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敲低线粒体转录因子A(TFAM)抑制人宫颈癌细胞及骨肉瘤细胞自噬及增殖、侵袭和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第4期40卷 311-318页

作者：许颖高榴杨靖瑞汪晶蒋旭禹莉蚌埠医科大学检验医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学输血学教研室安徽蚌埠233030

目的研究线粒体转录因子A(TFAM)对宫颈癌HeLa细胞及骨肉瘤U2OS细胞的线粒体功能、自噬、增殖、侵袭、迁移的影响。方法HeLa、U2OS细胞转染TFAM小干扰片段(si-TFAM)下调TFAM表达,Mito-Tracker Red CMXRos染色结合激光共聚焦显微镜检测线... 详细信息

目的研究线粒体转录因子A(TFAM)对宫颈癌HeLa细胞及骨肉瘤U2OS细胞的线粒体功能、自噬、增殖、侵袭、迁移的影响。方法HeLa、U2OS细胞转染TFAM小干扰片段(si-TFAM)下调TFAM表达,Mito-Tracker Red CMXRos染色结合激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位(MMP)、MitoSOX^(TM)Red标记法检测线粒体活性氧(mtROS)水平、实时定量PCR检测线粒体DNA(mtDNA)的表达,免疫荧光细胞化学染色检测自噬体数量的变化。Western blot法检测TFAM、微管相关蛋白1轻链3A/B(LC3A/B)、自噬相关基因2A(ATG2A)、ATG2B、ATG9A、锌指转录因子Snail、基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的表达。CCK-8法、平板集落形成实验检测细胞增殖,Transwell^(TM)实验、划痕愈合实验检测细胞侵袭、迁移的变化。结果下调TFAM表达导致HeLa及U2OS细胞MMP减少,mtDNA拷贝数减少,mtROS产生量增加。LC3A/B蛋白含量较对照组明显下降,胞质内自噬体数量明显减少,自噬早期阶段蛋白ATG2B、ATG9A表达量明显减少。HeLa及U2OS细胞Snail、MMP2和MMP9蛋白表达均减少。干扰TFAM表达,抑制HeLa及U2OS细胞的增殖、侵袭、迁移能力。结论下调TFAM表达抑制线粒体功能,延缓自噬进程,降低宫颈癌细胞及骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力。

关键词：宫颈癌细胞骨肉瘤细胞线粒体转录因子A(TFAM) 自噬侵袭迁移

姜黄素通过调控超级增强子相关基因抑制骨肉瘤的增殖和迁移

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中南大学学报（医学版） 2024年第4期49卷 541-552页

作者：欧阳湛波朱海宏刘忠越涂超屈健鲁琼徐敏中南大学湘雅二医院药学部长沙410011 中南大学湘雅二医院临床药学研究所长沙410011 岳阳市中心医院药学部湖南岳阳414000 中南大学湘雅二医院骨科长沙410011 中南大学湘雅二医院重症医学科长沙410011

目的:超级增强子相关基因可能跟骨肉瘤进程息息相关,姜黄素对骨肉瘤等肿瘤具有一定的抑制作用。本研究旨在探讨姜黄素在体内外对骨肉瘤的影响,并研究姜黄素是否可以通过抑制超级增强子相关基因LIM衰老细胞抗原样结构域1(LIM and senesce... 详细信息

