检索结果-南通市图书馆

同方期刊数据库

疏肝益阳胶囊对动脉性勃起功能障碍大鼠TGF-β、NADPH表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华中医药杂志 2014年第1期29卷 66-68页

作者：王济白明华郑燕飞刘保兴李东桓王琦北京中医药大学中医体质与生殖医学研究中心北京100029 中日友好医院中医男科北京100029

目的:通过检测动脉性勃起功能障碍(AED)大鼠转化生长因子β(TGF-β)及还原型辅酶ⅱ(NADPH)的表达,观察中药疏肝益阳胶囊改善AED血管平滑肌功能的分子机制。方法:选取3月龄成年雄性SD大鼠,采用双侧髂内动脉结扎法制造勃起障碍模型。设假... 详细信息

目的:通过检测动脉性勃起功能障碍(AED)大鼠转化生长因子β(TGF-β)及还原型辅酶ⅱ(NADPH)的表达,观察中药疏肝益阳胶囊改善AED血管平滑肌功能的分子机制。方法:选取3月龄成年雄性SD大鼠,采用双侧髂内动脉结扎法制造勃起障碍模型。设假手术对照组、模型组、西药西地那非组(10.5mg·kg-1·d-1)、疏肝益阳小剂量治疗组(0.5g·kg-1·d-1)、大剂量治疗组(1g·kg-1·d-1),灌胃给药30d。荧光定量PCR法检测海绵体组织TGF-β、NADPH mRNA表达,ELISA法检测血浆TGF-β含量。结果:模型组与假手术组比较,TGF-β和NADPH表达显著升高(P<0.01);疏肝益阳治疗组与模型组比较,TGF-β和NADPH表达均显著降低(P<0.05)。结论:疏肝益阳胶囊对动脉性勃起障碍大鼠的血管平滑肌功能具有改善作用,而这种作用可能是通过调节氧化应激机制实现的。

关键词：疏肝益阳胶囊动脉性勃起功能障碍转化生长因子β 还原型辅酶ⅱ

糖尿病患者外周血白细胞磷酸戊糖途径代谢与呼吸爆发的关系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

广东医学 2012年第8期33卷 1136-1138页

作者：曾慧妍曹瑛薛耀明南方医科大学南方医院内分泌科广州510515

目的观察2型糖尿病患者外周血白细胞磷酸戊糖途径(PPP)关键酶———葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性、还原型辅酶ⅱ(NADPH)产量及呼吸爆发功能的变化,探讨糖尿病患者易感染的可能机制。方法检测2型糖尿病患者外周血白细胞G6PD活性、NADP... 详细信息

目的观察2型糖尿病患者外周血白细胞磷酸戊糖途径(PPP)关键酶———葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性、还原型辅酶ⅱ(NADPH)产量及呼吸爆发功能的变化,探讨糖尿病患者易感染的可能机制。方法检测2型糖尿病患者外周血白细胞G6PD活性、NADPH含量,并通过检测白细胞活性氧(ROS)产量观察其呼吸爆发功能,研究白细胞外不同浓度糖环境对细胞呼吸爆发功能的影响。结果与正常人比较,糖尿病患者外周血白细胞G6PD活性、NADPH产量及ROS含量均明显降低。结论血糖控制不良引起糖尿病患者白细胞内PPP途径代谢紊乱,G6PD活性下降从而导致其白细胞呼吸爆发功能障碍,这可能是糖尿病患者易于感染的主要原因之一。

关键词： 2型糖尿病白细胞呼吸爆发磷酸戊糖途径葡萄糖-6-磷酸脱氢酶还原型辅酶ⅱ 活性氧

Fenofibrate与Apocinin在脑缺血中神经保护作用的机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

