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黄芩苷通过miR-126-5p调节WEE1对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响

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中国老年学杂志 2024年第11期44卷 2693-2698页

作者：符鑫彭鑫黄婷婷廖雪霞颜悦蓉刘悦儋州市人民医院消化内科海南儋州571799 湖北文理学院附属医院襄阳市中心医院消化内科

目的探讨黄芩苷通过微小核糖核酸(miR)-126-5p调节WEE1对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法细胞计数试剂(CCK)-8法测定0、10、50、100、150、200μmol/L黄芩苷对体外培养的人食管癌细胞(EC109)增殖率的影响,筛选黄芩苷合适... 详细信息

目的探讨黄芩苷通过微小核糖核酸(miR)-126-5p调节WEE1对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法细胞计数试剂(CCK)-8法测定0、10、50、100、150、200μmol/L黄芩苷对体外培养的人食管癌细胞(EC109)增殖率的影响,筛选黄芩苷合适作用浓度。体外培养EC109,分为对照组、黄芩苷低、高剂量组、阴性对照组、黄芩苷高剂量+miR-126-5p inhibitor组,分组处理细胞后,以5-乙炔-2′-脱氧尿苷(EdU)染色、CCK-8法检测EC109细胞增殖;以Hoechst33258染色检测EC109细胞凋亡率;以免疫荧光染色检测EC109 B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)/Bcl-2;检测细胞迁移与侵袭;以免疫印迹实验检测各组EC109细胞WEE1、增殖蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)、上皮间质转化标志蛋白N-钙黏蛋白(cadherin)及E-cadherin表达;以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测各组EC109细胞miR-126-5p、WEE1 mRNA表达。结果与对照组比较,低、高剂量黄芩苷可明显降低EC109细胞增殖、迁移、侵袭能力和PCNA、N-cadherin蛋白表达及WEE1表达,明显升高细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、miR-126-5p及E-cadherin蛋白表达(P迁移侵袭,促使其凋亡。

关键词：黄芩苷微小核糖核酸(miR)-126-5p WEE1 食管癌细胞增殖凋亡迁移侵袭

ADAR1 p150和p110参与肝癌细胞增殖、迁移和侵袭

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重庆医科大学学报 2024年第7期49卷 820-829页

作者：巩雪柳静蹇文文崔易红涂增重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:研究腺苷脱氨酶1(adenosine deaminase acting on RNA 1,ADAR1)对肝细胞癌(liver hepatocellular carcinoma,LIHC)增殖、迁移与侵袭的影响。方法:利用基因表达谱交互式分析网站GEPIA检测ADAR1在LIHC中的表达水平和预后价值;提取人体肝癌标本的蛋白,通过Western blot实验检测ADAR1的表达情况。将ADAR1 p150和p110过表达质粒和靶向ADAR1 p150和p110的小干扰RNA分别转染进HepG2和Huh7细胞,利用Western blot和qPCR检测转染后细胞的ADAR1表达情况。通过CCK-8实验检测ADAR1对肝癌细胞增殖能力的影响。通过细胞划痕实验和Transwell实验检测ADAR1对肝癌细胞迁移和侵袭的影响。最后,在DAVID在线数据库中分析与ADAR1相关的信号通路,利用Western blot实验检测信号通路中相关蛋白的表达。结果:肝癌组织中ADAR1蛋白质水平明显高于癌旁组织,这与生物信息学的预测一致,且高表达的ADAR1与肝癌的不良预后相关;通过CCK-8实验,本研究发现过表达ADAR1可以促进肝癌细胞的增殖能力(P迁移和侵袭(P迁移和侵袭能力受到抑制(P迁移和侵袭。

关键词：腺苷脱氨酶1 肝癌增殖迁移侵袭 Wnt/β-catenin信号通路

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黄芩苷纳米粒制备及其对乳腺癌细胞迁移、侵袭和凋亡作用的评价

