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初断乳大鼠视网膜微血管周细胞的分离培养

中国细胞生物学学报 2014年第7期36卷 963-969页

作者：杨密清刘光辉王航黄陈稳郑永征任秉仪周子鑫杨巍纪斌峰孟春福州大学生物科学与工程学院福州350108 福建中医药大学附属人民医院福州350004 同济大学生命科学与技术学院上海200092

探讨、优化初断乳大鼠视网膜微血管周细胞（retinal microvascular pericytes,RMPs）的分离、培养方案。分别从15只初断乳大鼠及15只成年大鼠中剜取眼球,采用眼科显微手术器械分离获取视网膜,经碎化、消化、过滤处理,收集视网膜微血管片... 详细信息

探讨、优化初断乳大鼠视网膜微血管周细胞（retinal microvascular pericytes,RMPs）的分离、培养方案。分别从15只初断乳大鼠及15只成年大鼠中剜取眼球,采用眼科显微手术器械分离获取视网膜,经碎化、消化、过滤处理,收集视网膜微血管片段,予接种培养。MTT法测绘RMPs生长曲线,通过倒置显微镜观察RMPs形态,免疫荧光法鉴定周细胞标记物。比较2组之间视网膜分离操作时间、完整性、原代细胞数量、周细胞形态和表面标记物表达。结果显示,初断乳大鼠视网膜均成功分离,其中24眼视网膜呈整片分出,6眼视网膜破裂呈碎片状,单个眼球视网膜分离时间为14.3~45.5 s。视网膜分离操作时间及完整性与成年大鼠差异无统计学意义（P〉0.05）,初断乳大鼠原代RMPs细胞产量较成年大鼠高,细胞增殖能力强,细胞形态及表面标记物与成年大鼠一致。研究结果表明,初断乳大鼠视网膜是一种可用于RMPs培养的良好组织原料,该实验成功建立了初断乳大鼠RMPs分离培养体系。

关键词：初断乳大鼠视网膜微血管周细胞分离培养

青少年不同程度高度近视患者视网膜微血管变化情况分析

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眼科新进展 2022年第5期42卷 390-393,398页

作者：吉艳艳李忠庆王甲康烨崔迎春陆诗林袁海燕陈松天津医科大学眼科临床学院天津市眼科医院天津市眼科学与视觉科学重点实验室天津市眼科研究所天津市300020 聊城爱尔眼科医院山东聊城市252100

目的探讨青少年高度近视(HM)和超高度近视(SHM)患者视网膜微血管的变化。方法收集2021年1月至2021年11月在聊城爱尔眼科医院就诊的37例(64眼)近视青少年患者进行分析。根据平均等效球镜度(MSE)和眼轴长度(AL),将受试者分为HM组(23例41眼... 详细信息

目的探讨青少年高度近视(HM)和超高度近视(SHM)患者视网膜微血管的变化。方法收集2021年1月至2021年11月在聊城爱尔眼科医院就诊的37例(64眼)近视青少年患者进行分析。根据平均等效球镜度(MSE)和眼轴长度(AL),将受试者分为HM组(23例41眼,-9.0 D27 mm)。将黄斑中心凹6 mm范围内划分为以黄斑中心凹为中心的3个同心圆,直径为1 mm的黄斑中心凹、1~3 mm的内环区、3~6 mm的外环区,应用光学相干断层扫描血流成像(OCTA)对3个区域的浅层视网膜血管长度密度(SRVD)、浅层视网膜血管灌注密度(SBPD)和直径6 mm完整图像(整体黄斑区)的SRVD和SBPD及其内环区和外环区各个象限的患者SRVD和SBPD进行分析,并对两组患者视网膜厚度和黄斑中心凹无血管区(FAZ)面积进行分析。结果SHM组患者整体黄斑区、黄斑中心凹、内环和外环的SRVD分别为(15.63±1.91)mm^(-1)、(4.99±3.05)mm^(-1)、(14.09±2.71)mm^(-1)和(16.49±1.78)mm^(-1),HM组患者整体黄斑区、黄斑中心凹、内环和外环的SRVD分别为(16.94±1.30)mm^(-1)、(7.46±2.96)mm^(-1)、(16.18±2.12)mm^(-1)和(17.52±1.15)mm^(-1),两组患者间的各区域SRVD比较差异均有统计学意义(均为P0.05)外,其余内环区和外环区各象限SRVD和SBPD比较差异均有统计学意义(均为P视网膜厚度和FAZ面积比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论SHM患者黄斑区视网膜SRVD和SBPD明显低于HM患者,而视网膜厚度和FAZ保持稳定。

