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远程缺血后适应中大鼠海马CA1区TLR4和IL-6的表达变化及其意义

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中国免疫学杂志 2015年第8期31卷 1045-1048页

作者：张江常莉莎王大力周涛刘会英华北理工大学附属医院神经内科二病区唐山063000

目的:观察大鼠远程缺血后适应时海马CA1区TLR4、IL-6表达变化并探讨其意义。方法:72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、对照组、远程缺血后适应组,各组又分为12 h、24 h、48 h、72 h各时间点组,每组6只。应用改良Longa法建立大鼠脑缺血再... 详细信息

目的:观察大鼠远程缺血后适应时海马CA1区TLR4、IL-6表达变化并探讨其意义。方法:72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、对照组、远程缺血后适应组,各组又分为12 h、24 h、48 h、72 h各时间点组,每组6只。应用改良Longa法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型并以此为对照组,在再灌注即刻用止血带结扎/放松双后肢根部各30 min循环3次,作为远程缺血后适应处理方法。HE染色观察大鼠海马CA1区组织病理学变化,免疫组织化学染色观察大鼠海马CA1区TLR4和IL-6的表达。结果:在大鼠海马CA1区,远程缺血后适应组神经元缺失、细胞肿胀较对照组明显减轻。与假手术组相比,对照组与远程缺血后适应组TLR4和IL-6表达明显增高(P远程缺血后适应组TLR4和IL-6的表达较对照组明显减少(P远程缺血后适应具有脑保护作用,这种作用可能与抑制TLR4和IL-6表达有关。

关键词：远程缺血后适应 TLR4 IL-6 表达

远程缺血后适应对大鼠脑缺血的保护作用及其对Akt，GSK-3β的影响

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远程缺血后适应对大鼠脑缺血的保护作用及其对Akt，GSK-3β的影响

作者：宋兆晶山西医科大学

学位级别：硕士

目的：近来研究发现,缺血后适应(Ischemic postconditioning, PC)对大鼠脑缺血/再灌注(Ischemia/reperfusion, I/R)损伤具有神经保护作用,可以激活多种神经保护机制。而对于远程缺血后适应(Remote ischemic postconditioning,RPC)的研究甚少。本研究的目的是通过制备大鼠大脑中动脉阻塞(Middle cerebral artery occlusion, MCAO)线栓模型,初步探讨研究RPC对大鼠缺血性脑损伤是否具有保护作用,以及RPC对大鼠脑内蛋白激酶B(Protein kinase B, Akt)、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β)表达的影响。方法：本实验分为两部份：第一部分建立稳定的大鼠MCAO线栓模型,证明远程缺血后适应对缺血脑组织的保护作用。24只健康雄性Sprague Dawley (SD)大鼠(280-310g)随机分为3组,每组8只：(1)对照组(control):大鼠大脑中动脉阻塞2小时,再灌注24小时。(2)缺血即刻后适应组(Remote ischemic postconditioning at beginning of ischemia, I-RPC):大鼠大脑中动脉缺血即刻给予双下肢缺血训练。(3)再灌注即刻后适应组(Remote ischemic postconditioning at beginning of reperfusion, R-RPC):大鼠大脑中动脉缺血再灌注即刻给予双下肢缺血训练。双下肢缺血训练的方法是分离大鼠双侧股动脉,夹闭10min,放开10min,如此三个循环。各组大鼠再灌注24小时后处死,TTC染色拍照,Image-Pro Plus软件分析,计算脑梗死体积。12分评分法进行神经功能评分。第二部分探讨远程缺血后适应脑保护作用的机制,研究其对Akt, GSK-3β通路的影响。24只健康雄性SD大鼠(280-310g)随机分为4组,每组6只：假手术组(sham);control;I-RPC;R-RPC,各组大鼠于再灌注24小时处死,留取石蜡切片标本。HE染色计算脑梗死体积以及免疫荧光半定量测定Akt, GSK-3β的磷酸化水平。再取16只健康雄性SD大鼠按以上分组留取脑蛋白标本,Western blot定量测定Akt、GSK-3β磷酸化水平。结果：(1)TTC染色和HE染色脑梗死体积分析显示,I-RPC组和R-RPC组较对照组梗死体积明显减少,具有统计学差异(p后神经功能评分显示,I-RPC组和R-RPC组较对照组评分有减少趋势,但无统计学差异。(3)免疫荧光结果显示I-RPC组和R-RPC组缺血侧皮质区和基底节区p-Akt, p-GSK-3β的磷酸化水平较对照组增高。但只有R-RPC组与对照组比较具有统计学差异(p缺血侧皮质区和基底节区p-Akt, p-GSK-3β的磷酸化水平较对照组明显增高,具有统计学差异(p0.05)。这与免疫荧光结果相吻合。结论：本研究建立了稳定的大鼠大脑中动脉阻塞远程缺血后适应模型,证明远程缺血后适应可以减少大鼠急性缺血脑梗死体积,改善神经功能评分,具有神经保护作用。并且证实大鼠脑内Akt、GSK-3β磷酸化水平增高可能是远程缺血后适应发挥脑保护作用的机制之一。

