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赖氨大黄酸通过抑制HER-2信号通路诱导乳腺癌SK-Br-3细胞凋亡

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药学学报 2008年第11期43卷 1099-1105页

作者：林雅军黄云虹甄永占刘秀均甄永苏中国医学科学院、北京协和医学院医药生物技术研究所北京100050 华北煤炭医学院河北唐山063000

为研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对人乳腺癌细胞株SK-Br-3细胞增殖、凋亡的影响及HER-2信号通路在其中的作用。应用MTT法检测赖氨大黄酸对SK-Br-3细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;应用Western blotting... 详细信息

为研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对人乳腺癌细胞株SK-Br-3细胞增殖、凋亡的影响及HER-2信号通路在其中的作用。应用MTT法检测赖氨大黄酸对SK-Br-3细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;应用Western blotting检测HER-2信号通路蛋白表达水平及蛋白磷酸化水平;应用RT-PCR和免疫化学方法分别检测HER-2 mRNA和蛋白表达水平。结果显示,赖氨大黄酸能有效抑制乳腺癌SK-Br-3细胞增殖,作用48 h的IC50值为85μmol.L-1,并能诱导其凋亡,随药物浓度的增加,细胞凋亡率也逐渐升高;Western blotting结果显示,赖氨大黄酸抑制HER-2蛋白表达和蛋白磷酸化,抑制NF-κB蛋白表达,升高p53和p21蛋白表达;RT-PCR和免疫化学结果表明,赖氨大黄酸能抑制HER-2 mRNA的转录水平,从而抑制其蛋白表达。因此,赖氨大黄酸能有效抑制SK-Br-3细胞增殖,并诱导其凋亡,HER-2/NF-κB/p53/p21参与了赖氨大黄酸诱导SK-Br-3细胞凋亡的过程。赖氨大黄酸解决了大黄酸不溶于水的难题,并且能够通过HER-2信号通路诱导细胞凋亡,有望成为临床肿瘤辅助化疗药物。

关键词：赖氨大黄酸细胞凋亡 HER-2信号通路乳腺肿瘤

赖氨大黄酸对糖尿病大鼠肝脏的保护作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2014年第3期40卷 499-503,I0001页

作者：刘晓庆甄永占郝晓方王梅梅章广玲河北联合大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室河北唐山063000 河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对糖尿病模型大鼠肝脏的保护作用,阐明RHL对肝脏的保护作用机制。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型。将40只大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组、25和50mg·kg-1 RHL治疗组,每组10只。采用... 详细信息

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对糖尿病模型大鼠肝脏的保护作用,阐明RHL对肝脏的保护作用机制。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型。将40只大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组、25和50mg·kg-1 RHL治疗组,每组10只。采用硫代巴比妥酸法检测肝脏组织中丙二醛(MDA)水平,联苯三酚自氧化法和NADPH偶联法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;HE染色观察肝脏组织病理学变化;Nile red染色观察肝脏组织脂肪水平;Western blotting法检测脂肪合成相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,糖尿病模型组大鼠体质量减低,血糖、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平升高(P<0.05),肝脏组织中SOD和GSH-Px活性降低(P<0.05),肝脏组织出现大量脂肪空泡和脂肪蓄积。糖尿病模型大鼠脂肪合成信号通路ERK1/2-SREBP-1c被激活;与模型组比较,25和50mg·kg-1 RHL治疗组大鼠脂肪合成信号通路被抑制。与模型组比较,RHL治疗组大鼠体质量无显著变化,但血糖、TG和TC水平显著降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05)。与糖尿病模型组比较,RHL治疗组大鼠肝脏组织中的脂肪空泡和脂肪蓄积明显减少。结论:RHL能抑制氧化应激、肝脏脂肪变性和脂肪蓄积从而发挥对糖尿病大鼠肝脏的保护作用。

关键词：赖氨大黄酸糖尿病肝脏脂肪肝

赖氨大黄酸和紫杉醇对肺癌细胞增殖的抑制作用和凋亡诱导作用

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吉林大学学报（医学版） 2013年第3期39卷 432-436页

作者：甄永占林雅军章广玲林小虎王梅梅李冉魏静波河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 卫生部北京医院老年医学研究所北京100730 河北省迁西县人民医院胸外科河北唐山064300