关键词：视网膜微血管高度近视超高度近视光学相干断层扫描血流成像

OCTA对糖尿病视网膜病变患者视网膜微血管检测

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国际眼科杂志 2022年第2期22卷 327-330页

作者：许厚银郎胜坤中国天津市眼科医院天津眼科学与视觉科学重点实验室天津市眼科研究所天津医科大学眼科临床学院 300020 中国人民武装警察部队特色医学中心中国天津市300163

目的:探讨光学相干断层扫描血管成像技术(OCTA)在观察糖尿病视网膜病变(DR)患者视网膜微血管中的应用价值。方法:前瞻性研究。选取我院2017-06/2019-12期间收治的84例98眼DR患者为研究组,进一步根据DR程度分为非增生型DR组和增生型DR组... 详细信息

目的:探讨光学相干断层扫描血管成像技术(OCTA)在观察糖尿病视网膜病变(DR)患者视网膜微血管中的应用价值。方法:前瞻性研究。选取我院2017-06/2019-12期间收治的84例98眼DR患者为研究组,进一步根据DR程度分为非增生型DR组和增生型DR组,另选取60例68眼同期于我院体检的单纯性糖尿病患者为对照组。采用OCTA定量分析受试者的视网膜黄斑区微血管,采用自带分析软件获得浅层、深层旁中心凹视网膜的血流密度(SCP、DCP)、黄斑中心凹无血管区域(FAZ)面积以及周长、非圆指数(AI)、全层视网膜血流密度(FD-300)。比较各组间定量指标差异以及OCTA参数与DR严重程度的相关性和对DR的诊断价值。结果:研究组的FD-300、SCP、DCP均低于对照组(t=6.476、8.907、5.078,均P视网膜黄斑区浅层、深层毛细血管形态,血流密度定量指标与疾病严重程度呈负相关性,对于DR的诊断具有较高的临床价值。

关键词：糖尿病视网膜病变光学相干断层扫描血管成像技术(OCTA) 视网膜微血管黄斑中心凹无血管区

糖尿病大鼠视网膜微血管的重建及某些药物对其的影响

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第二军医大学学报 2000年第12期21卷 1110-1112页

作者：刘志勇韩丽荣张传森韩传贵第二军医大学长海医院眼科上海200433 基础医学部解剖学教研室

目的 :研究糖尿病大鼠视网膜微血管的重建。方法 :用链脲佐菌素 (STZ)诱导 SD大鼠建立糖尿病动物模型 ,运用视网膜消化铺片和图像分析方法观测糖尿病大鼠视网膜微血管的重建 ,及非酶糖化抑制剂和活血化瘀中药对其重建的影响。结果 :在 ... 详细信息

目的 :研究糖尿病大鼠视网膜微血管的重建。方法 :用链脲佐菌素 (STZ)诱导 SD大鼠建立糖尿病动物模型 ,运用视网膜消化铺片和图像分析方法观测糖尿病大鼠视网膜微血管的重建 ,及非酶糖化抑制剂和活血化瘀中药对其重建的影响。结果 :在 8周时毛细血管宽度即有显著性变化 (P视网膜微血管的形态重建 ,两者之间呈显著正相关。 (2 )

关键词：糖尿病视网膜病变视网膜微血管动物模型

血小板反应蛋白-1在糖尿病大鼠视网膜微血管中的表达

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上海交通大学学报（医学版） 2008年第6期28卷 661-664页