广东医学 2015年第16期36卷 2491-2494页

作者：张元元李正金赵立仙李云王光明大理学院附属医院内科云南大理671000 大理学院附属医院病理科云南大理671000

目的探讨Fenofibrate(Feno)和Apocinin(Apo)联合应用在脑缺血中的神经保护作用。方法在脑缺血动物模型中给予Feno(Feno组)、Apo(Apo组)及Feno+Apo(Feno+Apo组)干预,以羧甲基纤维素钠(CMC)为对照(CMC组)。应用实时荧光定量PCR分析SOD1、2、3和NADPH的亚基NOX2 mRNA表达,检测SODs和NADPH oxisase酶活性改变以及ROS含量分析。结果与CMC组比较,Feno组、Apo组及Feno+Apo组脑坏死面积均明显减小(P=0.000),Feno组和Feno+Apo组SOD1、2、3的mRNA及其SODs酶活性升高(P=0.000);Feno组、Apo组及Feno+Apo组NOX2 mRNA表达以及NADPH oxisase酶活性降低,ROS的含量减少(P=0.000)。结论 Feno通过促进SODs mRNA的表达和活性以及抑制NADPH oxidase mRNA的表达和酶的活性,而Apo仅通过抑制NADPH oxidase mRNA的表达和酶的活性以保护脑组织的缺血损伤,而两者联合应用不能够起到加强作用。

关键词：脑缺血还原型辅酶ⅱ 超氧化物歧化酶

芳香酶在雄性生殖中的功能及调节机制的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

解剖学杂志 2017年第5期40卷 606-610页

作者：乔慧莲汤臻杨倩倩李臻第四军医大学组织学与胚胎学教研室西安710032

在男性哺乳动物体内,雄激素对生殖系统的发育至关重要,除此之外,一定水平的雌激素对于维持正常的精子发生也是必不可少的.雌激素主要调节精子发生的两个环节：精子的数量和精子的成熟.在男性生殖系统内,雌激素由雄激素转化而来,而芳香... 详细信息

在男性哺乳动物体内,雄激素对生殖系统的发育至关重要,除此之外,一定水平的雌激素对于维持正常的精子发生也是必不可少的.雌激素主要调节精子发生的两个环节：精子的数量和精子的成熟.在男性生殖系统内,雌激素由雄激素转化而来,而芳香酶是催化该过程的关键酶.芳香酶是由两部分组成的微粒体酶复合物,第 1 部分被称为细胞色素 P450 芳香酶（cytochrome P450 aromatase,P450arom）,是由特异基因编码的糖蛋白,负责结合到类固醇底物并起催化作用;第 2 部分是一个普遍存在的、非特异编码的黄素蛋白,即还原型辅酶ⅱ（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH）细胞色素 P450 还原酶,负责将 NADPH 上的电子转移到P450arom[1],通常所说的芳香酶是指P450arom.现对芳香酶在睾丸的表达分布、雄性生殖功能的影响以及芳香酶表达的调节机制 3 个方面进行综述.

关键词：芳香酶调节雄性生殖男性生殖系统 phosphate 精子发生 P450 还原型辅酶ⅱ

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

亚砷酸钠对雄性大鼠肺氧化损伤作用研究

中国职业医学 2016年第4期43卷 420-423页

作者：苏鑫王素华杨欢刘建国包头医学院公共卫生学院内蒙古包头014060

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_2)经饮水染毒对大鼠肺氧化损伤作用。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠,随机分为对照组和低、中、高剂量组,每组8只。3个剂量组大鼠自由饮用质量浓度分别为10.00、100.00和1 000.00μg/L的NaAsO_2溶液,对... 详细信息

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_2)经饮水染毒对大鼠肺氧化损伤作用。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠,随机分为对照组和低、中、高剂量组,每组8只。3个剂量组大鼠自由饮用质量浓度分别为10.00、100.00和1 000.00μg/L的NaAsO_2溶液,对照组大鼠自由饮用超纯水。染毒28 d后处死大鼠,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数和细胞死亡率,以酶联免疫吸附实验测定BALF中活性氧(ROS)、还原型辅酶ⅱ(NADPH)、总抗氧化能力和一氧化氮(NO)水平。结果中剂量组大鼠BALF中白细胞总数分别高于对照组和高剂量组(P<0.05);高剂量组大鼠BALF中细胞死亡率分别高于对照组、低剂量组和中剂量组(P<0.01)。低、中和高剂量组大鼠BALF中ROS水平分别高于对照组(P<0.01);中、高剂量组大鼠BALF中NADPH水平分别高于对照组和低剂量组(P<0.05);中和高剂量组大鼠BALF中总抗氧化能力分别低于对照组(P<0.01),但NO水平均高于对照组(P<0.05)。结论砷进入大鼠体内后可能是通过激活氧化酶NADPH使ROS高表达,进而使NO增多,造成组织氧化应激损伤。