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中国医院药学杂志 2024年

作者：黄英红吴昭容周欢思吴亚萍秦丹孙宗喜广西中医药大学附属国际壮医医院壮瑶医药研究实验室北京中医药大学中药学院广西中医药大学药学院

目的：以植物来源的玉米醇溶蛋白为载体材料制备黄芩苷-玉米醇溶蛋白纳米粒（BA-ZNPs），并对其进行体外抗肿瘤活性评价。方法：采用相分离法构建BA-ZNPs，通过观测形态学、粒径大小、Zeta电位、包封率、载药量等指标对纳米粒进行表征... 详细信息

目的：以植物来源的玉米醇溶蛋白为载体材料制备黄芩苷-玉米醇溶蛋白纳米粒（BA-ZNPs），并对其进行体外抗肿瘤活性评价。方法：采用相分离法构建BA-ZNPs，通过观测形态学、粒径大小、Zeta电位、包封率、载药量等指标对纳米粒进行表征。通过CCK-8法检测BA-ZNPs对转移性人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长情况的影响；细胞划痕实验和Transwell小室评价BA-ZNPs对细胞迁移和侵袭作用的影响；流式细胞仪检测BA-ZNPs细胞周期分布及细胞凋亡情况。结果：BA-ZNPs呈类球形，粒径约为110 nm，包封率为（83.02 ± 1.24）%，载药量为（4.39 ± 0.32）%。载体材料无细胞毒性，黄芩苷（BA）、BA-ZNPs均可显著抑制肿瘤细胞的生长，纳米化显著增强BA的细胞毒作用。相较于BA，BA-ZNPs对肿瘤细胞愈合能力的抑制作用显著增强，对肿瘤细胞的迁移和侵袭抑制作用也显著提高，更利于发挥细胞周期阻滞作用，提高BA对肿瘤细胞的杀伤能力并诱导细胞凋亡。结论：黄芩苷纳米粒可有效抑制MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭，进而诱导细胞凋亡，有望为治疗转移性乳腺癌提供基础理论依据。

关键词：黄芩苷玉米蛋白纳米粒乳腺癌细胞迁移侵袭凋亡

LncRNA DGUOK-AS1调控miR-204-5p对肝癌细胞MHCC97-H增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

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中国老年学杂志 2024年第5期44卷 1243-1248页

作者：王磊辛小敏闫小燕王秀敏安阳市人民医院消化内科河南安阳455000

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)脱氧鸟苷激酶反义RNA(DGUOK-AS)1调控miR-204-5p对肝癌细胞MHCC97-H增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析肝癌组织中DGUOK-AS1和miR-204-5p表达量。双荧光素酶报... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)脱氧鸟苷激酶反义RNA(DGUOK-AS)1调控miR-204-5p对肝癌细胞MHCC97-H增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析肝癌组织中DGUOK-AS1和miR-204-5p表达量。双荧光素酶报告实验确定DGUOK-AS1与miR-204-5p靶向关系,RT-qPCR检测干扰DGUOK-AS1表达后MHCC97-H细胞miR-204-5p表达量。集落形成实验分析DGUOK-AS1和miR-204-5p表达对MHCC97-H细胞增殖的影响。流式细胞仪分析细胞周期分布和凋亡。Transwell实验分析细胞迁移和侵袭。结果与癌旁组织比较,肝癌组织中DGUOK-AS1表达量明显上调,而miR-204-5p表达量明显下调(P迁移和侵袭细胞数、S期细胞比例显著降低,细胞凋亡率显著升高(P迁移和侵袭细胞数、S期细胞比例显著升高,细胞凋亡率显著降低(P迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。

关键词：脱氧鸟苷激酶反义RNA(DGUOK-AS)1 miR-204-5p 肝癌细胞增殖凋亡迁移侵袭

ADNP介导WNT/β-catenin信号通路促进卵巢癌细胞迁移与侵袭

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ADNP介导WNT/β-catenin信号通路促进卵巢癌细胞迁移与侵袭

