检索结果-南通市图书馆

3种有益微生物对菲牛蛭养殖水体理化因子及成活率的影响

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水生态学杂志 2010年第1期3卷 107-111页

作者：张彬汪波林强梁万文吕军仪广西水产研究所广西南宁530021 北京师范大学珠海分校广东珠海519085 中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 中山大学生命科学学院广东广州510275

为减少高密度养殖下菲牛蛭(Hirudinaria manillensis)疾病发生和养殖废水排放,研究比较了3种商品化有益微生物制剂(硝化细菌T1、光合细菌T2和EM复合菌T3)对养殖水体的净化效果。结果表明,3种有益微生物制剂在15d内均能使养殖水体的pH稳... 详细信息

为减少高密度养殖下菲牛蛭(Hirudinaria manillensis)疾病发生和养殖废水排放,研究比较了3种商品化有益微生物制剂(硝化细菌T1、光合细菌T2和EM复合菌T3)对养殖水体的净化效果。结果表明,3种有益微生物制剂在15d内均能使养殖水体的pH稳定在6.8以上,溶氧量(DO)分别比对照组提高30.12%、26.95%和46.12%;化学耗氧量(COD)分别比对照组低1.02mg/L、1.13mg/L和1.53mg/L;3个处理组对氨氮(NH4+-N)的平均降解率分别为48.48%、45.23%和63.10%,亚硝态氮(NO2-N)平均值分别比对照组低0.16mg/L、0.19mg/L和0.27mg/L;菲牛蛭存活率均高达90%以上,明显高于对照组的53%。3种有益微生物制剂均有显著增加溶氧量、降低氨氮、亚硝态氮和化学耗氧量的效应,对菲牛蛭养殖水体均具有很好的净化作用,其中以EM复合菌效果最佳。

关键词：菲牛蛭有益微生物理化因子成活率

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不同温度和密度对菲牛蛭越冬成活率的影响

水产学杂志 2014年第4期27卷 52-55页

作者：张涛于翔龚元宋文华李军张健辽宁省淡水水产科学研究院辽宁辽阳111000 荆州市民康生物科技有限公司湖北荆州434300

在13℃~15℃、18℃~21℃和28℃~31℃的土层温度下,将体质量7.0g和3.0g的活菲牛蛭Hirudinaria manillensis放养到湿度35%~45%、底铺水稻田土的体积为580mm×380mm×60mm的80目网箱中,网箱置于同等大的聚乙烯塑料箱中,密度变化在2~5kg之间... 详细信息

在13℃~15℃、18℃~21℃和28℃~31℃的土层温度下,将体质量7.0g和3.0g的活菲牛蛭Hirudinaria manillensis放养到湿度35%~45%、底铺水稻田土的体积为580mm×380mm×60mm的80目网箱中,网箱置于同等大的聚乙烯塑料箱中,密度变化在2~5kg之间,观察其越冬情况。150d的试验表明:温度为18℃~21℃时,菲牛蛭的越冬存活率最高,大个体组的成活率随投放密度的增加先升高而后下降,大个体的成活率最高(68.8±2.8%);小个体组的成活率随投放密度的增加而下降,最高为61.0±1.9%。各试验组菲牛蛭的相对失重率随越冬温度升高而增大,28℃~31℃下大个体组的相对失重率最大(9.4±2.0%和10.2±2.2%);18℃~21℃下,小个体组相对失重率最大(9.6±2.8%和10.6±2.6%)。

关键词：菲牛蛭越冬成活率相对减重率

配合饲料添加赖氨酸对菲牛蛭生长及水蛭素活性的影响

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贵州农业科学 2018年第5期46卷 88-91页

作者：王雪熊伟姚俊杰吴俣学贾美香贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省农业科学院水产研究所贵州贵阳550025

探明赖氨酸对菲牛蛭生长及水蛭素活性的影响,为规模化养殖菲牛蛭提供技术参考,在配合饲料中添加不同浓度的赖氨酸对菲牛蛭进行为期37d的饲养,测定和统计菲牛蛭的生长情况及水蛭素活性。结果表明:配合饲料中添加0.7~2.1g/kg赖氨酸后菲牛... 详细信息

