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抗人红细胞NADH－细胞色素b5还原酶单克隆抗体的建立

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单克隆抗体通讯 1995年第3期11卷 61-64页

作者：兰风华唐玉钗黄长晖朱忠勇王瑶南京军区福州总医院全军医学检验中心第二军医大学

以重组人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；通过常规方法将小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经ＥＬＩＳＡ筛选及有限稀释法克隆化，选出６株阳性克隆。其中两株分泌ＩｇＧ，其余均分泌ＩｇＭ。免... 详细信息

以重组人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；通过常规方法将小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经ＥＬＩＳＡ筛选及有限稀释法克隆化，选出６株阳性克隆。其中两株分泌ＩｇＧ，其余均分泌ＩｇＭ。免疫印迹分析表明，两株ＩｇＧ单克隆抗体对人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶有较高的特异性和亲和力。这一研究为开展对人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶的研究和遗传性高铁血红蛋白血症的免疫诊断奠定了基础。

关键词：红细胞细胞色素酶还原酶辅酸I 单克隆抗体

低共熔溶剂和还原酶串联催化生物质合成糠醇和2,5-呋喃二甲醇的研究

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低共熔溶剂和还原酶串联催化生物质合成糠醇和2,5-呋喃二甲醇的研...

作者：潘磊湖北大学

学位级别：硕士

糠醛(FAL)和5-羟甲基糠醛(HMF)可以作为石油基前体的替代品,适用于广泛的行业,如化学品、食品、制药、生物燃料、粘合剂和溶剂。糠醇(FOL)是一种重要的糠醛升级化合物,主要用于制备果酸、树脂、添加剂、聚合物、纤维和火箭燃料。2,5-呋... 详细信息

糠醛(FAL)和5-羟甲基糠醛(HMF)可以作为石油基前体的替代品,适用于广泛的行业,如化学品、食品、制药、生物燃料、粘合剂和溶剂。糠醇(FOL)是一种重要的糠醛升级化合物,主要用于制备果酸、树脂、添加剂、聚合物、纤维和火箭燃料。2,5-呋喃二甲醇(BHMF)是5-羟甲基糠醛的下游产物,它是一种参与聚合物、燃料和大环聚醚合成的多功能构件。目前,大多数制造商使用传统的化学催化剂来生产呋喃醇。但它通常需要强酸强碱或高温高压等较为严格的反应条件。在本研究中,甜菜碱基低共熔溶剂(DES)作为化学催化剂,新构建的含有醛还原酶以及甲酸脱氢酶(FDH)的重组大肠杆菌SF21作为生物催化剂,通过一锅化学酶法串联催化使农业废弃物(玉米芯、甘蔗渣)合成为呋喃醇。研究结果如下:首先,将甜菜碱与柠檬酸(CA)混合制备低共熔溶剂(DES)CA:Betaine。以CA:Be taine(10 wt%)作为催化剂和反应介质,在170℃、30 min条件下,在CA:Betaine-W ater(10:90,wt:wt)体系中催化玉米芯(60 g/L)中的碳水化合物(葡聚糖加木聚糖)生成74.6 m M糠醛,96.5 m M甲酸和40.3 m M葡萄糖。以CA:Betaine(8 wt%)为催化剂和反应介质,甘蔗渣(40 g/L)中的碳水化合物在170℃、30 min条件下,在C A:Betaine-Water(8:92,wt:wt)体系中催化生成47.9 m M 5-羟甲基糠醛,14.0 m M糠醛,62.9 m M甲酸和3.9 m M葡萄糖。结果表明,使用该DES能够高效催化生物质制备呋喃醛(糠醛、5-羟甲基糠醛)。其次,构建了含有甲酸脱氢酶(FDH)和NADPH依赖性醛还原酶(Ss CR)的重组大肠杆菌SF21。FDH可以催化生物质衍生的甲酸盐,将其转化为二氧化碳,并提供N AD(P)H,将生物衍生的糠醛与5-羟甲基糠醛分别生物转化为糠醇与2,5-呋喃二甲醇。在相同条件下,以玉米芯衍生的的糠醛稀释液里的几种产物浓度为基础,通过与大肠杆菌CCZU-A13(含有Ss CR基因)对比,串联酶表现出更高的活性与产率。这也说明在大肠杆菌中共表达甲酸脱氢酶(FDH)和NAD(P)H依赖的醛还原酶(Ss CR)是高效生物合成呋喃醇的良好策略。最后,串联化学催化剂低共熔溶剂CA:Betaine和生物催化剂重组大肠杆菌SF21来催化农业废弃物,建立了一锅化学酶法合成高价值呋喃醇的工艺流程。在2 h内,大肠杆菌SF21以玉米芯衍生的甲酸和葡萄糖为共底物,有效地将衍生的糠醛(74.6 m M)转化为糠醇(产率95.8%),获得糠醇产量0.117 g糠醇/g玉米芯(0.343 g糠醇/g木聚糖)。在6 h内,有效地将甘蔗渣衍生的5-羟甲基糠醛(47.9 m M)与糠醛(14.0 m M)分别转化为2,5-呋喃二甲醇与糠醇,2,5-呋喃二甲醇生产率达到0.137 g糠醇/g甘蔗渣(0.323 g 2,5-呋喃二甲醇/g葡聚糖);糠醇生产率达到0.033 g糠醇/g甘蔗渣(0.136 g糠醇/g木聚糖)。这也证明了串联的化学酶法催化农业废弃物合成为呋喃醇的可行性。总的来说,本研究建立了一锅化学生物方法转化,开发了一种将生物质高效转化为2,5-呋喃二甲醇与糠醇可持续的方法。具有生物兼容性的甜菜碱基低共熔溶剂将玉米芯与甘蔗渣高效催化为5-羟甲基糠醛与糠醛,重组大肠杆菌SF21作为生物催化剂有效的将5-羟甲基糠醛与糠醛分别转化为2,5-呋喃二甲醇与糠醇。建立了一种条件温和且绿色环保的高效合成呋喃醇工艺,为生物质催化合成呋喃醇提供了一种新思路。