目的:超级增强子相关基因可能跟骨肉瘤进程息息相关,姜黄素对骨肉瘤等肿瘤具有一定的抑制作用。本研究旨在探讨姜黄素在体内外对骨肉瘤的影响,并研究姜黄素是否可以通过抑制超级增强子相关基因LIM衰老细胞抗原样结构域1(LIM and senescent cell antigen-like-containing domain 1,LIMS1)、富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)、含无菌α基序结构域蛋白4A(sterile alpha motif domain containing4A,SAMD4A)的表达来抑制骨肉瘤的进展。方法:用5~50μmol/L姜黄素分别处理人骨肉瘤细胞系(MG63细胞或U2OS细胞)24、48和72 h后,采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞活力。分别用二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)或姜黄素(2.5、5.0μmol/L)孵育细胞7 d,采用克隆形成实验测定体外细胞增殖能力。用含DMSO或姜黄素(10、15μmol/L)处理细胞后,采用划痕愈合实验、transwell迁移实验评价细胞的迁移能力,实时反转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcription PCR,real-time RT-PCR)和蛋白质印迹法检测细胞中LIMS1、SPARC、SAMD4A的mRNA和蛋白质的表达水平。建立骨肉瘤荷瘤裸鼠模型,用姜黄素灌胃14 d后评估姜黄素在体内对骨肉瘤体积和重量的影响。采用real-time RT-PCR检测12对骨肉瘤患者的癌组织和癌旁组织中LIMS1、SPARC、SAMD4A的mRNA表达水平。结果:不同浓度的姜黄素分别处理细胞24、48和72 h后,细胞活力均显著下降。与DMSO组相比,2.5μmol/L姜黄素组和5.0μmol/L姜黄素组细胞克隆形成率均明显下降(均P迁移率均明显下降,除10μmol/L姜黄素组24 h的U2OS细胞迁移率差异无统计学意义外(P>0.05),其余差异均有统计学意义(P迁移实验结果表明:与DMSO组比较,10μmol/L姜黄素组和15μmol/L姜黄素组的迁移细胞数均明显减少(均P0.05)。结论:姜黄素在体内外抑制骨肉瘤的增殖、迁移等进程,这可能与超级增强子相关基因LIMS1的失活有关。

关键词：骨肉瘤姜黄素超级增强子相关基因增殖迁移

下调METTL5通过Wnt/β-catenin信号通路抑制三阴乳腺癌细胞增殖、迁移与侵袭

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中国药理学通报 2024年第2期40卷 285-291页

作者：吴坤琳严乾壹王德星缪秀英张惠灏福建医科大学附属第一医院甲状腺乳腺外科福建福州350005 福建医科大学附属第一医院滨海院区国家区域医疗中心综合外科二区福建福州350005 福建医科大学第一临床医学院福建福州350005

目的探讨甲基转移酶5(methyltransferase-like 5,METTL5)在三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中的作用和潜在机制。方法采用免疫组织化学方法和Western blot检测TNBC肿瘤组织和细胞系中METTL5的表达情况。用靶向METTL5的shRNA(shRNA-METTL5)转染TNBC细胞后,用CCK-8、集落形成、伤口愈合以及Transwell实验分别检测细胞增殖活性、迁移与侵袭,Western blot检测Wnt/β-catenin信号关键蛋白的表达。构建异种移植瘤模型,验证敲降METTL5对TNBC细胞在体内生长以及Wnt/β-catenin信号活性的影响。结果METTL5在TNBC肿瘤组织和细胞系中表达上调(P迁移和侵袭并降低了Wnt/β-catenin信号分子β-catenin、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-7的表达(均P迁移与侵袭,其作用可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词：三阴乳腺癌甲基转移酶5 m6A甲基化 Wnt/β-catenin 增殖迁移侵袭

NCOR2基因通过调控PI3K/AKT通路促进食管鳞状细胞癌KYSE450细胞迁移和侵袭

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第4期31卷 342-350页

作者：姚佳丽石秀枝程圣旗张雨彤安哲昆王彦强山西医科大学基础医学院山西太原030001 山西医科大学转化医学研究中心山西太原030001

目的:探究核受体辅阻遏物2(NCOR2)基因对食管鳞状细胞癌(ESCC)发生发展的影响及其潜在的分子调控机制。方法:收集2017年5月至2018年7月间在山西省肿瘤医院确诊的155例ESCC患者的癌及癌旁组织标本及临床资料,利用患者的转录组和临床病理... 详细信息

