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光照对中国南北方萱藻丝状体生长发育影响的比较

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水产学报 2016年第7期40卷 1039-1049页

作者：夏云捷宫相忠高伟罗伟张静王吉中国海洋大学海洋生命学院

通过分离、培养我国北方海域(烟台、青岛)和南方海域(舟山、温州)的萱藻丝状体,比较研究了不同光强[7.2、21.6、36.0、50.4、64.8、86.4、108.0和129.6μmol/(m2·s)]和不同光周期(8L:16D、10L:14D、12L:12D、14L:10D和16L:8D)对我国南北方萱藻丝状体生长及发育的影响。结果表明:(1)过高[≥108.0μmol/(m2·s)]或过低[≤21.6μmol/(m2·s)]光强条件均不利于我国南北方萱藻丝状体的快速生长;(2)我国南北方萱藻丝状体生长的最适光强条件相同,在64.8μmol/(m2·s)条件下培养20 d后,其丝状体的增重倍比和日均增长率均达到最大值;(3)我国南北方萱藻丝状体发育的最适光强条件均为36.0μmol/(m2·s),培养20 d后,烟台、青岛、舟山和温州的萱藻丝状体的孢子囊枝比例均达到最大值,分别为34.72%±0.91%、35.06%±1.17%、35.37%±0.59%和34.33%±0.41%;(4)我国南北方萱藻丝状体生长的最适光周期条件不同,培养20 d后,北方萱藻丝状体的增重倍比和日均增长率均在14L:10D条件下达到最大值,分别为82.75%±2.39%、3.00%±0.36%和81.28%±4.53%、3.04%±0.49%,而南方均在16L:8D条件下达到最大值,分别为89.52%±0.88%、3.18%±0.30%和88.66%±7.09%、3.22%±0.26%;(5)经过20 d的培养观察,我国北方萱藻丝状体发育的适宜光周期范围为8L:16D~10L:14D,而南方的适宜光周期范围为10L:14D~12L:12D。

关键词：萱藻丝状体光照强度光周期生长发育

应用响应曲面法优化萱藻丝状体单室孢子囊发育条件

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海洋与湖沼 2023年第2期54卷 483-492页

作者：张玉敏王玉萌宫相忠中国海洋大学海洋生命学院山东青岛266003

为优化萱藻丝状体单室孢子囊发育条件,提高孢子囊比例,研究以萱藻丝状体为材料,在单因素试验的基础上,应用响应曲面法对丝状体单室孢子囊的发育条件进行优化。结果显示,诱导萱藻丝状体单室孢子囊发育的最佳条件为:温度17.67°C,光照强度... 详细信息

为优化萱藻丝状体单室孢子囊发育条件,提高孢子囊比例,研究以萱藻丝状体为材料,在单因素试验的基础上,应用响应曲面法对丝状体单室孢子囊的发育条件进行优化。结果显示,诱导萱藻丝状体单室孢子囊发育的最佳条件为:温度17.67°C,光照强度30.32μmol/(m^(2)·s),外加氮浓度37.37 mg/L,外加磷浓度10.63 mg/L。在该条件下诱导培养20 d,丝状体孢子囊比例为48.92%±5.58%,约为对照组的1.41倍。试验结果与理论预测值的相对误差小于5%,模型可靠。为评价优化培养后萱藻丝状体孢子囊的发育情况,对丝状体进行了阴干刺激(17°C,2h),结果显示,优化培养后的丝状体游孢子放散量(3.33×10^(6) ind./g FW)约为对照组(1.67×10^(6) ind./g FW)的1.99倍。研究表明,在萱藻丝状体单室孢子囊诱导过程中,对诱导环境条件进行有目的性的调控,不仅可以提高孢子囊比例,还可以促进孢子囊发育和游孢子放散的同步性。

关键词：萱藻丝状体响应曲面法孢子囊发育

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四种抗生素对共培养的萱藻丝状体和膨胀色球藻的影响

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水产学报 2018年第12期42卷 1906-1915页

