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慢性间断低氧暴露对大鼠心肌线粒体ATP酶及呼吸链酶复合物的影响

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中国应用生理学杂志 2004年第3期20卷 219-222页

作者：龙超良尹昭云汪海军事医学科学院毒物药物研究所北京100850 军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津300050

目的 :研究慢性间断低氧暴露对大鼠心肌线粒体Na+ 、K+ ATPase和Ca2 + 、Mg2 + ATPase以及呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性的影响。方法 :经慢性间断低氧暴露 (模拟海拔 30 0 0m、5 0 0 0m分别低氧 ,每天 4h ,共 2周 ,最后 80 0 0m... 详细信息

目的 :研究慢性间断低氧暴露对大鼠心肌线粒体Na+ 、K+ ATPase和Ca2 + 、Mg2 + ATPase以及呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性的影响。方法 :经慢性间断低氧暴露 (模拟海拔 30 0 0m、5 0 0 0m分别低氧 ,每天 4h ,共 2周 ,最后 80 0 0m低氧 4h)和急性低氧 (模拟海拔 80 0 0m低氧 4h)的大鼠 ,断头处死 ,迅速取出心脏 ,分离心肌线粒体 ,用水解磷酸根法测定ATP酶活性 ,用Clark氧电极法测定呼吸链酶复合物的活性。结果 :①慢性间断低氧暴露对大鼠心肌线粒体Na+ 、K+ ATPase的活性无明显影响。②急性低氧大鼠心肌线粒体Ca2 + 、Mg2 + ATPase的活性较正常大鼠显著降低 ,而慢性间断低氧暴露大鼠心肌线粒体Ca2 + 、Mg2 + ATPase的活性则明显升高 ,接近正常水平。③急性低氧大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物I(NADH CoQ还原酶 )、复合物Ⅱ (琥珀酸 CoQ还原酶 )、复合物IV(细胞色素氧化酶 )活性较正常大鼠显著降低 ,而经慢性间断低氧暴露后 ,三者的活性均显著提高。相同实验条件下 ,低氧对复合物Ⅲ (CoQ 细胞色素C还原酶 )活性无明显影响。结论 :慢性间断低氧暴露可以显著提高心肌线粒体Ca2 + 、Mg2 + ATPase和呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ的活性 ,从而改善低氧时心肌线粒体呼吸链的功能 ,维持心肌正常能量代谢 ,最?

关键词：低氧线粒体 Na^+、K^+-ATPase Ca^2+、Mg^2+-ATPase 呼吸链酶复合物

高住低训模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物的活性: 线粒体习服过程所需时间分析

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第24期12卷 4780-4783页

作者：李永春辽宁警官高等专科学校警训系辽宁省大连市116033

背景：以往的研究发现，高原训练的有效时间为4～6周，而高住低训的有效训练时间、尤其是线粒体的习服所需要的时间还未见系统报道。目的：构建模拟“高住低训”训练法大鼠模型，观察低氧和高原训练刺激作用下，高住低训习服过程中模型... 详细信息

背景：以往的研究发现，高原训练的有效时间为4～6周，而高住低训的有效训练时间、尤其是线粒体的习服所需要的时间还未见系统报道。目的：构建模拟“高住低训”训练法大鼠模型，观察低氧和高原训练刺激作用下，高住低训习服过程中模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物活性的动态变化，分析线粒体呼吸链酶复合物的高住低训习服过程所需时间。设计：分组对照动物实验。单位：辽宁师范大学体育学院运动生理实验室。材料：实验选用健康成年SD大鼠40只，雌雄不拘，由大连医科大学实验动物中心提供。实验动物的处置符合动物伦理学。实验用模型常压低氧环境所用低氧分压系统由美国Hypoxico公司制造，氧气监测仪为美国产TOXIBLAEPGM-36型。方法：随机将大鼠分为5组：常氧对照组，高住低训1，2，3，4周组，每组8只。高住低训组大鼠每天在低氧分压系统模拟的海拔2500m的高原环境生活，同时模拟海拔1300m环境下游泳运动1h，每周训练6d。主要观察指标：采用可见分光光度法测定每组大鼠心肌线粒体呼吸链复合酶体Ⅰ-Ⅳ活性，用Bradford法进行线粒体蛋白定量检测。结果：①心肌线粒体呼吸链复合酶活性：高住低训1周大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ～Ⅳ活性较对照组显著降低，差异有显著性意义（P〈0．05～0．01）；高住低训2周时酶复合Ⅲ活性与对照组比较，差异无显著性意义（P〉0．05），而其他酶复合物在高住低训3周时与对照组比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。②线粒体蛋白含量：高住低训1，2周时与对照组比较，差异无显著性意义（P〉0．05），高住低训3，4周时高于对照组，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ～Ⅳ活性的高住低训习服过程需要3周。

