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云南不同蚕区僵蚕致病菌株的分离鉴定及致病力差异研究

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西南农业学报 2024年

作者：江秀均李玲利柴建萍倪婧白兴荣云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

【目的】了解云南省不同蚕区家蚕僵蚕病原的多样性及不同来源白僵菌菌株对家蚕的致病力差异。【方法】从云南省9个县(市)收集僵蚕样品，分离纯化获得病原菌，通过观察菌株的形态特征、产孢结构，并结合菌株核糖体rDNA-ITS序列的系统发... 详细信息

【目的】了解云南省不同蚕区家蚕僵蚕病原的多样性及不同来源白僵菌菌株对家蚕的致病力差异。【方法】从云南省9个县(市)收集僵蚕样品，分离纯化获得病原菌，通过观察菌株的形态特征、产孢结构，并结合菌株核糖体rDNA-ITS序列的系统发育分析，确认病原种类。此外，还测定分析了不同地理来源以及不同孢子浓度的球孢白僵菌菌株对家蚕致病力的差异影响。【结果】经形态学和ITS序列分析，云南蚕区僵病病原菌属于白僵菌属(Beauveria)、虫草菌属(Cordyceps)和绿僵菌属(Metarhizium)，其中以球孢白僵菌(Beauveria bassiana)和莱氏绿僵菌(Metarhizium rileyi)为主要病原，分别占57.58%和30.30%。不同地理来源的球孢白僵菌株对家蚕幼虫的致病力存在一定的差异。供试菌株侵染后，家蚕的僵蚕率达72.5%～95%，半致死时间(LT50)为5.093 ～ 7.133 d，其中LL1-1菌株的僵蚕率最高(为95%)，半致死时间最短(为5.093 d)，致病力最强；CB1-2菌株的僵蚕率较低(为75%)，半致死时间最长(为7.133 d)，致病力最弱。随着接种浓度的增加，病原的致病力变强，家蚕的僵蚕率也升高。【结论】云南省蚕区家蚕僵病病原种类呈多样性，球孢白僵菌和莱氏绿僵菌为主要病原菌，不同来源的白僵菌株对家蚕的致病力存在差异，本研究结果可为家蚕僵病的防治和僵蚕的生产提供参考依据。

关键词：家蚕僵病分离鉴定 rDNA-ITS序列分析致病力

对铜绿丽金龟具有高致病力的昆虫病原线虫的筛选

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植物保护 2024年第1期50卷 334-338,355页

作者：白勇章王文杰王志敏李朔涵李克斌曹雅忠王森山宋丽雯尹姣甘肃农业大学植物保护学院兰州730070 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害综合治理全国重点实验室北京100193

为筛选对铜绿丽金龟Anomala corpulenta幼虫具有生防潜力的昆虫病原线虫品系,测定了9个昆虫病原线虫品系对铜绿丽金龟1龄幼虫的致病力,以及不同施用剂量、环境温度及土壤相对湿度条件对线虫致病力的影响。生测结果表明,樱桃异小杆线虫品... 详细信息

为筛选对铜绿丽金龟Anomala corpulenta幼虫具有生防潜力的昆虫病原线虫品系,测定了9个昆虫病原线虫品系对铜绿丽金龟1龄幼虫的致病力,以及不同施用剂量、环境温度及土壤相对湿度条件对线虫致病力的影响。生测结果表明,樱桃异小杆线虫品系Heterorhabditis beicherriana D26-6对铜绿丽金龟幼虫致病力最高,处理11 d后的校正死亡率达到了98.3%;对线虫D26-6致病力的单因子测定发现,侵染铜绿丽金龟幼虫的最佳剂量为150 IJs/头、最佳温度范围为20~30℃、最佳土壤湿度为18%,有较好的开发应用潜力。

