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败酱草及其混伪品的显微鉴别特征与HPLC指纹图谱研究

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中草药 2024年第6期55卷 2066-2076页

作者：章蕾黄子洳林紫怡钟晓明程汝滨黄真浙江中医药大学药学院浙江杭州310053

目的对败酱草Herba Patriniae及其市场常见混伪品的显微鉴别特征和HPLC指纹图谱进行研究,明确不同品种的败酱草及其混伪品间的差异,为败酱草的准确鉴定提供技术保障。方法收集败酱草正品药材黄花败酱和白花败酱,市场常见败酱草混用品异... 详细信息

目的对败酱草Herba Patriniae及其市场常见混伪品的显微鉴别特征和HPLC指纹图谱进行研究,明确不同品种的败酱草及其混伪品间的差异,为败酱草的准确鉴定提供技术保障。方法收集败酱草正品药材黄花败酱和白花败酱,市场常见败酱草混用品异叶败酱、菥蓂和苣荬菜,采用显微鉴别方法对5种药材粉末的显微特征进行研究;优化败酱草总皂苷的提取工艺,比较不同品种的总皂苷含量;建立败酱草及其混伪品的HPLC指纹图谱,基于指纹图谱相似度评价、聚类分析和主成分分析,对败酱草及其混伪品进行鉴别和药材质量的综合评价。结果败酱草及其混伪品药材粉末的显微特征存在显著差异;优化了败酱草总皂苷的提取工艺,结果表明,败酱草及其混伪品总皂苷含量存在差异;建立了败酱草及其混伪品共26批的HPLC指纹图谱,共标定了11个共有峰,明确了败酱草及其混伪品指纹图谱的差异,通过相似度分析、聚类分析和主成分分析,可将败酱草及其混伪品进行准确区分;综合评价分析结果表明,败酱草及其混伪品的得分差异较大,其中正品白花败酱和黄花败酱的得分最高。结论获得了败酱草及其市场常见混伪品在粉末的显微特征和HPLC指纹图谱的差异,为败酱草的准确鉴别和临床用药安全提供了技术支撑。

关键词：败酱草混伪品鉴别指纹图谱聚类分析主成分分析

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败酱草总黄酮提取及体内外抑菌效果观察

败酱草总黄酮提取及体内外抑菌效果观察

作者：郭嘉栋塔里木大学

学位级别：硕士

本试验通过响应面分析法优化超声辅助提取败酱草总黄酮的工艺,通过体内外抑菌试验探讨败酱草提取物的抑菌效果,小鼠急性毒性试验确定败酱草总黄酮提取物的小鼠体内剂量及安全性评价,从而为败酱草的资源开发利用提供理论和应用依据。1.... 详细信息