作者：许琳刘堃朱冬青邬海翔顾青许迅上海交通大学第一人民医院眼科上海200080

目的研究高糖状态下血小板反应蛋白-1(TSP-1)在视网膜微血管中的表达。方法链脲佐菌素腹腔注射诱导建立大鼠糖尿病动物模型,设立正常对照组。体外培养牛视网膜微血管内皮细胞,免疫组化法进行鉴定。分别于建模后2、4、8周,运用免疫组化及... 详细信息

目的研究高糖状态下血小板反应蛋白-1(TSP-1)在视网膜微血管中的表达。方法链脲佐菌素腹腔注射诱导建立大鼠糖尿病动物模型,设立正常对照组。体外培养牛视网膜微血管内皮细胞,免疫组化法进行鉴定。分别于建模后2、4、8周,运用免疫组化及Western blotting检测大鼠视网膜中TSP-1的表达。收集不同时段高糖孵育的内皮细胞,Real-time PCR检测TSP-1mRNA表达的变化。结果TSP-1在糖尿病大鼠视网膜组织的表达随病程而增加;在正常对照组中,TSP-1的表达呈现生理性的年龄-相关性增长,其增加程度远低于相应周龄的糖尿病大鼠。高糖孵育内皮细胞48 h时,TSP-1 mRNA较正常对照增高,在高糖作用5 d时反而下降(P血管稳态起重要作用。在高糖状态下,TSP-1高表达可能对新生血管的形成起到重要的负反馈作用。

关键词：血小板反应蛋白-1 高糖视网膜微血管糖尿病,大鼠

妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜微血管的变化

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国际眼科杂志 2024年第9期24卷 1476-1480页

作者：彭博王春芳山西省眼科医院中国山西省太原市030002 山西医科大学第一医院眼科中国山西省太原市030001

目的:利用光学相干断层扫描血管成像(OCTA)评估妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜表层黄斑区和视乳头区微血管的变化。方法:回顾性研究。收集2020-09/2021-01就诊于山西医科大学第一医院产科的妊娠期高血压和子痫前期患者25例,其中妊娠... 详细信息

目的:利用光学相干断层扫描血管成像(OCTA)评估妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜表层黄斑区和视乳头区微血管的变化。方法:回顾性研究。收集2020-09/2021-01就诊于山西医科大学第一医院产科的妊娠期高血压和子痫前期患者25例,其中妊娠期高血压10例、轻度子痫前期9例、重度子痫前期6例;另收集同期就诊于我院的健康孕妇25例、健康未孕女性25例。应用OCTA测量视网膜黄斑区和视乳头区血管密度(VD)、灌注密度(PD)。分析比较各组受检者右眼视网膜微血管各参数的变化。结果:妊娠期高血压和子痫前期患者黄斑区中心VD、内环VD、中心PD、内环PD均低于健康孕妇和健康未孕女性(均P0.05)。健康孕妇和健康未孕女性黄斑区和视乳头VD、PD比较均无差异(均P>0.05)。结论:OCTA可较好地显示妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜表层微血管的变化,并在未出现明显视网膜病变前已经观察到妊娠期高血压和子痫前期患者黄斑区和视乳头VD、PD下降,OCTA可能对早期识别妊娠期高血压和子痫前期患者微血管变化提供一定帮助。

关键词：妊娠期高血压子痫前期视网膜微血管光学相干断层扫描血管成像

妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜微血管变化的研究

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妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜微血管变化的研究

作者：彭博山西医科大学

学位级别：硕士

目的:利用光学相干断层扫描血管成像(OCTA)评估妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜微血管的变化。方法:收集2020年9月至2021年1月在山西医科大学第一医院产科确诊的妊娠期高血压和子痫前期患者20例(20眼),其中妊娠期高血压7例(7眼)、轻... 详细信息