作者：胡媛媛湖北医药学院

学位级别：硕士

背景:卵巢癌被视为女性生殖系统中最具挑战性的恶性肿瘤之一,由于其高度的侵袭性和早期阶段缺乏明显的症状和分子标志物而导致5年生存率极低,预后差,迫切需要开发有效的靶向治疗策略。活性依赖性神经保护蛋白(ADNP)是一种转录因子,定位... 详细信息

背景:卵巢癌被视为女性生殖系统中最具挑战性的恶性肿瘤之一,由于其高度的侵袭性和早期阶段缺乏明显的症状和分子标志物而导致5年生存率极低,预后差,迫切需要开发有效的靶向治疗策略。活性依赖性神经保护蛋白(ADNP)是一种转录因子,定位于人类染色体20q12-13.2上,其与多种恶性肿瘤的发展有关,包括卵巢癌。该基因区域的扩增与肿瘤的侵袭性生长相关。研究发现ADNP与高级别浆液性卵巢癌的不良预后密切相关,并与多种肿瘤细胞转移过程中的上皮间充质转化(EMT)有关。前期研究发现ADNP的共表达基因主要富集在Wnt通路,而多项研究表明Wnt/β-catenin通路在卵巢癌中被过度激活,是调控EMT的主要信号通路,基于此,我们假设ADNP通过调节Wnt/β-catenin信号途径来影响人卵巢癌细胞的上皮-间质转化(EMT),进而改变卵巢癌的侵袭性和迁移能力。目的:此次研究主要是为了探讨ADNP对人卵巢癌细胞上皮间充质转化的影响及参与侵袭转移的可能调控机制。方法:使用生物信息学方法分析ADNP与卵巢癌预后、病理分期的关系,对A DNP共表达基因的进行KEGG富集。在本研究中,使用实时荧光定量PCR(qRT-P CR)和Western blot对正常人卵巢上皮细胞系IOSE80与人卵巢癌细胞系A2780和S KOV3中ADNP的m RNA和蛋白表达水平进行了检测。选定A2780和SKOV3细胞系进行深入实验,通过ADNP特异性小干扰RNA(si RNA)对细胞进行瞬时转染,设置空白及阴性对照组,再次用qRT-PCR和Western blot分析各组细胞中ADNPm RNA和蛋白的表达水平,以筛选出最合适的两种RNA序列用于进一步实验。采用划痕实验和Transwell侵袭实验评估各组细胞的迁移和侵袭能力。qRT-PCR法和W estern blot法检测EMT标志蛋白E-cadherin、Vimentin和N-cadherin转录水平和蛋白水平的变化。通过qRT-PCR和Western blot法,我们检测了转录水平和蛋白水平上Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白p-GSK-3β、Wnt3a、GSK-3β以及β-catenin的表达变化,同时使用ELISA法检测各组细胞上清液中Wnt3a的含量。结果:1、生信分析表明ADNP与卵巢癌不良预后、病理分期有关,ADNP共表达基因主要富集在Wnt通路。2、相较于正常人卵巢上皮细胞,ADNP的m RNA和蛋白在A2780和SKOV3卵巢癌细胞系中的表达显著提高(P迁移率明显低于对照组(P侵袭实验显示,在A2780和SKOV3两种细胞中,24h、48h、72h干扰组si-ADNP1和si-ADNP3的细胞侵袭数量明显低于对照组(P迁移和侵袭。

关键词：活性依赖性神经保护蛋白卵巢癌上皮间充质转化 Wnt/β-catenin通路迁移侵袭

舒芬太尼调节Fas/FasL信号通路对卵巢癌增殖、迁移和侵袭的影响

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中国优生与遗传杂志 2024年第8期32卷 1587-1592页

