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人脐带间充质干细胞外泌体靶向miR-126调节高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞中血管内皮生长因子-a的表达

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中华眼底病杂志 2024年第5期40卷 372-378页

作者：马映雪何广辉高翔付燕武斌天津市第一中心医院、天津市眼科医院、天津市眼科学与视觉科学重点实验室、天津市眼科研究所、天津医科大学眼科临床学院天津300020

目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)外泌体(Exo)靶向miR-126对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(hREC)中血管内皮生长因子(VEGF)-A水平的影响,初步探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通路在其中发挥的作用。方... 详细信息

目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)外泌体(Exo)靶向miR-126对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(hREC)中血管内皮生长因子(VEGF)-A水平的影响,初步探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通路在其中发挥的作用。方法将hREC置于30 mmol/L葡萄糖EGM-2-MV内皮细胞培养基中并于含1%O2的低氧细胞培养箱中培养,建立高糖低氧细胞模型。建模后分为Exo组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、PBS+anti-miR126组、Exo+anti-miR126组、PBS+anti-mTOR组、PBS+anti-HIF-1α组。PBS组、Exo组高糖低氧诱导的hREC分别与PBS、100μg/ml的hUCMSC Exo共培养。PBS+anti-mTOR组、PBS+anti-HIF-1α组:浓度为500 nmol/L mTOR抑制剂ADZ2014、25μmol/L HIF-1α抑制剂YC-1分别预处理hREC 12 h后,再行高糖低氧诱导后与PBS共培养。PBS+anti-miR126组、Exo+anti-miR126组:miR-126 LNA Power Inhibitor探针转染高糖低氧诱导的hREC,转染6 h后分别与PBS、hUCMSC Exo共培养。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测PBS组、Exo组共培养0、8、16、24 h细胞中miRNA-126表达水平。共培养24 h时,免疫荧光染色、蛋白质免疫印迹法(Western blot)、qPCR分别检测PBS组、Exo组细胞中mTOR、HIF-1α水平。Western blot、qPCR检测PBS+anti-mTOR组、PBS+anti-HIF-1α组细胞中VEGF-A表达水平。qPCR检测PBS+anti-miR126组、Exo+anti-miR126组细胞中VEGF-A、mTOR、HIF-1αmRNA表达。两组间比较采用t检验;多组间比较采用单因素方差分析。结果共培养0、8、16、24 h,Exo组细胞中miR-126 mRNA相对表达量逐渐增高,差异有统计学意义(F=95.900,P<0.05)。与PBS组比较,Exo组细胞中mTOR、HIF-1α蛋白表达(t=3.466、6.804)以及mTOR、HIF-1α、VEGF-A mRNA表达(t=8.642,7.897、6.099)均下调,差异有统计学意义(P<0.05);PBS+anti-mTOR组、PBS+anti-HIF-1α组细胞中VEGF-A蛋白(t=3.337、7.380)、mRNA(t=8.515、10.400)表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05);Exo+anti-miR126组细胞中VEGF-A、mTOR、HIF-1αmRNA表达明显升高,差异均有统计学意义(t=4.664、6.136、6.247,P<0.05)。结论miR-126通过mTOR/HIF-1α通路参与调节hUCMSC Exo对高糖诱导的hREC中VEGF-A水平的影响。

关键词： miR-126 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白缺氧诱导因子1α 血管内皮生长因子-a 人脐带间充质干细胞外泌体细胞实验

血管内皮生长因子-a和癌胚抗原在非小细胞肺癌中表达水平的相关性及临床意义

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血管内皮生长因子-A和癌胚抗原在非小细胞肺癌中表达水平的相关性...

作者：陈梨皖南医学院

学位级别：硕士

目的:观察血管内皮生长因子-a(VEGF-A)和癌胚抗原(CEA)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中表达水平的相关性,评估二者在NSCLC的筛查、预测分期和分型等方面的临床应用。方法:收集于2018年07月至2020年02月期间在弋矶山医院就诊且经病理组织学... 详细信息