作者：张红霞宫相忠高伟沈世军王吉张静中国海洋大学海洋生命学院

为抑制或消除萱藻丝状体扩增阶段出现的膨胀色球藻,本研究探讨了头孢噻肟钠、阿莫西林、四环素和红霉素4种抗生素对共培养的萱藻丝状体和膨胀色球藻产生的影响。结果显示,浓度为50和100 mg/L的头孢噻肟钠均显著抑制膨胀色球藻的生长,进... 详细信息

为抑制或消除萱藻丝状体扩增阶段出现的膨胀色球藻,本研究探讨了头孢噻肟钠、阿莫西林、四环素和红霉素4种抗生素对共培养的萱藻丝状体和膨胀色球藻产生的影响。结果显示,浓度为50和100 mg/L的头孢噻肟钠均显著抑制膨胀色球藻的生长,进而保证萱藻丝状体正常生长与发育;浓度为50～1 000 mg/L的阿莫西林对膨胀色球藻和萱藻丝状体均无抑制作用,阿莫西林不适于去除共培养体系中的膨胀色球藻;浓度为100和200 mg/L的四环素对膨胀色球藻有显著的抑制作用,但此浓度下萱藻丝状体细胞质萎缩,生长状况较差;浓度为0.10～1.00 mg/L的红霉素对膨胀色球藻的生长均有显著的抑制作用,但当其浓度超过0.50 mg/L时,萱藻丝状体的生长亦受到抑制,甚至死亡。

关键词：萱藻膨胀色球藻丝状体抗生素共培养

二氧化锗对共培养萱藻丝状体和硅藻生长的影响

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水产学报 2019年第2期43卷 431-440页

作者：杨儒谦宫相忠沈世军高伟张红霞庄英瑞中国海洋大学海洋生命学院

为抑制萱藻丝状体保存和扩增过程中出现的小伪菱形藻与碎片菱形藻的生长,本实验应用实验生态学方法,分别建立了丝状体与小伪菱形藻、丝状体与碎片菱形藻、丝状体与小伪菱形藻和碎片菱形藻的共培养体系,研究了1.00～4.00μg/mL二氧化锗（... 详细信息

为抑制萱藻丝状体保存和扩增过程中出现的小伪菱形藻与碎片菱形藻的生长,本实验应用实验生态学方法,分别建立了丝状体与小伪菱形藻、丝状体与碎片菱形藻、丝状体与小伪菱形藻和碎片菱形藻的共培养体系,研究了1.00～4.00μg/mL二氧化锗（GeO;）对共培养条件下丝状体生长发育及附生硅藻生长的影响。结果显示:（1）处理萱藻丝状体和硅藻共培养体系的适宜GeO;浓度为1.00～2.50μg/mL,各实验组14 d的硅藻抑制率均高于67.33%±5.18%,且丝状体生长发育良好,2.00μg/mL为最适浓度,此浓度下丝状体日均增长率最高,在各培养体系中均大于11.00%,且诱导后孢子囊枝比例和孢子囊直径分别为57.47%±5.31%和（24.55±1.01）μm,与对照组差异不显著;（2） 3.50和4.00μg/mL GeO;虽对硅藻抑制效果更佳,但同时也会抑制丝状体生长和后期孢子囊的形成与发育,其中4.00μg/mL GeO;可导致丝状体死亡;（3）碎片菱形藻较小伪菱形藻对GeO;更敏感。实验14 d,各浓度GeO;对碎片菱形藻的抑制率为（82.10%±2.40%）～（96.35%±0.79%）,均高于同浓度GeO;对小伪菱形藻的抑制率;同时在丝状体与小伪菱形藻和碎片菱形藻的共培养体系中,碎片菱形藻占硅藻比例随GeO;浓度升高而相应下降。

关键词：萱藻丝状体小伪菱形藻碎片菱形藻二氧化锗

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应用响应曲面法优化萱藻丝状体扩增条件

水产学报 2022年第9期46卷 1646-1655页

作者：王玉萌刘德举张玉敏张敏宫相忠中国海洋大学海洋生命学院

为优化萱藻丝状体扩增条件，提高萱藻丝状体的扩增速率，以实验室萱藻种质库保存的丝状体为实验材料，在单因素实验的基础上，应用Box-Behnken设计对萱藻丝状体扩增条件进行了响应曲面优化探索。结果显示，以增重倍比为指标，确定了扩... 详细信息

