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紫叶稠李组培诱导及增殖体系的建立

中国林副特产 2011年第3期 46-47页

作者：郑璐黄立华王占龙龙忠伟朱虹辽宁省干旱地区造林研究所辽宁朝阳122000

以紫叶稠李的侧芽为试验材料,对其进行不定芽的诱导和芽的继代增殖,通过正交试验,经极差与方差的分析得出结论:紫叶稠李不定芽诱导培养基添加激素种类及其浓度的最佳水平组合为:6-BA1.5mg/L+IBA 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L,诱导率高达97.5%。... 详细信息

以紫叶稠李的侧芽为试验材料,对其进行不定芽的诱导和芽的继代增殖,通过正交试验,经极差与方差的分析得出结论:紫叶稠李不定芽诱导培养基添加激素种类及其浓度的最佳水平组合为:6-BA1.5mg/L+IBA 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L,诱导率高达97.5%。紫叶稠李的继代增殖培养基的最佳水平组合为:6-BA 1.5mg/L+IBA 0.05mg/L+NAA 0.2mg/L,增值倍数可达4.2倍。能在短期内快速繁殖出大量苗,为工厂化育苗提供参考。

关键词：紫叶稠李组培诱导与增殖

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基于正交实验的赤苍藤组培快繁体系建立

植物学报 2024年第1期59卷 99-109页

作者：张尚文黄诗宇杨天为李婷张向军高曼熔广西农业科学院生物技术研究所南宁530007 广西大学农学院南宁530004

以赤苍藤(Erythropalum scandens)带芽点的半木质化枝条为材料建立赤苍藤组培快繁体系,研究外植体灭菌条件,通过正交实验,设计不同植物生长调节剂组合对赤苍藤愈伤组织诱导、愈伤组织分化、生根壮苗及移栽驯化的影响。结果表明,赤苍藤... 详细信息

以赤苍藤(Erythropalum scandens)带芽点的半木质化枝条为材料建立赤苍藤组培快繁体系,研究外植体灭菌条件,通过正交实验,设计不同植物生长调节剂组合对赤苍藤愈伤组织诱导、愈伤组织分化、生根壮苗及移栽驯化的影响。结果表明,赤苍藤外植体消毒最佳方法是以体积浓度为75%乙醇浸泡60秒后,再以质量浓度为0.1%HgCl_2消毒10分钟,成功率为48.89%;叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.5 mg·L^(-1) 6-BA+1.0 mg·L^(-1) 2,4-D+1.0 mg·L^(-1) IBA,培养30天,诱导率达71.11%,且绿色紧密;茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0 mg·L^(-1) 6-BA+0.5 mg·L^(-1) 2,4-D+1.0 mg·L^(-1) IBA,培养30天,诱导率为70.00%,且绿色紧密;诱导愈伤组织增殖以及分化的最佳培养基为MS+2.0mg·L^(-1) 6-BA+0.5mg·L^(-1)TDZ+1.0 mg·L^(-1) IBA,芽分化率达98.89%,增殖系数为3.33;生根最佳培养基为MS+1.5 mg·L^(-1) 6-BA+0.5 mg·L^(-1) IBA,生根率为100%,平均生根数为2.2条;生根苗在小颗粒泥炭土中成活率达88.89%。该研究建立了赤苍藤组培快繁体系,为赤苍藤优质种苗生产奠定了良好基础。

关键词：赤苍藤组培快繁无菌苗愈伤组织诱导与增殖

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米槁组织培养不定芽发生与继代增殖

西北植物学报 2021年第9期41卷 1552-1558页

作者：梁格林刘济明武梦瑶刘欢唐子燕贵州大学林学院贵阳550025 贵州大学森林生态研究中心贵阳550025

该研究以米槁的带腋芽茎段为实验材料,建立米槁不定芽诱导及增殖培养体系,探究不同消毒时间、取材时间及不同激素种类和浓度配比条件对米槁带芽茎段不定芽诱导及增殖的影响。结果表明:(1)外植体最适消毒方式为75%酒精30 s+0.1%HgCl26.5 ... 详细信息