作者：王向阳刘安军李波中国人民解放军联勤保障部队第九六〇医院麻醉科山东济南250031 山东大学附属生殖医院麻醉科山东济南250031

目的探讨舒芬太尼对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,分析其机制是否与脂肪酸合成酶(Fas)/脂肪酸合成酶配体(FasL)信号通路有关。方法使用0.001~100μmol/L的舒芬太尼处理卵巢癌细胞SKOV3,筛选最佳药物浓度;将SKOV3细胞分为对照组、... 详细信息

目的探讨舒芬太尼对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,分析其机制是否与脂肪酸合成酶(Fas)/脂肪酸合成酶配体(FasL)信号通路有关。方法使用0.001~100μmol/L的舒芬太尼处理卵巢癌细胞SKOV3,筛选最佳药物浓度;将SKOV3细胞分为对照组、低浓度舒芬太尼组(舒芬太尼-L组,0.01μmol/L舒芬太尼)、中浓度舒芬太尼组(舒芬太尼-M组,0.1μmol/L舒芬太尼)、高浓度舒芬太尼组(舒芬太尼-H组,1μmol/L舒芬太尼)、舒芬太尼-H+sh-NC组、舒芬太尼-H+sh-Fas组。检测各组SKOV3细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Snail、Fas、FasL蛋白表达情况。结果使用0.001~100μmol/L的舒芬太尼处理卵巢癌细胞,细胞存活率显著降低,呈浓度依赖性,选择浓度为0.01、0.1、1μmol/L的舒芬太尼进行后续实验;与对照组相比,舒芬太尼-L组、舒芬太尼-M组、舒芬太尼-H组细胞增殖、迁移、侵袭数,N-cadherin、Snail蛋白水平均降低,细胞凋亡率,E-cadherin、Fas、FasL蛋白水平均升高(P迁移和侵袭的抑制能力。结论舒芬太尼可能通过激活Fas/FasL信号通路抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进卵巢癌细胞凋亡。

关键词：舒芬太尼脂肪酸合成酶/脂肪酸合成酶配体信号通路卵巢癌增殖迁移侵袭

槲皮素抑制乳腺癌细胞迁移侵袭及分子机制研究

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中国中药杂志 2015年第6期40卷 1144-1150页

作者：孙怡顾君苏州大学附属第一医院药学部江苏苏州215006

目的:探究槲皮素(naringenin)对乳腺癌细胞MDA-MB-231转移的影响及其作用机制。方法:MTT法观察经不同浓度槲皮素对乳腺癌细胞MDA-MB-231生长能力的影响;划痕实验(wound healing)及Transwell实验分析考查槲皮素对MDAMB-231水平运动能力... 详细信息

目的:探究槲皮素(naringenin)对乳腺癌细胞MDA-MB-231转移的影响及其作用机制。方法:MTT法观察经不同浓度槲皮素对乳腺癌细胞MDA-MB-231生长能力的影响;划痕实验(wound healing)及Transwell实验分析考查槲皮素对MDAMB-231水平运动能力的影响;采用Western blotting考察槲皮素对MDA-MB-231细胞整合素Integrinβ3,β1及基质金属蛋白酶MMP-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2),MMP-9蛋白表达的影响;运用计算机虚拟对接技术体外评价槲皮素与整合素Integrinβ3的结合能力。结果:槲皮素可以剂量依赖性抑制MDA-MB-231细胞的增殖;Wound healing实验和Transwell小室迁移实验中,随着槲皮素浓度提高,MDA-MB-231迁移数目呈递减趋势;随着槲皮素浓度的提高,乳腺癌细胞侵袭能力呈递减趋势;槲皮素可以剂量依赖性抑制Integrinβ3蛋白表达,而对Integrinβ1的表达不甚明显,此外槲皮素可以显著抑制MMP-2和MMP-9的蛋白表达;计算机虚拟对接结果发现槲皮素与Integrinβ3的结合能力数值为较低负值,表明槲皮素与Integrinβ3有较好的亲和力。结论:槲皮素具有抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞生长能力,阻断MDA-MB-231细胞迁移、运动以及侵袭,其机制为槲皮素与Integrinβ3结合后,下调MMP-2,MMP-9的表达。