为优化萱藻丝状体扩增条件，提高萱藻丝状体的扩增速率，以实验室萱藻种质库保存的丝状体为实验材料，在单因素实验的基础上，应用Box-Behnken设计对萱藻丝状体扩增条件进行了响应曲面优化探索。结果显示，以增重倍比为指标，确定了扩增萱藻丝状体的最佳条件为温度20.45°C，光照强度78.13μmol/(m~2·s)，外加氮磷比16.19。在该条件下扩增10 d，萱藻丝状体增重倍比为(299.21%±13.58%)，显著高于单因素实验和Box-Behnken设计实验条件下获得的萱藻丝状体增重倍比。实验结果与理论预测值的相对误差小于5%，模型可靠。为评价优化培养后萱藻丝状体的发育情况，对丝状体进行了20 d的诱导，结果显示，优化培养后的萱藻丝状体呈深褐色，细胞质充盈，孢子囊比例(26.37%±5.22%)比对照组的孢子囊比例(18.10%±3.51%)提高了45.69%；优化条件下的孢子囊直径平均为(19.75±0.21)μm，显著高于对照组的孢子囊直径(16.91±0.36)μm。研究表明，在萱藻丝状体扩增过程中，对扩增环境条件进行调控，设置合适的营养盐浓度配比，可以实现较高的扩增速率，并促进丝状体的孢子囊发育。

关键词：萱藻丝状体孢子囊响应曲面法扩增

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萱藻生活史中盘状体阶段生长特性

中国水产科学 2009年第4期16卷 525-532页

作者：张泽宇李晓丽宋玲君魏海霞由学策大连水产学院农业部海洋水产增养殖学与生物技术重点开放实验室

于2006年3-5月在大连沿海萱藻[Scytosiphon lomentaria(Lyngbye)Link]的繁殖期内,采集具有多室配子囊的成熟萱藻,采用阴干刺激方法获得配子并在室内培育形成盘状体。观察结果显示,在20℃和15℃下,盘状体表面细胞生长出丝状体和叶状体。... 详细信息

于2006年3-5月在大连沿海萱藻[Scytosiphon lomentaria(Lyngbye)Link]的繁殖期内,采集具有多室配子囊的成熟萱藻,采用阴干刺激方法获得配子并在室内培育形成盘状体。观察结果显示,在20℃和15℃下,盘状体表面细胞生长出丝状体和叶状体。叶状体经生长后沿藻体纵轴裂开又形成了丝状体。丝状体上与基质接触的细胞进行放射状分裂形成盘状体,未与基质接触的细胞在继续分裂增加藻体长度的同时,在丝状体上形成了许多节状细胞团,节状细胞团与基质接触后向周边分裂又形成了盘状体。由丝状体形成的盘状体在15℃和10℃下培养2个月后形成了单室孢子囊。单室孢子囊成熟后经阴干刺激可放出游孢子,游孢子附着后萌发为直立管状萱藻幼苗。实验结果表明,在萱藻生活史中的盘状体阶段还存在盘状体→丝状体→盘状体与盘状体→叶状体→丝状体→盘状体2个循环。盘状体阶段这2个循环的存在,改变了从配子或合子获得盘状体的单一途径。利用丝状体游离培养生长速度快以及节状细胞团切碎后能在短时间内形成盘状体的特性,在室内进行人工增殖丝状体,当节状细胞团出现后将丝状体切碎,可以获得大量盘状体,通过室内培养使盘状体形成孢子囊并放出孢子,经孢子采苗后在室内培育出萱藻幼苗。本研究旨在为萱藻人工育苗探索一条新路。

关键词：萱藻生活史盘状体丝状体叶状体

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萱藻不同发育阶段形态学及生活史的研究

中国海洋大学学报（自然科学版） 2010年第8期40卷 98-102页

作者：邢永泽宫相忠尹宝树中国海洋大学海洋生命学院山东青岛266003 中科院海洋研究所山东青岛266003

在实验所设定条件下,萱藻(Scytosiphon lomentaria)雌雄配子都可以自由放散,配子结合为合子后发育成为孢子体。孢子体在所设定条件下均可以生长,但其存在形式受到温度影响:在高温(>20℃)条件下,孢子体主要以垫状体或类垫状形式存在,孢... 详细信息