该研究以米槁的带腋芽茎段为实验材料,建立米槁不定芽诱导及增殖培养体系,探究不同消毒时间、取材时间及不同激素种类和浓度配比条件对米槁带芽茎段不定芽诱导及增殖的影响。结果表明:(1)外植体最适消毒方式为75%酒精30 s+0.1%HgCl26.5 min,11月为外植体取材进行消毒的最佳时期。(2)最适不定芽诱导培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,不定芽诱导率可达到81.24%;6-BA和NAA均能促进米槁不定芽的增殖,且NAA是不定芽增殖的主要影响因素。(3)最适不定芽增殖培养基为MS+0.1 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.3 g/L AC+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,不定芽平均增殖系数达到2.79。该研究基本建立了米槁不定芽诱导及增殖培养体系,为其深层次的资源开发、利用及快速繁殖提供了一条新的路径。

关键词：米槁组织培养不定芽诱导与增殖

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树兰茎段丛生芽快繁体系的建立

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2016年第12期44卷 157-162页

作者：易双双陆顺教冷青云王存杨光穗中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室/海南省热带观赏植物种质创新利用工程技术研究中心海南儋州571737

【目的】建立茎段诱导丛生芽途径的树兰快速繁殖技术体系,为树兰种苗生产及工厂化育苗奠定基础。【方法】以树兰当年生分蘖苗的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究不同质量浓度6-BA、NAA和IBA组合对树兰茎段丛生芽诱导、增殖及生... 详细信息

【目的】建立茎段诱导丛生芽途径的树兰快速繁殖技术体系,为树兰种苗生产及工厂化育苗奠定基础。【方法】以树兰当年生分蘖苗的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究不同质量浓度6-BA、NAA和IBA组合对树兰茎段丛生芽诱导、增殖及生根的影响。【结果】不同质量浓度6-BA和NAA组合对树兰茎段丛生芽的诱导与增殖均有显著影响,树兰茎段丛生芽诱导最适宜培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率最高达到73.13%;增殖最适宜培养基为MS+3.0mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA,增殖系数最高达到5.2。不同质量浓度NAA和IBA组合对树兰组培苗生根有显著影响,生根最适宜培养基为MS+1.0mg/L NAA+1.5mg/L IBA,生根率可达100%,平均根数7.78条/株,株高7.44cm,茎粗2.82mm。【结论】建立了树兰茎段诱导丛生芽的组织培养快繁体系,在该体系下丛生芽的诱导率和增殖率均较高,生根状况良好。

关键词：树兰茎段丛生芽诱导与增殖组织培养

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福建柏组织培养体系的建立及优化

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2020年第11期48卷 42-53,62页

作者：周成城余江洪陈凌艳何天友郑郁善福建农林大学园林学院福建福州350002 福建农林大学林学院福建福州350002

【目的】探究福建柏不同外植体再生过程中最适激素配比,为建立福建柏组织培养体系提供技术支持。【方法】以福建柏鳞叶和茎段作为外植体,在饱和洗衣粉液浸泡20 min和体积分数75%酒精浸泡30 s条件下,研究体积分数0.1%HgCl 2浸泡不同时间(... 详细信息

