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链霉素抗性筛选井冈霉素高产菌株的研究

安徽农业科学 2007年第28期35卷 8930-8932页

作者：牛莉娜葛翠凤葛绍荣四川大学生物资源与生态环境教育部重点实验室四川成都610064

对井冈霉素产生菌吸水链霉菌井冈变种SJ-6(Streptomyce shygroscopicusvar. Jingganggensis Yen)进行UV和亚硝酸复合诱变,在含有菌株孢子最小抑制浓度的链霉素培养基平板上,采用链霉素抗性筛选法获得大量的链霉素抗性突变株,筛选到突变... 详细信息

对井冈霉素产生菌吸水链霉菌井冈变种SJ-6(Streptomyce shygroscopicusvar. Jingganggensis Yen)进行UV和亚硝酸复合诱变,在含有菌株孢子最小抑制浓度的链霉素培养基平板上,采用链霉素抗性筛选法获得大量的链霉素抗性突变株,筛选到突变株UN-80,在摇瓶发酵条件下,井冈霉素化学效价达15 943μg/ml,比出发菌株SJ-6提高了84.4%。该菌株连续培养5代,其化学效价基本稳定,具有较好的遗传稳定性。

关键词：链霉素抗性筛选 UV诱变亚硝酸诱变井冈霉素

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链霉素抗性突变理性筛选新霉素高产菌株

生物技术通报 2014年第12期30卷 173-176页

作者：陈宏张祝兰孙菲张引周璟明郑榕福建省微生物研究所福建省新药(微生物)筛选重点实验室福州350007

采用化学诱变剂NTG结合链霉素抗性筛选法获得新霉素高产菌株。出发菌株费氏链霉菌(Streptomyces fradiae)FS1109的孢子悬液经不同剂量的化学诱变剂NTG处理后,涂布在含链霉素最小抑制浓度(3μg/m L)的培养基平板上培养,获得大量的链霉素... 详细信息

采用化学诱变剂NTG结合链霉素抗性筛选法获得新霉素高产菌株。出发菌株费氏链霉菌(Streptomyces fradiae)FS1109的孢子悬液经不同剂量的化学诱变剂NTG处理后,涂布在含链霉素最小抑制浓度(3μg/m L)的培养基平板上培养,获得大量的链霉素抗性突变株。经影印法初筛和摇瓶发酵复筛,正突变率高于负突变率,获得一株遗传性状稳定的Streptomyces fradiae Str 63菌株,其新霉素生物活性单位比出发菌株提高了50%以上,且C组分较出发菌株的低。

关键词：费氏链霉菌新霉素链霉素抗性筛选突变

链霉素抗性突变—万古霉素高产菌株的选育研究

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中国抗生素杂志 2005年第2期30卷 70-72页

作者：江凌邬建国陈伟伟杜连祥天津科技大学食品科学与生物工程学院天津300222

以东方拟无枝酸菌(Amycolatopsisorientalis)AO-4为出发菌株,经紫外线(15w,253.7nm,距离30cm)诱变处理,筛选链霉素抗性突变株(链霉素浓度1000μg/ml),从中获得万古霉素高产变株AmycolatopsisorientalisAO-29,其发酵效价较出发菌株提高1... 详细信息

关键词：东方拟无枝酸菌链霉素抗性筛选万古霉素

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氮离子注入选育阿维拉霉素高产菌株的研究

微生物学通报 2007年第1期34卷 39-42页

作者：贺亚男朱传合杜连祥路福平天津科技大学生物工程学院天津市工业微生物重点实验室天津300222

以提高产绿链霉菌(Streptomyces viridochromogenes)SV-1产阿维拉霉素(Avilamycin)产量为目的,采用低能氮离子注入技术,辅之以链霉素抗性筛选法进行诱变选育研究。结果表明,“马鞍”区域即注入剂量范围在3×10^(15)～5×10^(15)ions/cm^... 详细信息

