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酶促反应色谱分离耦合过程参数分析

化学反应工程与工艺 1998年第1期14卷 56-60,86页

作者：何志敏杜翔吴金川余国琮天津大学化学工程研究所

对酶促反应色谱分离耦合过程进行了反应动力学参数及操作参数分析，并以蔗糖酶促水解为模型反应进行了正交实验研究。结果表明，该耦合过程对产物非竞争性抑制的消除效果要优于竞争性抑制。产率对底物浓度最为敏感，其次为洗脱速率和进... 详细信息

对酶促反应色谱分离耦合过程进行了反应动力学参数及操作参数分析，并以蔗糖酶促水解为模型反应进行了正交实验研究。结果表明，该耦合过程对产物非竞争性抑制的消除效果要优于竞争性抑制。产率对底物浓度最为敏感，其次为洗脱速率和进料体积，而转化率的敏感性次序由大到小依次为洗脱速率、底物浓度和进料体积。

关键词：酶促反应色谱分离耦合过程产物抑制参数分析

微量热法研究单底物酶促反应的热力学和动力学性质及过渡态的分析

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化学学报 1998年第7期56卷 625-630页

作者：望天志刘义吴鼎泉屈松生李卫萍万洪文武汉大学化学系武汉430072 华中师范大学化学系武汉430070

用ＬＫＢ－２１０７型微量热系统，测定了漆酶催化氧化３，４－二羟基苯甲醛、邻甲氧基酚、邻苯三酚、３，４，５－三羟基苯甲酸反应的热谱图，利用热谱图计算了米氏常数、反应速率常数和热力学参数，并应用过渡态理论对其催过程进行了... 详细信息

用ＬＫＢ－２１０７型微量热系统，测定了漆酶催化氧化３，４－二羟基苯甲醛、邻甲氧基酚、邻苯三酚、３，４，５－三羟基苯甲酸反应的热谱图，利用热谱图计算了米氏常数、反应速率常数和热力学参数，并应用过渡态理论对其催过程进行了分析，结果表明：稳定过渡态结构有利酶促反应，酶－底物在反应物时相互作用仅仅是降低酶的催化效率，提出两种可能提高酶催化剂效率的方法。

关键词：微量热法漆酶酶促反应热力学邻甲氧基酚

大球盖菇干制过程香气变化规律及与关键酶促反应的关联性

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食品科学技术学报 2023年第1期41卷 30-42页

作者：李佳霖杨焱李文陈万超刘晓风兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 上海市农业科学院食用菌研究所/农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室/国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术对不同干制时间段的大球盖菇子实体中挥发性风味化合物进行分离、鉴定,探究其在55℃恒温热风干制过程中挥发性风味物质的变化规律。在整个干制过程中共鉴定出245种挥发性风味化合物,其中包... 详细信息

采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术对不同干制时间段的大球盖菇子实体中挥发性风味化合物进行分离、鉴定,探究其在55℃恒温热风干制过程中挥发性风味物质的变化规律。在整个干制过程中共鉴定出245种挥发性风味化合物,其中包括34种醛类化合物、29种酯类化合物、40种醇类化合物、37种酮类化合物、7种酸类化合物、24种烷烃类化合物、26种烯烃类化合物及48种其他类化合物;醛、酮、醇类化合物占比较大,三者含量之和占总含量的65.49%~89.30%,为大球盖菇中主要的挥发性物质。通过气味活度值热图分析结合偏最小二乘判别分析法,筛选出45种关键气味化合物,其中1-辛烯-3-酮始终是干制过程中气味贡献最大的化合物,整个干制过程中共有20种差异性化合物。综合分析得到大球盖菇干制过程香气变化规律:随着干制的进行,样品土腥味、青草气味逐渐减弱,干制后期呈现焦香、麦芽香等风味,但整个过程中蘑菇味、土腥味仍是大球盖菇的关键风味特征。对合成醛、酮、醇类化合物的主要代谢途径中的关键酶酶活进行测定,发现此类酶会受热激活,随干制的进行酶活整体呈现显著下降趋势,在干制终点几乎没有活性。代谢酶活性与对应化合物含量相关性分析表明,脂肪氧合酶与醛酮类化合物具有较强的正相关性,乙醇脱氢酶与醇类化合物具有较强的负相关性,这与大球盖菇干制过程中醛、酮、醇类化合物含量的动态变化趋势一致。