【目的】探究福建柏不同外植体再生过程中最适激素配比,为建立福建柏组织培养体系提供技术支持。【方法】以福建柏鳞叶和茎段作为外植体,在饱和洗衣粉液浸泡20 min和体积分数75%酒精浸泡30 s条件下,研究体积分数0.1%HgCl 2浸泡不同时间(5,8,10,12,15 min)后的消毒效果;以福建柏鳞叶和茎段为材料,通过单因素试验,研究生长素(NAA和2,4-D)对不同外植体愈伤组织诱导的影响,再通过正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA不同配比对外植体愈伤组织诱导的影响;以福建柏愈伤组织为材料,采用正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA、KT对愈伤组织继代增殖的影响;以福建柏带芽茎段为材料,研究细胞分裂素6-BA对芽诱导和萌发的影响;以福建柏分化苗为材料,采用正交试验研究6-BA、2,4-D、KT对分化苗继代生长的影响;以福建柏无根苗为材料,研究无根苗扩增繁殖的效果。【结果】(1)福建柏鳞叶最适消毒配方为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1%HgCl 210 min,污染率为16.67%;茎段为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1%HgCl 215 min,污染率为23.33%。(2)鳞叶愈伤组织诱导最适配方为MS培养基+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,诱导率为81.67%;诱导出的愈伤组织白色近透明,长势良好。而茎段为MS培养基+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,诱导率为78.33%,诱导出的愈伤组织淡绿色,长势良好。(3)愈伤组织最适增殖配方为MS基本培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L,增殖质量为1.984 g,褐化率23.33%。(4)芽诱导萌发最适配方为MS基本培养基+6-BA 2.0 mg/L,平均诱导芽数2.05个,平均萌动数1.70个,分化率100%。(5)分化苗生长和扩繁的最适配方为1/2MS基本培养基+2,4-D 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,平均生长长度为2.241 cm,无褐化,扩繁成活率为95.50%,扩繁系数为3.18。【结论】福建柏以带芽茎段作为芽增殖再生途径外植体,鳞叶作为愈伤组织再生途径的外植体进行组织培养效果最佳,长势好且稳定。

关键词：福建柏愈伤组织离体再生诱导与增殖

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南高丛蓝莓快繁技术体系研究

植物研究 2014年第1期34卷 131-135页

作者：龚雪元杜亚填张翔宇刘姣吉首大学林产化工工程湖南省重点实验室张家界416600 中药产业发展办公室毕节551700

以南高丛蓝莓试管无菌丛生芽为材料,对南高丛蓝莓丛生芽的诱导与增殖、继代次数对丛生芽诱导增殖的影响、瓶内生根、瓶外生根、不同生根方式试管苗移栽成活率的大小进行了研究。南高丛蓝莓丛生芽诱导与增殖培养基以WPM+ZT 2.0 mg·L-1较... 详细信息

以南高丛蓝莓试管无菌丛生芽为材料,对南高丛蓝莓丛生芽的诱导与增殖、继代次数对丛生芽诱导增殖的影响、瓶内生根、瓶外生根、不同生根方式试管苗移栽成活率的大小进行了研究。南高丛蓝莓丛生芽诱导与增殖培养基以WPM+ZT 2.0 mg·L-1较佳,增殖倍数可达3.50;继代6次丛生芽增殖倍数可达24.00;瓶内生根生根培养基以WPM+ZT 0.5 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1为佳,生根率可达80.73%±3.17%,生根周期为100 d;试管芽用25 mg·L-1IBA溶液浸蘸10 s,以1/6 WPM为营养液加珍珠岩作基质,生根率可达到80.00%±5.00%,生根周期为40 d;瓶外生根试管苗移栽成活率是瓶内生根试管苗的2倍。基本建立了南高丛蓝莓的试管快繁技术体系,为南高丛蓝莓的工业化育苗奠定了技术基础。

关键词：丛生芽诱导与增殖瓶内生根瓶外生根快繁技术

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天冬丛生芽快速诱导与试管苗生根技术研究

天冬丛生芽快速诱导与试管苗生根技术研究

作者：李林贵州大学

学位级别：硕士

天冬[Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr]作为我国传统的中药材,具有养阴润燥、清肺降火、抗氧化、抑菌消炎、抗肿瘤等功效,集药用、食用、饲用与观赏于一身,有巨大的开发潜力。目前天冬繁殖以种子繁殖、分株繁殖为主,但因为周期长... 详细信息

