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血红蛋白(Hb)是脊椎动物红细胞内的呼吸蛋白，是血液中运输氧气的主要物质，研究其直、间接电化学行为对于研究生命体内的电子转移过程，了解生命过程的氧化还原机理及建立高灵敏的检测方法等方面具有非常实际的意义。纳米生物分析化学是近年来研究的热点，由于纳米粒子具有特殊的理化性质，既可以用于制备修饰电极，又可以用于生物大分子的标记。电分析化学方法具有实时、快速、灵敏、易于微型化等特点，所以将它应用于研究Hb的电化学行为是一种非常有效的方法。本论文将Hb的分析检测同电分析化学方法相结合，开展了Hb的电化学行为研究。为了满足纳米粒子标记物的需要开展了电化学生物探针用功能化纳米粒子的合成工作。本论文主要包括以下内容： 1．开展了Hb的间接电化学分析的研究。Hb含有铁卟啉活性中心，具有类似过氧化物酶(POD)的催化活性，能够催化HO氧化氢供体。本文利用Hb这一催化活性，以滴汞电极为工作电极，邻联茴香胺(ODA)和邻联甲苯胺(OT)为氢供体底物，应用极谱分析法分别对Hb催化HO氧化ODA和OT的反应进行了研究。实验结果表明这两个体系催化反应的产物在汞电极上都有很好的极谱还原电流响应。基于反应产物的还原电流在一定条件下与Hb和HO的浓度都成正比，建立了一种用于检测Hb和微量HO的电化学分析的方法，并将该方法应用于新鲜雨水中HO含量的测定，得到了满意的结果。 2．开展了Hb在修饰电极上的直接电化学行为研究。以Nafion／纳米碳酸钙／离子液体修饰碳糊电极为工作电极，考察了Hb在该修饰电极上的直接电化学行为。实验结果表明，Hb在Nafion／纳米碳酸钙膜内基本保持了其生物活性，并且在该修饰电极上其电子传递能力明显增强，有一对准可逆的氧化还原峰。对Hb的电化学行为进行了求解，其式电位不随扫速的变化而变化，电子转移数n为1.028，电子传递系数α为0.487，反应速率常数k=0.128s。 3．开展了功能化半导体纳米粒子的合成工作。作为生物探针用纳米粒子标记物，纳米粒子的水溶性和生物相容性是制备过程中的关键步骤，所以合成生物相容性纳米粒子是目前研究工作的重点。采用装置简单、价格低廉的方法，以巯基

关键词：血红蛋白H2O2 邻联茴香胺邻联甲苯胺极谱分析离子液体修饰碳糊电极电化学生物探针纳米粒子巯基乙酸

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碱性品红等苯胺衍生物的光谱和电化学以及与DNA相互作用的研究

碱性品红等苯胺衍生物的光谱和电化学以及与DNA相互作用的研究

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作者：王增健青岛科技大学

学位级别：硕士

本论文选取含有苯胺结构的若干有机小分子(碱性品红、邻氨基酚、邻联茴香胺)作为对象,分别对碱性品红的光谱和电化学性质及与DNA的相互作用,聚邻氨基酚/Ni膜的制备、电催化性质及DNA的固定,邻联茴香胺在铂网栅光透电极上的薄层光谱电化... 详细信息

本论文选取含有苯胺结构的若干有机小分子(碱性品红、邻氨基酚、邻联茴香胺)作为对象,分别对碱性品红的光谱和电化学性质及与DNA的相互作用,聚邻氨基酚/Ni膜的制备、电催化性质及DNA的固定,邻联茴香胺在铂网栅光透电极上的薄层光谱电化学性质进行了研究。运用循环伏安法和可见吸收光谱法研究了碱性品红和DNA的相互作用,实验证明碱性品红对dsDNA比对ssDNA具有更高的选择性结合能力,可望应用于选择性区分dsDNA和ssDNA以及在DNA生物传感器中作为杂交指示剂。并制备了聚碱性品红修饰的玻碳电极,DNA在此电极上有电化学响应。根据聚苯胺薄膜良好的导电性能选择了邻氨基酚作为聚合对象,运用电化学聚合法在Pt电极上制备了嵌入金属离子Ni的聚邻氨基酚导电聚合物膜(Ni/P-OAP/Pt),该膜有良好的伏安特性,并且具有三维立体结构。成功地将DNA固定在电极表面。同时利用聚合物膜中Ni能催化葡萄糖的电氧化的性质,实现Ni/P-OAP/Pt电极对葡萄糖的电催化测定。葡萄糖在此电极上的电催化氧化峰电流与葡萄糖含量在0.03～0.08 m mol·L范围内呈良好的线性关系。采用电化学和光谱电化学方法,在不同pH值的B-R缓冲溶液中对伏安酶联免疫分析体系中灵敏底物邻联茴香胺(ODA)的电氧化性质进行了研究。发现在oH 2.0 B-R缓冲溶液中ODA的电氧化为2e的一步转移过程,在pH 4.7 B-R缓冲溶液的情况下则为分步的两个单电子的电化学氧化过程。pH 9.0的情况下还原峰基本消失,表现为不可逆的电氧化过程。

