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运动发酵单胞菌232B木薯快速乙醇发酵

太阳能学报 2009年第9期30卷 1228-1232页

作者：周玲玲赵海甘明哲靳艳玲申乃坤戚天胜中国科学院成都生物研究所成都610041 中国科学院研究生院北京100049 成都固生科技发展有限公司成都610041

以运动发酵单胞菌232B(*** 232B)为菌种,木薯为底物进行同步糖化快速乙醇发酵的研究。首先采用Full Factorial设计和最速上升实验确定了培养基成分中的两个显著性因子及其最适浓度:酵母粉4.0g·kg^(-1),硫酸铵0.8g·kg^(-1)。在最适合... 详细信息

以运动发酵单胞菌232B(*** 232B)为菌种,木薯为底物进行同步糖化快速乙醇发酵的研究。首先采用Full Factorial设计和最速上升实验确定了培养基成分中的两个显著性因子及其最适浓度:酵母粉4.0g·kg^(-1),硫酸铵0.8g·kg^(-1)。在最适合的培养基条件下,对木薯料水比和糖化酶用量进行了优化,得到*** 232B木薯乙醇发酵最佳料水比为1:3,糖化酶浓度为4AGU·g^(-1)淀粉,乙醇发酵4.915g·(kg·h)^(-1)。利用高效液相色谱对发酵液中残糖进行了分析,证明葡萄糖、果糖等单糖已完全被菌体利用,剩余糖多为二糖、三糖等不可发酵的低聚糖。

关键词：运动发酵单胞菌木薯燃料乙醇快速乙醇发酵

运动发酵单胞菌同步糖化发酵厨余垃圾制取乙醇

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中国环境科学 2008年第3期28卷 251-254页

作者：马鸿志宫利娟汪群慧徐文龙哈尔滨工业大学环境科学与工程系黑龙江哈尔滨150090 北京科技大学环境工程系北京100083 中国城市建设研究院北京100029

以学生食堂的厨余垃圾为原料,接种运动发酵单胞菌同步糖化发酵制取燃料乙醇,探讨其发酵过程的影响因素,并与酵母发酵的结果进行对比.结果表明,较适宜的乙醇发酵条件为:固液比1:0.5,pH5,接种量10%,温度30℃,发酵时间40h,在此条件下,乙醇... 详细信息

以学生食堂的厨余垃圾为原料,接种运动发酵单胞菌同步糖化发酵制取燃料乙醇,探讨其发酵过程的影响因素,并与酵母发酵的结果进行对比.结果表明,较适宜的乙醇发酵条件为:固液比1:0.5,pH5,接种量10%,温度30℃,发酵时间40h,在此条件下,乙醇产量为53g/L.与接种酵母进行乙醇发酵相比,运动发酵单胞菌发酵具有乙醇产率高,发酵速率快等优点,可以有效地从厨余垃圾中生产乙醇.

关键词：厨余垃圾同步糖化发酵运动发酵单胞菌燃料乙醇发酵条件

运动发酵单胞菌共表达α-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶发酵甘薯生产乙醇

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应用与环境生物学报 2012年第5期18卷 785-790页

作者：王广珺何明雄张义正四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室成都610064

运动发酵单胞菌是乙醇发酵的极佳菌种,但其所能利用的发酵底物范围狭窄,不能利用淀粉作为发酵底物.为增加其利用底物的范围使其能够水解淀粉,本研究构建了3种表达淀粉酶的运动发酵单胞菌菌株:1)Zymomonas mobilis(pAmyE)表达α-淀粉酶;2... 详细信息

运动发酵单胞菌是乙醇发酵的极佳菌种,但其所能利用的发酵底物范围狭窄,不能利用淀粉作为发酵底物.为增加其利用底物的范围使其能够水解淀粉,本研究构建了3种表达淀粉酶的运动发酵单胞菌菌株:1)Zymomonas mobilis(pAmyE)表达α-淀粉酶;2)***(pGA)表达葡萄糖淀粉酶;3)***(pAmyGA)共同表达α-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶.DNS法测定淀粉酶活显示,每种转化菌株的胞外淀粉酶活性均高于胞内,且两种淀粉酶共表达的酶活高于这两种淀粉酶单独表达的酶活之和,说明这两种淀粉酶能够协同作用降解淀粉.对于重组菌株***(pAmyGA),约59.3%的淀粉酶活性都在胞外检测到.用淀粉含量高且耐贮存的徐薯18匀浆加少量葡萄糖作为培养基直接用上述3个菌株发酵生产乙醇.结果显示,共表达α-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶的重组菌株***(pAmyGA)的乙醇产量为54.7 g/L,达到了理论值的83.2%,表明本研究得到了能够直接高效利用淀粉生产乙醇的运动发酵单胞菌的菌株.