关键词：线粒体呼吸链酶复合物高住低训习服运动医学组织工程

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细胞色素BC_1酶复合物抑制剂的对接研究

浙江大学学报（理学版） 2007年第2期34卷 192-196页

作者：郭辉俞庆森邹建卫刘海春王红青浙江大学化学系浙江杭州310027

细胞色素BC1酶复合物是细胞呼吸和光合作用的重要组成部分,也是抑制病菌的重要靶标.细胞色素BC1酶复合物的抑制剂在近几年来的应用越来越广.为了得到活性更高的抑制剂,本文采用分子对接技术(DOCK4.0),对8个典型结构的此类抑制剂进行了对... 详细信息

细胞色素BC1酶复合物是细胞呼吸和光合作用的重要组成部分,也是抑制病菌的重要靶标.细胞色素BC1酶复合物的抑制剂在近几年来的应用越来越广.为了得到活性更高的抑制剂,本文采用分子对接技术(DOCK4.0),对8个典型结构的此类抑制剂进行了对接,并通过分析结合能与活性的相关性,得到了较好的构效关系模型,相关系数R2=0.75.在此基础上,设计了4个新的抑制剂,均具有较高的预测活性.所建立的模型将为研究新的细胞色素BC1酶复合物抑制剂提供一定的理论指导.

关键词：细胞色素BC1 酶复合物能量得分分子对接

丁烯酸内酯对心肌线粒体呼吸链酶复合物活力的影响

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毒理学杂志 2005年第1期19卷 18-20页

作者：刘井波彭双清阳海鹰王国强军事医学科学院毒物药物研究所国家北京药物安全评价研究中心北京100850

目的　研究丁烯酸内酯 (BUT)对大鼠心肌细胞毒性作用机制。方法　差速贴壁结合化学方法分离纯化大鼠心肌细胞。MTT法检测BUT作用于心肌细胞后其存活率的改变。用差速离心法分离心肌线粒体。TBA法检测心肌匀浆和心肌线粒体悬液中MDA的含... 详细信息

目的　研究丁烯酸内酯 (BUT)对大鼠心肌细胞毒性作用机制。方法　差速贴壁结合化学方法分离纯化大鼠心肌细胞。MTT法检测BUT作用于心肌细胞后其存活率的改变。用差速离心法分离心肌线粒体。TBA法检测心肌匀浆和心肌线粒体悬液中MDA的含量。应用紫外分光光度法检测BUT作用于线粒体悬液 2h后线粒体呼吸链酶复合物活力。结果　BUT对培养的心肌细胞有很强的毒性作用并且呈现明显的量效关系 ,其作用于心肌细胞的LC50 为5 3 μg/mL。BUT作用在线粒体悬液中所引起的脂质过氧化效应强于其在心肌匀浆中所引起的脂质过氧化作用。BUT作用后线粒体酶复合物活力发生了改变 ,复合物Ⅰ和复合物Ⅱ的活力受到了比较明显的抑制 ,而复合物Ⅲ、Ⅳ的活力则有一定程度升高。结论　BUT能引起心肌细胞的脂质过氧化作用 ,这种作用有可能是因为BUT作用于线粒体呼吸链影响了电子在呼吸链上的传递过程所致。