关键词：铜绿丽金龟昆虫病原线虫 Heterorhabditis beicherriana 致病力

莱氏绿僵菌Mr006鉴定及对草地贪夜蛾致病力

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中国生物防治学报 2024年第1期40卷 44-51页

作者：胡飞徐婷婷彭辉胡本进苏贤岩毕思佳吴振晨朱克旭徐丽娜王振营安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所合肥230031 中国农业科学院植物保护研究所北京100193 安徽农业大学合肥230036 滁州市食品药品检验中心滁州239000

收集草地贪夜蛾致病性莱氏绿僵菌,丰富昆虫病原真菌资源,为草地贪夜蛾绿色防控生防制剂开发提供依据。采用形态学和ITS-r DNA序列分析相结合的方法对菌株Mr006进行了鉴定,以浸渍法生物测定了该菌株对草地贪夜蛾幼虫和蛹的致病力,并进行... 详细信息

收集草地贪夜蛾致病性莱氏绿僵菌,丰富昆虫病原真菌资源,为草地贪夜蛾绿色防控生防制剂开发提供依据。采用形态学和ITS-r DNA序列分析相结合的方法对菌株Mr006进行了鉴定,以浸渍法生物测定了该菌株对草地贪夜蛾幼虫和蛹的致病力,并进行了田间应用效果评价。结果表明,分离的Mr006菌株鉴定为莱氏绿僵菌;该菌株对草地贪夜蛾幼虫、蛹均有致病力,用孢子浓度为1×10^(7)孢子/mL接种后,1~5龄幼虫的校正死亡率分别为91.16%、88.38%、70.71%、53.03%和22.73%,蛹的校正死亡率为76.26%;对草地贪夜蛾1~5龄幼虫和蛹的LC50分别为3.55×10^(4)、8.23×10^(4)、3.63×106、4.16×10^(7)、4.23×10^(8)和2.57×10^(5)孢子/mL;用孢子浓度为1×10^(8)孢子/mL接种后,1~5龄幼虫和蛹的LT50值分别缩短至3.47、3.94、4.90、6.73、9.01 d和4.02 d。田间喷施莱氏绿僵菌Mr006分生孢子悬浮液后20 d,对草地贪夜蛾田间防治效果可达64%以上,持效性较好。莱氏绿僵菌Mr006对草地贪夜蛾致病力强,具有较好的生防潜力。

关键词：莱氏绿僵菌鉴定草地贪夜蛾致病力防治效果

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采用3种方法比较分析稻瘟病菌的致病力

植物病理学报 2024年第2期54卷 364-376页

作者：王东元王继春孙文献朱峰吴宪祁山颜欧玉苹吉林农业大学植物保护学院长春130118 吉林省农业科学院植物保护研究所/吉林省农业微生物重点实验室/农业农村部东北作物有害生物综合治理重点实验室公主岭136100

明确稻瘟病菌的致病力是筛选抗瘟资源、培育抗瘟品种和指导品种布局的前提和基础。本研究用东北粳稻区吉林省的166份水稻稻瘟病菌单孢分离物分别与7个中国稻瘟病菌生理小种鉴别寄主品种(Chinese differential varieties,CDVs)和源于粳... 详细信息

明确稻瘟病菌的致病力是筛选抗瘟资源、培育抗瘟品种和指导品种布局的前提和基础。本研究用东北粳稻区吉林省的166份水稻稻瘟病菌单孢分离物分别与7个中国稻瘟病菌生理小种鉴别寄主品种(Chinese differential varieties,CDVs)和源于粳稻丽江新团黑谷(LTH)的23个抗稻瘟病单基因品种(monogenetic differential varieties,MDVs)在温室内人工接种,分析稻瘟病菌的致病力情况。稻瘟病菌的致病力按与CDVs互作表型可划分为7个群、44个生理小种,其中ZA为优势菌群,出现频率为45.18%,ZA17(19.28%)、ZG1(9.64%)等为优势生理小种;与MDVs互作亲和表型按U-i-k-z-ta模式命名生理小种,优势生理小种不突出,但子群致病型较明显,出现比例较高的子群分别为U73(47.0%)、i5(31.9%)、i7(31.9%)等;利用与单基因品种互作明确的稻瘟病菌无毒基因频率展现病原菌的致病力,频率较高的分别为Avr-Pi12(74.69%)、Avr-Pi9(72.28%)、Avr-Pi19(68.67%)、Avr-Pi20(68.07%)等,表明Pi12(t)、Pi9(t)、Pi19(t)、Pi20(t)等为吉林省抗稻瘟病广谱基因型。采用优势无毒基因频率显示稻瘟菌致病性,能够明确反映出广谱抗瘟基因型,可作为抗稻瘟病育种目标。