在实验所设定条件下,萱藻(Scytosiphon lomentaria)雌雄配子都可以自由放散,配子结合为合子后发育成为孢子体。孢子体在所设定条件下均可以生长,但其存在形式受到温度影响:在高温(>20℃)条件下,孢子体主要以垫状体或类垫状形式存在,孢子体产生的孢子可以发育为新的孢子体;中等温度(>13℃)条件下,孢子体以丝状体或类垫状体形式存在,可以产生单室孢子囊,放散的孢子发育为新的叶状体;低温条件下(<9℃)孢子体主要以丝状体形式存在,发育缓慢。垫状体主要作为孢子体度夏及自我繁殖的一种形式存在。实验发现配子体的产生与发育主要受温度影响,受光周期影响不明显。

关键词：萱藻丝状体类垫状体垫状体生活史

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萱藻丝状体的种质保存技术

水产学报 2014年第7期38卷 1026-1033页

作者：庄琰宫相忠张文健高伟张必达中国海洋大学海洋生命学院长岛爱华海藻食品有限公司

采用液体保存法和胶囊化低温保存法对萱藻丝状体进行保存,探讨了液体培养法中温度、光照强度以及胶囊化低温保存法中胶球含水量对萱藻丝状体种质保存的影响。结果显示:(1)在液体保存法中,温度对萱藻丝状体的保存影响较小,当光强为5.4μm... 详细信息

采用液体保存法和胶囊化低温保存法对萱藻丝状体进行保存,探讨了液体培养法中温度、光照强度以及胶囊化低温保存法中胶球含水量对萱藻丝状体种质保存的影响。结果显示:(1)在液体保存法中,温度对萱藻丝状体的保存影响较小,当光强为5.4μmol/(m2·s)时,6~18℃均可实现萱藻丝状体的长期保存;(2)光照强度对萱藻丝状体的液体保存影响显著,16.2μmol/(m2·s)及以上的光强不利于种质的保存,5.4μmol/(m2·s)对萱藻丝状体的液体保存最有利;(3)在6~18℃,5.4μmol/(m2·s)条件下保存萱藻丝状体60 d后,萱藻丝状体细胞状态良好且存活率仍在97%以上;(4)胶球含水量过高或过低均会降低萱藻丝状体胶囊化低温保存后的存活率,15%是萱藻丝状体胶球的最适含水量,在该条件下,萱藻丝状体保存1个月后的存活率仍在50%以上。研究证明,在适宜条件下,液体保存法和胶囊化低温保存法均可实现萱藻丝状体的种质保存。

关键词：萱藻丝状体温度光照强度液体保存胶囊化低温保存

萱藻(Scytosiphon lomentaria)无菌种质获取技术研究

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海洋湖沼通报 2019年第5期 149-155页

作者：沈世军宫相忠张红霞杨儒谦王吉张静高伟庄英瑞中国海洋大学海洋生命学院

本研究将抗生素处理法与固体平板培养法相结合,对获取无菌萱藻种质的技术进行探索研究。萱藻种质首先经过匀浆机处理(50Hz,59s)、无菌海水冲洗过滤,然后在黑暗条件下,以抗生素混合液(头孢噻肟钠800μg/L、红霉素200μg/L、亚胺培南200μ... 详细信息

本研究将抗生素处理法与固体平板培养法相结合,对获取无菌萱藻种质的技术进行探索研究。萱藻种质首先经过匀浆机处理(50Hz,59s)、无菌海水冲洗过滤,然后在黑暗条件下,以抗生素混合液(头孢噻肟钠800μg/L、红霉素200μg/L、亚胺培南200μg/L、乙酰磺胺1600μg/L和制霉菌素16μg/L)处理7d,之后转移至固体平板培养后光照条件下培养形成藻落。经过固体培养平板、液体培养基及DAPI染色三种方式确认20个样品中有19个达到了无菌状态,成功率达95%。结果表明这种获取无菌萱藻种质的方法是成熟可靠的。

关键词：萱藻丝状体无菌化抗生素固体培养 DAPI染色

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