关键词：砷亚砷酸钠氧化应激还原型辅酶ⅱ 活性氧抗氧化能力一氧化氮

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

硫氧还蛋白及其与肿瘤的关系

中国兽医杂志 2011年第1期47卷 54-56页

作者：苏荣胜胡锴刘传敦刘好朋万婷潘家强唐兆新华南农业大学兽医学院广东广州510642

硫氧还蛋白（thioredoxin,Trx）是一种普遍表达于各种生物组织器官的小分子多功能蛋白质。Trx、硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase,TrxR）和还原型辅酶ⅱ（NADPH）共同组成了Trx系统，该系统是一个控制细胞还原／氧化状态和细胞... 详细信息

硫氧还蛋白（thioredoxin,Trx）是一种普遍表达于各种生物组织器官的小分子多功能蛋白质。Trx、硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase,TrxR）和还原型辅酶ⅱ（NADPH）共同组成了Trx系统，该系统是一个控制细胞还原／氧化状态和细胞增殖／生存的广泛表达的氧化还原系统，

关键词：硫氧还蛋白还原酶肿瘤白及还原型辅酶ⅱ 氧化还原系统细胞增殖功能蛋白质组织器官

糖尿病外周血白细胞呼吸爆发与G6PD的相关性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

糖尿病外周血白细胞呼吸爆发与G6PD的相关性研究

作者：曾慧妍南方医科大学

学位级别：硕士

【背景】随着生活水平的提高、生活方式的改变和人口的老龄化，糖尿病患病率在世界范围内呈现出上升趋势，成为继心脑血管疾病、肿瘤之后的又一严重危害大众健康的慢性非传染性疾病。目前全球已诊断的糖尿病患者超过1.5亿人，预测到202... 详细信息