关键词：稻瘟病菌致病力生理小种无毒基因

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落叶型棉花黄萎病菌落形态特征及致病力鉴定

新疆农业科学 2024年

作者：赖成霞杨延龙汪鹏龙朱梦宇杨栋李春平葛风伟玛依拉·玉素音阳妮马君新疆农业科学院经济作物研究所新疆农业大学科学技术学院新疆维吾尔自治区植物保护站新疆师范大学生命科学学院

【目的】分析新疆北疆棉花黄萎病的致病力及其分化现状，收集昌吉市、沙湾市为主的棉花黄萎病的形态特征及致病力进行鉴定。【方法】利用棉花落叶型黄萎病的特异性引物DB19f/DB22r和非落叶型引物INTND2f/INTND2r对所有菌株的致病力进行... 详细信息

【目的】分析新疆北疆棉花黄萎病的致病力及其分化现状，收集昌吉市、沙湾市为主的棉花黄萎病的形态特征及致病力进行鉴定。【方法】利用棉花落叶型黄萎病的特异性引物DB19f/DB22r和非落叶型引物INTND2f/INTND2r对所有菌株的致病力进行分子鉴定，并进行全基因组重测序，以SNP 位点作为标记进行遗传多样性分析，并利用显微镜观察菌落、菌丝和孢子形态，以强致病力菌种V991作对照，观察菌落形态和致病力鉴定，采用叶绿素荧光成像技术比较观测具有强致病力的Vd-3和V991的病情变化图像和荧光参数变化趋势。【结果】调查的14个菌株均为落叶型。其菌落为圆形，菌丝的轮枝数为2，孢子形态为长卵圆形。与V991相比，Vd-3的病情指数最高，属强致病力的菌株，其对棉花具有明显不同的侵染方式和速度，Vd-3的侵染从叶缘到叶片中央，而V991的侵染是从叶肉部分的零星发病扩展到叶缘，再发展到中央部分，并且Vd-3侵染叶片各荧光成像和参数天变化趋势更为显著，其中非调节性能量耗散的量子产量Y(NO)和非光化学淬灭NPQ4在第6 d就到了变化拐点，最大光化学量子产量Fv/Fm和实际光量子产量Y（Ⅱ）则变化缓慢，13d 时Fv/Fm表现明显差异。【结论】昌吉市、沙湾市的大丽轮枝菌均为落叶型，圆形菌落，菌丝轮枝数是2，长卵圆形孢子，Vd-3不仅为遗传距离最远且变异性大的菌株，而且为最强致病力的黄萎病病株，与V991相比，对棉花具有不同的侵染方式，荧光参数Y(NO)和NPQ变化更为敏锐。

关键词：致病力叶绿荧光成像棉花黄萎病全基因组重测序

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胰岛素对昆虫病原线虫致病力及生殖力的影响

中国生物防治学报 2024年

作者：钱秀娟孙丹臧建成 Edwin E.Lewis 甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室西藏农牧学院植物科学学院美国爱达荷大学农业与生命科学学院昆虫学植物病理学及线虫学系

昆虫病原线虫是一种极具潜力的生防因子，因其高效的杀虫特性而受到国际生防界的广泛关注，胰岛素作为一种蛋白质多肽，已被证实对昆虫、线虫等的生长发育、寿命都有重要调控作用。为了明确胰岛素对昆虫病原线虫的影响，本试验通过对经... 详细信息