关键词：低共熔溶剂还原酶生物质 2,5-呋喃二甲醇糠醇

硝基水杨酰胺抑制泛醌-细胞色素c还原酶的作用对氢醌的敏感性

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第2期15卷 337-339页

作者：吕斌徐建兴陈世智中国科学院生物物理研究所中国医学科学院药物研究所

泛醌－细胞色素ｃ还原酶（ＱＣＲ）是线粒体呼吸链的三个能量偶联部位之一，它起着将电子从还原型泛醌传递给细胞色素ｃ（Ｃｙｔ．ｃ）的作用，根据Ｋｉｎｇ和Ｙｕ提出的泛醌结合蛋白理论［１］，泛醌－细胞色素ｃ还原酶中含有泛醌结合... 详细信息

泛醌－细胞色素ｃ还原酶（ＱＣＲ）是线粒体呼吸链的三个能量偶联部位之一，它起着将电子从还原型泛醌传递给细胞色素ｃ（Ｃｙｔ．ｃ）的作用，根据Ｋｉｎｇ和Ｙｕ提出的泛醌结合蛋白理论［１］，泛醌－细胞色素ｃ还原酶中含有泛醌结合蛋白ＱＰｃ．研究表明，泛醌－细胞色...

关键词：硝基水杨酰胺泛醌细胞色素C 还原酶氢醌

中国东北地区6个少数民族亚甲基四氢叶酸还原酶C677T突变的分布

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 316-317页

作者：薛雅丽王琦于佳梅傅松滨陈峰黄承滨史忠成刘岸张贵寅李璞哈尔滨医科大学医学遗传学研究室哈尔滨150086

细胞色素b5还原酶基因L72P突变的分子诊断

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中华检验医学杂志 1999年第4期22卷 3-5页

作者：吴玉水王瑶兰风华林运团陈学香唐玉钗朱忠勇南京军区福州总医院

巴西橡胶HMG-CoA还原酶基因cDNA的扩增与克隆

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热带作物学报 1993年第2期14卷 11-15页

作者：黄俊生孔德謇符少萍热带作物生物技术国家重点实验室海南儋州571737

从橡胶树高产无性系(热研7—33—97)的新鲜胶乳制备总RNA,采用磁吸附法从总RNA纯化mRNA,加反转录酶得到cDNA,以cDNA为模板,设计并人工合成一对特异引物,采用聚合酶链式反应(PCR技术)扩增到一段约1.0kb的DNA片段,用1％低融点琼脂糖电泳... 详细信息

从橡胶树高产无性系(热研7—33—97)的新鲜胶乳制备总RNA,采用磁吸附法从总RNA纯化mRNA,加反转录酶得到cDNA,以cDNA为模板,设计并人工合成一对特异引物,采用聚合酶链式反应(PCR技术)扩增到一段约1.0kb的DNA片段,用1％低融点琼脂糖电泳回收目的DNA片段,然后将目的DNA克隆到pGEM—5Zf(-)质粒载体上。