关键词：大球盖菇干制挥发性风味化合物气味活度值酶促反应

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热动力学法研究间歇反应器中酶促反应动力学

化工学报 1997年第1期48卷 102-107页

作者：梁毅汪存信屈松生吴元欣李定或武汉大学化学系武汉430072 武汉化工学院化工系武汉430074

用热动力学法研究了间歇反应器中单底物酶促反应动力学,并详细讨论了产物竞争性抑制作用对反应速率的影响.用微量热法研究了过氧化氢酶催化分解过氧化氢和精氨酸酶催化水解L-精氨酸的反应,实验验证了本文热动力学法研究间歇反应器中单... 详细信息

用热动力学法研究了间歇反应器中单底物酶促反应动力学,并详细讨论了产物竞争性抑制作用对反应速率的影响.用微量热法研究了过氧化氢酶催化分解过氧化氢和精氨酸酶催化水解L-精氨酸的反应,实验验证了本文热动力学法研究间歇反应器中单底物酶促反应动力学的正确性.

关键词：热动力学法间歇反应器酶促反应动力学

热动力学的滴定量热法研究 Ⅱ.单底物酶促反应的热动力学

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化学学报 2000年第3期58卷 308-312页

作者：梁毅汪存信刘欲文屈松生邹国林中国科学院生物物理研究所武汉大学化学与环境科学学院武汉430072 武汉大学生命科学学院武汉430072

用滴定量热法分别建立了滴定期和停滴反应期单底物酶促反应热动力学的数学模型.根据这两种模型,可由一次实验的滴定量热曲线同时解析出单底物酶促反应的热力学参数(△_rH_m)和动力学参数(K_m和k_2).用滴定量热法研究了一个经典的单底物... 详细信息

用滴定量热法分别建立了滴定期和停滴反应期单底物酶促反应热动力学的数学模型.根据这两种模型,可由一次实验的滴定量热曲线同时解析出单底物酶促反应的热力学参数(△_rH_m)和动力学参数(K_m和k_2).用滴定量热法研究了一个经典的单底物酶促反应——过氧化氢酶催化分解过氧化氢反应的热动力学,由滴定期和停滴反应期热动力学模型解析出在298.15K和pH=7.0时该反应的米氏常数K_m分别为(5.41±0.24)×10^(-3)和(5.43±0.21)×10^(-3)mol·L^(-1),酶转换数k_2分别为(3.58±0.33)×10~3和(3.60±0.41)×10~3s^(-1),摩尔反应焓为(-86.75±0.88)kJ·mol^(-1),实验结果验证了上述热动力学模型的正确性.

关键词：滴定量热法酶促反应热动力学过氧化氢酶

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微量热法研究单底物酶促反应的产物抑制作用

化学学报 1996年第1期54卷 38-44页

作者：梁毅汪存信吴鼎泉屈松生武汉大学化学系

本文建立了有产物抑制的单底物酶促反应动力学的对比进度方程和热动力学的数学模型.根据此模型,可由反应的热谱曲线方便地解析出动力学参数(K_m,K_i和V_m)和摩尔反应焓(△_rH_m),并同时确定产物的抑制类型.用微量热法研究了精氨酸酶催... 详细信息

本文建立了有产物抑制的单底物酶促反应动力学的对比进度方程和热动力学的数学模型.根据此模型,可由反应的热谱曲线方便地解析出动力学参数(K_m,K_i和V_m)和摩尔反应焓(△_rH_m),并同时确定产物的抑制类型.用微量热法研究了精氨酸酶催化水解L-精氨酸的热动力学,确定水解产物L-鸟氨酸属于竞争性可逆抑制剂,298.15K和pH 9.4时L-鸟氨酸与精氨酸酶作用的抑制常数K_i=1.22×10^(-3)mol·L^(-1).实验结果验证了本文有产物抑制的单底物酶促反应热动力学研究法的正确性.