天冬[Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr]作为我国传统的中药材,具有养阴润燥、清肺降火、抗氧化、抑菌消炎、抗肿瘤等功效,集药用、食用、饲用与观赏于一身,有巨大的开发潜力。目前天冬繁殖以种子繁殖、分株繁殖为主,但因为周期长、繁殖系数低而限制其种苗生产。尽管部分研究者对天冬组培快繁进行过探索,但仍未建立起有效的快繁技术体系。本研究系统探索了天冬种子无菌萌发与外植体培养、愈伤组织诱导与不定芽形成、丛生芽诱导与增殖、试管苗生根与移栽等环节的适宜条件,为有效构建该物种规模化人工种植所需的种苗快繁技术提供了依据。主要结果如下:1、种子灭菌与萌发培养条件:以成熟饱满的天冬种子的培养材料,进行消毒处理,适宜的消毒方法为:75%乙醇处理30 s,2%的次氯酸钠处理20 min或0.1%升汞处理10min;适宜的种子萌发培养基为:MS+KT 0.1 mg·L+GA 0.5 mg·L+6-BA 1.0 mg·L+蔗糖30 g·L+琼脂7 g·L,p H 5.8～6.0,培养15 d时,种子开始露白,培养36 d左右芽苗生长到3 cm以上,生长良好;三种植物生长调节剂对天冬种子萌发作用大小排序为GA>KT>6-BA,经方差分析GA的作用达到显著水平。2、愈伤组织诱导与不定芽形成条件:以节间为外植体,进行愈伤组织诱导与不定芽的诱导,愈伤组织诱导培养基为:1/2MS+NAA 1.0 mg·L+6-BA 0.1 mg·L蔗糖30 g·L+琼脂7 g·L,p H 5.8～6.0;外植体9 d时出现愈伤,21 d时茎段布满愈伤组织,影响作用大小为:NAA?6-BA?培养基中大量元素含量,经方差分析NAA对愈伤的影响作用达到显著水平(P增殖培养基为:NAA 0.3mg·L+6-BA 0.5 mg·L+KT 0.5 mg·L+KHPO 30 mg·L+蔗糖30 g·L+琼脂7 g·L,p H 5.8～6.0,增殖倍数达6.64。3、带芽茎段诱导丛生芽及其增殖条件:以带芽茎段为外植体,进行丛生芽诱导与增殖,腋芽诱导培养基为:MS+NAA 0.1 mg·L+6-BA 1.0 mg·L+蔗糖30 mg·L+琼脂7mg·L,p H 5.8～6.0。诱导率达85.05%,平均芽数最高达2.87个,芽颜色翠绿,生长健壮;丛生芽增殖培养基为:MS+6-BA 0.5 mg·L+IAA 1.5 mg·L+KT 1.5 mg·L+蔗糖30g·L+琼脂7 g·L,p H 5.8～6.0,培养21 d后,其增殖倍数达3.65,三种生长调节剂的影响作用大小为:KT>6-BA>IAA,经方差分析KT的作用达到显著水平(P增殖倍数达到4.47,优于苹果泥、椰汁、土豆泥。当增殖过程中出现褐化现象时,添加PVP 1.0 g·L可降低褐化率至14.13%。4、生根培养条件:以无根芽苗为外植体,进行生根培养。在1/2MS中生根率达到最高为78.59%,与White、MS、1/4MS培养基中芽苗生根率有显著差异(P诱导的影响作用大小为:IBA?PUT?IAA,均对天冬生根的影响达到显著水平(P<0.05);同时添加0.5g·L活性炭有利于根系变粗,茎枝繁茂。5、适宜的移栽基质:以椰糠、泥炭、蛭石、珍珠岩、园土为基质原料进行混合组配后分别植入天冬试管苗,通过对各组合基质理化性质分析、试管苗生长状况观察和生理指标测定,基质容重与试管苗移栽成活率呈极显著负相关(P<0.01),基质孔隙度与试管苗生长指标呈正相关。在椰糠-珍珠岩-蛭石(容重为0.23 g·cm、总孔隙度为65.07%、p H为6.30、电导率为0.51 m S·cm)组合基质中,试管苗成活率达87.10%,生长健壮,优于其它基质;隶属函数综合评价得出椰糠︰珍珠岩︰蛭石=1︰1︰1的组合基质评分最高(0.93),更有利于试管苗生长,为试管苗的适宜栽培基质。