目的:研究赖氨大黄酸(RHL)、紫杉醇单独和两者联合对人肺癌H460细胞增殖和凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:选取处于对数生长期肺癌细胞株H460,随机分为对照组(不加药物)、紫杉醇组(1μmol.L-1紫杉醇)、RHL组(100μmol.L-1 RHL)和紫杉... 详细信息

目的:研究赖氨大黄酸(RHL)、紫杉醇单独和两者联合对人肺癌H460细胞增殖和凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:选取处于对数生长期肺癌细胞株H460,随机分为对照组(不加药物)、紫杉醇组(1μmol.L-1紫杉醇)、RHL组(100μmol.L-1 RHL)和紫杉醇联合RHL组,并设空白组。采用MTT法和流式细胞术分别检测各组处理后48h的细胞增殖率和凋亡率;采用Western blotting方法检测凋亡相关蛋白和MEK/ERK蛋白的表达水平。结果:细胞培养48h后,联合用药组细胞增殖率显著低于对照组、紫杉醇组和RHL组(P酸化强度降低。结论:紫杉醇和RHL均可抑制肺癌H460细胞增殖,诱导细胞凋亡;RHL通过降低ERK活性、上调caspase-3和PARP的切割片段蛋白表达,增强紫杉醇抑制肺癌细胞增殖和凋亡诱导作用。

关键词：赖氨大黄酸紫杉醇肺癌细胞凋亡联合用药

赖氨大黄酸对KK/HlJ糖尿病小鼠胰岛素抵抗的改善作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2017年第6期43卷 1074-1079页

作者：李彩魏洁甄永占代明鹤胡刚郭立新林雅军北京大学第五临床医学院内分泌科北京100730 北京医院国家老年医学中心卫生部老年医学重点实验室北京100730 华北理工大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对链脲佐菌素(STZ)诱导的KK/HlJ糖尿病(DM)小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并阐明其作用机制。方法:腹腔注射STZ(50mg·kg^(-1))并给予DM专属饲料制备KK/HlJ小鼠DM模型。将48只小鼠分为正常对照组、模型组、低剂量RH... 详细信息

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对链脲佐菌素(STZ)诱导的KK/HlJ糖尿病(DM)小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并阐明其作用机制。方法:腹腔注射STZ(50mg·kg^(-1))并给予DM专属饲料制备KK/HlJ小鼠DM模型。将48只小鼠分为正常对照组、模型组、低剂量RHL治疗组(25mg·kg^(-1))和高剂量RHL治疗组(50mg·kg^(-1)),每组12只,共治疗16周。采用葡萄糖氧化酶法检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平,HE染色观察小鼠胰腺组织形态表现,免疫组织化学法检测小鼠胰岛组织中胰岛素水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清胰岛素、C反应蛋白(CRP)和肝脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)水平,Western blotting法检测小鼠肝脏组织中糖原合成相关基因(PI3K、AKT和GSK-3β)的磷酸化表达水平。结果:与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠FBG、TG和TC水平降低(P0.05)。与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠血清CRP水平和肝脏组织中TNF-α和IL-6水平降低(P酸化表达水平升高(P<0.01)。结论:RHL对STZ所致KK/HlJ DM小鼠胰岛素抵抗有改善作用,其机制可能与RHL促进糖原合成有关。

关键词：赖氨大黄酸小鼠,KK/HlJ 胰岛素抵抗磷酯酰肌醇3-激酶

赖氨大黄酸对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2015年第6期41卷 1171-1175,I0013页

作者：冯秋生阚泉吕翠平李冉魏静波赵毓芳甄永占华北理工大学基础医学院组织学与胚胎学系河北唐山063000 华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室河北省唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063000

目的:观察赖氨大黄酸(RHL)对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用腹腔注射百草枯方法建立活性氧引起血管损伤小鼠模型。将30只C57小鼠随机分为对照组(n=10)、百草枯模型组(n=10)和RHL干预组(n=10)。... 详细信息