本试验通过响应面分析法优化超声辅助提取败酱草总黄酮的工艺,通过体内外抑菌试验探讨败酱草提取物的抑菌效果,小鼠急性毒性试验确定败酱草总黄酮提取物的小鼠体内剂量及安全性评价,从而为败酱草的资源开发利用提供理论和应用依据。1.败酱草总黄酮提取工艺研究。采用超声波提取法,通过单因素与响应面试验探究不同因素的交互作用对败酱草总黄酮得率的影响。结果表明:超声波提取法提取总黄酮的最佳工艺为提取温度73℃,乙醇浓度80%,超声功率400 W,败酱草总黄酮得率为2.84%。2.败酱草提取物体外抑菌作用研究。通过牛津杯试验、MIC、MBC与生长曲线的测定,研究了败酱草提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌的体外抑菌效果。结果表明:败酱草提取物对金黄色葡萄球菌极敏感、对大肠杆菌高敏感、对肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中敏感。败酱草提取物对金黄色葡萄球菌的MIC为0.0625 g/m L,MBC为0.125 g/m L;对大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌的MIC为0.0625 g/m L,MBC为0.125 g/m L。在药物浓度为0.5 MIC对应药物浓度时,败酱草提取物可推迟细菌对数期。3.败酱草提取物急性毒性试验。试验组小鼠分别灌服高浓度(20 g/kg)、中浓度(10 g/kg)、低浓度(5 g/kg)、连续灌胃5天,小鼠未出现异常情况,精神变化正常,生化指标无显著性变化(P>0.05),且高浓度组小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠病理切片与空白对照组一致未见明显病变,各剂量组均未出现死亡。根据《急性毒性试验指导原则》,败酱草提取物对雌雄小鼠急性经口的最大耐受剂量均大于20 g/kg,无严重急性中毒的危险性。4.败酱草提取物小鼠体内抑菌试验。小鼠腹腔注射羊源致病性大肠杆菌,通过观察小鼠的存活率、生长性能、免疫因子及肠道组织形态来研究败酱草总黄酮提取物对小鼠大肠杆菌病的防治作用。结果发现:败酱草提取物高中剂量组可降低小鼠血清中的TNF-α、IL-1α、IL-6含量(P败酱草提取物高剂量组(10 g/kg)与中剂量组(5 g/kg)对小鼠大肠杆菌病有一定治疗效果,且败酱草总黄酮提取物对致病性大肠杆菌的抑制作用与2 mg/kg庆大霉素相当。综上所述,超声辅助提取法可提高败酱草总黄酮得率;败酱草提取物无急性中毒的危险性且败酱草提取物在体内外均有良好抑菌效果。

关键词：败酱草安全性试验提取工艺抑菌效果总黄酮

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中药败酱草的生药学研究

药物分析杂志 2024年第7期44卷 1255-1266页

作者：余坤子韩士凯麻思宇康帅程显隆魏锋中国食品药品检定研究院北京102629 河北省安国市市场监督管理局安国071200

目的:通过对败酱草类药材进行生药学研究,找出专属性鉴别点。并借助此研究探讨如何制订全草类中药性状及显微鉴别项。方法:基于植物分类学原理,采用性状鉴别、显微鉴别等手段,对败酱草类药材及市售混伪品进行比较研究。结果:败酱草类药... 详细信息

目的:通过对败酱草类药材进行生药学研究,找出专属性鉴别点。并借助此研究探讨如何制订全草类中药性状及显微鉴别项。方法:基于植物分类学原理,采用性状鉴别、显微鉴别等手段,对败酱草类药材及市售混伪品进行比较研究。结果:败酱草类药材及其混伪品可以通过茎表面、断面特征,茎生叶形态,花序被毛情况,气味等性状特征,以及茎横切面等显微特征实现相互区分。结论:建立败酱草类药材及其混伪品的鉴别方法,避免同名异物现象给市场带来的混乱,并为此类药材的标准提高提供依据。

关键词：败酱草苏败酱北败酱性状鉴别显微鉴别混伪品质量标准

败酱草水提物通过调控circ_0000936/miR-665抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭

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现代肿瘤医学 2024年第6期32卷 1017-1024页

作者：张正平李坤正吴彬杰刘熹巨虎张晓璐青海大学附属医院神经外科青海西宁810000 南京医科大学附属无锡市人民医院神经外科江苏无锡214023

目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pear... 详细信息

目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936和miR-665表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229细胞,si-NC、si-circ_0000936分别转染至LN229细胞,pcDNA-circ_0000936转染至LN229细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936与miR-665的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:胶质瘤组织中circ_0000936的表达量高于正常脑组织(P败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白水平和circ_0000936的表达量(P败酱草对LN229细胞生物学行为的作用。结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭。

关键词：败酱草胶质瘤 circ_0000936 miR-665 细胞增殖迁移侵袭

败酱草及其近缘种叶绿体全基因组分析和DNA条形码构建

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中国现代中药 2024年

作者：孟文娜浦香东蒲婧哲申传璞陈庆张磊吕雄文马陶陶安徽医科大学药学院炎症免疫性疾病安徽省实验室安徽医科大学中药配方颗粒中心安徽省食品药品检验研究院中药质量研究与评价重点实验室亳州济人药业