目的:探究核受体辅阻遏物2(NCOR2)基因对食管鳞状细胞癌(ESCC)发生发展的影响及其潜在的分子调控机制。方法:收集2017年5月至2018年7月间在山西省肿瘤医院确诊的155例ESCC患者的癌及癌旁组织标本及临床资料,利用患者的转录组和临床病理数据进行生存预后分析及临床关联性分析。采用qPCR法检测6种ESCC细胞(TE-1、TE-5、TE-9、KYSE150、KYSE180和KYSE450)中NCOR2基因的表达水平,筛选NCOR2基因高表达的KYSE450细胞进行siRNA敲低实验,构建敲降NCOR2的细胞模型。利用CCK-8、克隆形成、细胞划痕和Transwell实验检测敲低NCOR2对KYSE450细胞增殖活性、克隆形成、迁移和侵袭能力的影响。对NCOR2敲低的KYSE450细胞进行转录组测序分析,筛选差异表达基因,进行GO和KEGG富集分析,解析NCOR2可能影响的信号调控网络。结果:NCOR2在ESCC组织中表达水平显著高于癌旁组织(P迁移和侵袭能力均显著降低(均P0.05)。在KYSE450细胞中敲低NCOR2基因后,转录组测序分析后发现54个基因发生了显著上调、127个基因发生了显著下调。KEGG分析发现,显著差异基因富集于PI3K/AKT分子信号通路(P迁移与侵袭,进而影响ESCC的发生与发展。

关键词：核受体辅阻遏物2 食管鳞状细胞癌 KYSE450细胞迁移侵袭 PI3K/AKT信号通路

P4HB在胶质母细胞瘤中的表达及其对临床预后和肿瘤细胞增殖与迁移的影响

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解放军医学杂志 2024年第4期49卷 459-467页

作者：黄冠又侯小红葛学成甘鸿川郝淑煜吴震贵阳市第二人民医院神经外科贵州贵阳550081 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科北京100070

目的探讨脯氨酸4-羟化酶β多肽(P4HB)在多形性胶质母细胞瘤(GBM)中的表达及其对临床预后和肿瘤细胞增殖与迁移的影响。方法(1)根据癌症基因组图谱(TCGA)、GTEx数据库和GEPIA2数据库,应用R软件分析P4HB基因在GBM与正常脑组织的表达差异。... 详细信息

目的探讨脯氨酸4-羟化酶β多肽(P4HB)在多形性胶质母细胞瘤(GBM)中的表达及其对临床预后和肿瘤细胞增殖与迁移的影响。方法(1)根据癌症基因组图谱(TCGA)、GTEx数据库和GEPIA2数据库,应用R软件分析P4HB基因在GBM与正常脑组织的表达差异。(2)选取2017年2月-2019年12月在贵阳市第二人民医院神经外科接受手术治疗的52例GBM肿瘤标本,另选取10例正常脑组织作为对照。应用免疫组织化学方法检测GMB组织和正常脑组织中P4HB的表达水平。采用log-rank检验的Kaplan-Meier法进行生存分析;受试者工作特征(ROC)曲线分析P4HB对GBM患者生存率的预测价值。采用Cox回归模型分析P4HB表达水平及相关临床病理因素与患者预后的关系。(3)将人源性GBM U87细胞随机分为对照组、NC-siRNA组和P4HB-siRNA组。P4HB-siRNA组转染siRNA干扰P4HB表达。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测U87细胞中P4HB mRNA含量;CCK-8法和免疫荧光染色检测P4HB对U87细胞增殖活力的影响;划痕实验检测P4HB对U87细胞迁移能力的影响。结果与正常脑组织比较,P4HB在GBM组织中表达明显上调(P迁移。P4HB可能成为GBM的相关预测标志物和潜在治疗靶点。

关键词：脯氨酸4-羟化酶β多肽胶质母细胞瘤预后增殖迁移

地榆皂苷Ⅰ调控IGFL2-AS1/miR-138-5p抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移