关键词：脑缺血远程缺血后适应 Akt GSK-3β

远程缺血后适应对急性心肌梗死急诊PCI患者的心脏保护作用

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远程缺血后适应对急性心肌梗死急诊PCI患者的心脏保护作用

作者：石向欣河北大学

学位级别：硕士

目的:观察远程缺血后适应(Remote ischemic post-conditioning,RIPost C)对急性ST段抬高型心肌梗死(ST elevation myocardial infarction,STEMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(Percutaneous coronary intervention,PCI)术后缺血再灌注心肌的保护作用,探讨其对心功能和预后的影响。方法:选取2017年12月-2018年10月,入住河北大学附属医院心内科,确诊为STEMI行急诊PCI的患者90例,其中男性71例(78.9%),女性19例(21.1%),平均年龄60.81±10.61岁,随机分为RIPost C组45例和对照组45例。RIPost C组:急诊PCI术前30-60分钟于左侧上肢肘中线上方约2cm处绑缚手动血压袖带,并充气加压至高于收缩压20mm Hg,造成左侧上肢血流中断,充气5 min后放气减压至0mm Hg,恢复血流5 min,共重复3次,共计30min。对照组:仅有血压袖带而无充气加压造成上肢缺血的过程,持续时间与RIPost C组相同。两组患者于PCI术前及术后4、8、16、24、72h静脉采血6次,分别检测肌酸激酶同工酶(Creatine Kinase MB,CK-MB),术前及术后24h检测C反应蛋白(C-reaction protein,CRP),记录CK-MB峰值。术前、术后90min行18导联心电图,记录术后90min内ST段回落指数(ST-segment resolution index,STRI)。记录两组患者梗死相关血管(Infarction related artery,IRA)开通前后TIMI血流分级,记录术中及术后2h内再灌注心律失常的发生率。所有患者住院期间、出院后3月行单光子发射型计算机断层显像(Single photon emission computed tomography,SPECT)、经胸超声心动图检查,记录静息灌注总评分(Summed rest score,SRS),左心室射血分数(Left ventricular ejection f Fraction,LVEF)、左心室舒张末期内径(Left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)、左室舒张末期容积(Left Ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末期容积(Left Ventricular end-systolic volume,LVESV))。随访3个月,记录主要不良心血管事件(Major adverse cardiovascular events,MACE)的发生率。比较两组间CK-MB、CRP、STRI、PCI术中及术后情况、再灌注心律失常的发生率、LVEF、LVEDD、LVEDV、LVESV、SRS、MACE,并进行统计学分析。结果:1.两组患者临床基线资料比较:RIPost C组与对照组比较,性别、年龄、心率、高血压、糖尿病、高血脂、吸烟史、BMI、Killip分级等临床基本资料差异均无统计学意义(P>0.05)。2.心肌酶及CRP:RIPost C组较对照组CK-MB峰值显著降低,差异有统计学意义(265.31±30.96U/L vs 287.96±39.50U/L,P=0.003)。在术前及术后24h,RIPost C组与对照组的CRP差异无统计学意义(术前CRP测定分别为5.17±3.85mg/Lvs5.87±4.83mg/L,P>0.05;术后24h CRP测定分别为15.02±4.75mg/Lvs16.28±4.95mg/L,P>0.05)。***段回落指数:术后90min内RIPost C组STRI较对照组为(64.6±14.3%vs62.8±8.5%,P>0.05),差异无统计学意义。***术中、术后的情况:两组患者血管病变类型、病变血管数量、IRA开通前TIMI血流分级、支架植入数量、支架直径、支架长度、造影剂用量等方面差异均无统计学意义(P>0.05),IRA开通后RIPost C组TIMI I-II级血流的发生率显著低于对照组(2.2%vs 13.3%,P=0.049),且差异有统计学意义,IRA开通后TIMIⅢ级的发生率RIPost C组较高于对照组(95.6%vs 86.7%,P>0.05),但差异无统计学意义。IRA开通后RIPost C组较对照组TIMI 0级发生率(2.2%vs 0.0%,P>0.05),差异无统计学意义。5.再灌注心律失常:PCI术中及术后2h内RIPost C组再灌注心律失常的发生率明显低于对照组(48.9%vs 71.1%,P=0.031),且差异有统计