以提高产绿链霉菌(Streptomyces viridochromogenes)SV-1产阿维拉霉素(Avilamycin)产量为目的,采用低能氮离子注入技术,辅之以链霉素抗性筛选法进行诱变选育研究。结果表明,“马鞍”区域即注入剂量范围在3×10^(15)～5×10^(15)ions/cm^2诱变效果最佳,菌株的抗药性突变与产量突变密切相关,链霉素抗性筛选法具有可行性。在摇瓶条件下,最终获得稳定性良好,阿维拉霉素产量达到83．5mg/L,较出发菌株提高195%的突变株SVT-45。实验表明,离子注入技术是一种有潜力的微生物诱变育种新方法。

关键词：离子注入诱变选育链霉素抗性筛选阿维拉霉素

氮离子注入玫瑰孢链霉菌选育达托霉素高产菌株的研究

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辐射研究与辐射工艺学报 2008年第5期26卷 317-320页

作者：周剑刘颖方东升江红张引高悟岩福建省微生物研究所福建省新药(微生物)筛选重点实验室福州350007

通过离子注入技术对达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)进行诱变选育,使用N^+作为离子源,初步探讨N^+注入对达托霉素生产菌所产生的生物学效应。通过链霉素抗性筛选法获得多株遗传稳定性较好的高产突变株,其中突变株... 详细信息

通过离子注入技术对达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)进行诱变选育,使用N^+作为离子源,初步探讨N^+注入对达托霉素生产菌所产生的生物学效应。通过链霉素抗性筛选法获得多株遗传稳定性较好的高产突变株,其中突变株N3-36发酵单位比出发菌株提高了26%。

关键词：达托霉素离子注入链霉素抗性筛选

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万古霉素高产菌株的选育研究

万古霉素高产菌株的选育研究

作者：江凌天津科技大学

学位级别：硕士

本论文通过诱变育种得到万古霉素(Vancomycin)高产菌株东方拟无枝酸菌Amycolatopsis Orientalis-29,并对其发酵条件进行了优化,同时建立了万古霉素的检测方法。使用紫外线对东方拟无枝酸菌Amycolatopsis Orientalis进行诱变处理,利用链... 详细信息

本论文通过诱变育种得到万古霉素(Vancomycin)高产菌株东方拟无枝酸菌Amycolatopsis Orientalis-29,并对其发酵条件进行了优化,同时建立了万古霉素的检测方法。使用紫外线对东方拟无枝酸菌Amycolatopsis Orientalis进行诱变处理,利用链霉素抗性筛选法进行初筛,最终得到高产菌株AO-29。在此基础上,优化了高产菌株AO-29的培养工艺和发酵培养基,提高了万古霉素的产量。分别对高效液相色谱法和二剂量管碟法测定万古霉素的各项参数进行了研究,最终选择高效液相色谱法(HPLC)作为检测万古霉素产量的方法。采用RP-HPLC法,色谱柱选用Phenomenex prodigy 5 μ ODS3 100A(250×4.60mm,5μm柱,以三乙胺缓冲液(磷酸调节pH3.3):乙腈:四氢呋喃=92:7:1为流动相,流速为***,检测波长为216nm。在该色谱条件下,在80μ***～600μg·mL浓度范围内有良好的线性关系。利用琼脂块法对***-1进行纯化,选择了发酵性能较好的4号菌株作为出发菌株,摇瓶产量0.794g/L。以东方拟无枝酸菌***-4为出发菌株,经紫外线诱变处理,筛选链霉素抗性突变株,从中获得万古霉素高产变株AO-29,其发酵效价较出发菌株提高167%。传代实验表明该变株的高产性能遗传特性较稳定。通过对发酵培养基和各项参数的优化,确定最佳培养基方案和发酵条件:采用牛肉膏18g/L,棉籽饼粉12g/L,蔗糖26g/L,麦芽糖38g/L,磷酸二氢钾0.005%,硝酸钾0.6%,氯化镁0.03%,发酵培养基初始pH值7.1,接种龄48h,接种量7%,摇床转速170r/min,装液量为25mL,培养温度为28℃,在36h时添加0.2%酪氨酸。万古霉素的产量达到3.66g/L。

