以光中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所

目的旨在进一步确证纤溶活性的蛋白酶ＳＷ１的溶栓作用和性质。用体外加热平板法、试管凝块法和在体内对大鼠静脉血栓溶解及对纤溶因子的作用等实验，发现ＳＷ１在体外可直接降解纤维蛋白，而无激活纤溶酶原的作用。在体内，ＳＷ... 详细信息

目的旨在进一步确证纤溶活性的蛋白酶ＳＷ１的溶栓作用和性质。用体外加热平板法、试管凝块法和在体内对大鼠静脉血栓溶解及对纤溶因子的作用等实验，发现ＳＷ１在体外可直接降解纤维蛋白，而无激活纤溶酶原的作用。在体内，ＳＷ１对大鼠静脉血栓有显著的溶解效果，与同剂量尿激酶的溶栓作用相当。给药（ｉｖ）３０ｍｉｎ后，ＳＷ１引起大鼠血浆中纤溶酶、纤溶酶原水平提高，纤维蛋白原水平下降，而对组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）、α２纤溶酶抑制剂无显著影响。提示ＳＷ１是一种具有纤溶活性的蛋白酶，而不是纤溶原激活剂。

关键词：链霉菌纤溶酶溶栓纤维蛋白原

链霉菌Streptomyces ***-H1424中的一个新的烷基间苯二酚类化合物

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天然产物研究与开发 2019年第9期31卷 1591-1595页

作者：张周鑫侯冠雄马亚团黄建萍罗剑英杨静颜一军黄胜雄云南大学化学科学与工程学院昆明650091 中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室昆明650201 云南中医学院中药学院昆明650500

运用色谱学方法对一株来自云南省玉溪市元江县的土壤链霉菌Streptomyces ***-H1424的次级代谢产物进行分离纯化,得到6个单体化合物。运用NMR、MS及与文献数据对比等手段,确定其为一系列的烷基间苯二酚类似物,其中包括1个新的烷基间苯二... 详细信息

运用色谱学方法对一株来自云南省玉溪市元江县的土壤链霉菌Streptomyces ***-H1424的次级代谢产物进行分离纯化,得到6个单体化合物。运用NMR、MS及与文献数据对比等手段,确定其为一系列的烷基间苯二酚类似物,其中包括1个新的烷基间苯二酚类化合物Adiposatatin E(1)以及5个已知的烷基间苯二酚类似物Adipostatin A(2)、Adiposatin B(3)、Adipostatin C(4)、Adipostatin D(5)和5-Heptadecyl-1,3-benzenediol(6)。运用滤纸片法测定6个化合物对几种病原细菌和真菌的抑菌活性,发现化合物1~6不具有显著的抑菌活性。

关键词：链霉菌次级代谢产物分离鉴定烷基间苯二酚

一株高活力纤维素酶产生菌-链霉菌C-5产酶研究

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太阳能学报 2009年第5期30卷 682-685页

作者：徐杰杨谦哈尔滨工业大学生命科学与工程系哈尔滨150001

以链霉菌(Streptomyces sp.)C-5为实验材料,稻草粉为唯一诱导碳源培养基,采用液体摇瓶发酵法,对其产纤维素酶进行了单因素优化试验和四因素三水平正交设计优化试验。C-5的最佳培养条件为:稻草粉5%(w/v),豆饼粉1.5%(w/v),初始pH为7.5,培... 详细信息

以链霉菌(Streptomyces sp.)C-5为实验材料,稻草粉为唯一诱导碳源培养基,采用液体摇瓶发酵法,对其产纤维素酶进行了单因素优化试验和四因素三水平正交设计优化试验。C-5的最佳培养条件为:稻草粉5%(w/v),豆饼粉1.5%(w/v),初始pH为7.5,培养温度31℃。在此最佳培养条件下C-5的CMCase酶活达到了41.37U,是优化前CMCase酶活的3.32倍。链霉菌C-5的产酶进程长,酶活维持较高水平可达10d以上。因此,利用该菌生产纤维素酶具有一定的优越性,对提高秸秆的资源利用率有良好的应用前景。

关键词：放线菌链霉菌纤维素酶

链霉菌FX645对偶氮染料红AR30的降解机制研究

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环境科学 2013年第2期34卷 611-615页

作者：谢练武方继前郭亚平中南林业科技大学理学院长沙410004

从印染厂污泥中筛选到1株对偶氮染料红30(AR30)具有较强脱色降解作用的菌株Streptomyces ***645.通过降解产物的紫外-可见吸收光谱、LC-MS分析及各降解产物在发酵体系中浓度随时间变化的规律,探讨了菌株FX645对AR30的可能降解途径,首先... 详细信息

从印染厂污泥中筛选到1株对偶氮染料红30(AR30)具有较强脱色降解作用的菌株Streptomyces ***645.通过降解产物的紫外-可见吸收光谱、LC-MS分析及各降解产物在发酵体系中浓度随时间变化的规律,探讨了菌株FX645对AR30的可能降解途径,首先在偶氮还原酶的作用下AR30发生偶氮键的裂解,生成4-硝基-2,6-二氯苯胺与2-[(4-胺苯基)-(2-氰乙基)-氨基]乙酸乙酯,然后分别发生硝基还原、氨基酰化、氰基水解作用,生成一系列的苯胺类化合物.