关键词：运动发酵单胞菌乙醇发酵甘薯 α-淀粉酶葡萄糖淀粉酶共表达

运动发酵单胞菌限制-修饰系统缺失突变株的构建及其性质分析(英文)

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应用与环境生物学报 2013年第2期19卷 189-197页

作者：吴波何明雄冯红张艳胡启春张义正四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室成都610064 农业部沼气科学研究所生物质能技术研究中心成都610041 农业部农村可再生能源开发与利用重点实验室成都610041

低遗传转化率阻碍了产乙醇模式菌——运动发酵单胞菌的遗传或分子生物学操作.本研究将运动发酵单胞菌菌株ZM4的5个限制-修饰系统相关基因失活,构建了5个限制-修饰系统突变菌株.研究结果表明:在突变株Zmmrr和Zm1933中,甲基化穿梭表达质粒... 详细信息

低遗传转化率阻碍了产乙醇模式菌——运动发酵单胞菌的遗传或分子生物学操作.本研究将运动发酵单胞菌菌株ZM4的5个限制-修饰系统相关基因失活,构建了5个限制-修饰系统突变菌株.研究结果表明:在突变株Zmmrr和Zm1933中,甲基化穿梭表达质粒pBBR1MCS-tet的电转化率分别提高了17倍和2倍,而限制修饰基因ZMO0575的失活则明显降低了甲基化修饰质粒和非甲基化质粒的转化率.较之其它3个突变株,突变株Zmmrr和Zm1933具有更高的遗传稳定性.发酵实验结果进一步表明这些限制-修饰系统突变株并未显著改变运动发酵单胞菌的主要性质,例如细胞生长、葡萄糖利用率和乙醇产量等.研究运动发酵单胞菌的限制-修饰系统将有助于构建适合于分子遗传操作的基因工程菌株.

关键词：运动发酵单胞菌限制-修饰系统基因敲除电转化乙醇发酵

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运动发酵单胞菌和大肠杆菌间穿梭质粒的构建

南开大学学报（自然科学版） 2006年第3期39卷 23-28页

作者：邹少兰高卫华刘成张敏华天津大学石化中心天津300072

运动发酵单胞菌(***)是目前发现的乙醇发酵能力最强的微生物之一,被认为是进行大规模乙醇生产的潜在菌种；但由于其可利用的碳源范围窄,所以对其进行基因工程改造首先需要有较好的载体系统．以***内源质粒pZM2和大肠杆菌(***)质粒pBR328... 详细信息

运动发酵单胞菌(***)是目前发现的乙醇发酵能力最强的微生物之一,被认为是进行大规模乙醇生产的潜在菌种；但由于其可利用的碳源范围窄,所以对其进行基因工程改造首先需要有较好的载体系统．以***内源质粒pZM2和大肠杆菌(***)质粒pBR328、pACYC184为出发质粒,构建了三个***之间的克隆型穿梭质粒,即pZB1、pZB21和pZB31．对它们在*** CP4中的稳定性、拷贝数的初步比较分析表明：pZB21最稳定、拷贝数最高,pZB31次之,pZB1最差．进一步以pZB21为载体,在***- bilis CP4中表达***的talB基因,酶活水平为0．087 U/mg蛋白．证明pZB21是能用于基因表达的、较为理想的***之间的穿梭载体．

关键词：运动发酵单胞菌穿梭质粒稳定性拷贝数 talB基因

运动发酵单胞菌RecET重组系统的构建及应用

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四川大学学报（自然科学版） 2016年第1期53卷 209-214页

作者：李涛曹庆华吴燕谭雪梅张义正四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室成都610064

为了提高外源基因整合到染色体的效率,在已构建的运动发酵单胞菌-大肠杆菌穿梭载体基础上,构建了RecET表达质粒pSUZM3a-RecET.选取乙醇脱氢酶Ⅰ(adhA)基因作为靶基因,四环素抗性基因(Tcr)作为筛选标记基因,检测RecET重组系统在***中进... 详细信息

为了提高外源基因整合到染色体的效率,在已构建的运动发酵单胞菌-大肠杆菌穿梭载体基础上,构建了RecET表达质粒pSUZM3a-RecET.选取乙醇脱氢酶Ⅰ(adhA)基因作为靶基因,四环素抗性基因(Tcr)作为筛选标记基因,检测RecET重组系统在***中进行基因重组的可行性.将两端带有60bp adhA基因同源臂的四环素抗性基因片段电击转化含有RecET重组系统表达质粒的运动发酵单胞菌ZM4,获得adhA基因缺失突变菌株.对突变菌株adhA基因的PCR产物进行测序发现,adhA基因已被置换为四环素抗性基因.上述结果表明:RecET重组系统在运动发酵单胞菌中具有高效、便捷和可操作性,只需60bp同源臂即可完成同源重组.