【背景】随着生活水平的提高、生活方式的改变和人口的老龄化，糖尿病患病率在世界范围内呈现出上升趋势，成为继心脑血管疾病、肿瘤之后的又一严重危害大众健康的慢性非传染性疾病。目前全球已诊断的糖尿病患者超过1.5亿人，预测到2025年将增至3亿人。糖尿病合并严重感染是糖尿病最常见的并发症之一。在应用胰岛素治疗以前，感染是糖尿病的主要死因，直至二十世纪五十年代，糖尿病患者仍有较高的死亡率。近年来，随着胰岛素和抗生素的应用，糖尿病并发感染的死亡率有所下降，但仍占糖尿病死亡原因第二位。糖尿病患者的感染发生率高达36.8％，并仍有上升的趋势。因此，有效地防治感染对于降低糖尿病患者的死亡率非常重要。目前认为糖尿病患者易并发各种感染，主要与高血糖状态、机体防御机能减弱、糖尿病的并发症、营养不良等因素有关，其中比较受关注的是机体防御机能减弱。控制不良或伴酮症酸中毒的糖尿病患者常同时有多种防御机能缺陷，对入侵微生物的的各反应阶段都被抑制，从而极易感染，且程度严重。白细胞在抗感染方面发挥着重要作用。它参与机体非特异性免疫和特异性免疫过程，有吞噬、杀死病原体的作用，是机体抗感染的第一道防线。许多研究对糖尿病患者白细胞吞噬杀菌功能进行了研究，发现血糖控制差的糖尿病患者，中性粒细胞的趋化、粘附、吞噬及氧化杀菌等功能均较正常人低，且与病情控制及代谢紊乱的程度有关。多数糖尿病患者白细胞的超微结构亦有异常。近年来，对糖尿病患者白细胞吞噬杀菌功能降低机制的研究越来越重视，国内外很多学者分别从糖尿病患者白细胞膜脂流动性、胞内碱性磷酸酶活力、溶酶体酶、调理素、Ca浓度、山梨醇及肌醇代谢状态等方面进行了研究，但仍无定论。呼吸爆发是白细胞激活后行使杀菌功能的主要途径。NADPH是呼吸爆发的必需物质，它的生成有赖于细胞内磷酸戊糖途径(PPP)的关键酶——葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的活性正常。对G6PD的研究早在上世纪80年代就已进入DNA水平，研究主要集中在G6PD缺乏症基因突变方面。近年来，美国哈佛大学医学院Joslin糖尿病中心研究发现G6PD与糖尿病肾病、血管内皮细胞功能等均存在密切联系。目前认为，G6PD不仅与白细胞呼吸爆发功能，与糖尿病及其并发症均存在密切关系。本研究将采用含不同浓度葡萄糖培养液离体培养的健康成人外周血白细胞及符合ADA 1997年诊断标准的糖尿病患者外周血白细胞作为研究对象，观察细胞周围环境中葡萄糖浓度对其呼吸爆发功能的影响。研究分为以下两部分进行：第一章不同浓度葡萄糖培养正常人离体白细胞的呼吸爆发功能研究【目的】探讨正常人离体外周血白细胞经不同葡萄糖浓度培养后，在不同时间点，白细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性的改变，及其对白细胞呼吸爆发功能的影响。【方法】 1．以分离出来的健康成人外周血白细胞为实验对象，分别用5mM，15mM，25mM浓度的D-葡萄糖培养液培养(5mM组、15mM组、25mM组)，20mML-葡萄糖+5mM D-葡萄糖培养为高渗对照组(L-GLU组)，每组6例。 2．分别在10min、20min、30min、1h、2h、4h、8h、12h、24h共9个不同的培养时间点，用分光光度法检测白细胞内G6PD的活性及NADPH的含量，用荧光探针法检测细胞内ROS产量。 3．实验数据计量资料以均数±标准差(x±s)表示。采用SPSS10.0软件进行统计分析，采用连续性重复测量的方差分析。同时考虑处理分组和重复测量的时间点两个因素，同时兼顾主效应和交互效应的影响。检验标准α定为0.05。【结果】 1．正常人白细胞G6PD活性及NADPH含量在不同浓度葡萄糖培养时均表现为早期相(即10min、20min、30min、1h和2h五个时间点)无显著变化。25mM组在培养4h时开始出现G6PD活性及NADPH含量的下降，15mM组在培养8h时出现下降，均与培养时间呈负相关(分别为r=-0.803 P＜0.001 N=54和r=-0.879 P＜0.001 N=54)。5mM组及L-GLU组均未见G6PD活性及NADPH含量随时间的改变。 2．从4h时间点开始，25mM组的G6PD活性及NADPH含量与15mM组、5mM组及L-GLU组相比，均存在显著差异(P＜0.01)。从8h时间点开始，15mM组的G6PD活性及NADPH含量与25mM组、5mM组及L-GLU组相比，差异显著(P＜0.01)。 3．除L-GLU组外，不同浓度葡萄糖组在培养10min、20min、30min时白细胞内ROS产量随培养液葡萄糖浓度的升高而增加。从1h时间点开始，15mM组及25mM组白细胞内ROS产量均随着NADPH的含量及G6PD活性的下降而降低。5mM组及L-GLU组G6PD活性、NADPH含量及ROS产量均无明显改变(P

关键词：白细胞呼吸爆发葡萄糖-6-磷酸脱氢酶还原型辅酶ⅱ 活性氧 2型糖尿病

G6PD在AngⅡ诱导的HUVEC氧化应激中的作用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

G6PD在AngⅡ诱导的HUVEC氧化应激中的作用

作者：董静菲河北医科大学

学位级别：硕士

目的：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD），是哺乳动物中一个重要的看家酶;在磷酸戊糖途径中为首个限速酶，广泛分布于全身各组织细胞内。G6PD是机体正常的新陈代谢和生长发育过程中必不可少的一种酶;对维持胞浆池的NADPH和细胞的氧化还原平... 详细信息