目的：基于败酱类药材基原植物的叶绿体基因组序列分析开发特定的DNA条形码，准确鉴别败酱草及其近缘种。方法：采用Illumina高通量测序技术对败酱科败酱属植物白花败酱、黄花败酱和异叶败酱的叶绿体基因组进行测序；采用生物信息学软... 详细信息

目的：基于败酱类药材基原植物的叶绿体基因组序列分析开发特定的DNA条形码，准确鉴别败酱草及其近缘种。方法：采用Illumina高通量测序技术对败酱科败酱属植物白花败酱、黄花败酱和异叶败酱的叶绿体基因组进行测序；采用生物信息学软件对基因组进行组装注释、特征分析、序列比较和系统发育分析；基于叶绿体基因组高突变区构建特异性DNA条形码进行验证。结果：3种败酱属植物叶绿体基因组呈四分体结构，全长分别为159 585、158 919、158 919 bp，编码的基因数分别为130、132、132，包含8个rRNA基因和37个tRNA基因，蛋白质编码基因数分别为85、87、87。ccsA、ndhG、rpl23、ndhF序列可作为特异DNA条形码成功扩增16份样品，黄花败酱、白花败酱和少蕊败酱聚类在同一分支，异叶败酱和糙叶败酱聚类在另一支。通过ccsA、ndhG、ndhF序列可进一步鉴别糙叶败酱和异叶败酱。结论：ccsA、ndhG、rpl23、ndhF序列可作为补充特异DNA条形码区分败酱草及其近缘种。

关键词：败酱草叶绿体基因组分子鉴定 DNA条形码系统发育分析

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败酱草质量标准的建立及优化

临床合理用药杂志 2024年第17期17卷 154-157页

作者：王瑛兰刘元昆万海青崔翠翠山东省威海市中医院 264200

目的提高和完善中药败酱草的质量标准。方法采用显微鉴别观察败酱草粉末的显微特征,以绿原酸指标对12批败酱草进行薄层鉴别,用高效液相色谱法(HPLC)对败酱草进行指纹图谱研究。结果败酱草粉末显微鉴别、薄层鉴别方法具有较好的专属性,... 详细信息

目的提高和完善中药败酱草的质量标准。方法采用显微鉴别观察败酱草粉末的显微特征,以绿原酸指标对12批败酱草进行薄层鉴别,用高效液相色谱法(HPLC)对败酱草进行指纹图谱研究。结果败酱草粉末显微鉴别、薄层鉴别方法具有较好的专属性,在选定的色谱条件下,得到败酱草的HPLC指纹图谱,同时测定出绿原酸、芦丁关键成分,标定出11个共有峰作为败酱草药材质量评估的关键指标。结论薄层鉴定和显微鉴别可以很好地对败酱草进行定性鉴别,败酱草指纹图谱的确立,建立及优化了败酱草的质量标准。

关键词：败酱草绿原酸芦丁显微鉴别高效液相色谱法指纹图谱

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败酱草质量研究

中国药物评价 2024年第1期41卷 52-55页

作者：易耀江易航李义保罗文焉爱勇江西济民可信药业有限公司江西宜春336000 江西省宜春市食品药品检验所江西宜春336000

目的:建立败酱草的薄层鉴别方法(TLC)及HPLC测定东莨菪内酯含量测定方法,为败酱草的质量研究提供依据。方法:采用TLC鉴别法,HPLC作为含量测定方法,色谱柱:Ultimate Plus C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.5%冰醋酸(15∶85);柱... 详细信息

目的:建立败酱草的薄层鉴别方法(TLC)及HPLC测定东莨菪内酯含量测定方法,为败酱草的质量研究提供依据。方法:采用TLC鉴别法,HPLC作为含量测定方法,色谱柱:Ultimate Plus C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.5%冰醋酸(15∶85);柱温:25℃;流速:1 mL·min^(-1);检测波长:343 nm。结果:薄层鉴别中检出与对照药材相同颜色的荧光斑点;东莨菪内酯在0.8384~20.96μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(函数关系为Y=39.233X+7.0215,r=0.9999),回收率为91.0%~97.9%,均值为95.4%,RSD(n=6)为3%。结论:本方法鉴别专属性较好,含量测定方法专属性、稳定性、重现性、准确度良好,可用于败酱草的质量控制。

