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高效液相色谱-串联质谱法测定食用动物组织中那西肽残留

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中国食品卫生杂志 2022年第4期34卷 755-760页

作者：聂晨韩静静赵飒杨帆何京澄王培锋李明哲林超张鸿伟青岛海关技术中心山东青岛266002 中国海洋大学食品科学与工程学院山东青岛266002

目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定食用动物组织(猪肉、猪肝脏、猪肾脏、鸡肉、鸡肝脏及鸡肾脏)中那西肽残留含量。方法动物组织中那西肽残留经0.1%甲酸乙腈提取,Captiva ND固相萃取柱净化,液相色谱-串联质谱多反应监测负离子模式... 详细信息

目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定食用动物组织(猪肉、猪肝脏、猪肾脏、鸡肉、鸡肝脏及鸡肾脏)中那西肽残留含量。方法动物组织中那西肽残留经0.1%甲酸乙腈提取,Captiva ND固相萃取柱净化,液相色谱-串联质谱多反应监测负离子模式扫描测定,基质匹配标准曲线外标法定量。结果各相关基质中那西肽在2~200μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数r>0.99,各动物组织中的检出限为2.0μg/kg,定量限为7.0μg/kg。在3.5、7.0和70μg/kg添加浓度下,那西肽的回收率范围为76.27%~92.31%,相对标准偏差为2.15%~8.03%。结论该方法简便快速、准确度高和重复性良好,适用于食用动物组织中那西肽残留的监测与定量测定。

关键词：高效液相色谱-串联质谱法那西肽食用动物组织

基于吲哚酸单元的那西肽生物合成途径中酶底物容忍度研究

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有机化学 2020年第11期40卷 3828-3836,M0011页

作者：范亚飞张鄂郭恒牟柠陈单丹王文贵王守锋刘文济南大学化学化工学院山东省氟化学化工材料重点实验室济南250022 中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室上海200032 中国科学院上海有机化学研究所湖州生物制造中心浙江湖州313000

那西肽(NOS)是硫肽类抗生素的典型代表,具有非常好的抗菌活性,但水溶性差以及生物利用度低等问题限制了其临床上的应用.由于其结构复杂,采用化学全合成方式获得理化性质改善的类似物难以进行.在前期那西肽生物合成研究的基础上,以侧环3... 详细信息

那西肽(NOS)是硫肽类抗生素的典型代表,具有非常好的抗菌活性,但水溶性差以及生物利用度低等问题限制了其临床上的应用.由于其结构复杂,采用化学全合成方式获得理化性质改善的类似物难以进行.在前期那西肽生物合成研究的基础上,以侧环3-甲基-2-吲哚酸(MIA)类似物作为化学探针,通过探针分子与突变株共同发酵并结合发酵产物的高分辨质谱数据,探究了那西肽生物合成酶的底物容忍度.研究结果表明,那西肽生物合成酶对F, Cl, CH3取代的MIA类似物有一定的耐受能力,对大位阻取代基(NO2, CF3, Ph)的MIA类似物不能耐受,同时MIA上取代基团的结构大小和性质也影响了NOS生物合成途径中相关酶蛋白对其识别、转运和上载等步骤.不仅探究了NOS生物合成途径中相关酶蛋白的底物容忍度,有望通过生物合成途径工程获得NOS的类似物;同时为采用酶的定向进化技术以改善NOS生物合成过程中限速步骤酶的底物容忍度,拓展利用NOS产生菌获得更多类似物提供了借鉴.

关键词：那西肽 3-甲基-2-吲哚酸突变生物合成:化学小分子探针酶底物容忍度

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那西肽提取工艺研究

中国动物保健 2022年第8期24卷 95-97页

作者：闵江娄燕刘正光王丹丹赵才兵梁景乐山东胜利生物工程有限公司山东济宁272000 中牧实业股份有限公司北京100095

优化那西肽提取工艺,80%四氢呋喃溶液为提取溶剂,提取那西肽,经过浓缩、结晶、重结晶,制备高含量那西肽产品。得到最佳提取工艺条件是:浸提pH7.0,浸提温度25℃,两次浸提时间1h,一次浸提料液比1:7,二次浸提料液比1:4,粗精粉重结晶得到纯... 详细信息

优化那西肽提取工艺,80%四氢呋喃溶液为提取溶剂,提取那西肽,经过浓缩、结晶、重结晶,制备高含量那西肽产品。得到最佳提取工艺条件是:浸提pH7.0,浸提温度25℃,两次浸提时间1h,一次浸提料液比1:7,二次浸提料液比1:4,粗精粉重结晶得到纯品,含量95%。