关键词：碱性品红邻氨基酚邻联茴香胺紫外-可见吸收光谱法电化学导电聚合物薄膜脱氧核糖核酸

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基于芯片三电极系统检测辣根过氧化物酶的研究

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海南师范大学学报（自然科学版） 2021年第3期34卷 279-284页

作者：邵波党雯迪闫丽君孙云秀施璠黄玉豪王晓峰孙伟海南师范大学化学与化工学院海口市功能材料与光电化学重点实验室海南海口571158 清华大学精密仪器系北京100084

本文设计一种芯片三电极系统,以金盘电极为工作电极,金片电极为辅助电极,Ag/AgCl电极为参比电极,以邻联茴香胺(ODA)和邻苯二胺(OPD)两种常见的底物体系建立了检测辣根过氧化物酶(HRP)的方法。HRP能够催化H_(2)O_(2)氧化ODA和OPD,其氧化... 详细信息

本文设计一种芯片三电极系统,以金盘电极为工作电极,金片电极为辅助电极,Ag/AgCl电极为参比电极,以邻联茴香胺(ODA)和邻苯二胺(OPD)两种常见的底物体系建立了检测辣根过氧化物酶(HRP)的方法。HRP能够催化H_(2)O_(2)氧化ODA和OPD,其氧化产物在芯片金电极上分别于-0.23 V和-0.50 V(***/AgCl)处产生一个灵敏的还原峰,峰电流随HRP浓度增加而增大。对于ODA-H_(2)O_(2)体系,测定游离HRP的范围是5.0×10^(-7)~1.0×10^(-5)g/mL,检出限为1.0×10^(-7)g/mL(3σ)。对于OPD-H_(2)O_(2)体系,测定游离HRP的线性范围是1.0×10^(-8)~1.0×10^(-4)g/mL,检出限为1.0×10^(-9)g/mL(3σ)。

关键词：芯片电极邻联茴香胺邻苯二胺差分脉冲伏安法辣根过氧化物酶

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眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶活性检测方法的优化

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海峡药学 2009年第5期21卷 29-31页

作者：陈洲黄剑钧薛玲许云禄林丽珊福建医科大学药学院福建医科大学基础医学院福州350004 莆田学院药学系莆田351100

目的优化眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase of Naja atra venom,NAV-LAO)酶活性测定方法。方法采用邻联茴香胺(ODA)、邻苯二胺(OPD)和3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)三种供氢体测定NAV-LAO的活性并比较其灵敏度和重复性。结... 详细信息

目的优化眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase of Naja atra venom,NAV-LAO)酶活性测定方法。方法采用邻联茴香胺(ODA)、邻苯二胺(OPD)和3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)三种供氢体测定NAV-LAO的活性并比较其灵敏度和重复性。结果OPD方法测定L-氨基酸氧化酶酶活性的检测限为***-1,相对标准偏差(RSD)为2.1%。结论OPD方法测定NAV-LAO活性具有较好的灵敏度和稳定性。

关键词：眼镜蛇毒 L-氨基酸氧化酶邻联茴香胺邻苯二胺 3,3′,5,5′-四甲基联苯胺

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以ODA为底物固体电极伏安法测定辣根过氧化物酶及其标记物的研究

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青岛科技大学学报（自然科学版） 2003年第3期24卷 202-205页

作者：王海玉焦奎孙伟王光杰青岛科技大学化学与分子工程学院山东青岛266042

以玻碳电极为工作电极研究了邻联茴香胺 ( ODA)为底物微分脉冲伏安法测定辣根过氧化物酶 ( HRP)及其标记物的方法。 HRP能够催化 H2 O2 氧化 ODA,其反应产物在玻碳电极上 - 0 .31 V ( ***/Ag Cl)左右被还原产生一个灵敏的还原峰 ,还原... 详细信息

以玻碳电极为工作电极研究了邻联茴香胺 ( ODA)为底物微分脉冲伏安法测定辣根过氧化物酶 ( HRP)及其标记物的方法。 HRP能够催化 H2 O2 氧化 ODA,其反应产物在玻碳电极上 - 0 .31 V ( ***/Ag Cl)左右被还原产生一个灵敏的还原峰 ,还原峰电流随着酶浓度的增大而增大 ,借助此还原电流可以测定 HRP,并可用于以 HRP为标记物的酶免疫分析。对酶催化反应条件和酶催化反应产物的测定条件进行了详细的研究 ,在最佳实验条件下测定游离 HRP的线性范围是 4.0× 1 0 - 10 ～ 6.0× 1 0 - 8g· m L- 1,检测限为3.3× 1 0 - 10 g· m L- 1;测定游离的酶标记物 ( Ig G- HRP) ,稀释范围为 1∶ 2 0 0 0～1∶ 1 0 0 0 0 0 0 ,最大稀释比为 1∶ 1 0 0 0 0 0 0。

关键词： ODA 邻联茴香胺玻碳电极微分脉冲伏安法测定辣根过氧化物酶

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