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生物学教学 2006年第3期31卷 77-78页

综合2005年7月1日《科技日报》和2005年8月26日《新民晚报》消息，2005年7月1日出版的国际权威杂志《细胞》用15页的篇幅，刊登了中科院生物物理研究所所长、清华大学生命科学与医学研究院副院长铙子和院士领导的一个研究小组的这一研... 详细信息

综合2005年7月1日《科技日报》和2005年8月26日《新民晚报》消息，2005年7月1日出版的国际权威杂志《细胞》用15页的篇幅，刊登了中科院生物物理研究所所长、清华大学生命科学与医学研究院副院长铙子和院士领导的一个研究小组的这一研究成果。他们经过三年的努力，在世界上率先解析了线粒体膜蛋白复合物Ⅱ的三维精细结构，填补了线粒体结构生物学和细胞生物学领域的空白。这个与呼吸氧化作用密切相关的膜蛋白复合物的发现及其结构的阐明。

关键词：膜蛋白复合物三维结构精细结构线粒体解析世界科学家生物学领域《科技日报》《细胞》

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双向BN/SDS-PAGE分离鉴定痢疾杆菌福氏5型M90T株毒力相关膜蛋白复合物

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生物技术通报 2011年第9期27卷 163-166,180页

作者：龚益熊廖翔朱力吴兰周晓巍梁龙黄培堂南昌大学食品工程与生命科学学院南昌330047 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

通过蓝色非变性凝胶电泳(BN-PAGE)比较痢疾杆菌福氏5型野生株M90T和大质粒缺失株M90TΔT的膜蛋白复合物,发现一个野生株特有的复合物,其分子量约为290 kD,命名为M90T-290。通过第二向SDS-PAGE分离M90T-290得到6个蛋白亚基,质谱鉴定为:... 详细信息

通过蓝色非变性凝胶电泳(BN-PAGE)比较痢疾杆菌福氏5型野生株M90T和大质粒缺失株M90TΔT的膜蛋白复合物,发现一个野生株特有的复合物,其分子量约为290 kD,命名为M90T-290。通过第二向SDS-PAGE分离M90T-290得到6个蛋白亚基,质谱鉴定为:一个由大质粒编码的毒力蛋白Apyrase(ATP-二磷酸水解酶)和5个染色体编码的蛋白,这些蛋白可能以膜复合物的形式影响毒力蛋白IcsA的单极性分布和痢疾杆菌在细胞间的扩散。这个新发现的毒力相关膜复合物在痢疾杆菌的致病过程中可能发挥重要作用。

关键词：痢疾杆菌蓝色非变性凝胶电泳膜蛋白复合物毒力 ATP-二磷酸水解酶

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福氏志贺氏菌M90T毒力相关膜蛋白复合物组成蛋白基因缺失突变体的构建

福氏志贺氏菌M90T毒力相关膜蛋白复合物组成蛋白基因缺失突变体的...

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作者：冉金宝内蒙古农业大学

学位级别：硕士

志贺氏菌是引起人类腹泻病常见的病原菌之一,严重影响人们的日常生活,重症者致死。目前由于人们对志贺氏菌的致病机制和宿主的免疫保护机制还不十分清楚,还未研究出非常有效的疫苗,无法有效控制传染。细菌膜蛋白复合物在细菌致病的... 详细信息