关键词：微量热法产物抑制酶促反应精氨酸酶

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不同磁场对过氧化氢酶活性及酶促反应的影响

天津大学学报 2009年第10期42卷 897-900页

作者：刘勇贾绍义吴松海天津大学化工学院天津300072

在不同的磁场条件下研究了Nu-Fe-B静磁场对过氧化氢酶活性和反应动力学参数及二级结构的影响.采用磁场强度为0.15.T、0.30.T、0.45.T的静磁场分别处理过氧化氢酶溶液,以曝磁时间为参数,对酶的活性、反应动力学参数、二级结构分别进行测... 详细信息

在不同的磁场条件下研究了Nu-Fe-B静磁场对过氧化氢酶活性和反应动力学参数及二级结构的影响.采用磁场强度为0.15.T、0.30.T、0.45.T的静磁场分别处理过氧化氢酶溶液,以曝磁时间为参数,对酶的活性、反应动力学参数、二级结构分别进行测定.结果表明,与对照样相比,处理过的过氧化氢酶活性增大,当作用时间为1.h时,活性最大,3个磁场下酶的活性分别增加了18.2%、23.5%和25.8%;用不同的磁场对过氧化氢酶溶液分别作用1.h,与对照样相比,随着磁场强度的增加,Km值从0.027.85,mol/L增加到0.087.24,mol/L,Vm值从0.035.97,mol/(L·min)增加到0.095.11,mol/(L·min);同时,圆二色光谱测定结果表明磁场处理过的过氧化氢酶的二级结构也发生变化,这可能是由于磁场对过氧化氢酶辅酶中的Fe3+影响而引起的.

关键词：稳恒磁场过氧化氢酶活性酶促反应二级结构

利用表面等离子体谐振生物传感器实时监测酶促反应的新方法

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分析化学 2003年第12期31卷 1425-1429页

作者：向四海崔大付蔡浩原陈翔中国科学院电子学研究所传感技术国家重点实验室中国科学院电子学研究所传感技术国家重点实验室北京100080

在理论上 ,基于表面等离子体谐振 (surfaceplasmonresonance,SPR)生物传感器的酶促反应检测分析方法被证明是可行的。这种方法与通常SPR传感器检测技术不同 ,它消除通常当成检测目标的表面吸附信号 ,而检测通常认为是噪声的本体折射率... 详细信息

在理论上 ,基于表面等离子体谐振 (surfaceplasmonresonance,SPR)生物传感器的酶促反应检测分析方法被证明是可行的。这种方法与通常SPR传感器检测技术不同 ,它消除通常当成检测目标的表面吸附信号 ,而检测通常认为是噪声的本体折射率变化信号 ,以此实时检测酶促反应的动态过程。利用自产的SPR 2 0 0 0生化分析仪 ,在检测胶原酶Ⅰ降解胶原Ⅰ的实验中检测到了反应引起的反应液本体折射率的上升变化 ,从而证明了这种新颖的检测方法实际上也是可行的。这种技术一旦成熟 ,可以用来进行酶学分析及酶靶标的药物筛选研究开发。

关键词：表面等离子体谐振本体折射率酶促反应生物传感器

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酶促反应制备壳寡糖条件的研究

中国生物工程杂志 2008年第11期28卷 67-71页

作者：孙玉英张继泉王淑军刘万顺韩宝芹淮海工学院海洋学院连云港222005 中国科学院海洋研究所青岛266071 中国海洋大学海洋生命学院青岛266003

通过膜分离法从Microbacterium ***01的发酵液中分离到内切壳聚糖酶ChiN,并对其酶解制备壳寡糖条件进行了优化,获得的酶解产物数均分子量为1200。经薄层层析与HPLC分析,降解产物中不含单糖,初步说明降解产物为壳寡糖。酶解制备壳寡糖反... 详细信息

通过膜分离法从Microbacterium ***01的发酵液中分离到内切壳聚糖酶ChiN,并对其酶解制备壳寡糖条件进行了优化,获得的酶解产物数均分子量为1200。经薄层层析与HPLC分析,降解产物中不含单糖,初步说明降解产物为壳寡糖。酶解制备壳寡糖反应条件温和,操作简便,为实现壳寡糖产业化奠定了基础。

关键词：壳聚糖酶壳寡糖酶促反应