目的:利用光学相干断层扫描血管成像(OCTA)评估妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜微血管的变化。方法:收集2020年9月至2021年1月在山西医科大学第一医院产科确诊的妊娠期高血压和子痫前期患者20例(20眼),其中妊娠期高血压7例(7眼)、轻度子痫前期7例(7眼)、重度子痫前期6例(6眼);另收集同期就诊于我院的健康孕妇20例(20眼)、健康未孕女性20例(20眼)。收集所有受检者的基本资料,均行全面眼科检查及OCTA检查。比较分析妊娠期高血压和子痫前期患者、健康孕妇、健康未孕女性在黄斑区和视乳头的血管密度(VD)、灌注密度(PD),比较分析妊娠期高血压患者、轻度子痫前期患者、重度子痫前期患者在黄斑区和视乳头的VD、PD,旨在了解妊娠期高血压和子痫前期对视网膜微血管的影响。结果:妊娠期高血压和子痫前期患者黄斑区的中心VD、内环VD、中心PD、内环PD、整圆PD均低于健康孕妇、健康未孕女性(F=4.685、6.830、4.940、7.129、3.295,P=0.013、0.002、0.011、0.002、0.044)。妊娠期高血压和子痫前期患者视乳头的内环PD低于健康孕妇(F=3.751,P=0.029)。妊娠期高血压患者、轻度子痫前期患者、重度子痫前期患者黄斑区和视乳头的VD、PD均无显著性差异(P>0.05)。健康孕妇和健康未孕女性黄斑区和视乳头的VD、PD均无显著性差异(P>0.05)。结论:OCTA可较好地显示妊娠期高血压和子痫前期患者视网膜微血管的变化,并在未出现明显视网膜病变前已经观察到妊娠期高血压和子痫前期患者黄斑区和视乳头血管密度、灌注密度下降,OCTA可能对早期识别妊娠期高血压和子痫前期患者微血管变化提供一定帮助。

关键词：妊娠期高血压子痫前期视网膜微血管光学相干断层扫描血管成像

观察长期高脂饮食大鼠视网膜微血管的变化及吡格列酮干预疗效

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观察长期高脂饮食大鼠视网膜微血管的变化及吡格列酮干预疗效

作者：陈琳琳河北医科大学

学位级别：硕士

目的:近年来,脂代谢紊乱、肥胖因其可导致严重的心脑血管病变而影响人民健康,被日益受到关注。随着研究的展开和深入,研究者发现肥胖、脂代谢紊乱对视网膜微血管也有影响。目前,有关高脂血症、肥胖引发视网膜微血管损伤的具体机制尚不... 详细信息

