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南江黄羊LHβ基因部分序列SphⅠ酶切分析

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中国草食动物 2005年第Z1期25卷 85-86页

作者：李利张红平吴登俊王维春张国俊陈瑜四川农业大学动物科技学院雅安625014 四川农业大学动物科技学院雅安625014 四川农业大学动物科技学院雅安625014 四川省南江县畜牧局四川省南江县畜牧局四川省南江县畜牧局

利用牛、绵羊等动物LHβ亚基基因序列设计引物,首次扩增并采用Sph Ⅰ酶切分析南江黄羊247个个体该基因部分序列的多态性.结果表明,采用Sph Ⅰ酶切LHβ亚基基因出现三种基因型,其中BB基因型占绝对优势(57.49%),其次为AB型(38.87%),AA型... 详细信息

利用牛、绵羊等动物LHβ亚基基因序列设计引物,首次扩增并采用Sph Ⅰ酶切分析南江黄羊247个个体该基因部分序列的多态性.结果表明,采用Sph Ⅰ酶切LHβ亚基基因出现三种基因型,其中BB基因型占绝对优势(57.49%),其次为AB型(38.87%),AA型出现的比例非常小(3.64%),即南江黄羊群体中B等位基因频率76.925%远远高于A(23.075%).

关键词：南江黄羊 LHβ亚基基因 Sph I 酶切基因型

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重组蛋白酶切方法的比较与分析

解剖科学进展 2018年第4期24卷 408-410,414页

作者：封瑞吕丽婷苏敬阳康泽毛建伟郝丽英曾晓荣中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110122 东北大学机械工程与自动化学院过程装备与环境工程研究所沈阳110004 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理教育部重点实验室泸州646000

目的探讨制备纯化重组蛋白的酶切方法,比较不同蛋白纯化方法的差异。方法在大肠杆菌BL-21中分别诱导表达p GEX-6p-3/CT1,p GEX-6p-3/CT3,p GEX-6p-3/Ca M,p GEX-6p-3/Ca MKⅡ。采用超声破碎、B-per试剂以及B-per试剂加变性复性试剂盒等... 详细信息

目的探讨制备纯化重组蛋白的酶切方法,比较不同蛋白纯化方法的差异。方法在大肠杆菌BL-21中分别诱导表达p GEX-6p-3/CT1,p GEX-6p-3/CT3,p GEX-6p-3/Ca M,p GEX-6p-3/Ca MKⅡ。采用超声破碎、B-per试剂以及B-per试剂加变性复性试剂盒等方法制备带GST标签的融合蛋白,进一步在不同条件下使用蛋白酶进行酶切获得相应蛋白。将制备得到的蛋白进行SDS-PAGE电泳鉴定,同时,使用pull-down方法对蛋白活性进行鉴定。结果采用B-per试剂以及变性再复性试剂盒,同时酶切时加入DTT,能得到较高浓度与纯度的CT1蛋白。而无论采用B-per试剂或超声破碎,只要酶切时加入DTT均能获得CT3蛋白。采用简单的超声破碎,酶切时不需加入任何试剂即可得到高浓度与高纯度的胞浆蛋白Ca M,而目前仍没找到纯化Ca MKⅡ蛋白的理想方法,需进一步的实验研究。结论重组蛋白酶切纯化方法存在差异,DTT可能在酶切纯化蛋白时起到关键作用。

关键词：重组蛋白钙通道酶切膜蛋白

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多聚酶链反应结合酶切与异源双链形成分析检测白血病微小残留病

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白血病 1998年第2期7卷 74-77页

作者：邢佩霓王彤李梅生吕晓莉陕西省人民医院

采用多聚酶链反应结合ＨａｅⅢ、ＨｐａⅡ、ＡｌｕⅠ、ＴａｑⅠ四种限制性内切酶酶切及异源双链形成实验，分析了３０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者发病及病程中的ＴＣＲγ、ＩｇＨ基因重排，探讨上述方法在完善微小残留病检测中... 详细信息