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中草药 2024年第4期55卷 1248-1254页

作者：许运巧刚小清李金锋驻马店市中心医院妇产科河南驻马店463000 河南省人民医院妇产科河南郑州450000

目的探讨地榆皂苷Ⅰ对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制。方法人卵巢癌A2780细胞分别用7.5、15.0、30.0μmol/L的地榆皂苷Ⅰ处理,同时设置si-NC组、si-IGFL2-AS1组、地榆皂苷Ⅰ+pc DNA-IGFL2-AS1组、地榆皂苷Ⅰ+pcDNA组;MT... 详细信息

目的探讨地榆皂苷Ⅰ对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制。方法人卵巢癌A2780细胞分别用7.5、15.0、30.0μmol/L的地榆皂苷Ⅰ处理,同时设置si-NC组、si-IGFL2-AS1组、地榆皂苷Ⅰ+pc DNA-IGFL2-AS1组、地榆皂苷Ⅰ+pcDNA组;MTT检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;Transwell法检测迁移和侵袭细胞数;Western blotting法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达;双荧光素酶报告实验检测IGFL2-AS1和miR-138-5p的靶向关系。结果不同浓度的地榆皂苷Ⅰ处理A2780细胞后,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著减弱(P迁移及侵袭(P迁移和侵袭的作用(P迁移。

关键词：地榆皂苷Ⅰ IGFL2-AS1 miR-138-5p 卵巢癌增殖侵袭迁移

蒲公英多糖通过下调LncRNA CCAT1表达抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭

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中草药 2024年第4期55卷 1145-1157页

作者：刘晓燕龙凤黄勇赵玉周旋潘靖宇李雪叶海琳甘肃中医药大学甘肃兰州730000 西安宝石花长庆医院陕西西安710000 甘肃省中医药防治慢性疾病重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室甘肃兰州730000

目的通过观察蒲公英多糖(dandelion polysaccharide,DP)联合小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)靶向沉默长链非编码RNA(LncRNA)结肠癌相关转录因子1(colon cancer-associated transcript 1,CCAT1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,探究DP抗乳腺癌可能的分子机制。方法在线数据工具分析CCAT1在乳腺癌组织中的差异表达,qRT-PCR分别检测CCAT1在乳腺癌细胞系中的差异表达、DP(100、200μg/mL)对MCF-10A、MCF-7、MDA-MB-231细胞中CCAT1表达的影响以及siCCAT1对MDA-MB-231细胞中CCAT1表达的影响;CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验分别检测DP联合siCCAT1对MDA-MB-231细胞活力、迁移和侵袭能力的影响;在线数据工具预测CCAT1下游靶基因及靶基因富集的信号通路;Western blotting检测DP联合siCCAT1对MDA-MB-231细胞EMT相关蛋白及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)/细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)/周期蛋白依赖性激酶6(cyclin-dependent kinases 6,CDK6)信号通路中关键蛋白表达的影响。结果与癌旁正常组织及正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,CCAT1在人乳腺癌组织和细胞中高表达(P迁移和侵袭(P迁移和侵袭能力的作用更为明显(P迁移、侵袭和EMT进程,其机制可能与下调MDA-MB-231细胞中CCAT1表达进而抑制Akt/GSK-3β/Cyclin D1/CDK6信号通路有关。

关键词：蒲公英多糖乳腺癌结肠癌相关转录因子1 蛋白激酶B/糖原合成激酶-3β/细胞周期蛋白D1/周期蛋白依赖性激酶6信号通路迁移侵袭

小檗碱和XAV939联合应用可抑制骨肉瘤细胞MG-63的迁移与凋亡

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第5期31卷 469-476页

作者：吴昊越康兵田志敏张浩强李旭升宁夏医科大学第一临床医学院宁夏银川750004 联勤保障部队第九四〇医院关节外科甘肃兰州730050

目的:探讨小檗碱(BBR)联合XAV939对骨肉瘤MG-63细胞迁移与凋亡的影响及其可能的机制。方法:培养MG-63细胞,分别加入20~120μmol/L的BBR和5~60μmol/L的XAV939,通过CCK-8法测定BBR和XAV939的细胞毒性,采用Chou-Talalay分析法计算两药的... 详细信息