昆虫病原线虫是一种极具潜力的生防因子，因其高效的杀虫特性而受到国际生防界的广泛关注，胰岛素作为一种蛋白质多肽，已被证实对昆虫、线虫等的生长发育、寿命都有重要调控作用。为了明确胰岛素对昆虫病原线虫的影响，本试验通过对经卡森斯氏线虫Steinernema kraussei 0657L和短尾异小杆线虫Heterorhabditis brevicaudis 0641TY侵染的大蜡螟Galleria mellonella注射不同浓度胰岛素，观测昆虫病原线虫的生活史及其对大蜡螟的致病力，明确胰岛素对昆虫病原线虫致病力、生殖力的影响。结果表明：胰岛素干预时间和干预浓度均可对卡森斯氏线虫0657L在寄主昆虫体内的生长发育产生影响，侵染当天（t）干预和高浓度（1:500）干预，会明显缩短其发育历期；侵染当天无论是高浓度还是低浓度的胰岛素干预，均会明显缩短短尾异小杆线虫0641TY的发育历期，且相比较卡森斯氏线虫0657L，胰岛素促进短尾异小杆线虫0641TY发育历期的效果更明显。在卡森斯氏线虫0657L侵染大蜡螟10 d后，注射低浓度的胰岛素，可显著提高其生殖力；在短尾异小杆线虫0641TY侵染大蜡螟1 d后，注射低浓度的胰岛素，可显著提高其生殖力。胰岛素对卡森斯氏线虫0657L致病力有影响，在24 h内高浓度胰岛素可显著缩短寄主昆虫的死亡时间，但是侵染36 h后，各处理间差异不显著；而对短尾异小杆线虫0641TY致病力无影响。综上所述，胰岛素对卡森斯氏线虫0657L和短尾异小杆线虫0641TY的发育和生殖力均有影响，且对卡森斯氏线虫致病力有影响。

关键词：胰岛素昆虫病原线虫个体发育生殖力致病力

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高温胁迫对禾谷镰孢生长和致病力的影响

植物保护 2024年第1期50卷 129-136页

作者：徐庆王奥霖聂晓刘伟张昊曹世勤范洁茹周益林甘肃农业大学植物保护学院兰州730070 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害综合治理全国重点实验室农产品质量安全生物性危害因子(植物源)控制重点实验室北京100193 甘肃省农业科学院小麦研究所兰州730070

为探究高温胁迫对禾谷镰孢生长和致病力的影响,本研究测定了禾谷镰孢5株耐高温菌株和4株温度敏感型菌株在25℃和30℃下的菌丝生长速率、产孢量、孢子萌发率以及不同胁迫压力下的生长速率、致病力和DON毒素含量等。结果表明,不论耐高温... 详细信息

为探究高温胁迫对禾谷镰孢生长和致病力的影响,本研究测定了禾谷镰孢5株耐高温菌株和4株温度敏感型菌株在25℃和30℃下的菌丝生长速率、产孢量、孢子萌发率以及不同胁迫压力下的生长速率、致病力和DON毒素含量等。结果表明,不论耐高温菌株还是温度敏感型菌株,30℃高温对其菌丝生长均有抑制作用,但对产孢量和孢子萌发有促进作用;30℃高温能减轻NaCl和CaCl2胁迫对禾谷镰孢生长的抑制,但是不影响KCl、刚果红,SDS和H2O2对病原菌的抑制作用;在30℃下,大部分耐高温菌株的致病力不变或降低,而大部分温度敏感型菌株的致病力反而增加,30℃对大部分菌株的DON毒素产量有一定促进作用。研究结果可为研究气候变化下小麦赤霉病的流行和预测提供理论基础。

关键词：禾谷镰孢高温胁迫渗透胁迫致病力 DON

冻土毛霉菌株BO-1对韭菜迟眼蕈蚊的致病力及防治应用评价

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中国生物防治学报 2024年第1期40卷 52-60页

作者：祝国栋丁文娟邱季雨王燕薛明赵海朋张国福聊城大学农学与农业工程学院聊城252000 山东农业大学植物保护学院泰安271018 山东省农药检定所济南250100

