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钙黏蛋白在地塞米松诱导的人牙髓细胞成牙本质向分化中的表达研究

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牙体牙髓牙周病学杂志 2016年第7期26卷 396-400页

作者：邓子龙吴补领闫文娟屈茜陈明吕晓琳陈佳婧南方医科大学南方医院广东广州510515 南方医科大学口腔医学院广东广州510515

目的:探讨钙黏蛋白(cadherins)在地塞米松诱导的人牙髓细胞(HDPCs)成牙本质向分化过程中的作用。方法:酶消化法分离培养HDPCs,RT-PCR检测N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin在HDPCs中的表达;采用10-7mol/L地塞米松对第3代HDPCs进行处理,qRT-PCR检测成牙本质相关基因碱性磷酸酶(ALP)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin表达水平的变化;茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果:N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin均表达于HDPCs。地塞米松显著上调ALP、DMP-1、DSPP、R-cadherin的表达水平,同时显著下调N-cadherin、OB-cadherin,矿化结节形成情况则无明显差异。结论:地塞米松可诱导HDPCs向成牙本质细胞分化,同时调节钙黏蛋白的表达,提示钙黏蛋白可能参与调控地塞米松对HDPCs成牙本质向分化的诱导过程。

关键词：地塞米松钙黏蛋白人牙髓细胞(HDPCs) 成牙本质分化

二化螟钙黏蛋白CAD1的原核表达及与Cry1Ac、Cry2Aa蛋白的结合

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生物安全学报 2018年第4期27卷 249-254页

作者：周浩李博牛林邱林王永湖北工程学院生命科学技术学院/特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室湖北孝感432000 华中农业大学植物科学技术学院/昆虫资源利用与害虫可持续治理湖北省重点实验室湖北武汉430070 广州海关隶属南沙海关广东广州511400 中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室河南安阳455000 湖南农业大学植物保护学院湖南长沙410128

【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(Cs CAD1)的基础上,明确Cs CAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆Cs CAD1基因片段,将构... 详细信息

【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(Cs CAD1)的基础上,明确Cs CAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆Cs CAD1基因片段,将构建的p ET-28a-(+)-Cs CAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用western blot和ligand blot技术分析其与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21中表达一个约44 ku的蛋白,原核表达载体构建成功。SDS-PAGE显示该蛋白条带单一,且纯度较好。Ni柱亲和层析纯化该目的蛋白后进行Ligand blot分析,结果显示Cs CAD1重组蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合。【结论】Cs CAD1蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合,是潜在的Cry蛋白受体,所得结果有助于阐明Cry1Ac和Cry2Aa蛋白对二化螟的作用机制。

关键词：二化螟钙黏蛋白原核表达蛋白结合

钙黏蛋白调控上皮-癌组织界面的组织尺度结构重排和应力分布

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医用生物力学 2021年第S1期36卷 291-291页

作者：官刘员林绍珍陈鹏程冯西桥李博清华大学航天航空学院北京100084

目的研究上皮癌发展过程中组织界面的形成、维持、演化过程,探讨其力学-生物学耦合调控机制。方法采用慢病毒转染标记和基因敲除,获得稳定转染细胞系,开展上皮细胞和癌细胞对峙实验,观察多级上皮-癌组织界面形成和演化。通过分析界面几... 详细信息

目的研究上皮癌发展过程中组织界面的形成、维持、演化过程,探讨其力学-生物学耦合调控机制。方法采用慢病毒转染标记和基因敲除,获得稳定转染细胞系,开展上皮细胞和癌细胞对峙实验,观察多级上皮-癌组织界面形成和演化。通过分析界面几何特征、界面细胞动力学分析,量化界面动态演化规律。基于牵引力显微镜(TFM)、激光切割、有限元模拟、免疫荧光标记,计算组织界面机械力,并分析机械力对界面处癌细胞命运的影响。结果敲除MCF10A细胞E-cadherin之后。