探明赖氨酸对菲牛蛭生长及水蛭素活性的影响,为规模化养殖菲牛蛭提供技术参考,在配合饲料中添加不同浓度的赖氨酸对菲牛蛭进行为期37d的饲养,测定和统计菲牛蛭的生长情况及水蛭素活性。结果表明:配合饲料中添加0.7~2.1g/kg赖氨酸后菲牛蛭的特定生长率为0.77~0.82,增重率为29.76%~32.12%,水蛭素活性为280.52~285.52U/g,均显著高于不添加赖氨酸处理,其特定生长率和增重率均显著低于血液处理,水蛭素活性与血液处理无显著性差异,且略高于血液处理。添加赖氨酸浓度为1.4g/kg时,菲牛蛭的特定生长率、增重率和水蛭素活性最高,分别为0.82、32.12%和(285.52±5.68)U/g。

关键词：配合饲料赖氨酸菲牛蛭生长水蛭素

基于转录组的水蛭Guamerin基因筛选与原核表达

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基于转录组的水蛭Guamerin基因筛选与原核表达

作者：李萍陕西师范大学

学位级别：硕士

Guamerin是从日本医蛭中鉴定的一类抗凝血物质。它与Antistasin属于同一类丝氨酸蛋白酶抑制剂,由一个或多个Antistasin-like结构域组成。目前对Guamerin的研究主要集中在其作用模式上。本研究采用Pacbio测序平台分析了宽体金线蛭的全长... 详细信息

Guamerin是从日本医蛭中鉴定的一类抗凝血物质。它与Antistasin属于同一类丝氨酸蛋白酶抑制剂,由一个或多个Antistasin-like结构域组成。目前对Guamerin的研究主要集中在其作用模式上。本研究采用Pacbio测序平台分析了宽体金线蛭的全长转录组,筛选了新的可以产生抗凝血蛋白的基因,并筛选出了其Guamerin基因。并在转录组分析的基础上筛选、克隆了菲牛蛭的Guamerin基因,成功将其构建到p ET28a载体上,通过大肠杆菌BL21(DE3)进行体外原核表达;通过Tricine-SDS-PAGE电泳和Western-blot实验进行表达产物的验证,然后对纯化后重组Guamerin蛋白的活性进行验证。研究结果和主要结论如下:1.宽体金线蛭的全长转录组分析获得了30660个转录本,总长度为93.19Mb。共注释到了28144个转录本。从所有转录本中,共鉴定出24719个蛋白质编码序列(CDS),总长度为36.47Mb,根据转录本的注释结果,从Swiss-prot数据库中检索了所有已知的水蛭抗凝血基因,最终确定了426个符合标准的转录本,其中25个可以产生新的抗凝血蛋白。这426个转录本被划分8个Pfam蛋白家族,有121个基因被归为Antistasin家族,其中有13条Guamerin序列。对菲牛蛭进行筛选得到了14条Guamerin序列,作为后续体外表达的序列数据。2.根据菲牛蛭Guamerin基因的CDS序列设计引物,成功使用PCR克隆得到了Guamerin基因,序列分析结果显示G-HM1基因的ORF全长为249bp,编码82个氨基酸,通过双酶切反应将基因与p ET-28a载体进行体外重组,导入大肠杆菌Top10进行扩增,经双酶切反应、测序验证成功构建表达载体p ET-28a-G-HM1。3.将表达载体p ET-28a-G-HM1导入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,对融合蛋白p ET-28a-G-HM1的诱导表达条件进行筛选,通过Tricine-SDS-PAGE电泳检测目的蛋白,在14.4KDa附近有条带出现。最后确立蛋白表达条件为IPTG终浓度0.7m M,37℃诱导表达4h。4.通过凝胶柱层析对含His标签的p ET-28a-G-HM1融合蛋白进行纯化,纯化后Western-blot结果为14.4KDa附近的单一条带。BCA法检测纯化蛋白浓度为0.2mg/m L。5.通过APTT、PT、TT法分别对融合蛋白及其不同比例稀释品进行抗凝血功能检测,结果显示:随着融合蛋白p ET-28a-G-HM1浓度的增加,抗凝作用逐渐加强,但与同浓度水蛭素相比,抗凝血功能较弱。本论文在转录组数据分析的基础上,获得了宽体金线蛭和菲牛蛭的Guamerin基因序列,利用基因工程手段通过原核表达方法成功得到了具有抗凝血活性的Guamerin融合蛋白,验证了该水蛭Guamerin基因具有抗凝血活性,为水蛭的开发利用提供理论依据。