冻土毛霉菌株BO-1是新报道的韭菜迟眼蕈蚊病原真菌,但是关于其致病力和田间防效的针对性研究尚未见报道。本研究分析了冻土毛霉菌株BO-1对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的致病力,探究了温度对菌株致病力的影响,并通过防效试验评价了其应用价值。结... 详细信息

冻土毛霉菌株BO-1是新报道的韭菜迟眼蕈蚊病原真菌,但是关于其致病力和田间防效的针对性研究尚未见报道。本研究分析了冻土毛霉菌株BO-1对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的致病力,探究了温度对菌株致病力的影响,并通过防效试验评价了其应用价值。结果表明,冻土毛霉菌株BO-1对韭菜迟眼蕈蚊幼虫致病活性较高,处理3 d对2龄和4龄幼虫的致死中浓度LC50分别为3.714×10^(5)和4.680×10^(6)孢子/mL;冻土毛霉菌株BO-1发挥高致病活性的适宜温度为16~28℃,尤以20~24℃最优。盆栽和田间试验证实,菌株BO-1对韭菜迟眼蕈蚊防效突出,并具有较好的持续控害作用。当孢子浓度为1×10^(9)孢子/m L时,处理后7 d防效为95.57%,与化学杀虫剂噻虫胺(93.57%)相当。因此,将冻土毛霉菌株BO-1作为韭菜迟眼蕈蚊生防菌剂加以进一步开发可行性较强。

关键词：韭菜迟眼蕈蚊冻土毛霉昆虫病原真菌致病力防治效果

牛多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及致病力评估

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中国兽医学报 2024年第1期44卷 80-87页

作者：朱杰赵旭东笑骆建铧席俊程王贵平贾爱卿广东海大集团股份有限公司畜牧水产研究中心广东广州511400 广东海大畜牧兽医研究院广东广州511400 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease,BRD)是牛场中重要的疾病之一,给我国养牛业造成了严重的经济损失。多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)和溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)是与BRD相关的主要细菌性病原。为... 详细信息

牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease,BRD)是牛场中重要的疾病之一,给我国养牛业造成了严重的经济损失。多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)和溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)是与BRD相关的主要细菌性病原。为分离纯化到目前Pm和Mh流行的优势毒株,建立合适的小动物攻毒模型,给BRD疫苗研制提供有效的疫苗候选株。本研究首先从患BRD牛的病料中进行Pm和Mh的检测、分离鉴定,确定基因型且评估分离株对小鼠的致病性,筛选合适的疫苗候选株。结果显示,本研究在2022年11-12月从我国3个省份的6个牛场采集到48份患有BRD的牛鼻拭子,PCR检测结果显示Pm的检出率为47.9%(95%CI:33.3~62.8),Mh的检出率为37.5%(95%CI:24.0~52.6),Pm/Mh共感染的检出率为18.8%(95%CI:8.9~32.6)。在阳性样本中分离纯化得到12株Pm,经血清型鉴定均为A型多杀性巴氏杆菌(PmA);分离到11株Mh,其中7株为A1型,4株为A6型,且在同一头牛的鼻拭子中同时分离到A1型和A6型的Mh。随后建立PmA和Mh的小鼠感染模型,筛选到PmA和Mh的强毒株分别是PmA GDP001株和Mh GDM019株,并且测定PmA GDP001株对小鼠的LD_(50)为10^(1.1) CFU,Mh GDM019株对小鼠的LD_(50)为10^(8.2) CFU。本研究揭示了我国部分地区牛场中BRD主要细菌性病原的流行病学,分离到了重要的病原(PmA和Mh),并且鉴定了分离株的血清型,且通过小鼠感染致病模型筛选到毒力强的PmA和Mh菌株,为BRD多联多价疫苗的研发提供了良好的疫苗候选株。

关键词：牛呼吸道疾病多杀性巴氏杆菌溶血性曼氏杆菌细菌分离血清型致病力