关键词：偶氮染料脱色降解链霉菌降解机制偶氮还原酶

链霉菌CPCC 203909发酵物中1个新的曲古柳菌素

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中国中药杂志 2015年第9期40卷 1751-1754页

作者：陈明华巫晔翔许艳妮余利岩洪斌姜威司书毅中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所北京100050

应用已建立的CLA-1表达上调剂的高通量筛选模型,得到一株阳性链霉菌株CPCC 203909,并采用硅胶柱色谱、闪式反相C18柱色谱以及反相HPLC等色谱技术和方法,从链霉菌CPCC 203909的大米发酵提取物中分离得到1个新化合物,借助理化性质和波谱... 详细信息

应用已建立的CLA-1表达上调剂的高通量筛选模型,得到一株阳性链霉菌株CPCC 203909,并采用硅胶柱色谱、闪式反相C18柱色谱以及反相HPLC等色谱技术和方法,从链霉菌CPCC 203909的大米发酵提取物中分离得到1个新化合物,借助理化性质和波谱学数据分析,以及CD光谱比较和Marfeys法确定了其结构,鉴定为(-)-(R,2E,4Z)-7-[4'-(二甲基氨)苯基]-4,6-二甲基-7-氧代庚-2,4-二烯酰基-L-谷氨酰胺(1)。体外活性测试表明,化合物1对人胚肾293细胞具有一定的细胞毒作用,IC50为35.3μmol·L-1。

关键词：链霉菌曲古柳菌素 Marfeys法 CD光谱大米发酵提取物

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链霉菌对烟草中烟碱与绿原酸的降解作用研究

微生物学报 2007年第6期47卷 1095-1097页

作者：骆跃军陈育如李雪梅唐刚韦萍江苏省资源生物技术重点实验室南京师范大学微生物工程重点实验室南京210097 南京工业大学制药与生命科学学院南京210009

为了研究对烟草中烟碱与绿原酸的快速生物降解,筛选了能有效降解烟草中烟碱与绿原酸的链霉菌Z6菌株与Z8菌株,考察了Z6和Z8菌株在不同培养基上的培养特征,探讨了所选菌株对烟碱与绿原酸的降解特性。实验结果表明,Z8链霉菌在烟草固体培养... 详细信息

为了研究对烟草中烟碱与绿原酸的快速生物降解,筛选了能有效降解烟草中烟碱与绿原酸的链霉菌Z6菌株与Z8菌株,考察了Z6和Z8菌株在不同培养基上的培养特征,探讨了所选菌株对烟碱与绿原酸的降解特性。实验结果表明,Z8链霉菌在烟草固体培养基中培养48h后,对培养基中烟碱的降解率达到83.9%;培养72h后,对烟碱的降解率可达到93.7%,此时烟草中的烟碱含量降低到0.38mg/g,达到了欧盟条例的无害化标准。Z6菌对绿原酸的降解程度较高,培养48h后,对绿原酸的降解率为57.1%;培养72h后,降解率可达到67.5%.

关键词：链霉菌烟草烟碱绿原酸生物降解

链霉菌来源的UDP-葡萄糖-4-差向异构酶基因的克隆表达及酶性质研究

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微生物学报 2005年第6期45卷 881-884页

作者：张天宇王玲燕姜蓉李元中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所北京100050

经同源性比较,链霉菌139(Streptomycessp.139)产生胞外多糖依博素的生物合成基因簇中ste19基因编码的蛋白Ste19与UDP_葡萄糖_4_差向异构酶有较高同源性。将ste19基因克隆至质粒pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达。产生的可溶... 详细信息

经同源性比较,链霉菌139(Streptomycessp.139)产生胞外多糖依博素的生物合成基因簇中ste19基因编码的蛋白Ste19与UDP_葡萄糖_4_差向异构酶有较高同源性。将ste19基因克隆至质粒pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达。产生的可溶性Ste19重组蛋白,占细胞总蛋白的26%,说明该基因高GC含量(73.8%)及第三位碱基偏向使用GC(96.2%)并未影响其高效表达。SDS_PAGE结果显示重组蛋白的分子量约37kD,与理论推测值基本相同。经亲和层析纯化后得到了较高纯度的重组蛋白,经HPLC分析纯度为92.9%。酶活性分析表明:Ste19蛋白可将UDP_葡萄糖转化为UDP_半乳糖,因此,Ste19蛋白是UDP_葡萄糖_4_差向异构酶,它可能参与了依博素的生物合成。

关键词：链霉菌差向异构酶表达依博素生物合成

链霉菌AC-57及其产生的阿克拉霉素A的研究

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微生物学报 1991年第3期31卷 247-250页

作者：张海澜王定恩徐少华叶蕴芬陈佩君中国科学院上海药物研究所

阿克拉霉素A(Aclacinomycin A)是一种新型的蒽环类抗生素。

关键词：链霉菌阿克拉霉素A