采用多聚酶链反应结合ＨａｅⅢ、ＨｐａⅡ、ＡｌｕⅠ、ＴａｑⅠ四种限制性内切酶酶切及异源双链形成实验，分析了３０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者发病及病程中的ＴＣＲγ、ＩｇＨ基因重排，探讨上述方法在完善微小残留病检测中的应用和临床意义。３０例ＡＬＬ患者，１６例呈ＴＣＲγ重排，６例呈ＩｇＨ基因重排，其中１０例进行了酶切与异源双链形成实验。结果表明，每例患者均有不同的Ｖ区参与重排，形成不同的异源双链，且在重排中常有Ｎ区插入，形成新的酶切位点与异源双链，从而产生新的基因标志。其独特的基因重排方式具高度特异性，有助于微小残留病的检测及部分演化克隆的识别。

关键词：白血病微小残留病异源双链形成 PCR 酶切

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HCV基因5′-末端非编码区酶切分型与核心区基因分型初步比较

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中华微生物学和免疫学杂志 1995年第2期15卷 25-25页

作者：杜绍财王宇朱浚陈红松北京医科大学第二临床学院肝病研究所 100044 北京医科大学第二临床学院肝病研究所

取HCVⅡ型感染血清和Ⅲ型感染血清按不同比例混合,进行HCV RNA检测,酶切分型结果如下: 29例丙型肝炎患者两种分型方法基因型检测结果: (1)5′-NCR分型:①24/29例无HaeⅢ切点,在145bp处有cDNA带,判断为Ⅰ、Ⅱ型。②3/29例有HaeⅢ切点,酶... 详细信息

取HCVⅡ型感染血清和Ⅲ型感染血清按不同比例混合,进行HCV RNA检测,酶切分型结果如下: 29例丙型肝炎患者两种分型方法基因型检测结果: (1)5′-NCR分型:①24/29例无HaeⅢ切点,在145bp处有cDNA带,判断为Ⅰ、Ⅱ型。②3/29例有HaeⅢ切点,酶切后产生56bp、89bp2个片段,145bp处无cDNA带,判断为Ⅲ、Ⅳ型。③2/29有HaeⅢ切点,酶切后,产生56bp、89bp、145bp3个cDNA片段,判断为

关键词：酶切 HCV 分型

用限制性核酸内切酶酶切扩增的基因组DNA方法分析溶组织内阿米巴的致病性

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国际医学寄生虫病杂志 1993年第2期 92-92页

作者：周承

在巴西东北部地区,腹泻疾病常见,曾有溶组织内阿米巴高度流行的报道,然而从血清学研究和分离虫株酶谱分析表明这些溶组织内阿米巴大多是非致病株。本文采用聚合酶链反应(PCR)和限制性核酸内切酶酶切相

关键词：溶组织内阿米巴基因型巴西遗传型南美洲 DNA 酶切扩增致病性基因组染色体组

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新疆地区不同民族HCV基因酶切分型研究

中华肝脏病杂志 1998年第2期6卷 95-95页

作者：王云张希成谭欣成李小平刘志华王乐农兰州军区乌鲁木齐总医院肝病中心

新疆地区不同民族ＨＣＶ基因酶切分型研究王云，张希成，谭欣成，李小平，刘志华，王乐农我们对１４１例不同民族ＨＣＶ感染者进行了酶切基因分型研究，现报告如下。材料与方法：研究对象：１４１例为长年居住新疆各地区的汉族、维吾尔... 详细信息

新疆地区不同民族ＨＣＶ基因酶切分型研究王云，张希成，谭欣成，李小平，刘志华，王乐农我们对１４１例不同民族ＨＣＶ感染者进行了酶切基因分型研究，现报告如下。材料与方法：研究对象：１４１例为长年居住新疆各地区的汉族、维吾尔族、哈萨克族、回族、蒙古族ＨＣＶ感...