关键词：槲皮素计算机虚拟对接 MDA-MB-231 迁移侵袭 MMPs Integrin

miR-204-5p靶向溴结构域蛋白4对舌鳞状细胞癌细胞SCC25增殖和迁移侵袭的影响研究

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华西口腔医学杂志 2020年第2期38卷 185-192页

作者：郑晶张雨温李天客包阳张素欣河北医科大学第四医院口腔科石家庄050011

目的探讨miR-204-5p对溴结构域蛋白(BRD)4的靶向作用机制以及对舌鳞状细胞癌SCC25细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测舌鳞状细胞癌组织以及不同细胞株系间的miR-204-5p和BRD4 mRNA的表达水平;miR... 详细信息

目的探讨miR-204-5p对溴结构域蛋白(BRD)4的靶向作用机制以及对舌鳞状细胞癌SCC25细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测舌鳞状细胞癌组织以及不同细胞株系间的miR-204-5p和BRD4 mRNA的表达水平;miR-204-5p转染SCC25细胞后,细胞计数试剂盒(CCK)8法检测其对细胞增殖的影响,Transwell小室法检测miR-204-5p对SCC25迁移和侵袭的影响;使用TargetScan和荧光素酶实验分析并验证miR-204-5p与BRD4的靶向调控关系;RT-qPCR和Western blot检测miR-204-5p模拟物和抑制剂对BRD4表达水平的影响;Transwell小室法和CCK8法检测miR-204-5p调控BRD4对SCC25增殖和迁移侵袭的影响。结果miR-204-5p在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达下调,BRD4在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达上调;提高miR-204-5p表达量抑制SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭;TargetScan和荧光素酶实验证实miR-204-5p与BRD4具有靶向负调控关系;miR-204-5p模拟物抑制BRD4表达,miR-204-5p抑制剂促进BRD4表达上调;当在SCC25细胞中同时过表达miR-204-5p和BRD4时,BRD4能够回补miR-204-5p对SCC25细胞的抑制作用。结论miR-204-5p能够通过靶向负调控BRD4抑制舌鳞状细胞癌SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词： miR-204-5p 溴结构域蛋白4 增殖迁移侵袭

葫芦素B通过调控HERG1对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭和放射敏感性的影响

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中成药 2020年第6期42卷 1449-1456页

作者：董建设李豪赵俊峰陈瑞廷张林超贾占奎河南省中医院泌尿外科河南郑州450000 郑州大学第一附属医院泌尿外科河南郑州450000

目的探讨葫芦素B通过调控HERG1对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭和放射敏感性的影响。方法葫芦素B(0.1、1、10μmol/L)处理膀胱癌细胞48 h;将si-NC、si-HERG1、pcDNA、pcDNA-HERG1转染至T24细胞;经pcDNA、pcDNA-HERG1转染后,分别加入10μg/m... 详细信息

目的探讨葫芦素B通过调控HERG1对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭和放射敏感性的影响。方法葫芦素B(0.1、1、10μmol/L)处理膀胱癌细胞48 h;将si-NC、si-HERG1、pcDNA、pcDNA-HERG1转染至T24细胞;经pcDNA、pcDNA-HERG1转染后,分别加入10μg/mL葫芦素B培养48 h。MMT法检测各组细胞增殖情况;Transwell评估细胞的迁移和侵袭变化;细胞克隆形成实验测定细胞放射敏感性;RT-PCR检测T24细胞HERG1 mRNA表达;Western blot法检测蛋白表达。结果葫芦素B抑制T24细胞增殖、迁移、侵袭,HERG1mRNA及蛋白表达,呈浓度依赖型(P迁移和侵袭,增强其放射敏感性(P迁移和侵袭和放疗增敏的作用。结论葫芦素B能抑制膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭能力,并且增强细胞的放射敏感性,机制可能与调控HERG1基因有关。

关键词：葫芦素B HERG1 膀胱癌放射敏感性增殖迁移侵袭