目的:观察赖氨大黄酸(RHL)对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用腹腔注射百草枯方法建立活性氧引起血管损伤小鼠模型。将30只C57小鼠随机分为对照组(n=10)、百草枯模型组(n=10)和RHL干预组(n=10)。RHL干预组小鼠在造模前1周灌胃给予RHL,对照组和百草枯模型组灌胃给予等体积蒸馏水。百草枯模型组和RHL干预组腹腔注射百草枯,对照组腹腔注射等体积生理盐水,每周注射1次,持续2周。造模2周后检测血清丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;DCFH-DA染色观察血管活性氧水平;HE染色观察腹主动脉病理表现;Western blotting法检测血管损伤相关基因的表达。结果:与对照组比较,百草枯模型组小鼠血管组织小鼠血清SOD和GSH-Px活性下降(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05);与百草枯模型组比较,RHL干预组MDA水平下降(P<0.05),SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05);DCFH-DA和HE染色,百草枯模型组小鼠血管组织血管组织活性氧水平升高(P<0.05),血管结构破坏,RHL干预组血管活性氧水平下降(P<0.05),病理变化明显减轻。Western blotting法检测,与对照组比较,百草枯模型组小鼠血管组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和caspase-3表达水平降低(P<0.05),caspase-3裂解片段表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,RHL干预组小鼠血管组织eNOS和caspase-3表达水平升高(P<0.05),caspase-3裂解片段表达水平降低(P<0.05)。结论:百草枯能够诱导体内活性氧水平升高引起血管细胞损伤,RHL通过清除活性氧,上调eNOS表达,下调caspase-3裂解片段表达来拮抗百草枯的作用。

关键词：赖氨大黄酸百草枯活性氧细胞凋亡

赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用及其分子机制

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吉林大学学报（医学版） 2015年第3期41卷 481-485,I0004页

作者：郝晓方张荣花王琳王梅梅甄永占章广玲陈静华北理工大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室河北唐山063000 华北理工大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 华北理工大学基础医学院唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063000 华北理工大学生命科学院细胞生物学教研室河北唐山063000

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用,阐明RHL治疗大鼠胆汁淤积性肝纤维化的分子机制。方法:将35只大鼠分为对照组、模型组、35和70mg·kg-1 RHL治疗组及赖氨酸组,每组7只大鼠。通过胆总管结扎(BDL)方法建... 详细信息

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用,阐明RHL治疗大鼠胆汁淤积性肝纤维化的分子机制。方法:将35只大鼠分为对照组、模型组、35和70mg·kg-1 RHL治疗组及赖氨酸组,每组7只大鼠。通过胆总管结扎(BDL)方法建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型。使用全自动生化分析仪检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性以及总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL)水平;HE染色对肝脏组织行病理学检查;Masson三色染色观察肝组织纤维数量;使用试剂盒通过酶标仪测定肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)水平;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布;Western blotting法检测α-SMA表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平升高(P<0.05);肝组织肝小叶结构被破坏,纤维异常增生,Hyp水平亦升高(P<0.05)。免疫组织化学染色,α-SMA着色于胞膜和胞浆且表达增多;Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠α-SMA表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,35和70mg·kg-1RHL治疗组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平明显降低(P<0.05)。肝脏病理组织学,与模型组比较,35和70mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中纤维成分数量减少,Hyp水平降低(P<0.05);免疫组织化学和Western blotting法,与模型组比较,35和70mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中α-SMA表达减少(P<0.05)。结论:RHL能抑制肝星形细胞激活、肝脏纤维变性和蓄积以发挥对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏的保护作用,RHL有望成为治疗胆汁淤积性肝纤维化的药物。

关键词：胆汁淤积肝纤维化赖氨大黄酸

赖氨大黄酸通过升高miRNA-451抑制肺癌A549细胞迁移

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第三军医大学学报 2014年第3期36卷 248-252页

作者：纪春梅甄永占骆广玲赵毓芳朱丽华唐山协和医院呼吸内科河北唐山063000 河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 开滦医疗集团林西医院妇产科河北唐山063000

目的研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对肺癌细胞株(A549)迁移的影响及miRNA-451在其中的作用。方法选取处于对数生长期的A549细胞株,并分为对照组、不同剂量(0、10、20、40、80、160μmol/L)的RHL组。采用MTT法检测各组细胞48 h增... 详细信息