关键词：天冬丛生芽试管苗诱导与增殖生根与移栽

半夏疏松愈伤组织形成中果胶酶的诱导条件研究

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半夏疏松愈伤组织形成中果胶酶的诱导条件研究

作者：田宇航贵州大学

学位级别：硕士

半夏[Pinellia ternata（Thunb.）Breit.]为天南星科半夏属草本药用植物,多年来半夏的产业化发展一直受到种质参差不齐、种源不稳定的限制。半夏人工种子技术已经成为半夏种源产业可持续发展的重要途径。松散状的愈伤组织是获得优质人... 详细信息

半夏[Pinellia ternata（Thunb.）Breit.]为天南星科半夏属草本药用植物,多年来半夏的产业化发展一直受到种质参差不齐、种源不稳定的限制。半夏人工种子技术已经成为半夏种源产业可持续发展的重要途径。松散状的愈伤组织是获得优质人工种胚的理想材料,研究发现半夏疏松愈伤组织的形成与细胞壁果胶酶活性存在相关性。本研究以半夏为材料,在筛选培养条件并建立半夏愈伤组织诱导体系后,以半夏愈伤组织为材料,结合组织形态、细胞结构显微观察与化学成分测定等方法,分析细胞壁成分与愈伤组织质地的关系,研究发现果胶酶对半夏疏松愈伤组织的形成发挥了重要的作用,同时探究半夏疏松愈伤组织形成中果胶酶的诱导条件,进而获得半夏疏松愈伤组织。随后探究不同植物激素、多胺类物质对半夏疏松愈伤组织继代增殖的影响,提高半夏疏松愈伤组织增殖率的同时保持较强的细胞分裂增殖能力,以利于后续细胞悬浮培养生产半夏人工种胚,以期为解决半夏人工种子的技术难题提供有力支撑。主要研究结果如下:1.采用单因素实验结合正交实验分析不同外植体、光照强度、蔗糖浓度以及生长素和细胞分裂素的种类和浓度对半夏愈伤组织诱导率的影响。结果显示:以苗龄30 d的叶片为外植体,在光照强度900～1200 lx的环境下,添加1.0 mg·L 2,4-D+0.5 mg·L 6-BA+40 g·L蔗糖时半夏愈伤组织的诱导率较高,且得到的愈伤组织呈现黄色、质地较疏松、生长旺盛的良好状态。2.将半夏愈伤组织分为黄色胚性疏松愈伤组织I、透明松散愈伤组织II、白色松软愈伤组织III、黄色致密愈伤组织IV四种类型,发现不同愈伤的细胞壁结构与成分差异显著。其中具备进一步增殖分化能力的愈伤组织I和IV的主要差别在于质地的疏松与致密,进一步研究发现I型愈伤组织的果胶酶活性在四种愈伤组织中最高,水溶性果胶含量也显著高于IV型愈伤组织,IV型致密愈伤组织的果胶酶活性较低,原果胶含量较高,水溶性果胶含量低。说明细胞壁果胶酶的活性差异会引发原果胶的降解,产生大量水溶性果胶,从而促使愈伤组织细胞初生壁、胞间层部分结构松散,随之影响愈伤组织的质地。以半夏疏松愈伤组织为材料,直接在培养基中添加外源果胶酶液,结果表明添加的酶液活力高于20.0 U·m L后,愈伤组织的质地开始变得松散,生长更加旺盛,进一步证明半夏愈伤组织的质地与细胞壁果胶酶活性的变化有密切的关系,我们通过不同光照强度、蔗糖浓度、植物激素、多胺组合的处理去诱导愈伤组织中果胶酶活性的变化。结果表明当果胶酶活性过高时,愈伤组织容易出现白化、湿软的现象,而酶活较低时,愈伤组织会变得坚实、结块化,难以形成疏松愈伤组织。其中,当果胶酶活性保持在4～5U·g的范围时,半夏疏松愈伤组织多呈疏松易分散的颗粒状,保持着良好的生长状态。随着光照强度、蔗糖、精铵、2,4-D和IAA的浓度的升高,果胶酶活性增强,而腐胺、6-BA浓度与果胶酶活性呈现负相关的趋势,亚精铵对果胶酶的活性几乎没有影响。其中光照、蔗糖和植物激素能够明显提高半夏疏松愈伤组织果胶酶活性,均维持在4～7U·g之间,而多胺类物质对果胶酶活性提升的作用普遍较低,其培养下的半夏疏松愈伤组织的果胶酶活性大约在1.44～3.24 U·g之间。因此我们初步筛选认为诱导内源果胶酶达到利于半夏疏松愈伤组织形成的活性范围的主要条件中,适宜的光照强度为1800～2000 lx,蔗糖浓度为40 g·L,植物激素为2.0 mg·L的2,4-D和1.0 mg·L的IAA。3.以半夏疏松愈伤组织为材料进行增殖培养,增殖生长曲线表明在第15 d时增殖量达到峰值,此时细胞活力旺盛,适合进行继代培养。随着继代周期的增加,半夏疏松愈伤组织细胞胚性分裂能力减弱,而继代周期较短的半夏疏松愈伤组织经过细胞悬浮分化培养时,单个周期内鲜重峰值可达1.197 g,活细胞密度为每毫升5.67×10～5个,且30d后已经有胚状体出现。为了实现在继代过程半夏疏松愈伤组织胚性分裂能力的长久保持,前期通过添加0.5 mg·L IAA+0.5 mg·L 6-BA时能够在继代增殖时增加愈伤组织质量的同时又保持半夏愈伤组织疏松易分散的质地,但随着继代次数的增加,植物激素类难以保持良好的调节效果,及时改变培养条件后发现添加5.0 mg·L的精铵的作用效果较佳,半夏疏松愈伤组织长势良好且质地疏松,有利于后续细胞悬浮培养。