关键词：远程缺血后适应经皮冠脉介入治疗急性ST段抬高型心肌梗死心脏保护

远程缺血后适应对急性ST段抬高心肌梗死PCI术后患者的肾功能保护研究

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远程缺血后适应对急性ST段抬高心肌梗死PCI术后患者的肾功能保护...

作者：邱洪苏州大学

学位级别：硕士

目的评估远程缺血后适应(remote ischemic postconditioning,RIC)对急性ST段抬高心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)PCI术后减少急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的效果。方法选取我院2014年3月至11月STEMI并行急诊PCI患者150名,排除CKD4期(e GFR远程缺血后适应试验。缺血后适应组(RIC组)71人,对照组66人。应用经皮冠状动脉腔内成形术或支架术,开通罪犯血管后即刻用血压计袖带对RIC组患者上肢进行反复束缚(200mm Hg压力,持续10分钟,袖带放气,1分钟后再次进行束缚,循环4次),术后两组患者TIMI血流分级均达3级,比较两组AKI的发生率并计算出各组病人的e GFR水平,观察手术前后e GFR的相对变化。结果1)RIC组71人,平均年龄(58.30±14.07)岁,女11人;对照组66人,平均年龄(57.83±14.13)岁,女7人,在年龄,性别,吸烟,血压水平,术前BUN、Scr及e GFR水平等临床基本情况两组间差异无统计学意义。2)RIC组术后三天内AKI发生率9.9%,对照组31.8%,RIC组AKI发生率显著小于对照组,差异有统计学意义(P后e GFR95.72±34.41(ml/min),差异具有统计学意义(P后e GFR98.30±34.22(ml/min),差异具有统计学意义(P后e GFR下降-13.199±22.34(ml/min),RIC组下降-2.29±19.34(ml/min),RIC组e GFR下降程度明显小于对照组,差异有统计学意义(P后AKI的发生率高。2、远程缺血后适应方便,安全,有效。对于行急诊PCI的STEMI患者,可以降低AKI的发生率,并有效地降低造影剂对肾小球滤过率的影响。给急诊PCI术的患者减少术后并发症带来益处。

关键词：远程缺血后适应急性ST段抬高心肌梗死急性肾损伤

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远程缺血后适应的心肌保护作用

远程缺血后适应的心肌保护作用

作者：曹苏岩苏州大学

学位级别：硕士

目的:探讨远程缺血后适应在动物实验及临床研究中的心肌保护作用及可能涉及的相关机制。方法:1.第一部分动物实验:30只健康雄性SD大鼠采用随机化原则将其分为3组:A组假手术组(sham组)10只,该组大鼠开胸后予前降支下穿线但不结扎前降支;... 详细信息