关键词：薄层色谱(TLC) 高效液相色谱(HPLC) 败酱草东莨菪内酯

基于网络药理学和分子对接技术探讨败酱草-赤芍药对治疗结肠直肠癌的作用机制

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甘肃中医药大学学报 2024年第5期 54-64页

作者：邢亚东武敏罗凯文孙大伟常伟蚌埠医科大学药学院宿州市第一人民医院内科安徽金太阳生化药业有限公司检验室安徽医科大学研究生院

目的基于网络药理学和分子对接技术探讨败酱草-赤芍药对治疗结肠直肠癌(CRC)的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索并筛选败酱草、赤芍的有效成分及靶点，在GeenCards、DrugBank、BharmGKB数据库中查找CRC... 详细信息

目的基于网络药理学和分子对接技术探讨败酱草-赤芍药对治疗结肠直肠癌(CRC)的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索并筛选败酱草、赤芍的有效成分及靶点，在GeenCards、DrugBank、BharmGKB数据库中查找CRC相关靶点；使用Cytoscape 3.8.0软件绘制有效成分-疾病-靶点可视化网络图，通过STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络，得核心基因；利用R软件及相关软件包对结果进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析，对得到的核心成分和核心靶点借助AutoDock Vina软件进行分子对接。结果从败酱草-赤芍药对中挖掘出有效成分42种，潜在靶点1486个，CRC相关靶点2976个，最终得到药物和疾病共有靶点143个；治疗疾病的重要靶点有骨髓瘤细胞癌基因(MYC)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)14、原癌基因蛋白(FOS)、缺氧诱导因子1α(HIF1A)、MAPK1,主要作用于p53、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K-Akt)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF)等信号通路；分子对接结果显示，败酱草-赤芍药对的主要化合物和核心靶点之间结合能均小于-7 kcal/mol,结合良好。结论败酱草-赤芍可能通过调节MYC、MAPK14、FOS、HIF1A、MAPK1等靶点发挥抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化等功效，从而发挥治疗CRC的作用。

关键词：结肠直肠癌败酱草赤芍网络药理学分子对接作用机制

黄柏、土茯苓、败酱草治疗人乳头瘤病毒感染经验--仝小林三味小方撷萃

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内蒙古中医药 2024年第4期43卷 87-89页

作者：张琳琳李修洋王涵北京市西城区陶然亭社区卫生服务中心北京100054 中国中医科学院广安门医院北京100053 北京中医药大学中药学院北京100029

人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染发病隐匿,病程缠绵难愈,持续性的感染很可能会造成宫颈癌的发生。中医认为,HPV感染属湿毒之邪,仝小林院士临床上常使用扶正驱邪、利湿解毒的方法进行治疗。在态靶辨治的基础上,应用黄柏、... 详细信息

人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染发病隐匿,病程缠绵难愈,持续性的感染很可能会造成宫颈癌的发生。中医认为,HPV感染属湿毒之邪,仝小林院士临床上常使用扶正驱邪、利湿解毒的方法进行治疗。在态靶辨治的基础上,应用黄柏、土茯苓、败酱草三味小方为基本方加减,明确病态,精准打靶。针对“湿”态,三药均能清热燥湿,针对毒邪,三药均具有解毒疗疮的作用,黄柏可清下焦热,土茯苓清热解毒,败酱草排脓破血,态靶同调。临床黄柏常用剂量为15~30g,土茯苓常用剂量为30~60g,败酱草常用剂量为15~30g,患者应定期复查HPV,根据病情变化,随症治疗。

关键词：黄柏土茯苓败酱草人乳头瘤病毒(HPV) 仝小林