关键词：组织界面上皮癌钙黏蛋白细胞动力学激光切割免疫荧光标记上皮细胞基因敲除

miR-503和钙黏蛋白在食管癌中表达及与患者预后的关系

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微循环学杂志 2021年第4期31卷 37-42页

作者：王军岐贾永申骏龙骆晴宝鸡市中心医院胸外科宝鸡721008

目的:分析食管癌组织中miR-503和钙黏蛋白(E-cadherin)的表达情况,探讨miR-503、E-cadherin与食管癌患者预后的关系。方法:选取2013-09—2015-03宝鸡市中心医院胸外科接受外科手术治疗的119例食管癌患者,术中收集相应的食管癌组织和癌... 详细信息

目的:分析食管癌组织中miR-503和钙黏蛋白(E-cadherin)的表达情况,探讨miR-503、E-cadherin与食管癌患者预后的关系。方法:选取2013-09—2015-03宝鸡市中心医院胸外科接受外科手术治疗的119例食管癌患者,术中收集相应的食管癌组织和癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR法检测组织中miR-503的相对表达量;采用免疫组化法检测食管癌组织中E-cadherin表达水平;采用Pearson法分析食管癌组织中miR-503表达水平与E-cadherin表达积分的相关性;对所有患者术后进行随访,采用Kaplan-Meier法分析食管癌组织中miR-503和E-cadherin表达与患者5年累积生存率的关系。结果:与癌旁正常组织比较,食管癌组织中miR-503相对表达量显著上升,E-cadherin阳性表达率、表达积分显著降低(P<0.05)。与浸润深度T_(1)+T_(2)、TNM分期Ⅰ+Ⅱ、高分化、无淋巴结转移患者比较,浸润深度T_(3)+T_(4)、TNM分期Ⅲ+Ⅳ、中和低分化、有淋巴结转移的患者miR-503相对表达量显著上升,而E-cadherin表达积分显著降低(P<0.05)。食管癌组织中miR-503表达水平与E-cadherin表达积分呈负相关(r=-0.517,P<0.05)。食管癌组织中miR-503高表达者5年累积生存率低于miR-503低表达者(42.31%vs 65.85%,χ^(2)=4.962,P<0.01),E-cadherin高表达者5年累积生存率高于E-cadherin低表达者的(79.59%vs 30.00%,χ^(2)=25.803,P<0.01)。结论:miR-503在食管癌组织中呈高表达,E-cadherin呈低表达,二者与食管癌的发生及患者预后密切相关。

关键词：食管癌 miR-503 钙黏蛋白预后

塞来昔布干预对人胃癌细胞E-钙黏蛋白和基质金属蛋白酶-2表达的影响

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胃肠病学和肝病学杂志 2012年第5期21卷 393-398页

作者：张宏玲刘敏陈兆峰周永宁赵越王霞兰州大学第一医院消化内科甘肃兰州730000

目的探讨COX-2与E-cadherin、MMP-2之间的相互关系及其参与胃癌细胞侵袭迁移的可能机制。方法应用塞来昔布(celecoxib)对体外培养的人胃癌细胞SGC7901进行干预,采用实时荧光定量反转录PCR检测COX-2、E-cadherin、MMP-2 mRNA的表达;运用... 详细信息

目的探讨COX-2与E-cadherin、MMP-2之间的相互关系及其参与胃癌细胞侵袭迁移的可能机制。方法应用塞来昔布(celecoxib)对体外培养的人胃癌细胞SGC7901进行干预,采用实时荧光定量反转录PCR检测COX-2、E-cadherin、MMP-2 mRNA的表达;运用免疫荧光标记法结合激光共聚焦荧光显微镜分析E-cadherin的蛋白表达量;应用Transwell法检测细胞侵袭及迁移能力的变化。结果塞来昔布明显抑制体外培养的人胃癌细胞SGC-7901中COX-2 mRNA的表达,E-cadherin mRNA的表达随着COX-2的表达下降而呈浓度与时间依赖性升高,MMP-2 mRNA的表达随着COX-2的表达下降而呈浓度与时间依赖性降低。塞来昔布30μmol/L干预人胃癌细胞SGC7901 24、36、48 h后,激光共聚焦荧光显微镜检测E-cadherin的蛋白表达量明显升高。塞来昔布干预组细胞穿过Transwell小室的细胞数明显少于对照组。结论 COX-2特异性抑制剂塞来昔布通过抑制COX-2的表达,上调E-cadherin的表达,下调MMP-2的表达,抑制体外培养的胃癌细胞SGC7901的侵袭迁移能力。