目的：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD），是哺乳动物中一个重要的看家酶;在磷酸戊糖途径中为首个限速酶，广泛分布于全身各组织细胞内。G6PD是机体正常的新陈代谢和生长发育过程中必不可少的一种酶;对维持胞浆池的NADPH和细胞的氧化还原平衡是不可缺少的。G6PD基因突变会造成G6PD蛋白部分功能的缺失，可导致新生儿黄疸，药物或感染介导的溶血危象，蚕豆病等。最近的研究显示G6PD在细胞和生物体的生理机能等方面具有重要作用。G6PD活性缺失，会干扰氧化还原的平衡状态，可导致细胞生长失调和信号传导异常，还会出现胚胎发育异常，增加退化性疾病的易感性等。但到目前为止，细胞处于氧化应激状态时，G6PD的活性变化以及与磷酸戊糖途径的关系尚不清楚，因此，研究G6PD的活性变化对了解如何维持细胞内NADPH和细胞的氧化还原平衡状态以及相关疾病的发病机制都具有十分重要的意义。人类的G6PD基因是一个X连锁遗传基因，位于Xq28区域，包含有13个外显子和12个内含子，长约有21kb。第一个外显子没有编码序列，位于第2和3外显子中间的内含子长约9kb。血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）是由血管紧张素Ⅰ转化生成的多肽（八肽）物质;是肾素－血管紧张素系统RAS中最为重要的活性物质。RAS在维持机体血压稳定及调节水、电解质平衡中发挥了重要作用。RAS活性的变化与心血管疾病的发生、发展具有密切相关性。在动脉硬化的发生、发展过程中，AngⅡ通过多种效应参与。AngⅡ刺激导致血管产生过量的自由基，进一步导致血管内皮细胞损伤，发生炎症反应和功能障碍，成为动脉粥样硬化的基础。但是血管内皮细胞在处于氧化应激状态时，细胞内会出现什么样的变化？G6PD活性会有怎样变化以及与磷酸戊糖途径又有什么关系，尚不清楚。基于上述情况，本实验选用人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）作为研究对象，使用AngⅡ刺激细胞复制氧化应激的模型，观察细胞内一氧化氮合酶（NOS）、一氧化氮（NO）、NADP/NADPH及G6PD蛋白的变化。对AngⅡ致HUVEC的氧化应激时，G6PD的变化以及与磷酸戊糖途径的关系进行研究。方法：1细胞培养人脐静脉内皮细胞株用含有100μg/mL青霉素、100μg/mL链霉素、10%FBS的低糖DMEM培养基，置37℃，5%CO2及饱和湿度下培养24小时，换用无血清的DMEM培养基再培养24小时。然后换用含有刺激因素和10%胎牛血清的DMEM培养基培养至所需时间后，收集细胞或上清液用于以下实验。2活性氧（ROS）的检测(1)分别给予细胞0，10-6，10-7，10-8mmol/L AngⅡ刺激，作用相同的时间1h后，采用活性氧检测试剂盒对不同浓度产生的活性氧进行检测。(2)用相同浓度10-6mmol/L的AngⅡ，分别给予细胞0h，0.5h，1h，3h的刺激后，采用活性氧检测试剂盒对不同时间产生的活性氧进行检测。3NADP/NADPH的变化检测给予细胞相同浓度（10-6mmol/L）AngⅡ的刺激后，分别作用0min，5min，15min，30min，60min，90min，120min后收取细胞，按试剂盒说明书熔炼细胞2次，进行测定。4G6PD活性变化测定给予细胞相同浓度（10-6mmol/L）AngⅡ的刺激后，分别作用0min，5min，15min，30min，60min，90min，120min后收取细胞，裂解蛋白并定量，冻于-70℃。按试剂盒说明书进行测定。5G6PD蛋白表达变化检测给予细胞相同浓度（10-6mmol/L）AngⅡ的刺激后，分别作用0min，5min，15min，30min，60min，90min，120min后收取细胞，提取蛋白，Western Blotting对G6PD进行测定。6NOS及NO的检测(1)分别给予细胞0min，5min，15min，30min，60min，90min，120min用相同浓度10-6mmol/L的AngⅡ的刺激后，收取细胞上清液，采用NO试剂盒进行检测。(2)分别给予细胞0min，5min，15min，30min，60min，90min，120min用相同浓度10-6mmol/L的AngⅡ的刺激后，收取细胞上清液，采用NOS试剂盒进行检测。7数据处理所有数据均用X S表示，采用SPSS16.0软件进行处理，对所测定结果进行正态性及方差齐性检验，多样本均数比较采用单因素方差分析（oneway ANOVA），以P <0.05为差异有统计学意义。结果：1AngⅡ刺激HUVEC后ROS的产生增多。(1)不同浓度的AngⅡ(0，10-6，10-7，10-8m

关键词：血管紧张素-Ⅱ 葡萄糖-6 -磷酸脱氢酶还原型辅酶ⅱ 活性氧簇一氧化氮合酶一氧化氮

冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂联用抗宫颈癌活性评价及其机制研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂联用抗宫颈癌活性评价及其机制研究