关键词：万古霉素东方拟无枝酸菌高效液相色谱法诱变育种链霉素抗性筛选

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纳他霉素高产菌株的诱变育种

纳他霉素高产菌株的诱变育种

作者：李海波河北农业大学

学位级别：硕士

纳他霉素(natamycin)是一种高效、广谱的抗真菌抗生素,能有效地抑制酵母菌和霉菌的生长,在医疗、食品等方面显示了良好的应用前景。本论文对纳他霉素生产菌的诱变和选育等方面进行了系统的研究,主要完成了以下几个方面的工作,并得到了... 详细信息

纳他霉素(natamycin)是一种高效、广谱的抗真菌抗生素,能有效地抑制酵母菌和霉菌的生长,在医疗、食品等方面显示了良好的应用前景。本论文对纳他霉素生产菌的诱变和选育等方面进行了系统的研究,主要完成了以下几个方面的工作,并得到了相关结论。建立了链霉素抗性与纳他霉素产量之间的关系模式,快速筛选纳他霉素高产突变株。并建立了一套快速、准确的产物分析方法,利用紫外分光光度计法快速测定发酵液中的纳他霉素含量。通过对纳他霉素生产菌(Streptomyces gilvosporeus ATCC 13326)SG-S菌株进行分离复壮,获得一株遗传性能较为稳定的菌株SG-17,以SG-17为出发菌株进行紫外线诱变育种,获得比出发菌株SG-17效价提高59%的菌株UV-125,对UV-125进行微波诱变,获得比UV-125效价提高33%的菌株M-63,以M-63为出发菌株进行了60Co-γ射线诱变,得到比M-63效价提高16%的菌株γ-188。γ-188的发酵效价达到4.58μg/mL,较SG-17提高了1.45倍。另外,在摇瓶水平进行了纳他霉素发酵培养基优化的研究,探索了不同碳源、不同氮源、无机盐和前体等各因子对纳他霉素生物合成的影响。结果表明:碳源以葡萄糖最佳,浓度为3.6%,氮源以大豆蛋白胨为最佳,最佳浓度为1.8%,无机盐KHPO对菌体生长的促进作用可从大豆蛋白胨中得到补充,同时研究了前体物质丙酸钠对于发酵产量的影响。最终通过正交分析确定了一套发酵培养基的最佳配方。另外,对纳他霉素发酵的条件也进行了考察,即菌株的发酵温度、初始pH值、溶氧量等。发现300mL三角瓶中装料量为25mL摇床转速为220rpm,pH值为7.2时,在温度28℃条件下发酵,纳他霉素发酵效价最高,其发酵效价提高了12%。

关键词：纳他霉素诱变链霉素抗性筛选紫外分光光度计法

紫外诱变结合链霉素抗性选育小诺霉素高产菌株

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安徽农业科学 2020年第15期48卷 109-111页

作者：范一文向慧敏谢田甜华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006

以自然筛选的小诺霉素产生菌XDBJ-CF为诱变选育的出发菌株,经最适照射剂量60 s的紫外诱变后,在含20μg/mL链霉素的高氏平板上培养,获得链霉素抗性突变株。突变株摇瓶初筛试验显示,高产突变株的数量大于低产突变株。从正突变株中挑选相... 详细信息

以自然筛选的小诺霉素产生菌XDBJ-CF为诱变选育的出发菌株,经最适照射剂量60 s的紫外诱变后,在含20μg/mL链霉素的高氏平板上培养,获得链霉素抗性突变株。突变株摇瓶初筛试验显示,高产突变株的数量大于低产突变株。从正突变株中挑选相对发酵单位130%以上的16株高产突变株进行摇瓶复筛,获得2株小诺霉素高产突变株XDBJ-CF-09-24、XDBJ-CF-09-90,其小诺霉素产量分别比出发菌株提高37.8%和46.3%,C2b组分分别较出发菌株提高10%和20%。

关键词：小诺霉素产生菌菌株选育紫外诱变链霉素抗性筛选

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纳他霉素生产菌株的原生质体诱变及菌种选育

纳他霉素生产菌株的原生质体诱变及菌种选育