目的:近年来,脂代谢紊乱、肥胖因其可导致严重的心脑血管病变而影响人民健康,被日益受到关注。随着研究的展开和深入,研究者发现肥胖、脂代谢紊乱对视网膜微血管也有影响。目前,有关高脂血症、肥胖引发视网膜微血管损伤的具体机制尚不十分清楚。本实验旨在探讨长期高脂饲养建立的肥胖高脂伴胰岛素抵抗SD大鼠模型视网膜微血管的变化以及缺氧诱导因子(hypoxia inducible factors, HIF)-1、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、细胞间粘附分子(intercellular adhension molecule, ICAM)-1以及转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-βmRNA的表达变化和吡格列酮的干预疗效。方法: 1 8周龄雄性SD大鼠随机分为3组,正常对照组(NC)、高脂饲养组(HF)、高脂加吡格列酮干预组(HP)。NC组予正常饲料,HF组和HP组予高脂饲料喂养,同时,HP组予吡格列酮15mg·kg·d剂量灌胃,NC组、HF组给予等剂量蒸馏水灌胃,每日一次。32周末收集24小时尿行24小时尿白蛋白定量检测。2天后大鼠情况稳定行正常血糖高胰岛素钳夹实验评价外周胰岛素抵抗程度。其余大鼠处死,采血检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)等指标;取一侧眼球固定行视网膜毛细血管铺片PAS染色以及免疫组织化学染色,另一侧分离视网膜组织采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法测定三组大鼠视网膜组织HIF-1、VEGF、ICAM-1和TGF-βmRNA的表达情况。 2统计学处理所有资料以SPSS10.0统计软件进行分析,首先用描述性统计和分析研究变量分布,符合正态分布的测定值以(x±s)表示,两组间的比较采用t检验,多组间的比较采用方差分析。结果: 1从进入实验第二周开始,高脂饲养组体重即开始增加,32周时,HF组和HP组大鼠体重、内脏脂肪重量及内脏脂肪占体重百分比均明显高于NC组(P均视网膜毛细血管铺片-PAS染色显示:NC组:动脉旁毛细血管网分布规则,动静脉血管走形较直,毛细血管粗细均匀,内皮细胞和周细胞规律分布,形态规则,周细胞内皮细胞比例1.082;HF组:动脉旁毛细血管网分布较乱,走形不直,内皮细胞增生,周细胞减少,且细胞形态不规则,还可见周细胞凋亡,白细胞聚集以及无细胞毛细血管形成等现象,但未见影周细胞及微血管瘤形成,周细胞内皮细胞比例0.483;HP组:动脉旁毛细血管网分布较规则,走形较直,内皮细胞增生及周细胞减少现象均有所好转,细胞形态亦较规则,未见无细胞毛细血管,周细胞内皮细胞比例0.755。 4视网膜毛细血管铺片免疫组织化学染色:可见视网膜血管呈现棕黄色阳性着染,动静脉染色深,微血管染色浅。HF组HIF-1、VEGF的表达比NC组明显增强,HP组HIF-1、VEGF的表达比HF组明显减弱,有统计学差异。同时,HF组ICAM-1、TGF-β的表达比NC组明显增强,HP组ICAM-1、TGF-β的表达介于NC组和HF组之间。 5 Real time-PCR检测:与NC组相比,HF组HIF-1的表达升高34.15%,HP组与HF组相比下降10.65%;VEGF mRNA表达增高390%,HP组与HF组相比下降82.6%;HF组ICAM-1、TGF-βmRNA的表达分别增高20.6%、76.2%,HP组较HF组分别改善12.3%,40.6%。结论: 1 SD大鼠经过32周高脂饮食饲养后体重、内脏脂肪重量及内脏脂肪占体重百分比均明显高于正常对照组。正糖高胰岛素钳夹显示存在明显胰岛素抵抗。并且空腹血糖、胰岛素、游离脂肪酸等也明显升高。说明已成功建立具有高脂、肥胖、胰岛素抵抗等特点的大鼠模型。 2视网膜毛细血管铺片PAS染色可见NC组周细胞减少,内皮细胞增生、白细胞聚集、无细胞毛细血管形成,提示长期高脂饮食导致的高脂、肥胖、胰岛素抵抗可引起大鼠视网膜微血管内皮损伤。 3视网膜毛细血管铺片免疫组织化学染色及Real-time PCR检测结果提示长期高脂饮食诱导的高脂肥胖

关键词：高脂视网膜微血管吡格列酮缺氧诱导因子血管内皮生长因子细胞间黏附分子-1 转化生长因子-β

冠心病患者的视网膜微血管损伤及其发病预测模型构建

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冠心病患者的视网膜微血管损伤及其发病预测模型构建

作者：钟娉婷汕头大学

学位级别：硕士

第一章基于光学相干断层扫描血管成像技术观察冠心病患者的视网膜血管改变目的:使用光学相干断层扫描血管成像（OCTA）测量冠心病患者的视网膜血管参数,探讨视网膜微血管改变与冠心病的发生和病变严重程度之间的关系。方法:此横断面研... 详细信息