关键词：钙黏蛋白基质金属蛋白酶-2 环氧化酶-2 胃癌

血管内皮钙黏蛋白对实验性角膜新生血管的作用及机制

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中华眼视光学与视觉科学杂志 2013年第3期15卷 174-177,180页

作者：刘高勤陈磊肖艳辉陈志刚陆培荣苏州大学附属第一医院眼科 215006

目的探讨血管内皮钙黏蛋白（rE—cadherin）在实验性角膜新生血管发生过程中的作用及机制。方法动物实验研究。以碱烧伤诱导构建小鼠角膜新生血管模型；RT—PCR法检测VE—cadherin在碱烧伤角膜组织中的表达：碱烧伤1周后角膜局部应用阻... 详细信息

目的探讨血管内皮钙黏蛋白（rE—cadherin）在实验性角膜新生血管发生过程中的作用及机制。方法动物实验研究。以碱烧伤诱导构建小鼠角膜新生血管模型；RT—PCR法检测VE—cadherin在碱烧伤角膜组织中的表达：碱烧伤1周后角膜局部应用阻断性抗小鼠VE—cadherin抗体进行干预，碱烧伤3周后大体观察角膜新生血管的发生情况以及全角膜铺片CD31荧光组织化学法检测角膜组织新生血管的面积；RT—PCR检测烧伤角膜组织内caspase-3mRNA的表达；流式细胞术检测角膜组织血管内皮细胞凋亡数目；体外实验进一步验证VE—cadherin对血管内皮细胞（HREC）血管网形成的影响。采用成组t检验方法处理数据。结果碱烧伤3周后，VE—cadherin抗体干预组角膜新生血管数目较对照组明显减少。RT—PCR结果显示***抗体干预组caspase-3基因水平表达增高：进一步流式细胞术检测结果显示vE，cadherin抗体干预后，角膜组织内凋亡的血管内皮细胞明显增多。体外实验证实VE—cadherin抗体明显抑制HREC细胞系血管网的形成。结论VE—cadherin钙黏蛋白能通过维护细胞间黏附以及抑制细胞的凋亡等作用保护实验性角膜新生血管内皮细胞的生长，从而维持新生血管的发生发展。

关键词：钙黏蛋白新生血管碱烧伤角膜

原钙黏蛋白19（PCDH19）基因突变相关的癫痫性脑病一例

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中国小儿急救医学 2016年第3期23卷 211-213页

作者：庄嘉鑫林彩梅吴小慧林学锋福建省泉州市儿童医院小儿神经科 362000

患儿，女，6岁，因“反复抽搐5年余，发热、抽搐再发1d”入福建省泉州市儿童医院小儿神经科住院治疗。患儿系G2P2，足月顺产，围生期无异常，家族史无异常。患儿10个月始出现抽搐发作，表现为睡眠时突发觉醒，双眼向一侧凝视，口唇发绀... 详细信息

患儿，女，6岁，因“反复抽搐5年余，发热、抽搐再发1d”入福建省泉州市儿童医院小儿神经科住院治疗。患儿系G2P2，足月顺产，围生期无异常，家族史无异常。患儿10个月始出现抽搐发作，表现为睡眠时突发觉醒，双眼向一侧凝视，口唇发绀，四肢不对称强直抽动，历时5～6min缓解，无发热。