关键词：那西肽提取工艺四氢呋喃溶液

那西肽脂质体的制备及其体外抗乙肝病毒的研究

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药学学报 2005年第5期40卷 462-465页

作者：蔡钦生黄海冯美卿周珮复旦大学药学院上海200032

目的　制备那西肽脂质体并了解其体外抗乙肝病毒作用。方法　以超声法和脱氧胆酸钠法制备那西肽脂质体,同时考察其包封率和粒径大小的影响因素。以HPLC测定那西肽含量,以透射电镜观察其形态,以激光散射法测定其粒径大小,以HepG2 2. 2. 1... 详细信息

目的　制备那西肽脂质体并了解其体外抗乙肝病毒作用。方法　以超声法和脱氧胆酸钠法制备那西肽脂质体,同时考察其包封率和粒径大小的影响因素。以HPLC测定那西肽含量,以透射电镜观察其形态,以激光散射法测定其粒径大小,以HepG2 2. 2. 15细胞模型检测那西肽脂质体对乙肝病毒HBsAg和HBeAg的抑制率。结果　采用氯仿甲醇混合液(2∶1,v/v)作溶剂的那西肽脂质体包封率高于二氧六环作溶剂的。随着那西肽与卵磷脂的重量比增大,脂质体包封率呈下降趋势。脱氧胆酸钠法中的脱氧胆酸钠可以调节脂质体粒径的大小,它与卵磷脂的重量比越大脂质体的粒径越小。添加保护剂的脂质体在-20℃放置2年后基本稳定。脂质体中那西肽质量浓度为1 25, 2 5和5 0μg·mL-1时,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别达到(46 .9±2. 6)%, (55. 4±1 .2)%, (65±3)%和(15. 1±2 .3)%, (36 .2±1.7)%, (36 .8±2. 5)%。结论　超声法或脱氧胆酸钠法可以制备那西肽脂质体;那西肽脂质体对乙肝病毒HBsAg和HBeAg抑制效果优于游离那西肽。

关键词：那西肽脂质体包封率抗乙肝病毒粒径大小

那西肽(Nosiheptide)对肉仔鸡免疫功能的影响

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中国兽医学报 2005年第5期25卷 534-535页

作者：李红军邹晓庭浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室浙江杭州310029

1日龄艾维茵肉仔鸡240只,随机分为4组,每组4个重复,每个重复15只。A0为空白对照组,喂基础日粮;A1喂基础日粮+1.25 m g/kg那西肽(N os iheptide);A2喂基础日粮+2.5 m g/kg那西肽;A3喂基础日粮+5 m g/kg那西肽。试验期42 d。试验结束后,... 详细信息

1日龄艾维茵肉仔鸡240只,随机分为4组,每组4个重复,每个重复15只。A0为空白对照组,喂基础日粮;A1喂基础日粮+1.25 m g/kg那西肽(N os iheptide);A2喂基础日粮+2.5 m g/kg那西肽;A3喂基础日粮+5 m g/kg那西肽。试验期42 d。试验结束后,测定各组胸腺、脾脏和腔上囊系数及外周血和脾脏淋巴细胞的转化率。试验结果表明,那西肽对肉仔鸡的免疫器官发育及T、B淋巴细胞转化有抑制作用,且抑制作用随剂量的增加而增加。

关键词：那西肽肉仔鸡免疫功能细胞增殖

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那西肽对肉仔鸡生长性能及胴体品质的影响

中国抗生素杂志 2010年第2期35卷 152-155页

作者：史莹华张伟毅王先科王成章河南农业大学牧医工程学院郑州450002

本试验选用120羽1日龄健康Avian肉仔鸡,随机分成3个处理,每个处理4个重复,每个重复10羽,分别饲喂基础日粮(对照组),基础日粮+5mg/kg黄霉素(黄霉素组),基础日粮+2.5mg/kg那西肽(那西肽组),以探讨那西肽对肉仔鸡生长性能和胴体品质的影响... 详细信息

本试验选用120羽1日龄健康Avian肉仔鸡,随机分成3个处理,每个处理4个重复,每个重复10羽,分别饲喂基础日粮(对照组),基础日粮+5mg/kg黄霉素(黄霉素组),基础日粮+2.5mg/kg那西肽(那西肽组),以探讨那西肽对肉仔鸡生长性能和胴体品质的影响。结果表明:(1)黄霉素组、那西肽组日增重比对照组分别提高了2.04%(P那西肽组比对照组的屠宰率提高了3.22%(P0.05),腿肌率提高了3.71%(P>0.05),腹脂率降低了18.40%(P0.05)。试验结果表明,饲料中添加那西肽可以明显促进肉仔鸡的生长,改善肉仔鸡的胴体品质,而且那西肽的效果显著优于黄霉素。

关键词：那西肽黄霉素肉仔鸡生长性能胴体品质

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高产那西肽活跃链霉菌的高通量选育

食品与发酵工业 2021年第7期47卷 8-13页

作者：张小朋陈贵才严发杰郭李坤曾伟主周景文甘肃汇能生物工程有限公司甘肃武威733000 浙江汇能生物股份有限公司浙江海宁314422 生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室(江南大学) 江苏无锡214122

