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植物病理学报 2018年第3期48卷 305-312页

作者：宋万朵晏立英雷永万丽云淮东欣康彦平任小平姜慧芳廖伯寿中国农业科学院油料作物研究所/油料作物生物学与遗传育种重点实验室武汉430062

2013~2016年从全国12个省市采集不同花生白绢病样本,共分离获得39个分离物,对其ITS-r DNA序列进行了分析,表明它们均属于齐整小核菌(Sclerotium rolfsii);这39个分离物分为两个亚组,分别包含22个和17个菌株;对这39个菌株进行了菌丝亲和... 详细信息

2013~2016年从全国12个省市采集不同花生白绢病样本,共分离获得39个分离物,对其ITS-r DNA序列进行了分析,表明它们均属于齐整小核菌(Sclerotium rolfsii);这39个分离物分为两个亚组,分别包含22个和17个菌株;对这39个菌株进行了菌丝亲和群分析及相关生物学特性比较,共鉴定出23个菌丝亲和群;8个亲和群包含2~6个菌株,其余的15个亲和群都只包含1个菌株;同一菌丝亲和群的菌株菌落形态相似,大多数菌株的菌丝生长速度、菌核大小比较相近,个别菌株差异较大;39个菌株均能产生草酸,在菌落形态、菌丝生长速度、菌核大小和重量上均有差异,生长速度为0.47~2.32cm·d^(-1),菌核直径为0.71~1.87 mm,单粒菌核干重为0.24~2.64 mg。

关键词：花生白绢病齐整小核菌鉴定生物学特性菌丝亲和群

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四川三个地区油菜核盘菌遗传分化情况研究

四川三个地区油菜核盘菌遗传分化情况研究

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作者：游琴四川农业大学

学位级别：硕士

核盘菌引起的油菜菌核病是油菜生产上最重要的病害,四川作为油菜主栽区,温润的气候使得菌核病大面积发生,造成严重损失。本文系统研究了四川省三个地区油菜菌核病病原菌-核盘菌在生物学特性、菌丝亲合群、遗传多样性及致病性方面的差异... 详细信息

核盘菌引起的油菜菌核病是油菜生产上最重要的病害,四川作为油菜主栽区,温润的气候使得菌核病大面积发生,造成严重损失。本文系统研究了四川省三个地区油菜菌核病病原菌-核盘菌在生物学特性、菌丝亲合群、遗传多样性及致病性方面的差异,明确不同发病程度地理区域来源的核盘菌菌株遗传分化的情况,深化人们对核盘菌遗传分化规律的认识,以期为油菜菌核病的综合防治提供重要的理论基础和现实指导意义。试验结果如下：1、从四川绵阳、成都和雅安地区油菜菌核病病株上收集分离纯化获得77个核盘菌菌株,测定各菌株的基本生物学特性,结果显示不同菌株在菌落培养形态、菌丝生长速率、培养基基质颜色、菌核数量、菌核重量和菌核大小等方面都存在显著差异。77个核盘菌菌株的菌落培养形态基本上可分为12种类型;其培养基基质颜色可分为白色、浅灰色、浅棕色和棕青色四种;菌丝生长速率范围为1.04～2.52cm/d,70.13%的菌株生长速率大于2.001cm/d,绵阳地区菌株平均生长速率显著小于雅安和成都地区;菌核数量范围为1～58个,三地区间无显著差异;菌核鲜重范围为0.13～1.37g/皿,雅安地区菌株显著高于成都和绵阳地区。对各生物学特性间的相关性做了分析,结果显示菌丝生长速率与菌核鲜重存在极显著正相关,其他特征之间均无显著相关。2、对77个核盘菌菌株进行菌丝亲和群测定,结果表明77个菌株划分成66个亲合群,其中57个菌株只能与自身亲和,占总株数86.36%,另20个菌株共构成了9个菌丝亲和群,每个亲和群由2-3个菌株构成。菌丝亲和群与菌株的地理来源关系较为明显。3、采用SRAP技术对77个核盘菌菌株进行遗传多样性研究。筛选出的10对SRAP引物共获得127条多态性条带,多态性比例为52.92%。UPGMA聚类分析结果显示,77个菌株相似系数在0.83～0.98间,在相似系数0.877处,77个菌株被划分成7大类,聚类结果与地理来源基本一致,雅安地区的菌株82.61%归在第Ⅱ类,成都和绵阳地区的菌株分别有59.10%和96.88%归在第1类中。聚类分析结果与菌丝亲和群存在一定相关性,与生长速率关系不明显。4、根据生物学特性和遗传多样性研究,从77个核盘菌菌株中筛选出50个菌株进行离体叶片致病力测定,选取供试油菜品种为川油58和中双7号。结果显示,病斑长度在1.60cm～6.10cm之间,核盘菌菌株内存在显著的致病力分化,这种分化与地理来源无显著相关。不同菌株在两品种间致病力呈现一定分化,但不明显,核盘菌菌株致病力与菌丝生长速率和菌核鲜重间存在显著正相关,与遗传聚类无显著相关。