目的:探讨远程缺血后适应在动物实验及临床研究中的心肌保护作用及可能涉及的相关机制。方法:1.第一部分动物实验:30只健康雄性SD大鼠采用随机化原则将其分为3组:A组假手术组(sham组)10只,该组大鼠开胸后予前降支下穿线但不结扎前降支;B组远程缺血后适应组(RIPC组)10只,结扎前降支60min并在前降支开通后迅速予以远程缺血后适应处理,前降支再灌注120min关胸;C组缺血再灌注组(I/R)组10只,结扎前降支60min,开通前降支再灌注120min后关胸。术中各组大鼠均持续心电监护,sham组为前降支下穿线180min后记录心电图,RIPC组及I/R组前降支再灌注120min时记录心电图。A组sham组大鼠于前降支下穿线180min后取血;B组RIPC组及C组I/R组大鼠于前降支恢复再灌注120min后取血。血液标本经离心机离心获得血清及血浆,用于测定大鼠心脏肌钙蛋白I(c Tn I),肌酸激酶同工酶(CK-MB)及基质衍生因子-1α(SDF-1α)。2.第二部分临床研究:42例急性ST段抬高性心肌梗死并行急诊PCI手术的患者采用随机化原则分为2组:A组PCI+RIPC组20人,该组患者在行急诊PCI开通血管5min内予远程缺血后适应处理。B组单纯PCI组22人,该组患者仅行常规急诊PCI手术。所有患者于术前及术后2h行心电图检查,比较2组心电图回落≥50%情况。2组患者均于术前、术后8h、术后16h、术后24h、术后48h共抽静脉血5次,测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)。2组患者均取术前、术后0.5h、术后8h、术后24h共抽取静脉血4次,测定基质衍生因子-1α(SDF-1α)。2组患者均于术后7天行心脏彩超检查,比较两组患者左室射血分数(EF)。结果:1.第一部分动物实验:(1)心电图:A组sham组心电图无明显变化,B组RIPC组及C组I/R组在结扎前降支后出现ST段弓背状抬高。前降支再灌注120min后B组RIPC组心电图回落≥50%个数较C组I/R组增多,但统计学差异不显著(8 VS 4,80.0%VS 40.0%,P>0.05)。(2)肌钙蛋白I(c Tn I):A组sham组c Tn I浓度为(0.67±0.16)μg/L,B组RIPC组为(2.98±0.62)μg/L,C组I/R组为(4.88±0.85)μg/L。与sham组相比,RIPC组及I/R组的c Tn I浓度均有明显的提高,差异有统计学意义(P0.05]。PCI+RIPC组较PCI组CK-MB曲线下面积降低,但差异无明显统计学意义(10195±2589 VS 10817±2850,P后7天左室射血功能分数(EF)略有增高,但差异无统计学意义[(46.3±6.2)%VS(44.7±8.0)%,P>0.05]。(4)基质衍生因子-1α(SDF-1α):PCI+RIPC组较PCI组各时间点血浆基质衍生因子-1α水平均无明显差异。[术前(1463.25±242.79)VS(1511.91±268.71)pg/ml,术后0.5小时(1558.75±340.80)VS(1602.41±356.85)pg/ml,术后8小时(1599.80±361.67)VS(1567.27

关键词：心肌缺血再灌注损伤远程缺血后适应 SDF-1α

远程缺血后适应对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用与CHOP和Caspase-3的关系

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远程缺血后适应对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用与CHOP和Caspa...

