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药西瓜UDP-糖基转移酶基因的克隆与表达分析

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中国农业大学学报 2019年第11期24卷 70-77页

作者：陈蒙杨铭慧刘月 LEE Sanghyeob 刘海峰延边大学农学院吉林延吉133002 世宗大学自然科学学院韩国首尔999007

为明确药西瓜UDP-糖基转移酶催化葫芦素形成葫芦素配糖体的表达规律,以药西瓜品种"WM9"叶片为供试材料,采用RT-PCR技术克隆药西瓜UDP-糖基转移酶基因,并对编码蛋白进行分析。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR),以ACTIN为内参基因,分析获得的... 详细信息

为明确药西瓜UDP-糖基转移酶催化葫芦素形成葫芦素配糖体的表达规律,以药西瓜品种"WM9"叶片为供试材料,采用RT-PCR技术克隆药西瓜UDP-糖基转移酶基因,并对编码蛋白进行分析。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR),以ACTIN为内参基因,分析获得的2个药西瓜UDP-糖基转移酶基因在不同组织器官中的表达规律。结果表明:克隆得到2个UDP-糖基转移酶基因,分别为1 546 bp和1 559 bp的cDNA全长序列,命名为UDP-E1和UDP-E2。对扩增获得的序列进行生物学信息分析,确定UDP-E1基因的完整开放阅读框(ORF)为1 314 bp,可编码氨基酸437个,理论分子量为49.02 ku,等电点为5.99,属稳定蛋白,Genbank登录号MK576125。UDP-E2基因的ORF为846 bp,可编码氨基酸281个,理论分子量为32.78 ku,等电点为5.23,属不稳定蛋白,Genbank登录号MK576126。这2个基因属于糖基转移酶超家族。UDP-E1和UDP-E2均与香瓜、黄瓜的UDP-糖基转移酶基因序列相似性最高。在各组织器官中,UDP-糖基转移酶均有表达,且在茎中表达水平最低,叶中表达水平最高。

关键词：药西瓜葫芦素糖基转移酶基因克隆实时荧光定量

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药西瓜化学成分的研究

中成药 2023年第10期45卷 3306-3312页

作者：王爱琴冯雷黄伟俊林琰浙江中医药大学附属杭州市中医院浙江杭州310007 浙江省立同德医院浙江杭州310012 衢州兴合资产经营有限责任公司浙江衢州324000

目的研究药西瓜Citrullus colocynthis(L.)Schrad.的化学成分。方法药西瓜95%乙醇提取物采用硅胶、ODS-C 18柱、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为endecaphyl... 详细信息

目的研究药西瓜Citrullus colocynthis(L.)Schrad.的化学成分。方法药西瓜95%乙醇提取物采用硅胶、ODS-C 18柱、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为endecaphyllacin A(1)、endecaphyllacin B(2)、khekadaengeninⅣ(3)、khekadaengeninⅤ(4)、neocucurbitacin C(5)、neocucurbitacin D(6)、23,24-dihydroisocucurbitacin B(7)、dihydro-epi-isocucurbitacin D(8)、(9β,10α)-25-(acetyloxy)-2,20-dihydroxy-9-methyl-19-norlanosta-1,5-diene-3,11,16,22-tetrone(9)、dihydrocucurbitain Q(10)、cucurbitacin E(11)、dihydrocucurbitacin E(12)。结论化合物9为新天然产物,化合物1~10为首次从西瓜属植物中分离得到。

关键词：药西瓜化学成分分离鉴定

药西瓜中三萜类成分的的LC-MS/MS分析研究

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药物分析杂志 2014年第7期34卷 1192-1196页

作者：毛艳贺金华顾政一张瑞萍蔡晓翠严欢康雨彤戎晓娟新疆维吾尔自治区药物研究所乌鲁木齐830004 天然药物活性物质与功能国家重点实验室中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050

目的：运用LC-MS/MS技术研究药西瓜中葫芦素类化学成分。方法：利用LC-MS/MS法进行分析测定。色谱条件：采用ODS-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为0.4%乙酸水溶液（A）-乙腈（B）,梯度洗脱（0～10 min,5%B;10～20 min,5%B→15... 详细信息