关键词：运动发酵单胞菌 RecET重组系统基因敲除基因敲入

运动发酵单胞菌和休哈塔假丝酵母混合发酵秸秆产乙醇

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食品与发酵工业 2017年第1期43卷 31-36页

作者：黄达明王美娟管国强崔凤杰霍书豪赵鹏翔张军宏卜令习赵正凯江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013 国网节能服务有限公司北京生物质能源技术中心北京100053

首先考察了运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis,***)和休哈塔假丝酵母(Candida shehatae,***)分别利用葡萄糖或木糖为唯一底物时的乙醇发酵特性;其次,研究了单菌及双菌发酵混合糖(葡萄糖和木糖比例为3∶1)的产乙醇性能;在此基础上,考察... 详细信息

首先考察了运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis,***)和休哈塔假丝酵母(Candida shehatae,***)分别利用葡萄糖或木糖为唯一底物时的乙醇发酵特性;其次,研究了单菌及双菌发酵混合糖(葡萄糖和木糖比例为3∶1)的产乙醇性能;在此基础上,考察了单菌和双菌培养应用于玉米秸秆发酵产乙醇的可行性。结果表明,***和***的接种方式显著影响混合糖发酵产乙醇的效率,当分步接种发酵48 h后,乙醇产量达到最高,为25.77 g/L。当以60 g/L Na OH预处理的玉米秸秆为底物时,分步接种可高效利用秸秆酶解产物(葡萄糖和木糖)实现乙醇产量的最大值(22.34 g/L),提示***和***分步接种发酵可最大化地发酵秸秆中的葡萄糖和木糖生产乙醇,有利于乙醇的高产率生产,可为实现纤维原料生产燃料乙醇的工业化提供参考。

关键词：混合糖运动发酵单胞菌休哈塔假丝酵母乙醇玉米秸秆

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运动发酵单胞菌乙醇发酵条件的优化

现代化工 2009年第S2期29卷 129-131页

作者：张向东杨谦张炳照哈尔滨工业大学生命科学系黑龙江哈尔滨150001

通过对运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)乙醇发酵条件和培养基成分分别进行单因子优化和正交优化,确定运动发酵单胞菌Z1乙醇发酵最佳葡萄糖含量为10%~15%,最适接种量为发酵培养基体积的1%,最佳发酵温度为30~35℃,培养基最适pH为6.0~9... 详细信息

通过对运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)乙醇发酵条件和培养基成分分别进行单因子优化和正交优化,确定运动发酵单胞菌Z1乙醇发酵最佳葡萄糖含量为10%~15%,最适接种量为发酵培养基体积的1%,最佳发酵温度为30~35℃,培养基最适pH为6.0~9.0;其发酵培养基最佳基础成分为:MgSO40.01%,(NH4)2SO40.18%,KH2PO40.18%,酵母膏0.9%;在这4种成分中酵母膏对乙醇产率的影响最大。

关键词：运动发酵单胞菌乙醇发酵

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运动发酵单胞菌酒精发酵糟液的全回流技术

食品与发酵工业 2004年第5期30卷 69-71页

作者：石贵阳陶飞蔡宇杰徐柔章克昌江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院无锡214036

酒精生产会产生大量的酒糟废液,若不适当处理,将会对环境造成严重的污染。文中将细菌酒精发酵废液经过过滤后,代替拌料用水,循环用于酒精生产。回流发酵进行了8批,酒精产量没有降低,体积分数稳定在7.3％左右。发酵液残糖和最终pH也趋于... 详细信息

酒精生产会产生大量的酒糟废液,若不适当处理,将会对环境造成严重的污染。文中将细菌酒精发酵废液经过过滤后,代替拌料用水,循环用于酒精生产。回流发酵进行了8批,酒精产量没有降低,体积分数稳定在7.3％左右。发酵液残糖和最终pH也趋于稳定,分别在1.5g/L和4.0上下波动。相对于酵母酒糟回流技术,细菌酒糟回流技术所需的处理过程更简单。而且在回流中,不需要每次都添加氮源,这样可以减少发酵有害物质的积累,有利于实现酒糟滤液全回流。

关键词：运动发酵单胞菌酒精发酵糟液全回流技术循环利用氮源补充