作者：刘亚洁郑州大学

学位级别：硕士

冬凌草甲素在多种癌症如宫颈癌、卵巢癌和胃癌等有抗肿瘤活性,但其生物利用度低、抗肿瘤作用机制不明等问题,限制了其临床抗肿瘤研究。因此,亟需提高冬凌草甲素抗肿瘤活性并阐明其抗肿瘤作用机制。本课题组前期实验发现抑制SLC7A11能够... 详细信息

冬凌草甲素在多种癌症如宫颈癌、卵巢癌和胃癌等有抗肿瘤活性,但其生物利用度低、抗肿瘤作用机制不明等问题,限制了其临床抗肿瘤研究。因此,亟需提高冬凌草甲素抗肿瘤活性并阐明其抗肿瘤作用机制。本课题组前期实验发现抑制SLC7A11能够显著提高冬凌草甲素抗宫颈癌细胞增殖作用。SLC7A11在多种癌症中高表达并促进肿瘤发生发展,是潜在的抗肿瘤靶标。因此,本课题拟评价冬凌草甲素和SLC7A11抑制剂联用的抗宫颈癌活性,并探索其分子作用机制。首先,我们用SLC7A11抑制剂和小RNA干扰技术下调SLC7A11,验证了抑制SLC7A11能够显著提高冬凌草甲素对宫颈癌细胞的增殖抑制活性。接着,我们用流式细胞术和蛋白免疫印迹实验检测了冬凌草甲素和SLC7A11抑制剂联用对细胞周期和细胞凋亡的作用,结果显示冬凌草甲素或SLC7A11抑制剂单用对细胞周期和细胞凋亡均无作用,但两化合物联用能够引起明显的G/M期阻滞和细胞凋亡。然而,细胞凋亡抑制剂对两化合物联用引起的细胞增殖作用影响微弱。基于SLC7A11是关键的铁死亡负调控因子,我们检测了冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂联用对铁死亡的影响,发现冬凌草甲素或SLC7A11抑制剂单用对铁死亡无明显影响,但两化合物联用能够诱导细胞内脂质活性氧和MDA含量增多,提示两化合物联用诱导铁死亡的发生。而且,铁死亡抑制剂Ferrostatin-1能够部分拮抗两化合物联用引起的细胞增殖抑制作用。接着,我们在宫颈癌细胞裸鼠异种植瘤模型中评价了冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂的抗肿瘤活性,发现冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂联用能够明显抑制肿瘤生长。综上,冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂在细胞水平和动物水平表现出显著的协同抗宫颈癌作用。接下来,我们初步探索了冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂发挥协同抗宫颈癌活性的分子机制。首先,通过蛋白免疫印迹实验和RT-q PCR实验,我们发现冬凌草甲素能够上调SLC7A11。接着,我们用流式细胞术检测两化合物联用对活性氧的作用,发现冬凌草甲素微弱地升高活性氧水平,但两化合物联用明显促进活性氧蓄积。同时,我们发现还原剂NAC和DTT能够显著拮抗两化合物联用引起的细胞增殖抑制。随后,我们发现两化合物联用对GSH/GSSG比值影响较小。基于此,我们进一步检测了冬凌草甲素和SLC7A11抑制剂联用对NADPH/NADP比值的作用,发现两化合物联用能够降低NADPH/NADP比值,且NADPH能够有力地拮抗两化合物的协同细胞增殖抑制活性。HO-1受NRF2调控,是重要的抗氧化因子,因此,我们研究了其对两化合物联用抗宫颈癌作用的影响。结果显示冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂联用明显升高HO-1的表达,抑制HO-1活性或下调其表达能够进一步增强冬凌草甲素和SLC7A11抑制剂对宫颈癌细胞的增殖抑制活性,提示HO-1在冬凌草甲素与SLC7A11抑制剂联用抗宫颈癌作用中发挥保护肿瘤细胞的作用。综上,本课题主要发现了冬凌草甲素和SLC7A11抑制剂具有强的协同抗宫颈癌作用,且两化合物联用主要通过诱导活性氧蓄积和降低NADPH/NADP比值发挥协同抗宫颈癌作用。本研究提高了冬凌草甲素的抗宫颈癌活性,同时阐释了两化合物联用的抗肿瘤作用机制,这些发现为促进冬凌草甲素的临床应用提供了理解基础。

关键词：冬凌草甲素宫颈癌 SLC7A11 活性氧还原型辅酶ⅱ