作者：卢旭霞山西医科大学

学位级别：硕士

目的：采用线栓法制备大鼠的大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,证明远程缺血后适应(Remote Isehemic Postconditiong,RIP)对大鼠脑缺血再灌注(Ischemia/ Reperfusion,I/R)的保护作用,初步探讨远程缺血后适对脑缺血的保护作用及其机制,为临床治... 详细信息

目的：采用线栓法制备大鼠的大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,证明远程缺血后适应(Remote Isehemic Postconditiong,RIP)对大鼠脑缺血再灌注(Ischemia/ Reperfusion,I/R)的保护作用,初步探讨远程缺血后适对脑缺血的保护作用及其机制,为临床治疗提供一种新的可能的策略。方法：本实验分两步进行,共用56只SD大鼠,第一部分,建立稳定的大鼠大脑中动脉缺血模型,证明远程缺血后适应对缺血脑组织的保护作用,远程缺血后适应为夹闭双侧股动脉10min,放开10min,此为一个循环,共进行三个循环。将32只雄性SD大鼠,大脑中动脉阻塞2h,随机分为4组,即：(1)假手术组(Sham, n=3);(2)对照组(Control,n=8);(3)在插栓即刻进行远程缺血后适应组(RIP1,n=8);(4)在再灌注即刻进行远程缺血后适应组(RIP2,n=8);于再灌注后4h,24h进行12分神经功能评分,24小时处死大鼠,TTC染色测定脑梗死体积.第二部分,在证实远程缺血后适应的保护作用的基础上,进行远程缺血后适应脑保护作用机制的研究,将24只SD大鼠,大脑中动脉阻塞2h,随机分为4组,即：(1)假手术组(Sham,n=6);(2)对照组(Control,n=6);(3)在插栓即刻进行远程缺血后适应组(RIP1,n=6);(4)在再灌注即刻进行远程缺血后适应(RIP4,n=6)于再灌注24h处死大鼠,免疫组化法评价C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP),Caspase-3的表达,将缺血侧脑组织分为皮质和基底节两个区域半定量分析。结果：插栓即刻组(RIP1),再灌注即刻组(RIP2)较对照组(Control)明显减少。(P0.05)。。插栓即刻组(RIP1,),再灌注即刻组(RIP2)的神经功能评分较对照组(Control)无明显差异。插栓即刻组(RIP1)和再灌注即刻组(RIP2)大鼠脑组织皮质和基底节CHOP阳性细胞数可明显减少,与对照组(Control)比较差异有显著性(P后到再灌注后10min,给予夹闭双侧股动脉10min,放开10min,此为一个循环,共进行三个循环,可以减少脑梗死体积,对脑缺血有保护作用,其机制可能与减少皮质和基底节内质网应激诱导的凋亡蛋白CHOP的含量,减少皮质Caspase-3的含量有关。

关键词：远程缺血后适应脑缺血内质网应激凋亡相关蛋白CHOP Caspase-3

上肢远程缺血后适应治疗对急性脑梗死神经功能及预后的影响研究

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中国全科医学 2016年第23期19卷 2767-2770页

作者：黄超任向阳周海涛马聪敏滕军放郑州大学附属洛阳中心医院神经内科河南省洛阳市471000 郑州大学第一附属医院神经内科

目的探讨上肢远程缺血后适应治疗对急性脑梗死神经功能及预后的影响。方法选取2013年1月—2015年1月郑州大学附属洛阳中心医院诊断为急性脑梗死的患者160例为研究对象,采用随机数字表法分为两组：对照组80例,予以常规药物治疗及正规康... 详细信息

目的探讨上肢远程缺血后适应治疗对急性脑梗死神经功能及预后的影响。方法选取2013年1月—2015年1月郑州大学附属洛阳中心医院诊断为急性脑梗死的患者160例为研究对象,采用随机数字表法分为两组：对照组80例,予以常规药物治疗及正规康复训练;治疗组80例,予以常规药物治疗、正规康复训练及上肢远程缺血后适应治疗。两组患者于治疗前及治疗14 d后进行美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分、经颅多普勒（TCD）检查,治疗3个月后进行改良Rankin量表（mRs）评分。平均随访（24.5±7.6）个月,统计两组患者终点事件〔短暂性脑缺血发作（TIA）、再发脑梗死、脑出血、心血管事件（急性冠脉综合征、心肌梗死）〕发生率。结果治疗前及治疗14 d后,对照组与治疗组NIHSS评分比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。治疗3个月后治疗组mRs评分0~1分41例（51.2%）,对照组mRs评分0~1分28例（35.0%）,两组患者mRs评分0~1分者所占比例比较,差异有统计学意义（χ2=4.306,P=0.038）。治疗前,对照组与治疗组颞窗病变侧大脑中动脉和枕窗基底动脉搏动指数（PI）比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;治疗14 d后,治疗组颞窗病变侧大脑中动脉和枕窗基底动脉PI较对照组降低（P〈0.05）。对照组与治疗组再发脑梗死、脑出血发生率比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;治疗组患者TIA、心血管事件发生率较对照组降低（P〈0.05）。治疗组患者上肢远程缺血后适应治疗过程中均未出现血压、心率、呼吸的改变,未出现其他不适感。结论上肢远程缺血后适应治疗可以改善急性脑梗死患者的神经功能及脑血管的顺应性,提高脑血流的储备能力,降低TIA及心血管事件的发生率,操作简单易行,具有较好的临床应用前景。