关键词：半夏疏松愈伤组织诱导与增殖果胶果胶酶

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当归水培苗的组织培养

西北师范大学学报（自然科学版） 2004年第4期40卷 77-79页

作者：雒晓芳杨宁陈学林丁兰赵庆芳马瑞君西北师范大学生命科学学院甘肃兰州730070

以甘肃漳县当年的当归(Angelicasinensis(Oliv.)Diels)种子经萌发而得的幼嫩水培苗为材料进行组织培养研究,结果表明:最佳诱导愈伤组织的培养基是H+0 5mg/L2,4-D;产生愈伤组织的能力依次是叶柄,根尖,叶片;愈伤组织的最佳增殖培养基是MS+... 详细信息

以甘肃漳县当年的当归(Angelicasinensis(Oliv.)Diels)种子经萌发而得的幼嫩水培苗为材料进行组织培养研究,结果表明:最佳诱导愈伤组织的培养基是H+0 5mg/L2,4-D;产生愈伤组织的能力依次是叶柄,根尖,叶片;愈伤组织的最佳增殖培养基是MS+1 0mg/L2,4-D+0 2mg/L6-BA;水培苗的最佳壮苗、增殖培养基是MS+1 0mg/LIAA+300mg/LLH+5 0mg/L6-BA;最佳生根培养基是MS+1 0mg/LIAA+300mg/LLH.

关键词：当归水培苗愈伤组织诱导与增殖