关键词：不同民族酶切 HCV 分型研究维吾尔族畏兀儿汉族民族新疆基因

大肠杆菌耐利福定突变基因的克隆及限制性酶切谱分析

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四川大学学报(医学版) 1996年第2期 13-13页

作者：段传可王浴生强文安华西医科大学基础医学院

大肠杆菌耐利福定突变基因的克隆及限制性酶切谱分析段传可，王浴生，强文安等。华西医科大学基础医学院。中国抗生素杂志１９９５；２０（３）∶１６３采用利福定（ｒｉｆａｎｄｉｎｅ，ＲＦＤ）浓度梯度平皿筛选得４株耐ＲＦＤ大肠杆... 详细信息

大肠杆菌耐利福定突变基因的克隆及限制性酶切谱分析段传可，王浴生，强文安等。华西医科大学基础医学院。中国抗生素杂志１９９５；２０（３）∶１６３采用利福定（ｒｉｆａｎｄｉｎｅ，ＲＦＤ）浓度梯度平皿筛选得４株耐ＲＦＤ大肠杆菌（ＲＦＤ的ＭＩＣ为５００μｇ／ｍ...

关键词：利福定突变基因酶切限制性大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属谱分析分析(数学)

用酶切和Southern杂交鉴定兔出血症病毒核酸型

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中国预防兽医学报 1993年第4期 11-11页

作者：吴康杜念兴南京农业大学

本研究组在以往的许多实验中证明,兔出血症病毒(RHDV)基因组为单股、线状DNA,但迄今仍有RHDV基因组为RNA的报道。为此,我们用酶切和Southern杂交进一步对RHDV核酸进行鉴定。取电泳纯RHDV核酸,分别用DNase和无DNase的RNase处理,与禾处理... 详细信息

本研究组在以往的许多实验中证明,兔出血症病毒(RHDV)基因组为单股、线状DNA,但迄今仍有RHDV基因组为RNA的报道。为此,我们用酶切和Southern杂交进一步对RHDV核酸进行鉴定。取电泳纯RHDV核酸,分别用DNase和无DNase的RNase处理,与禾处理的RHDV核酸一起作琼脂糖电泳。结果,未处理的和用RNase处理的RHDV核酸均在7.0kb处出现一条清晰的核酸带;用DNase处理的RHDV核酸则被完全降解,而不出现带。将此凝胶

关键词：兔出血症病毒核酸基因组 RNA 染色体组 RHDV Southern 酶切

聚合酶链反应结合酶切检测乙型肝炎表面抗原变异

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中华肝脏病杂志 1997年第3期5卷 149-149页

作者：何建文闻玉梅上海医科大学卫生部医学分子病毒学重点实验室

乙型肝炎病毒(HBV)编码包膜蛋白的 S 基因突变被认为是乙肝疫苗及乙肝免疫球蛋白(HBIG)联合免疫失败的原因之一。国外报道以 S 基因第587位核苷酸碱基因由鸟嘌呤变为腺嘌呤(587nt G→A)导致 HBsAg"α"抗原决定簇的145位氨基酸由甘氨酸... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)编码包膜蛋白的 S 基因突变被认为是乙肝疫苗及乙肝免疫球蛋白(HBIG)联合免疫失败的原因之一。国外报道以 S 基因第587位核苷酸碱基因由鸟嘌呤变为腺嘌呤(587nt G→A)导致 HBsAg"α"抗原决定簇的145位氨基酸由甘氨酸变为精氨酸(GGA→AGA)的变异株(145R)最为多见,国内也存在核变异株。目前多用聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)及对 PCR 产物直接测序检测 S 基因突变,因操作技术复杂,难以用于检测大量标本。此外,145R 突变改变了"α"决定簇的构型,使变异株与抗-HBs 的结合力降低,现用的诊断试剂不能有效地检测145R 的 HBsAg,故需建立一种简便、敏感、特异的检测145R 变异株的方法。通过对基因库中已有的35株不同亚型的 HBV 全基因组 DNA 作序列分析,发现587nt G→A突变可使 HBV 变异株出现1个新的 A1wN1 酶切点,同时丢失1个 BsiY1 酶切点,建立了 PCR 结合 AlwNl 和BsiYl 酶切检测145R 的方法并进行了初步应用。

关键词：聚合酶链反应 HBV 亚型酶切 PCR