目的:观察血管内皮生长因子-a(VEGF-A)和癌胚抗原(CEA)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中表达水平的相关性,评估二者在NSCLC的筛查、预测分期和分型等方面的临床应用。方法:收集于2018年07月至2020年02月期间在弋矶山医院就诊且经病理组织学或细胞学首次确诊为NSCLC患者为研究对象;同时选取诊断为肺炎、肺TB、结核性胸膜炎患者以及健康体检者为观察对象。收集入组的所有患者于清晨空腹抽取肘部静脉血3ml置于真空采血管中,离心后做好标记置-20℃保存用于VEGF-A、CEA的检测。比较三组之间VEGF-A和CEA表达水平的差异性,以及二者表达水平在TNM分期、AD和SCC之间的差异性。评估二者表达水平是否存在相关性以及联合检测在NSCLC筛查、预测分期和鉴别中的应用价值。结果:(1)NSCLC组患者血清VEGF-A和CEA表达水平显著高于良性疾病和健康对照组(P0.05),VEGF-A水平高于健康体检对照组(P0.05)。结论:NSCLC组患者血清VEGF-A和CEA表达水平显著高于良性疾病对照组和健康体检对照组;血清VEGF-A、CEA联合检测的AUC、敏感性显著高于单独检测,二者联合检测可提高对NSCLC的筛查和疾病鉴别效能;血清VEGF-A和CEA表达水平在NSCLC患者中呈显著正相关;NSCLC分期越晚,VEGF-A和CEA表达水平越高,在预测NSCLC分期方面具有很好的辅助作用;年龄、VEGF-A和CEA表达水平与NSCLC发病风险相关,年龄越大者、VEGF-A和CEA表达水平越高者,其患癌风险也相对越高,性别对其发病风险影响无显著差异性。

关键词：非小细胞肺癌血管内皮生长因子-a 癌胚抗原

普萘洛尔治疗增殖期血管瘤患者血管内皮生长因子-a及表皮生长因子样结构域7的表达分析

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华西口腔医学杂志 2014年第5期32卷 441-445页

作者：凌彬陈曼丽刘洁尹小朋林兆全龚忠诚新疆医科大学第一附属医院颌面肿瘤外科新疆医科大学口腔医学院.新疆维吾尔自治区口腔医学研究所乌鲁木齐830054 新疆医科大学第五附属医院口腔科乌鲁木齐830000

目的对普萘洛尔治疗增殖期婴幼儿血管瘤的临床疗效和治疗过程中血清及尿液血管内皮生长因子-a（VEGF-A）和表皮生长因子样结构域7（EGFL7）表达水平进行检测分析。方法选择30例婴幼儿增殖期血管瘤患者为研究对象,口服普萘洛尔治疗4-8个... 详细信息

目的对普萘洛尔治疗增殖期婴幼儿血管瘤的临床疗效和治疗过程中血清及尿液血管内皮生长因子-a（VEGF-A）和表皮生长因子样结构域7（EGFL7）表达水平进行检测分析。方法选择30例婴幼儿增殖期血管瘤患者为研究对象,口服普萘洛尔治疗4-8个月,口服剂量为每天0.5-2 mg·kg^-1。采用B超测量治疗前后瘤体的半径,采用Achauer疗效评定法进行临床疗效评估。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测治疗前、治疗后4周、治疗后12周血清及尿液中VEGF-A和EGFL7水平。结果治疗效果评价：2例优,11例好,14例中等,3例差。治疗前血清VEGF-A水平最高（335.692 pg·mL^-1±136.146 pg·mL^-1）,治疗后4周（264.853 pg·mL^-1±122.120 pg·mL^-1）和治疗后12周（211.345 pg·mL^-1±104.035 pg·mL^-1）呈逐渐下降趋势,治疗后4、12周血清VEGF-A水平低于治疗前（P〈0.05）。治疗前尿液VEGF-A水平最高（76.234 pg·mL^-1±24.169 pg·mL^-1）,治疗后4周（56.454 pg·mL^-1±16.111 pg·mL^-1）和治疗后12周（34.728 pg·mL^-1±12.656 pg·mL^-1）呈逐渐下降趋势,治疗后4、12周尿液VEGF-A水平低于治疗前（P〈0.05）。血清和尿液中EGFL7的表达趋势与VEGF-A一致。结论普萘洛尔能够安全有效地治疗增殖期婴幼儿血管瘤。普萘洛尔能降低增殖期婴幼儿血管瘤患者外周血清和尿液中VEGF-A和EGFL7水平。

关键词：普萘洛尔增殖期婴幼儿血管瘤血管内皮生长因子-a 表皮生长因子样结构域7

芬太尼对结直肠癌小鼠瘤体大小及血管内皮生长因子-a、缺氧诱导因子-1α的影响

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临床误诊误治 2022年第2期35卷 102-106页

作者：吴昱张占峰郝书航汪国基底妍汤龙信解放军联勤保障部队第九八〇医院麻醉科石家庄050082

目的探讨芬太尼对结直肠癌小鼠肿瘤大小及血管内皮生长因子-a(VEGF-A)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法选择15只6~8周龄雄性BALB/C小鼠,采用右前肢腋窝皮下注射结肠癌细胞株CT26的方法制作结直肠癌小鼠模型,肿瘤直径>1 cm时,按... 详细信息