关键词：脑梗死远程缺血后适应美国国立卫生研究院卒中量表预后

远程缺血后适应对大鼠脑缺血再灌注损伤后MIP-1α表达的影响

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中国比较医学杂志 2013年第8期23卷 24-29,I0001页

作者：王荣亮赵海苹罗玫张营陶真闫峰罗玉敏首都医科大学宣武医院脑血管病研究室北京100053

目的观察远程缺血后适应(remote ischemia postconditioning,RIPostC)对大鼠脑缺血再灌注损伤后巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammatory protein,MIP-1α)表达的影响,初步探讨RIPostC对炎症反应的作用。方法采用线栓法制备MCAO模型,77只健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠(280-310 g)随机分为7组,每组11只:(1)假手术组(S);(2)8 h对照组(I8);(3)RIPostC 8 h组(R8);(4)24 h对照组(I24);(5)RIPostC 24 h组(R24);(6)72 h对照组(I72);(7)RIPostC 72 h组(R72)。远程缺血后适应的具体操作方法为在大鼠脑缺血即刻夹闭双侧股动脉10 min,放开10 min,如此共进行三个循环。分别应用荧光定量RT-PCR、免疫印迹法及免疫荧光法研究大鼠脑缺血再灌注8 h、24 h和72 h时MIP-1αmRNA和蛋白质表达的变化。结果 (1)荧光定量RT-PCR结果显示:与S组相比,I组及R组大鼠缺血后MIP-1αmRNA的表达均有所增加,其中I8 h、R8 h和R24 h组MIP-1αmRNA的表达显著升高(P缺血后MIP-1α蛋白水平的表达均有所增加,其中I24 h和I72 h组MIP-1α蛋白表达显著增高(P缺血再灌注损伤的炎症反应,而远程缺血后适应可能通过减轻炎症反应而发挥脑保护作用。

关键词：脑缺血炎症反应远程缺血后适应 MIP-1α 大鼠

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远程缺血后适应对心肌保护作用的研究进展

医学综述 2019年第4期25卷 722-727页

作者：石向欣贺玉晓赵跃华张韫欢张敏秀王占启河北大学医学院河北保定071000 河北大学附属医院心内科河北保定071000

急性ST段抬高型心肌梗死患者应尽早进行再灌注治疗,但梗死相关血管的再通可导致缺血再灌注损伤。目前,缺血预适应已逐渐演变为远程缺血后适应,其能减轻心肌缺血再灌注损伤,改善患者心功能、降低心力衰竭的风险,对早期心肌具有保护作用,... 详细信息

急性ST段抬高型心肌梗死患者应尽早进行再灌注治疗,但梗死相关血管的再通可导致缺血再灌注损伤。目前,缺血预适应已逐渐演变为远程缺血后适应,其能减轻心肌缺血再灌注损伤,改善患者心功能、降低心力衰竭的风险,对早期心肌具有保护作用,但具体操作及临床效果仍面临许多问题,需要大量研究加以验证。远程缺血后适应的保护机制尚不清楚,相关研究尚无统一标准,可能与体液机制、神经反射机制或两者均有关。

关键词：心肌梗死缺血再灌注损伤远程缺血后适应心肌保护作用