关键词：宽体金线蛭菲牛蛭全长转录组原核表达 Guamerin 抗凝血

生物检定技术应用于水蛭抗凝血活性测定的研究

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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中国药学杂志 2015年第3期50卷 258-262页

作者：肖凌徐小玲何开勇陈科力湖北中医药大学药学院武汉430061 湖北省食品药品监督检验研究院武汉430064

目的将生物检定技术应用于水蛭抗凝血活性的测定,探讨反映水蛭生物活性的质量控制方法。方法采用肝素钠作为对照品,选择活化部分凝血酶时间值作为抗凝活性评价依据,对宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭、棒纹牛蛭的抗凝活性进行测定,测定结... 详细信息

目的将生物检定技术应用于水蛭抗凝血活性的测定,探讨反映水蛭生物活性的质量控制方法。方法采用肝素钠作为对照品,选择活化部分凝血酶时间值作为抗凝活性评价依据,对宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭、棒纹牛蛭的抗凝活性进行测定,测定结果分别用标准曲线法和生物检定统计法计算。结果 4种水蛭活性部分凝血酶时间法的量效关系曲线与肝素的量效关系曲线类似,突跃范围呈平行关系,上述特点符合生物检定的要求,以肝素钠作为标准品,采用生物检定技术活性部分凝血酶时间法测定水蛭等的抗凝活性是可行的。结论活化部分凝血酶时间值可以全面反映水蛭的抗凝血作用,测定结果对临床使用更具指导意义。生物检定技术应用于中药质量评价,是对现有中药质量标准控制方法良好的补充。

关键词：生物检定水蛭宽体金线蛭日本医蛭菲牛蛭棒纹牛蛭抗凝血活性活化部分凝血酶时间

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几种水蛭抗凝血物质提取及活性分析

中山大学学报（自然科学版） 2012年第4期51卷 92-96页

作者：张彬汪波龚元于翔吕军仪广西水产研究所广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室广西南宁530021 北京师范大学珠海分校广东珠海519085 荆州市民康生物科技有限公司湖北荆州434300 辽宁省淡水水产科学研究院辽宁辽阳111000 中山大学生命科学学院广东广州510275

研究3种提取方法对菲牛蛭不同处理品的抗凝作用,采用筛选的最佳提取方法分析了5种水蛭各处理品的抗凝血酶活性,并比较了3个不同地理分布野生菲牛蛭和2个不同饵料饲喂菲牛蛭各处理品的抗凝血酶活性。结果表明:丙酮浸提法在菲牛蛭各处理... 详细信息

研究3种提取方法对菲牛蛭不同处理品的抗凝作用,采用筛选的最佳提取方法分析了5种水蛭各处理品的抗凝血酶活性,并比较了3个不同地理分布野生菲牛蛭和2个不同饵料饲喂菲牛蛭各处理品的抗凝血酶活性。结果表明:丙酮浸提法在菲牛蛭各处理品中均具有最高的提取得率,所测抗凝血酶活性显著高于其他方法(P蛭抗凝血酶活性测定结果显示非吸血蛭类的湿体匀浆液和干体无或微弱的抗凝活性,而吸血蛭类(日本医蛭和菲牛蛭)具有较高抗凝活性,且菲牛蛭的抗凝活性显著高于日本医蛭(P菲牛蛭和不同饵料饲养菲牛蛭的湿体匀浆液、干体粉末和唾液腺分泌物抗凝活性均无显著差异(P>0.05)。研究表明菲牛蛭具有较强的体外抗凝血酶活性,且人工养殖对菲牛蛭的抗凝活性未产生不利影响。

关键词：水蛭菲牛蛭凝血酶抗凝作用提取液

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为民履职不负重托 005

为民履职不负重托

微芯片电泳结合多重PCR法在中药材水蛭品种特异性鉴定中的应用

昆明日报

作者：杜仲莹

1月20日至23日，省十三届人大五次会议在昆明隆重召开。昆明市代表团全体代表牢记职责使命、心怀民生之重，依法履职尽责，聚焦产业经济发展、营商环境改善、滇中城市群一体化发展、基础设施建设、教育文化卫生事业高质量发展等经济社... 详细信息