目的:探讨小檗碱(BBR)联合XAV939对骨肉瘤MG-63细胞迁移与凋亡的影响及其可能的机制。方法:培养MG-63细胞,分别加入20~120μmol/L的BBR和5~60μmol/L的XAV939,通过CCK-8法测定BBR和XAV939的细胞毒性,采用Chou-Talalay分析法计算两药的联合指数,确定后续实验的干预剂量;将MG-63细胞随机分为空白对照(NC)组、BBR组、XAV939组和BBR+XAV939联合组,采用划痕愈合实验、Transwell小室法检测BBR与XAV939单独或联合处理对MG-63细胞迁移能力的影响,Hoechst 33258染色、JC-1染色及AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测对细胞线粒体膜电位和凋亡的影响,免疫荧光法检测BAX蛋白的表达,WB法检测对细胞中MMP-2表达的影响,qPCR法检测对MMP-2基因表达的影响。结果:BBR和XAV939以剂量依赖方式抑制MG-63细胞的增殖,选定30μmol/L BBR、7.5μmol/L XAV939用于后续实验。与NC组相比,BBR(30μmol/L)、XAV939(7.5μmol/L)及BBR+XAV939联合处理细胞24 h后,MG-63细胞迁移能力显著降低、凋亡细胞显著增加(均P迁移、促进凋亡,其机制可能与迁移相关蛋白MMP-2的表达降低,凋亡相关蛋白BAX的水平增加有关。

关键词：小檗碱 XAV939 骨肉瘤 MG-63细胞迁移凋亡

竹纤维密胺餐具中三聚氰胺和甲醛在酸性条件下的迁移量测定

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中国食品卫生杂志 2024年第1期36卷 8-14页

作者：张泓金莉莉翁云宣朱蕾北京工商大学轻工科学技术学院北京100048 国家食品安全风险评估中心北京100022 北京工商大学化学与材料工程学院北京100048 塑料卫生与安全质量评价技术北京市重点实验室北京100048 常州进出口工业及消费品安全检测中心江苏常州213022

目的通过研究竹纤维密胺餐具中三聚氰胺和甲醛在酸性条件下的迁移规律,讨论影响迁移水平和安全风险的主要因素,对该类产品的安全管理提供建议。方法采集市场上不同品牌且明确标识含有竹纤维的密胺餐具14种(包括婴幼儿餐具),选择10%(V/V... 详细信息

目的通过研究竹纤维密胺餐具中三聚氰胺和甲醛在酸性条件下的迁移规律,讨论影响迁移水平和安全风险的主要因素,对该类产品的安全管理提供建议。方法采集市场上不同品牌且明确标识含有竹纤维的密胺餐具14种(包括婴幼儿餐具),选择10%(V/V)乙醇和4%(V/V)乙酸,按照GB 5009.156—2016的方法浸泡餐具,再参照食品安全国家标准GB 31604.15—2016和GB 31604.48—2016开展酸性条件下的迁移试验研究。结果竹纤维密胺餐具在接触4%(V/V)乙酸时,三聚氰胺和甲醛的迁移水平远高于10%(V/V)乙醇。对单个样品而言,三聚氰胺和甲醛的迁移趋势呈正相关的规律,且长期重复接触酸性较强的食品时迁移量超标的可能性更高。随着使用次数的增加,两者的整体迁移水平逐渐升高,该规律在竹纤维添加量较高的制品中更为明显。结论竹纤维密胺餐具中的三聚氰胺和甲醛的迁移规律在多次重复使用后仍基本一致;其中三聚氰胺的迁移水平更能反映树脂的分解情况。该类产品长期重复接触酸性食品时三聚氰胺或甲醛迁移量超标的可能性更高,尤其对于婴幼儿产品。应加强标签标识及消费者指导,杜绝使用不合规原料,促进行业良性发展。

关键词：三聚氰胺甲醛迁移食品安全竹纤维密胺餐具