关键词：线粒体呼吸链丁烯酸内酯酶复合物活力脂质过氧化作用紫外分光光度法心肌细胞心肌线粒体毒性作用机制 MTT法检测 BUT 差速离心法分离纯化化学方法 TBA法 LC50 复合物Ⅰ 肌匀浆存活率 MDA 悬液大鼠

高住低训对大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物活性的影响

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中国运动医学杂志 2008年第4期27卷 484-485页

作者：王耀光齐敦禹李兴海张林辽宁师范大学体育学院大连116029 辽宁警官高等专科学校大连医科大学附属医院

目的：探讨高住低训（HiLo）习服过程中大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物活性的动态变化。方法：40只SD大鼠分为5组：常氧对照组以及HiLo1、2、3、4周组,每组8只。HiLo组大鼠每天在模拟海拔2500m（氧含量约为15.4%）的环境生活,在模拟海拔1... 详细信息

目的：探讨高住低训（HiLo）习服过程中大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物活性的动态变化。方法：40只SD大鼠分为5组：常氧对照组以及HiLo1、2、3、4周组,每组8只。HiLo组大鼠每天在模拟海拔2500m（氧含量约为15.4%）的环境生活,在模拟海拔1300m（氧含量约为19.4%）环境游泳1h,每周6天。通过光谱分析法,观察在1~4周时间内,在HiLo作用下大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ（NADH-CoQ还原酶）、复合物Ⅱ（琥珀酸-CoQ还原酶）、复合物Ⅲ（CoQ-细胞色素C还原酶）和复合物Ⅳ（细胞色素氧化酶）活性的变化。常氧对照组不进行运动,测试指标与运动组相同。结果：HiLo1周组大鼠心肌线粒体酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性与对照组相比均显著下降（P〈0.05,P〈0.01）。HiLo2周组除酶复合物Ⅲ外,其他三种酶复合物活性均显著低于对照组（P〈0.05,P〈0.01）。HiLo3周组心肌线粒体酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性与对照组相比差异无统计学意义;但线粒体蛋白含量显著升高（P〈0.05）。HiLo4周组心肌线粒体酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ活性显著升高（P〈0.05,P〈0.01）;线粒体蛋白含量显著升高（P〈0.05）。结论：大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性在HiLo的习服过程中需要3周时间。

关键词：高住低训习服线粒体呼吸链酶复合物

亲和素—生物素—酶复合物(ABC)法在免疫诊断学中的应用

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黑龙江畜牧兽医 1989年第5期 29-30页

作者：王树林张萌辽宁省畜牧兽医科研所

亲和素—生物素—酶复合物(Avidin—Biotin—Enzyme Complex,ABC)法是Hsu等于1981年在生物素—亲和素架桥法(BRAB)和标记亲和素法(LAB)的基础上进行改良、建立起来的。这种方法是预先按一定比例将生物素化酶和亲和素共温后形成ABC复合物... 详细信息

亲和素—生物素—酶复合物(Avidin—Biotin—Enzyme Complex,ABC)法是Hsu等于1981年在生物素—亲和素架桥法(BRAB)和标记亲和素法(LAB)的基础上进行改良、建立起来的。这种方法是预先按一定比例将生物素化酶和亲和素共温后形成ABC复合物,再使ABC复合物与生物素化抗体反应。该法不仅减少了反应步骤。而且由于ABC的网格可以网罗相当数量的酶分子,从而使生物素—亲和素系统(BAS)的敏感度大为提高。用该法对多肽类激素进行了酶标测定,发现抗体滴度可提高20～40倍。

关键词：亲和素 ABC 免疫诊断学酶复合物生物素化抗体反应抗体滴度多肽类激素架桥法标记抗体

急性运动对大鼠肝脏线粒体呼吸链酶复合物的影响

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中国运动医学杂志 2008年第3期27卷 363-365页