目的：运用LC-MS/MS技术研究药西瓜中葫芦素类化学成分。方法：利用LC-MS/MS法进行分析测定。色谱条件：采用ODS-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为0.4%乙酸水溶液（A）-乙腈（B）,梯度洗脱（0～10 min,5%B;10～20 min,5%B→15%B;20～70 min,15%B→75%B;70～75 min,75%B→5%B）,流速1.0 mL·min^-1。质谱条件：ESI离子源;正负离子扫描模式;温度450℃,质量扫描范围：m/z 100～1000。结果：以葫芦素类化合物的质谱裂解规律为指导,参照药西瓜中已报道成分的质谱数据,分析推断了药西瓜中可能含有葫芦素L-2-O-β-D-葡萄糖苷、药西瓜苷B、葫芦素E-2-O-β-D-葡萄糖苷、双氢异葫芦素B-25-乙酯和葫芦素E等8个化学成分。结论：本实验建立的分析方法能够较全面地反映出药西瓜中葫芦素类的化学成分,为进一步开发利用该药材提供实验依据。

关键词：维吾尔药材化学成分分析药西瓜葫芦素类葫芦素E-2-O-β-D-葡萄糖苷液相色谱-质谱/质谱联用裂解途径分析

维吾尔族药药西瓜的化学成分与药理作用研究进展

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中国中药杂志 2020年第4期45卷 816-824页

作者：郑敏思刘玉霜袁涛刘立亚李志勇黄秀兰中央民族大学药学院北京100081 中国科学院新疆理化技术研究所新疆乌鲁木齐830011

药西瓜Citrullus colocynthis广泛分布在世界沙漠地区。传统医学认为,药西瓜具有治疗便秘、肝病、黄疸、伤寒、糖尿病、哮喘等作用。药西瓜作为一种域外药材,在我国被使用并引种成功。药西瓜主要活性成分为葫芦素类、黄酮类、生物碱类... 详细信息

药西瓜Citrullus colocynthis广泛分布在世界沙漠地区。传统医学认为,药西瓜具有治疗便秘、肝病、黄疸、伤寒、糖尿病、哮喘等作用。药西瓜作为一种域外药材,在我国被使用并引种成功。药西瓜主要活性成分为葫芦素类、黄酮类、生物碱类、酚酸类化合物,在现代药理学研究中被证实具有抗氧化、抗糖尿病、抗病原微生物、抗癌等活性。该文对药西瓜的传统应用、化学成分和药理作用进行综述,为药西瓜不同成分生物活性、作用机制的深入研究提供参考。

关键词：药西瓜葫芦素抗糖尿病抗癌

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维药药西瓜化学成分的分离与鉴定

中草药 2012年第3期43卷 432-435页

作者：苗静张洁邓世明代斌石河子大学化学化工学院新疆兵团化工绿色过程重点实验室新疆石河子832003 海南大学热带生物资源教育部重点实验室海南海口570228

目的研究药西瓜Citrullus colocynthis的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱手段结合重结晶技术进行分离纯化,通过NMR波谱数据和理化性质确定化合物的结构。结果从药西瓜中分离得到11个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、α-... 详细信息

目的研究药西瓜Citrullus colocynthis的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱手段结合重结晶技术进行分离纯化,通过NMR波谱数据和理化性质确定化合物的结构。结果从药西瓜中分离得到11个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、α-菠甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、α-菠甾酮(3)、双-[(2-乙基)己基]邻苯二甲酸酯(4)、对羟基苯甲酸(5)、6-C-对甲基苄基牡荆素(6)、双氢葫芦素E(7)、葫芦素E(8)、异表双氢葫芦素D(9)、双氢异葫芦素B-25-乙酯(10)、葫芦素E-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)。结论化合物6为新化合物,命名为6-C-对甲基苄基牡荆素;化合物1～5、7、9、10均为首次从该属植物中分离得到。

关键词：西瓜属药西瓜甾体葫芦素 6-C-对甲基苯基牡荆素

药西瓜(Citrullus colocynthis)UDP-糖基转移酶基因表达分析

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北方园艺 2019年第23期 135-140页

作者：杨铭慧陈蒙刘海峰延边大学农学院

以药西瓜为试材,采用连接转化、双酶切等方法,在前期克隆得到的2个药西瓜UDP-糖基转移酶基因UDP-E1、UDP-E2的基础上,将目的基因UDP-E1、UDP-E2与pET28a连接,构建重组质粒pET28a-UDP-E1和pET28a-UDP-E2,将重组质粒转化至*** BL21中,经... 详细信息