为提高活跃链霉菌(Streptomyces actuosus)发酵生产那西肽的强度,对1株已应用于工业化生产那西肽的菌株11-27进行了恒温常压等离子体诱变(atmospheric and room temperature plasma,ARTP),并对最终获得的高产突变菌株进行了工业化生产... 详细信息

为提高活跃链霉菌(Streptomyces actuosus)发酵生产那西肽的强度,对1株已应用于工业化生产那西肽的菌株11-27进行了恒温常压等离子体诱变(atmospheric and room temperature plasma,ARTP),并对最终获得的高产突变菌株进行了工业化生产应用。首先,根据那西肽的分子特征,建立了以FeCl_(3)为络合显色剂的多孔板高通量筛选方法。应用ARTP诱变方法对菌株11-27进行诱变处理,最终获得了1株高产突变菌株22-3B6,其那西肽的效价相对出发菌株11-27提高了13.7%。对高产菌株进行遗传稳定性分析后,在50 m^(3)工业生产罐上对最优菌株进行了16个批次的发酵验证,结果表明诱变菌株22-3B6生产那西肽的平均效价较对照菌株提高了10.1%。该文所建立的高通量筛选方法能简单、快速地获得高产突变菌株,从而有效地降低了那西肽的工业化生产成本。

关键词：那西肽活跃链霉菌高通量筛选常压室温等离子体诱变

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液质联用法快速分析畜禽肉中的那西肽

中国口岸科学技术 2022年第11期4卷 67-71页

作者：贾江钢范春蕾张益邹鲁倪梅林湛嘉曹国洲陈先锋宁波中盛产品检测有限公司宁波315012 宁波检验检疫科学技术研究院宁波315012 湖南省平江县梅县镇政府岳阳410412

本文建立了畜禽肉中那西肽的简便快捷、可靠灵敏的检测方法。采用乙腈+二氯甲烷混合溶液匀浆提取,正己烷脱脂后,提取液氮吹至近干,用1 mol/L氢氧化钠在80℃下水解1 h后,正己烷再次脱脂,通过BEH C18色谱柱保留,获得良好的峰形,UPLC-MS/M... 详细信息

本文建立了畜禽肉中那西肽的简便快捷、可靠灵敏的检测方法。采用乙腈+二氯甲烷混合溶液匀浆提取,正己烷脱脂后,提取液氮吹至近干,用1 mol/L氢氧化钠在80℃下水解1 h后,正己烷再次脱脂,通过BEH C18色谱柱保留,获得良好的峰形,UPLC-MS/MS在电喷雾负离子模式下进行分析。优化后的前处理方法能充分去除复杂基质的干扰,特异性好,灵敏度高。定性检测限和定量检测限范围分别为2.5μg/kg和5μg/kg。基质添加曲线定量的线性良好,相关系数均不低于0.9950。对于鸡肉,3个添加水平的平均回收率分别为94.4%~108.6%,相应的变异系数分别为3.9%~8.3%,批间变异系数为4.5%,对于猪肉,3个添加水平的平均回收率分别为92.1%~111.1%,相应的变异系数分别为3.0%~5.5%,批间变异系数为3.4%。

关键词：那西肽前处理方法液质联用

紫外诱变和氨基酸抗性筛选选育那西肽高产菌株

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中国抗生素杂志 2011年第8期36卷 586-589,605页

作者：秦艳飞薛正莲项驷文李恒奎王洲安徽工程大学生物与化学工程学院微生物发酵安徽省工程技术研究中心芜湖241000

目的筛选出那西肽高产菌株。方法以活跃链霉菌CB040517作为出发菌株,通过紫外-氯化锂诱变处理,并结合前体复合氨基酸抗性筛选,选育那西肽高产菌。结果通过致死率和正突变率的考察,确定紫外最佳诱变剂量为100s。在分离培养基上层加入氯... 详细信息

目的筛选出那西肽高产菌株。方法以活跃链霉菌CB040517作为出发菌株,通过紫外-氯化锂诱变处理,并结合前体复合氨基酸抗性筛选,选育那西肽高产菌。结果通过致死率和正突变率的考察,确定紫外最佳诱变剂量为100s。在分离培养基上层加入氯化锂和底层加入复合氨基酸进行正突变株的定向筛选,选育得到那西肽高产菌株UV-19-A12,其摇瓶效价达904.00μg/mL,比出发菌株提高72.5%,经过五代斜面传代试验考察,该菌株遗传性状稳定。结论紫外诱变和氨基酸抗性筛选可以获得那西肽高产菌株。

关键词：活跃链霉菌那西肽紫外诱变氨基酸抗性筛选