关键词：癫痫性脑病基因突变钙黏蛋白反复抽搐小儿神经科住院治疗儿童医院足月顺产

上皮型钙黏蛋白、细胞周期蛋白D_1表达水平与宫颈癌患者病理分期、淋巴结转移的相关性分析

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河南医学研究 2018年第2期27卷 235-236页

作者：张道省光山县人民医院病理科河南光山465450

目的分析上皮型钙黏蛋白(N-cadherin)、细胞周期蛋白D_1(Cyclin D_1)表达水平与宫颈癌患者病理分期、淋巴结转移的相关性。方法选取2016年3月至2017年5月光山县人民医院收治的宫颈癌患者42例,宫颈上皮内瘤变(CIN)患者42例,宫颈正常者42... 详细信息

目的分析上皮型钙黏蛋白(N-cadherin)、细胞周期蛋白D_1(Cyclin D_1)表达水平与宫颈癌患者病理分期、淋巴结转移的相关性。方法选取2016年3月至2017年5月光山县人民医院收治的宫颈癌患者42例,宫颈上皮内瘤变(CIN)患者42例,宫颈正常者42例,采取免疫组化法测定N-cadherin、Cyclin D_1,对比3组患者组织中N-cadherin、Cyclin D_1阳性表达情况,分析N-cadherin、Cyclin D_1与肿瘤病理分期、淋巴结转移的关联性。结果宫颈癌组织中N-cadherin阳性表达率高于正常宫颈组织,差异有统计学意义(P0.05)。结论 N-cadherin、Cyclin D_1表达可能与宫颈癌发生有关,且N-cadherin与宫颈癌转移、分化具有相关性,N-cadherin、Cyclin D_1可作为宫颈癌诊断的有效指标。

关键词：钙黏蛋白细胞周期蛋白D1 宫颈癌病理分期淋巴结转移

病毒性心肌炎患儿血清高迁移率蛋白-1和血管内皮细胞钙黏蛋白的变化

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中国综合临床 2011年第8期27卷 880-883页

作者：华敏黄友敏周永勤山东省滕州市中心人民医院输血科 277500 山东省滕州市中心人民医院儿科 277500

目的探讨病毒性心肌炎患儿血清高迁移率蛋白-1（HMGB-1）和血管内皮细胞钙黏蛋白（VE-cadherin）的变化及临床意义。方法采用ELISA法测定52例病毒性心肌炎患儿血清HMGB-1和VE-cadherin含量，同时检测磷酸肌酸激酶同工酶（CK—MB），并... 详细信息

目的探讨病毒性心肌炎患儿血清高迁移率蛋白-1（HMGB-1）和血管内皮细胞钙黏蛋白（VE-cadherin）的变化及临床意义。方法采用ELISA法测定52例病毒性心肌炎患儿血清HMGB-1和VE-cadherin含量，同时检测磷酸肌酸激酶同工酶（CK—MB），并与36例健康儿童作对照。结果病毒性心肌炎患儿血清HMGB1、VE—cadherin和CK-MB急性期含量[HMGB1（5．14±0．23）mg／L；VE—cadhefin（5．36±0．92）ms／L；CK—MB（31．42±3．22）U／L]明显高于恢复期[HMGB1（0．92±0．14）mg／L；VE-cadherin（2．93±0．64）mg／L；***（13．75±3．18）U／L]（t值分别为11．37、10．26、12．17，P均〈0.01）及对照组[HMGB1（0．86±0．12）mg/L；VE—cadherin（2．86±0．65）mg／L；CK-MB（12．83±3．04）U／L]（t值分别为12．06、11．19、12．64，P均〈0．01）；恢复期HMGBI、VE—cadhefin和CK—MB水平与对照组比较，差异均无统计学意义（t值分别为1．26、1．19、1．43，P均〉0．05）。病毒性心肌炎患儿HMGB1与VE—cadherin、CK-MB呈正相关（r值分别为0．73、0．79，P均〈0．05），VE：cadherin与CK-MB亦呈正相关（r=0．82，P〈0．05）。结论HMGB1和VE—cadhefin可能参与病毒性心肌炎的发生发展，并可作为病情判断及预后的观察指标。

关键词：病毒性心肌炎高迁移率蛋白-1 钙黏蛋白