关键词：油菜核盘菌菌丝亲和群致病力分化 SRAP分子标记

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湖北省油菜菌核病病菌多样性研究

湖北省油菜菌核病病菌多样性研究

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作者：杨丹华中农业大学

学位级别：硕士

由核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)de bary]引起的油菜菌核病是世界性顽固病害,严重影响油菜的产量和品质。本文系统研究了湖北省油菜菌核病病原菌——核盘菌在培养特性、菌核产量、致病力等重要生物学特性上的多样性,并选用代... 详细信息

由核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)de bary]引起的油菜菌核病是世界性顽固病害,严重影响油菜的产量和品质。本文系统研究了湖北省油菜菌核病病原菌——核盘菌在培养特性、菌核产量、致病力等重要生物学特性上的多样性,并选用代表性菌株分别分析了它们在菌丝亲和性和致病性方面的差异,比较了弱致病型菌株和强致病型菌株在致病力相关因子方面的差异,现将结果报道如下：从湖北省10个油菜产区(武穴、荆州、当阳、黄州、黄冈、仙桃、孝感、天门、荆门和潜江)的发病植株上共分离得到了1000个核盘菌菌株。在PDA培养基上对1000个菌株的培养特性进行了观察,结果表明：核盘菌的培养特性存在丰富的多样性,并根据菌株的菌落颜色、菌丝体丰度以及菌核形状、大小和数量的差异将1000个菌株的培养特性归为了八种类型,菌核的分布则主要存在三种类型。研究了1000个菌株的生长速率、致病力及菌核产量,结果表明：核盘菌在菌丝生长速度、致病力和菌核产量等方面存在丰富的多样性。菌丝生长速度、致病力和菌核产量的回归分析结果表明：菌丝生长速度与致病力之间有显著回归关系(P菌丝生长速度与菌核产量之间有显著回归关系(P0.05)。从10个地区中随机选取了60个代表菌株在MP培养基上进行了菌丝亲和性测定,结果表明：60个菌株被划分为27个亲和群,其中,有12个菌株只与自身亲和,归为12个亲和群,其它的48个菌株可划分为15个菌丝体亲和群，分别由2-9个菌株组成。菌丝亲和群与菌株的地理来源、菌株的生长速率及致病性的关系不显著(P>0.05)。研究了强致病性菌株JZJL-13和弱致病性菌株JZJL-46及TMHS-27在产生草酸、果胶酶、漆酶、蛋白酶和淀粉酶等方面的差异。结果表明：三个菌株均能正常分泌草酸和果胶酶,但强致病性菌株JZJL-13分泌草酸和果胶酶的能力明显强于弱致病性菌株JZJL-46和TMHS-27;菌株JZJL-13和TMHS-27均有分泌漆酶的能力,且强致病性菌株JZJL-13分泌漆酶的量显著高于弱致病性菌株TMHS-27(P菌丝亲和性等重要生物学特性上具有丰富的多样性,而且核盘菌的致病力与草酸、果胶酶、漆酶、蛋白酶和淀粉酶等致病因子相关。

关键词：核盘菌生物学特性致病性草酸果胶酶漆酶蛋白酶淀粉酶菌丝亲和群

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河南省花生白绢病菌群体多样性及对噻呋酰胺的抗性风险评估

河南省花生白绢病菌群体多样性及对噻呋酰胺的抗性风险评估

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作者：李敏河南农业大学

学位级别：硕士

花生白绢病是由齐整小核菌引起的一种世界性土传真菌病害。近年来,由于花生种植面积不断扩大,连作重茬和秸秆还田等耕作方式日益普遍,加上水肥条件改善和有机肥施用量减少,导致花生白绢病在我国各花生主产区普遍发生。目前花生白绢病已... 详细信息