目的探讨芬太尼对结直肠癌小鼠肿瘤大小及血管内皮生长因子-a(VEGF-A)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法选择15只6~8周龄雄性BALB/C小鼠,采用右前肢腋窝皮下注射结肠癌细胞株CT26的方法制作结直肠癌小鼠模型,肿瘤直径>1 cm时,按照随机数字表法分为A、B、C组,每组5只。B组和C组分别给予芬太尼10和50μg/(kg·d)腹腔注射,A组给予等量生理盐水腹腔注射,连续1周。颈椎脱臼法处死小鼠,观察3组肿瘤直径和体积,比较血清VEGF-A和HIF-1α水平,以及瘤体组织VEGF-A、HIF-1αmRNA和蛋白表达情况。结果B组和C组肿瘤直径和体积均小于A组,血清VEGF-A和HIF-1α水平均低于A组,瘤体组织VEGF-A、HIF-1αmRNA和蛋白表达水平均低于A组(P0.05)。结论芬太尼能够抑制结直肠癌小鼠肿瘤的生长,这种抑制作用可能是通过下调VEGF-A和HIF-1α实现的,而且该作用可能与芬太尼的剂量相关。

关键词：结直肠肿瘤芬太尼血管内皮生长因子-a 缺氧诱导因子-1α 小鼠,近交BALB/C

血管内皮生长因子-a和α-Adducin在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的相关性

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国际消化病杂志 2019年第3期39卷 216-221页

作者：李良顾慧珍浙江省台州医院急救中心

目的研究血管内皮生长因子-a(VEGF-A)、细胞膜骨架蛋白α-Adducin(ADD1)在胃癌(GC)组织中的表达及其与临床病理特征和预后的相关性。方法选取2010年5月至2012年5月浙江省台州医院确诊的147例GC患者的肿瘤组织及癌旁正常组织,分别作为研... 详细信息

目的研究血管内皮生长因子-a(VEGF-A)、细胞膜骨架蛋白α-Adducin(ADD1)在胃癌(GC)组织中的表达及其与临床病理特征和预后的相关性。方法选取2010年5月至2012年5月浙江省台州医院确诊的147例GC患者的肿瘤组织及癌旁正常组织,分别作为研究组和对照组,采用免疫组织化学法检测两组VEGF-A和ADD1的表达水平,分析VEGF-A、ADD1的表达水平与GC患者的临床病理学特征及预后的关系。结果VEGF-A、ADD1在GC组织中的高表达率明显高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。肿瘤位置不同的GC患者中VEGF-A表达水平的差异具有统计学意义(P<0.05)。组织分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移不同的GC患者中ADD1表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。VEGF-A与ADD1在GC组织中的表达呈正相关。VEGF-A、ADD1高表达组的总生存率(OS)、无病生存率(DFS)均显著低于低表达组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论VEGF-A、ADD1在GC组织中呈高表达,VEGF-A表达水平与GC患者肿瘤位置及GC预后呈相关性,ADD1表达水平与GC患者组织分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移及GC预后呈相关性,且VEGF-A与ADD1在GC组织中的表达呈正相关。

关键词：胃癌血管内皮生长因子-a α-Adducin 临床病理特征预后

血管内皮生长因子-a及其在肿瘤临床中的应用研究

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黑龙江医学 2005年第10期29卷 739-741页

作者：张健禹亮王巨付凯姜久仰哈尔滨医科大学第一临床医学院胸外科黑龙江哈尔滨150001

血管内皮生长因子-a是近代分子生物学中应用较广的因素之一,笔者通过文献检索,概述内皮生长因子-A的结构和特点。该因子的宗族表达调控,生物行为功能与检测;血管内皮生长因子-a的临床应用前景与展望。

关键词：肿瘤学血管内皮生长因子-a 肿瘤临床应用研究

血管内皮生长因子-a和生存素在慢性肝病组织中的表达及意义

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海南医学 2013年第13期24卷 1877-1879页

作者：王红芳申建刚张定国深圳市罗湖区人民医院血液内科广东深圳518000 深圳市龙华新区人民医院消化内科广东深圳518109 深圳市人民医院消化内科广东深圳518020

目的研究慢性肝病组织中血管内皮生长因子-a(VEGF-A)和生存素的表达及其临床意义。方法收集手术切除并经病理学证实的原发性肝癌38例,应用免疫组化方法检测原发性肝癌、乙肝肝硬化和慢性乙型肝炎组织中VEGF-A和生存素的表达。结果 VEGF-... 详细信息

目的研究慢性肝病组织中血管内皮生长因子-a(VEGF-A)和生存素的表达及其临床意义。方法收集手术切除并经病理学证实的原发性肝癌38例,应用免疫组化方法检测原发性肝癌、乙肝肝硬化和慢性乙型肝炎组织中VEGF-A和生存素的表达。结果 VEGF-A在慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化及原发性肝癌组织中的阳性率分别为26.7%、73.1%和68.4%,三者之间的差异有统计学意义(P<0.01);生成素在慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化及原发性肝癌组织中蛋白阳性表达率分别是33.3%、46.2%和84.2%,三者之间的差异有统计学意义(P<0.01);生成素在HCC组织中的表达明显高于在慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化组织中的表达(P<0.01)。结论随着慢性肝病进展,VEGF-A与生成素在肝组织中的表达逐渐升高,二者可作为HCC早期诊断的标志物。