志贺氏菌是引起人类腹泻病常见的病原菌之一,严重影响人们的日常生活,重症者致死。目前由于人们对志贺氏菌的致病机制和宿主的免疫保护机制还不十分清楚,还未研究出非常有效的疫苗,无法有效控制传染。细菌膜蛋白复合物在细菌致病的过程中发挥着重要的作用,而毒力大质粒是志贺氏菌致病的关键,毒力大质粒丢失后志贺氏菌失去致病性,那么野生株和毒力大质粒缺失株的膜蛋白复合物是否存在差异,如果存在差异,差异之处的膜蛋白复合物是否参与志贺氏菌的致病过程或影响志贺氏菌的毒力?本实验室以此为出发点通过BN PAGE,分离了志贺氏菌福氏5型M90T野生株和M90T毒力大质粒缺失株膜蛋白复合物谱,通过比较观察,发现在分子量约290kDa处有一条野生株特有的条带,此条带经质谱鉴定后,包含由毒力大质粒编码的Apyrase和染色体编码的DnaK、C1pB、 GapA、EF-Tu、YdgA6个蛋白质组成。经文献调研,其中Apyrase和DnaK均能影响外膜蛋白IcsA的极性分布和功能,减弱了志贺氏菌的毒力。综合分析,我们推测此复合物的各个蛋白可能共同调节外膜蛋白IcsA的极性分布和功能。为验证我们的推测,本实验采用由Datsenko和Wanner建立的λ Red重组系统,成功敲除了apyrase、 dnaK、 c1pB、 ydgA及icsA,为下步工作奠定了良好的基础。同时,在构建缺失突变体的过程中,经过摸索优化,掌握了高效、稳定的操作方法。

关键词：志贺氏菌膜蛋白复合物 λRed重组系统缺失突变体

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肺炎球菌多糖-脑膜炎球菌外膜蛋白复合物结合菌苗在婴幼儿中的免疫原性

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国际生物制品学杂志 1996年第5期19卷 224-225页

作者：肖詹蓉

本文对由6B、14、19F和23F型肺炎球菌荚膜多糖(PS)和脑膜炎球菌外膜蛋白复合物(OMPC)组成的4价肺炎球菌PS-脑膜炎球菌OMPC结合菌苗(Pnc OMPC)在婴幼儿中的免疫原性进行了研究。作者把62名婴儿分为A、B两组,A组,27人,于2、4和6月龄接种Pn... 详细信息

本文对由6B、14、19F和23F型肺炎球菌荚膜多糖(PS)和脑膜炎球菌外膜蛋白复合物(OMPC)组成的4价肺炎球菌PS-脑膜炎球菌OMPC结合菌苗(Pnc OMPC)在婴幼儿中的免疫原性进行了研究。作者把62名婴儿分为A、B两组,A组,27人,于2、4和6月龄接种Pnc OMPC,于7和14月龄时采血;B组,35人,于4、6和14月龄接种,于7和15月龄时采血,31名幼儿于24月龄时接种1剂菌苗,其中10人于26月龄时加强接种1剂,于27月龄时采血。

关键词：脑膜炎球菌肺炎球菌免疫原性菌苗疫苗膜蛋白复合物婴幼儿

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弗氏志贺菌M90T株毒力相关膜蛋白复合物组成基因缺失突变体的构建

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生物技术通讯 2012年第6期23卷 777-780页

作者：冉金宝廖翔周围王羽魏波高原岳俊杰梁龙王纯洁内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

目的:构建弗氏志贺菌M90T株毒力相关膜蛋白复合物组成蛋白基因的缺失突变株。方法:分别扩增目的基因的上、下游同源臂和卡那霉素抗性基因片段,利用重叠延伸PCR技术将这3个片段融合为打靶片段,电击转化M90T/pKD46感受态细胞,在λRed重组... 详细信息

目的:构建弗氏志贺菌M90T株毒力相关膜蛋白复合物组成蛋白基因的缺失突变株。方法:分别扩增目的基因的上、下游同源臂和卡那霉素抗性基因片段,利用重叠延伸PCR技术将这3个片段融合为打靶片段,电击转化M90T/pKD46感受态细胞,在λRed重组系统的作用下,通过同源重组将目的基因置换为卡那霉素抗性基因,之后在辅助质粒pCP20的作用下切除FRT位点之间的卡那霉素抗性基因,得到基因缺失突变体。结果与结论:分别构建了M90T株毒力相关膜蛋白复合物4个组成蛋白Apy、DnaK、ClpB、YdgA的基因缺失突变体,为进一步研究各基因的功能提供了突变体。

关键词：膜蛋白复合物缺失突变株重叠延伸PCR λRed重组系统弗氏志贺菌M90T株

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