花生白绢病是由齐整小核菌引起的一种世界性土传真菌病害。近年来,由于花生种植面积不断扩大,连作重茬和秸秆还田等耕作方式日益普遍,加上水肥条件改善和有机肥施用量减少,导致花生白绢病在我国各花生主产区普遍发生。目前花生白绢病已成为河南省花生生产的重要威胁。本研究从河南省南阳、驻马店、商丘、郑州、新乡地区随机选取23块花生田,采用五点取样法调查了白绢病的田间发病率,分离纯化了病株上的病原菌;在室内离体条件下分析了 5个地区123株花生白绢病菌的菌丝亲和群(MCG)和形态学特征,对其中37株代表性菌株进行了致病性测定;采用菌丝生长速率法测试了 8种杀菌剂对37株白绢病菌的抑制活性;通过菌丝生长速率法建立了花生白绢病菌对噻呋酰胺的敏感性基线,药剂驯化获得了噻呋酰胺抗性菌株,评估了花生白绢病菌对其抗药性风险。主要研究结果如下:1.采用五点取样法调查了河南省南阳、驻马店、商丘、郑州、新乡地区花生白绢病的田间发病率。结果表明,在所调查的23个花生田块(13个春播花生田和10个夏播花生田)中白绢病均有发生,不同花生田块白绢病的发病率存在明显差异,田块5(南阳)的发病率(50.40%)最高,而田块16(商丘)的发病率(3.60%)最低。此外,还发现春播花生田白绢病的发病率(8.80%～50.40%)均高于夏播花生田(3.60%～8.40%)。2.从上述5个地区采集分离到123株花生白绢病菌株,并对其进行了菌丝亲和群(MCG)测定。结果表明,123株花生白绢病菌株被划分为6个MCGs,MCG1菌株数量最多、分布最广泛,包括71株菌株,来自5个地区;MCG2仅次于MCG1,共有32株菌株,分别来自南阳、新乡和驻马店3个地区;其余的MCGs菌株数量较少(2～10株)。除商丘外,其他地区的菌株分别被划分到不同的MCG中。123株花生白绢病菌株的香农-维纳多样性指数(H)为1.13,不同地区的H存在差异,说明河南省5个地区花生白绢病菌MCG的多样性水平不一致。3.基于MCG分类,比较分析了不同MCG菌株之间的菌落特征、菌丝生长速率、菌核数量、菌核干重和菌核直径的差异。结果发现,6个MCGs菌株之间在菌落形态、菌核在PDA平板上的分布及菌核的数量、干重、直径上均存在显著性差异,而在菌丝生长速率方面无明显差异。选取37株代表性菌株,比较了不同MCG菌株之间的致病力差异。结果显示,不同MCG菌株之间的致病力无显著差异。不同MCG菌株之间的菌丝生长速率、菌核数量、菌核干重、菌核直径和致病力的相关性分析结果表明,不同MCG菌株之间,仅菌核数量与菌核干重(r=-0.848,P菌丝生长速率法测定了噻呋酰胺、戊唑醇、萎锈灵、氟唑菌酰胺、联苯菌酰胺、啶酰菌胺、咯菌腈和四氟醚唑8种杀菌剂对37株代表性菌株的离体活性。结果表明,8种杀菌剂对花生白绢病菌都有很强的抑制活性,但不同杀菌剂对靶标菌菌丝生长的平均EC50值差异明显。其中,萎锈灵、噻呋酰胺和氟唑菌酰胺的抑制活性最好,平均EC50值分别为0.2034、0.3493和0.4264 mg/L;其次是戊唑醇、咯菌腈和联苯菌酰胺,平均EC50值分别为1.0724、1.6099和1.8161 mg/L;四氟醚唑和啶酰菌胺的抑制活性相对较低,平均EC50值分别为2.9232和3.7164 mg/L。此外,8种杀菌剂对花生白绢病菌的变异倍数均小于4,表明该病菌对8种杀菌剂未产生抗药性。比较不同MCG花生白绢病菌对同一杀菌剂的敏感性发现,除啶酰菌胺外,7种杀菌剂对不同MCG菌株的平均EC50值均无显著差异。5.采用菌丝生长速率法测定了河南省5个地区123株花生白绢病菌株对噻呋酰胺的敏感性,结果表明,所有供试菌株对噻呋酰胺均有较高的敏感性,EC50值分布范围在0.1686～0.8276 mg/L之间,平均值为0.3897±0.1204 mg/L,所测菌株对噻呋酰胺的敏感性频率分布呈连续性的单峰曲线,接近正态分布,无敏感性下降的亚群体存在。因此,可将该群体的平均EC50值作为河南地区花生白绢病菌对噻呋酰胺田间抗性监测的敏感基线。以随机选取的5株花生白绢病菌为野生亲本菌株,在含噻呋酰胺的PDA平板上进行药剂驯化诱导后,共获得2株能稳定遗传的抗性菌株(ZZ-3-1和ZZ-3-2),抗性突变频率为0.2%,2株抗性菌株抗药性倍数分别为40.25和79.78倍。生物适合度分析结果显示,抗性菌株ZZ-3-1在菌丝生长速率、菌核干重和菌核直径上与亲本敏感菌株无显著性差异,而在产生菌核数量和致病力方面显著低于亲本菌株;抗性菌株ZZ-3-2的菌丝生长速率显著低于亲本菌株,而在菌核数量、菌核干重、菌核直径和致病力方面与亲本菌株无显著差异。交互抗性测定结果表明,噻呋酰胺与戊唑醇、四氟醚唑、萎锈灵和咯菌

关键词：花生白绢病齐整小核菌菌丝亲和群形态学特征致病力杀菌剂抗药性风险评估

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