关键词：血管内皮生长因子-a 生成素原发性肝癌乙肝肝硬化慢性乙型肝炎

胃癌患者血管内皮生长因子-a的测定及其临床意义

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胃肠病学 2004年第1期9卷 27-29页

作者：丁士刚林三仁董秀云曲恒怡杨雪玲黄淑美刘文静周丽雅北京大学第三医院消化科 100083 山东省烟台市牟平区医院消化内科

背景:胃癌的生长和转移与新生血管的生成密切相关。血管内皮生长因子(VEGF)鄄A在肿瘤组织中大量表达,在肿瘤血管生成中发挥重要作用。目的:测定胃癌患者循环血液中VEGF鄄A的含量,并探讨其临床意义。方法:选取经内镜和病理检查证实的135... 详细信息

背景:胃癌的生长和转移与新生血管的生成密切相关。血管内皮生长因子(VEGF)鄄A在肿瘤组织中大量表达,在肿瘤血管生成中发挥重要作用。目的:测定胃癌患者循环血液中VEGF鄄A的含量,并探讨其临床意义。方法:选取经内镜和病理检查证实的135例胃癌患者和48例胃良性疾病患者,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定其血浆和血清VEGF鄄A含量。10例手术前胃癌患者和10例胃良性疾病患者于1周后、16例胃癌患者于术后3周再次测定血清VEGF鄄A含量。结果:135例胃癌患者的血浆和血清VEGF鄄A含量显著高于48例胃良性疾病患者(血浆:74.1pg/ml±96.0pg/ml对23.7pg/ml±16.9pg/ml,P0.05)。16例胃癌患者术前和术后3周的血清VEGF鄄A含量分别为328.4pg/ml±141.7pg/ml和103.5pg/ml±52.2pg/ml,差异有显著性(P<0.0001)。结论:胃癌患者的血浆和血清VEGF鄄A含量显著增高,血清VEGF鄄A含量较稳定。胃癌切除术后血清VEGF鄄A含量显著降低。

关键词：胃癌血管内皮生长因子-a VEGF-A 肿瘤酶联免疫吸附测定手术

肿瘤上清液激活成纤维细胞后对血管内皮生长因子-a表达影响

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肿瘤上清液激活成纤维细胞后对血管内皮生长因子-A表达影响

作者：肖衡重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：检测肿瘤细胞上清液对成纤维细胞的激活的最佳浓度及最佳浓度的条件培养液激活成纤维细胞后血管内皮生长因子（VEGF-A）的表达的变化规律。方法：用MTT法和流式细胞凋亡术测定成纤维细胞在不同浓度条件培养液中的生长变化与凋亡... 详细信息

目的：检测肿瘤细胞上清液对成纤维细胞的激活的最佳浓度及最佳浓度的条件培养液激活成纤维细胞后血管内皮生长因子（VEGF-A）的表达的变化规律。方法：用MTT法和流式细胞凋亡术测定成纤维细胞在不同浓度条件培养液中的生长变化与凋亡率。用RT-PCR， Western blot，免疫组化检测成纤维细胞的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）与VEGF-A的表达。结果：MTT法发现肿瘤细胞上清液与2×DMEM:F12比例为1:1时，对成纤维细胞的生长有明显的促进作用，其生长速度快于其它浓度（P＜0.05）。流式细胞凋亡术检测表明随着肿瘤细胞上清液浓度的提高，成纤维细胞的凋亡率也上升，1:1的凋亡率与1.5:1时有差异（P＜0.05）。肿瘤细胞上清液组成的条件培养基能促进成纤维细胞α-SMA与VEGF-A稳定的表达，二者在培养后第1天都开始表达，第3天表达量达到峰值，第三天以后表达稳定。结论：当肿瘤细胞上清液与2×DMEM:F12比例为1:1时，能有效促进成纤维细胞的生长并促使成纤维细胞向肌成纤维细胞稳定的转化。肿瘤细胞上清液能够有效稳定的激活成纤维细胞为肌成纤维细胞，成纤维细胞的激活程度影响VEGF-A的表达，二者均具有最佳的激活时间点，并且最佳时间点相一致，最佳激活点的成纤维细胞有望成为一种可用于移植的促进血管重建的细胞。

关键词：成纤维细胞肿瘤细胞上清液血管内皮生长因子-a α-平滑肌肌动蛋白肌成纤维细胞