目的研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对肺癌细胞株(A549)迁移的影响及miRNA-451在其中的作用。方法选取处于对数生长期的A549细胞株,并分为对照组、不同剂量(0、10、20、40、80、160μmol/L)的RHL组。采用MTT法检测各组细胞48 h增殖情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞48 h迁移情况;Real-time PCR检测各组细胞48 h miRNA-451和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的转录水平;Western blot检测各组细胞48 h MMP-9蛋白水平变化。结果细胞培养48 h后,RHL处理组A549细胞增殖活性呈现明显剂量依赖性抑制。细胞划痕实验和Transwell实验均发现80μmol/L RHL能够抑制A549细胞迁移。同时80μmol/L以上剂量的RHL能够显著升高miR-451水平,降低MMP-9的转录水平(P<0.05)。Western blot检测结果也证实了80μmol/L以上剂量的RHL能够显著抑制MMP-9蛋白表达水平(P<0.05)。结论 RHL通过诱导miR-451的表达、抑制MMP-9的表达,从而抑制A549细胞迁移。

关键词：赖氨大黄酸肺肿瘤细胞迁移 miRNA-451 基质金属蛋白酶-9

赖氨大黄酸抑制p-EGFR诱导宫颈癌CaSki细胞系细胞凋亡

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基础医学与临床 2012年第4期32卷 413-416页

作者：甄永占林雅军章广玲赵毓芳闫丰刘学军高俊玲河北联合大学基础医学院河北唐山063000 卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所北京100730 河北联合大学附属医院河北唐山063000

目的研究赖氨大黄酸(RHL)对人宫颈癌CaSki细胞增殖、凋亡的影响及EGFR信号通路在其中的作用。方法应用MTT法检测RHL对CaSki细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞凋亡,应用Western blot检测EGFR信号通路蛋白表达水平及其蛋白磷酸化水... 详细信息

目的研究赖氨大黄酸(RHL)对人宫颈癌CaSki细胞增殖、凋亡的影响及EGFR信号通路在其中的作用。方法应用MTT法检测RHL对CaSki细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞凋亡,应用Western blot检测EGFR信号通路蛋白表达水平及其蛋白磷酸化水平。结果 RHL能有效抑制宫颈癌CaSki细胞增殖,48和72 h的IC50值分别是84.57μmol/L和74.79μmol/L,RHL能诱导CaSki细胞凋亡,随药物浓度的增加,细胞凋亡率也逐渐升高;RHL能够抑制EGFR、AKT蛋白磷酸化,并显著下调NF-κB、BCL-2及Survivin蛋白的水平(P<0.01),同时RHL还上调BAX蛋白的表达(P<0.01)。结论 RHL可能通过EGFR/AKT/NF-κB/Survivin信号通路诱导CaSki细胞凋亡。

关键词：赖氨大黄酸细胞凋亡宫颈癌 EGFR信号通路

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赖氨大黄酸对2型糖尿病小鼠胰腺保护作用

第三军医大学学报 2014年第5期36卷 461-465页

作者：胡刚甄永占骆广玲魏洁林雅军卫生部北京医院/卫生部北京老年医学研究所北京100730 河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 开滦医疗集团林西医院妇产科河北唐山063000

目的探讨赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对2型糖尿病小鼠胰腺保护作用。方法建立小鼠2型糖尿病模型并根据体质量分层,采用随机数字表分为3组:模型组、25 mg/kg RHL和50 mg/kg RHL治疗组,另外设对照组为同龄正常小鼠。检测体质量、血糖... 详细信息

目的探讨赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对2型糖尿病小鼠胰腺保护作用。方法建立小鼠2型糖尿病模型并根据体质量分层,采用随机数字表分为3组:模型组、25 mg/kg RHL和50 mg/kg RHL治疗组,另外设对照组为同龄正常小鼠。检测体质量、血糖、血脂、胰岛素水平;检测胰腺活性氧水平和抗氧化酶活性。体外培养小鼠胰岛β细胞系,检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,糖尿病模型组小鼠血糖、总胆固醇、甘油三酯和胰腺活性氧水平均显著升高(P<0.05),体质量、胰岛素和抗氧化酶活性均显著降低(P<0.05)。与模型组相比,25、50 mg/kg RHL治疗组血糖、总胆固醇、甘油三酯和胰腺活性氧水平均显著降低(P<0.05),体质量、胰岛素和抗氧化酶活性均显著升高(P<0.05)。体外研究发现RHL能抑制过氧化氢诱导的胰岛β细胞凋亡。结论 RHL对2型糖尿病小鼠胰腺的保护作用与抑制氧化应激、减少胰岛β细胞凋亡有关。

关键词： 2型糖尿病赖氨大黄酸胰岛β细胞细胞凋亡小鼠