关键词：橡胶树 HMG-CoA 还原酶基因克隆

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人肝二氢蝶啶还原酶的三个活性组分

生物化学杂志 1992年第2期8卷 225-229页

作者：陈震华沈荣森关秀华盛文璐 CreedW.Abell 武汉大学化学系生物化学教研组武汉430072 美国德州大学医学院生物化学教研室

本文测定了人肝二氢蝶啶还原酶三个活性组分(Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ)的动力学常数。对NADH来说,这三个组分几乎具有相同的Km值,对组分Ⅱ来说,二氢蝶啶还原酶对蝶啶的Km值顺序如下:醌型6,7一二甲基二氢蝶啶(qDMPH_2)>醌型6-甲基二氢蝶啶(q6MPH_2)>醌... 详细信息

本文测定了人肝二氢蝶啶还原酶三个活性组分(Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ)的动力学常数。对NADH来说,这三个组分几乎具有相同的Km值,对组分Ⅱ来说,二氢蝶啶还原酶对蝶啶的Km值顺序如下:醌型6,7一二甲基二氢蝶啶(qDMPH_2)>醌型6-甲基二氢蝶啶(q6MPH_2)>醌型生物喋呤(qBH_2)。以qDMPH_2为底物,组分Ⅰ和Ⅱ的Km值大约比组分Ⅲ的Km值高2.5倍。所有三个组分具有不同的Vmax值,因而催化效应也不相同。每一个组分的SDS凝胶电泳均为单一谱带,相当于分子量26kD亚基。这些结果告诉我们,不同组分的DHPR在结构上有某种联系但催化效应却有差别。

关键词：二氢蝶啶还原酶蝶啶动力学常数

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纤维二糖氧化还原酶降解木质纤维素研究进展

纤维素科学与技术 1996年第4期4卷 1-8页

作者：方靖高培基山东大学微生物研究所济南250100

本文综述了纤维二糖氧化还原酶降解木质纤维素的最新进展。黄孢原毛平革菌生长在纤维素上时生成两种胞外纤维二糖氧化还原酶即纤维二糖脱氢酶和纤维二糖醌氧化还原酶，它们可以氧化纤维二糖及纤维素糊精，有多种电子受体．纤维二糖脱氢... 详细信息

本文综述了纤维二糖氧化还原酶降解木质纤维素的最新进展。黄孢原毛平革菌生长在纤维素上时生成两种胞外纤维二糖氧化还原酶即纤维二糖脱氢酶和纤维二糖醌氧化还原酶，它们可以氧化纤维二糖及纤维素糊精，有多种电子受体．纤维二糖脱氢酶还可以氧化纤维素，酶分子中均含有纤维素吸附位点。纤维二糖存在时这两种酶能还原醌和苯氧基。因此推测这些酶在木质纤维素降解中起调节作用。在其它一些真菌中亦发现此类酶的存在。

关键词：纤维二糖氧化还原酶纤维素降解木素

琥珀酸细胞色素c还原酶系中细胞色素b的多相氧化还原反应

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1984年第6期 627-637页

作者：邹承鲁唐海伦王大成李淑连金元祯中国科学院上海生物化学研究所中国科学院生物物理研究所

呼吸链中从泛醌到细胞色素c一段一向受到人们的重视。尤其是细胞色素b的动力学行为,虽然文献上报道很多但结果却不一致。早在工929年Keilin就已经观察到细胞色素b的氧化还原速度比细胞色素系统其它组份都慢一些。1952年Chance也观察到... 详细信息

呼吸链中从泛醌到细胞色素c一段一向受到人们的重视。尤其是细胞色素b的动力学行为,虽然文献上报道很多但结果却不一致。早在工929年Keilin就已经观察到细胞色素b的氧化还原速度比细胞色素系统其它组份都慢一些。1952年Chance也观察到这一现象。但他发现在不具氧化磷酸化能力的制剂中细胞色素b的还原速度才比c或c慢,而在具有氧化磷酸化能力的制剂中细胞色素b的还原速度并不比c慢。于是他认为也许是磷酸化系统受到损害而影响到细胞色素b的还原速度。Chance还发现b的还原在动力学上是快慢两相。后来有一些作者也都报道了b的两相还原现象。

关键词：细胞色素还原速度多相氧化光吸收 nm 电磁波吸收氧化还原电位抗霉素还原现象还原酶底物浓度氧化还原反应