作者：李洁西北师范大学体育学院甘肃兰州730070

目的：研究急性运动对大鼠肝线粒体呼吸链酶复合物活性的影响。方法：21只健康雄性Wister大鼠随机分为安静对照组、大强度运动组和中等强度运动组,每组7只。大强度运动组进行大强度间歇性跑台运动,速度为27m/min,坡度为0,总运动时间90m... 详细信息

目的：研究急性运动对大鼠肝线粒体呼吸链酶复合物活性的影响。方法：21只健康雄性Wister大鼠随机分为安静对照组、大强度运动组和中等强度运动组,每组7只。大强度运动组进行大强度间歇性跑台运动,速度为27m/min,坡度为0,总运动时间90min,每运动10min间歇1min;中等强度运动组进行中等强度持续性跑台运动,速度为18m/min,坡度为0,运动时间100min;对照组未进行任何运动。采用分光光度法测定线粒体呼吸链酶复合物（Ⅰ-Ⅳ）活性。结果：与安静对照组相比,大强度运动组复合物Ⅰ和复合物Ⅱ活性无显著性变化,复合物Ⅲ和复合物Ⅳ活性分别下降16%和45%,有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;而中等强度运动组复合物Ⅰ、复合物Ⅲ和复合物Ⅳ活性分别下降26.1%、24%和65%,有统计学意义（P〈0.01）,复合物Ⅱ活性显著升高（P〈0.01）,升高54.7%。与大强度运动组相比,中等强度运动组复合物Ⅰ和复合物Ⅳ活性显著降低（P〈0.01）,复合物Ⅱ活性显著升高（P〈0.01）,复合物Ⅲ活性下降9.5%,但无统计学意义。结论：大强度间歇疲劳运动对大鼠肝线粒体NADH呼吸链起始端酶（复合物Ⅰ）和FADH2呼吸链起始端酶（复合物Ⅱ）活性无显著影响,可使复合物Ⅲ和复合物Ⅳ活性显著下降;中等强度持续疲劳运动使大鼠肝线粒体NADH呼吸链酶（复合物Ⅰ、复合物Ⅲ和复合物Ⅳ）活性显著下降,复合物Ⅱ活性显著增强;中等强度运动对肝线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ的影响较大强度运动严重。

关键词：运动性疲劳线粒体呼吸链酶复合物

高住高练低训对大鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物活性的影响

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高住高练低训对大鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物活性的影响

作者：王世超西北师范大学

学位级别：硕士

研究目的本实验旨在研究骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物在HiHiLo刺激作用下其活性的动态变化规律，为运动与低氧适应的研究提供参考。实验方法以健康雄性2月龄Wister大鼠为实验对象，筛选出的大鼠随机分为常氧安静对照组（C）、HiH... 详细信息