1月20日至23日，省十三届人大五次会议在昆明隆重召开。昆明市代表团全体代表牢记职责使命、心怀民生之重，依法履职尽责，聚焦产业经济发展、营商环境改善、滇中城市群一体化发展、基础设施建设、教育文化卫生事业高质量发展等经济社会发展和民生热点难点问题积极建言献策，

关键词：区域性音乐厅菲牛蛭昆明市滇中城市群产业链中小学艺术教育一带一路生物资源国际中心城市中小学校发展轴

来源： cnki报纸评论

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cnki报纸

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药物分析杂志 2020年第3期40卷 429-435页

作者：刘杰解盈盈过立农高妍昝珂郑健王俊丽李文静李丽潇黄涛宏中央民族大学北京100081 中国食品药品检定研究院北京102629 山东省食品药品检验研究院济南250101 岛津企业管理(中国)有限公司北京100020

目的:通过特异性引物的聚合酶链式反应(PCR)法结合微芯片电泳检测的方法,特异性鉴别宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭3种水蛭品种。方法:针对宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭3个品种的线粒体同源序列,设计区分正伪品水蛭以及分别鉴定3个品种... 详细信息

目的:通过特异性引物的聚合酶链式反应(PCR)法结合微芯片电泳检测的方法,特异性鉴别宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭3种水蛭品种。方法:针对宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭3个品种的线粒体同源序列,设计区分正伪品水蛭以及分别鉴定3个品种水蛭样品的特异性引物;通过PCR和微芯片电泳检测的方法验证所设计引物的特异性;将验证得到的特异性引物进行整合,建立3个品种的特异性引物用于三重PCR的方法。结果:确定了用于区分宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭3个品种中正伪品的特异性引物KA;确定了宽体金线蛭特异性引物KT,日本医蛭特异性引物RI,菲牛蛭特异性引物FN;建立了3种特异性引物进行三重PCR鉴别3个品种水蛭药材的方法。结论:通过特异性引物结合三重PCR的方法,可以同步鉴定宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭的人为预混样品,鉴定结果准确,且用于三重PCR的特异性引物不存在引物之间相互结合或非特异性扩增的现象。

关键词：宽体金线蛭菲牛蛭日本医蛭聚合酶链式反应(PCR)法微芯片电泳特异性鉴定多重PCR

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不同品种水蛭抗凝抗血栓作用的比较

中国医院药学杂志 2012年第14期32卷 1093-1096页

作者：关世侠袁中文周郁斌张怡叶小玲胡波广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的:比较研究宽体金线蛭和菲牛蛭的体内外的抗凝、抗血栓作用。方法:采用凝血酶直接滴定法测定不同处理方法的2种水蛭体外抗凝血活性;采用胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠脑血栓,角叉菜胶诱导小鼠尾静脉血栓以及大鼠动-静脉旁路血栓形成的方... 详细信息

目的:比较研究宽体金线蛭和菲牛蛭的体内外的抗凝、抗血栓作用。方法:采用凝血酶直接滴定法测定不同处理方法的2种水蛭体外抗凝血活性;采用胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠脑血栓,角叉菜胶诱导小鼠尾静脉血栓以及大鼠动-静脉旁路血栓形成的方法,观察不同处理方法的两种水蛭的抗血栓作用。采用毛细管法和剪尾法,观察不同处理方法的两种水蛭的抗凝血作用。结果:菲牛蛭鲜体和干品的体外抗凝活性远优于鲜体及干燥宽体金线蛭;鲜品菲牛蛭、干燥菲牛蛭以及经不同方法处理的宽体金线蛭均具有明显的体内抗凝抗血栓活性,其中以菲牛蛭鲜品的作用最强烈;煎煮后的菲牛蛭几乎无体内外生物活性。结论:菲牛蛭与宽体金线蛭的活性成分有很大区别,且菲牛蛭比目前广泛应用的宽体金线蛭具有更优的药效活性。

关键词：菲牛蛭宽体金线蛭抗凝抗血栓