以药西瓜为试材,采用连接转化、双酶切等方法,在前期克隆得到的2个药西瓜UDP-糖基转移酶基因UDP-E1、UDP-E2的基础上,将目的基因UDP-E1、UDP-E2与pET28a连接,构建重组质粒pET28a-UDP-E1和pET28a-UDP-E2,将重组质粒转化至*** BL21中,经过不同浓度的IPTG诱导,期望出现目的蛋白条带,且上清中的目的蛋白条带较沉淀与对照组明显。结果表明:成功构建原核表达重组质粒,IPTG浓度为1.0 mmol·L-1时,UDP-E1的融合蛋白分子量约为49 kDa,IPTG浓度为0.8 mmol·L-1时,UDP-E2的融合蛋白分子量约为32 kDa,目的蛋白在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。

关键词：药西瓜 UDP-糖基转移酶原核表达

维吾尔药药西瓜进口与引种品种的性状及生药对比研究

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中药材 2011年第3期34卷 349-352页

作者：满尔哈巴.海如拉何江杨伟俊地力努尔陈燕新疆维吾尔自治区药物研究所新疆乌鲁木齐830004 新疆维吾尔药重点实验室新疆乌鲁木齐830004

目的:为了安全、准确的使用药西瓜Citrullus colocynthis (L.) Schrad.,对进口药西瓜与引种药西瓜进行生药学对比研究。方法:对其药用部位果实进行性状、显微及薄层色谱鉴别。结果:进口药西瓜与引种药西瓜的药材性状、主要显微特征及理... 详细信息

目的:为了安全、准确的使用药西瓜Citrullus colocynthis (L.) Schrad.,对进口药西瓜与引种药西瓜进行生药学对比研究。方法:对其药用部位果实进行性状、显微及薄层色谱鉴别。结果:进口药西瓜与引种药西瓜的药材性状、主要显微特征及理化特征大致相同,其差异表现在:引种药西瓜果实个体较大,薄壁细胞淀粉粒较多,导管较粗,石细胞较长;进口药西瓜薄层色谱红色斑点颜色较深。结论:本次引种栽培药西瓜与进口药西瓜生药学差异不大,如规模化种植,将有望替代进口药西瓜。

关键词：药西瓜引种栽培性状生药学

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药西瓜化学成分

中国实验方剂学杂志 2014年第24期20卷 102-105页

作者：利程苏亚伦刘华吉滕飞江西中医药大学药学院南昌330004 天然药物活性物质与功能国家重点实验室、中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所北京100050

目的：研究药西瓜Citrullus colocynthis中的化学成分。方法：利用各种色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和NMR,MS等波谱技术鉴定化合物的结构。结果：从药西瓜乙醇提取物中分离鉴定了9个化合物,包括2个生物碱类化合物,3个三萜类化合... 详细信息

目的：研究药西瓜Citrullus colocynthis中的化学成分。方法：利用各种色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和NMR,MS等波谱技术鉴定化合物的结构。结果：从药西瓜乙醇提取物中分离鉴定了9个化合物,包括2个生物碱类化合物,3个三萜类化合物,4个三萜皂苷类化合物。分别为烟酰胺（1）,尿嘧啶（2）,异葫芦素B（3）,葫芦素E（4）,双氢葫芦素E（5）,葫芦素E-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）,khekadaengoside E（7）,葫芦素K-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）,deoxocucurbitoside B（9）。结论：化合物1~3均为首次从药西瓜中分离得到。

关键词：药西瓜化学成分三萜三萜皂苷

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药西瓜在新疆昌吉地区引种表现及栽培技术

种子 2010年第11期29卷 68-70页

作者：何江杨伟俊满尔哈巴.海如拉张涛新疆维吾尔自治区药物研究所乌鲁木齐830004 新疆维吾尔药重点实验室乌鲁木齐830004

药西瓜自2005年在昌吉州地区引种栽培以来,于2009年在昌吉州玛纳斯县引种成功,并由多年生性状驯化为一年生,其药材性状符合《中华人民共和国卫生部药品标准—维吾尔药分册》中药西瓜标准(WS3-BW-0068-98)。同时,该品种产量较高,一般水... 详细信息

药西瓜自2005年在昌吉州地区引种栽培以来,于2009年在昌吉州玛纳斯县引种成功,并由多年生性状驯化为一年生,其药材性状符合《中华人民共和国卫生部药品标准—维吾尔药分册》中药西瓜标准(WS3-BW-0068-98)。同时,该品种产量较高,一般水肥条件可产干药材86 kg/667 m2,同时,本品种还具有病虫害少,管理粗放的特点。

关键词：药西瓜引种栽培