研究目的本实验旨在研究骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物在HiHiLo刺激作用下其活性的动态变化规律，为运动与低氧适应的研究提供参考。实验方法以健康雄性2月龄Wister大鼠为实验对象，筛选出的大鼠随机分为常氧安静对照组（C）、HiHiLo1周训练组（H1）、 HiHiLo2周训练组（H2）、HiHiLo3周训练组（H3）、HiHiLo4周训练组（H4）、HiHiLo5周训练组（H5）。采用自制低压氧舱造成低压低氧环境（氧分压为15.4%，相当于海拔2500m高度），常氧训练海拔高度为1500m（以兰州市海拔高度为基点），训练日隔天加一次低氧环境训练;大鼠每天12h生活在低氧环境，12h生活在常氧环境（包括非训练日）。常氧对照组喂养一周后取材，训练组按分组时间均在每周1进行取材，分别检测大鼠体重、血清肌酸激酶（CK）活性、骨骼肌线粒体ATP酶活性、骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物I、II、III、IV活性指标变化。实验结果 1.大鼠血清肌酸激酶（CK）活性在第2周达到最高值，其中前三周与C组比较显著提高（P＜0.01、P＜0.05），分别提高了35.23%（H1组）、61.93%（H2组）、32.39%（H3组）;H2组CK活力值达到最高;H3、4、5组呈明显下降趋势，与H2组比较显著下降，分别降低18.25%（H3组）、32.98%（H4组）、34.74%（H5组）。 2. H1组大鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物I、II、III、IV活性与C组相比均显著下降，分别为30.03%、35.56%、14.54%.、35.08%（P＜0.01、P＜0.05）;H2组除酶复合物III无显著差异（下降2.10%）以外，其他三种酶复合物活性均显著低于安静对照组（P＜0.01、P＜0.05），分别下降16.49%、13.73%、24.97%;H3组大鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物I较C组显著提高15.63%。而酶复合物II、III、IV与C组比较无统计学意义;H4组骨骼肌线粒体酶复合物I、II、IV活性显著性提高（P＜0.05），分别提高17.36%、17.61%、37.13%、21.44%;H5组骨骼肌线粒体酶复合物活性I、II、III、IV活性显著提高（P＜0.01），分别提高42.10%、39.08%、49.74%、35.83%。 3.骨骼肌线粒体ATP酶活性呈现先下降后上升到趋于平稳态势。与C组比较发现，H1组线粒体ATP酶活性显著下降（P＜0.01），下降39.27%;H2组下降21.30%（P＜0.05）;H3组与安静对照组比较提高8.91%;H4组骨骼肌线粒体ATP酶活性提高40.21%（P＜0.01）;H5组骨骼肌线粒体ATP酶活性提高38.39%（P＜0.01）。结论 1.第1周、2周肌酸激酶活性升高，第3周开始下降，第4周、5周继续下降，说明在HiHiLo过程中骨骼肌适应从第三周开始。 2.5周HiHiLo可显著提高骨骼肌线粒体呼吸链CⅠ～Ⅳ活性，在HiHiLo过程中，骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物酶Ⅰ～Ⅳ活性均在第1周下降，从第2周开始一直到第5周持续升高，其中骨骼肌线粒体呼吸链CⅠ、CⅢ在第3周已经高于安静时酶活性，说明骨骼肌线粒体呼吸链酶活性需3-4周可适应HiHiLo。 ***不但可以提高安静时骨骼肌线粒体ATP酶的活性,而且可增强其活性的储备力，从而提高骨骼肌收缩能力。骨骼肌线粒体ATP酶活性在第3周高于安静时，说明骨骼肌线粒体ATP酶3周内就已经完成了HiHiLo习服

关键词：高住高练低训骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物 CK ATP

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家蚕细胞质多角体病毒基因-酶复合物的分离

中国科学 1981年第11期 1381-1385页

作者：戴仁鸣巫爱珍沈学仁钱力孙玉昆中国科学院上海生物化学研究所

本文报道了家蚕细胞质多角体病毒(简称CPV)颗粒经紫外光照射后,通过DEAE-Sephadex A-25 柱层析,用氯化钠溶液分步洗脱分离得到基因-酶复合物。以~3H-UTP和[~3H-甲基]-S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)作为底物时,该复合物均呈现RNA多聚酶和甲基... 详细信息

本文报道了家蚕细胞质多角体病毒(简称CPV)颗粒经紫外光照射后,通过DEAE-Sephadex A-25 柱层析,用氯化钠溶液分步洗脱分离得到基因-酶复合物。以~3H-UTP和[~3H-甲基]-S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)作为底物时,该复合物均呈现RNA多聚酶和甲基转移酶活力。与CPV的RNA基因相同,基因-酶复合物能由聚丙烯酰胺凝胶电泳分成9条片段,各个片段也均呈现RNA多聚酶和甲基转移酶的酶活力。说明CPV颗粒里的RNA多聚酶和甲基转移酶紧密结合于双链RNA基因上,在复制过程中,CPV的双链RNA基因的每一片段各自独立地进行转录。

关键词：酶复合物 RNA 多聚酶聚合酶基因片段甲基转移酶甲基化酶凝胶电泳分离颗粒双链家蚕细胞