第一章基于光学相干断层扫描血管成像技术观察冠心病患者的视网膜血管改变目的:使用光学相干断层扫描血管成像（OCTA）测量冠心病患者的视网膜血管参数,探讨视网膜微血管改变与冠心病的发生和病变严重程度之间的关系。方法:此横断面研究在广东省人民医院入组2018年10月至2019年10月就诊于心内科并经冠脉造影确诊的冠心病患者,同时入组体检中心的健康对照者。使用OCTA测量参与者的视网膜神经血管参数,包括神经纤维层厚度和视乳头旁血管密度、黄斑区浅深层毛细血管（SCP,DCP）密度等参数;采用Gensini评分评价患者冠脉病变的严重程度。结果:入组270例冠心病患者和140例性别年龄匹配的对照者。SCP整体（mean SCP）、SCP旁中央凹区（parafoveal SCP）和SCP中央凹周围区（perifoveal SCP）血管密度在冠心病组中为48.64%,50.77%和49.21%;在对照组中为49.92%,52.29%和50.67%。Mean DCP、parafoveal DCP和perifoveal DCP血管密度在冠心病组中为47.80%,52.61%和49.01%;在对照组中为52.21%,56.00%和53.70%。将整体人群按对照组血管密度中位数二等分组后分析:SCP整体及各区域血管密度较低的人患冠心病几率显著高于血管密度较高的人,mean SCP中OR=2.33（95%CI,1.49–3.65）;parafoveal SCP中OR=2.68（95%CI,1.70–4.23）;perifoveal SCP中OR=2.36（95%CI 1.49–3.72）。同时,DCP整体及各区域血管密度较低的人患冠心病几率也显著高于血管密度较高的人,mean DCP中OR=4.04（95%CI,2.53–6.45）;parafoveal DCP中OR=4.08（95%CI,2.54–6.55）;perifoveal DCP中OR=3.88（95%CI,2.43–6.19）。将冠心病组按组内血管密度中位数二等分组,较低的SCP和DCP血管密度分别对应较高的Gensini评分;矫正混杂因素后,仅DCP血管密度在Gensini评分中具有显著意义（mean DCP,p=0.004;parafoveal DCP,p=0.035;perifoveal DCP,p=0.006）。而在SCP中无此显著趋势。结论:视网膜血管密度与冠心病的发生和冠脉狭窄的严重程度相关。DCP血管密度或可反映冠心病患者的冠脉微循环障碍。第二章基于光学相干断层扫描血管成像技术预测慢性冠脉完全阻塞的发生目的:视网膜微血管系统与冠心病的发生和严重程度相关,但视网膜微血管系统在冠心病亚组中是否有不同的改变尚未明确。我们旨在研究视网膜血管在慢性冠脉完全阻塞（CTO）和非CTO（non-CTO）冠心病患者中的不同改变,同时利用视网膜微血管特征在冠心病中鉴别CTO和non-CTO。方法:本横断面研究入组了2018年11月至2019年07月于心内科住院并确定行冠脉介入治疗的冠心病患者。所有患者均采用光学相干断层血管成像（OCTA）自动测量视网膜血管参数并接受冠脉造影,基于造影结果将冠心病患者分为CTO和non-CTO两组。利用受试者工作特征曲线（ROC）评价视网膜血管参数在区分CTO与non-CTO患者中的表现。结果:本研究共纳入218例冠心病患者,包括102例CTO和116例non-CTO。SCP的均值、旁中央凹、旁中央凹的上方与下方的血管密度在non-CTO组中分别为49.85%、52.56%、52.88%和52.25%,在CTO组中则为47.77%、49.58%、49.64%和49.51%。DCP的均值、旁中央凹、旁中央凹的上方与下方的血管密度在non-CTO组中分别为50.10%、54.37%、54.79%和53.95%,在CTO组中则为48.41%、53.09%、53.42%和52.77%。矫正混杂因素后发现,两组间的显著差异仅存在于SCP血管密度,而在DCP血管密度中无显著性差异。多因素回归分析筛选出具有预测CTO价值的参数,包括SCP旁中央凹的上半侧（OR,0.772;95%CI,0.685–0.870;p＜0.001）、男性（OR,5.609;95%CI,1.181–26.641;p=0.003）和左室射血分数（LVEF,OR,0.916;95%CI,0.880–0.954;p＜0.001）。ROC曲线分析中,SCP旁中央凹的上半侧用于预测CTO的曲线下面积（AUC）为0.722（特异性为53.9%,敏感性为86.2%）,结合临床变量（性别、LVEF）用于预测CTO发病的AUC为0.812（特异性为89.0%,敏感性为65.9%）。结论:在冠心病患者中,CTO较non-CT

关键词：冠状动脉粥样硬化性心脏病视网膜微血管光学相干断层扫描血管成像 Gensini评分预测