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膜联蛋白a2在小鼠视网膜新生血管形成过程中的表达及作用机制

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中华眼科杂志 2013年第7期49卷 642-648页

作者：王猛杨侠董晓光山东省医学科学院山东省眼科研究所山东省眼科学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地青岛266071 临沂市人民医院眼科

目的探讨膜联蛋白a2（ANXa2）在小鼠视网膜新生血管形成过程中的表达及作用机制。方法实验研究。将C57BL/6J小鼠分为4组：正常组（80只）、氧诱导视网膜病变（OIR）空白对照组（80只）、OIR阴性干扰组（50只）和OIR阳性干扰组（50只）... 详细信息

目的探讨膜联蛋白a2（ANXa2）在小鼠视网膜新生血管形成过程中的表达及作用机制。方法实验研究。将C57BL/6J小鼠分为4组：正常组（80只）、氧诱导视网膜病变（OIR）空白对照组（80只）、OIR阴性干扰组（50只）和OIR阳性干扰组（50只）。采用视网膜铺片法对比观察氧诱导视网膜新生血管形态学变化。实时荧光（real-time）PCR法检测正常组和OIR空白对照组12-30日龄小鼠视网膜组织中ANXa2mRNA的表达变化。取4组中17日龄小鼠视网膜行视网膜铺片。应用real-timePCR法及免疫印迹法检测4组17日龄小鼠视网膜组织中ANXa2、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9和组织金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）的mRNA和蛋白表达情况。应用单因素方差分析对4组结果进行比较，进一步的两两比较采用SNK-q检验。结果4组17日龄小鼠视网膜铺片结果发现，与正常组相比，OIR空白对照组视网膜新生血管迂曲、扩张，分布紊乱，渗漏严重，血管分层不清，大量异常交通支。ANXa2基因干扰后，OIR阳性干扰组视网膜新生血管迂曲现象减轻，血管渗漏较少，微血管瘤及新生血管芽数量减少，视网膜层次较明显，新生血管的危害减轻。不同日龄小鼠视网膜中ANXa2基因表达水平与新生血管生长密切相关，呈现出视网膜血管发育旺盛期高表达，而血管发育停滞期低表达的趋势。real-timePCR法检测结果显示，4组小鼠视网膜中ANXa2、VEGF-OL、MMP-2、MMP-9和TIMP-2的mRNA表达水平的差异均有统计学意义（F=8．122-74．009，P值均〈0．05）。进一步两两比较结果显示，OIR空白对照组的VEGF-α（0．22±0．04）、MMP-2（11．08±1．28）、MMP-9（4．64±0．38）的基因表达水平较正常组（0．16±0．02、2．18±1．39、1．17±0．25）显著上调（SNK-q检验：P值均〈0．01），而OIR阳性干扰组的VEGF-α（0．02±0．01）、MMP-2（2．21±0．42）、MMP-9（1．33±0．10）的基因表达水平较OIR空白对照组下调（SNK-q检验：P值均〈0．01）；OIR空白对照组的TIMP-2基因表达水平（0．59±0．15）较正常组（1．35±0．01）下调（SNK-q检验：P〈0．05），而OIR阳性干扰组TIMP-2的基因表达水平（1．19±0．16）较OIR空白对照组上调（SNK-q检验：P〈0．05）。免疫印迹法在蛋白水平的检测得到类似结果。结论ANXa2在诱导小鼠视网膜新生血管生成时高表达，可调节新生血管相关因子的表达，影响视网膜新生血管的形态学变化。基因干扰技术能成功抑制ANXa2基因的表达，ANXa2有望成为防治视网膜新生血管新的靶点。

关键词：视网膜新生血管化膜联蛋白a2 血管内皮生长因子A 基质金属蛋白酶类

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膜联蛋白a2磷酸化与功能调控研究进展

第二军医大学学报 2019年第2期40卷 213-218页

作者：李辰跃顾操赵世红海军军医大学(第二军医大学)长海医院眼科上海200433

膜联蛋白a2(Anxa2)是一种多功能蛋白,通过多种翻译后修饰来调控其复杂的功能。蛋白质磷酸化是目前最受关注的Anxa2翻译后修饰方式,Ser11、Ser25和Tyr23是最主要的3个磷酸化位点。磷酸化对Anxa2功能调控的可能影响一直是热门话题。近年... 详细信息

膜联蛋白a2(Anxa2)是一种多功能蛋白,通过多种翻译后修饰来调控其复杂的功能。蛋白质磷酸化是目前最受关注的Anxa2翻译后修饰方式,Ser11、Ser25和Tyr23是最主要的3个磷酸化位点。磷酸化对Anxa2功能调控的可能影响一直是热门话题。近年来研究发现在肿瘤细胞外泌体中也存在Anxa2表达,故对Anxa2及其磷酸化的研究也从细胞内拓展至细胞外。Anxa2及其磷酸化的研究在众多临床学科领域也取得了令人瞩目的成果。本文就Ser11、Ser25和Tyr23磷酸化位点对Anxa2功能调控的影响及其在外泌体中的研究进展作一综述。

关键词：膜联蛋白a2 磷酸化外泌体丝氨酸酪氨酸

膜联蛋白a2在炎症性肠病肠粘膜中的表达及临床意义

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南方医科大学学报 2012年第11期32卷 1548-1552页

作者：张朝霞赵芯梅吕超蓝李晨智发朝南方医科大学南方医院消化内科//省胃肠疾病重点实验室广东广州510515

目的探讨膜联蛋白a2(ANXa2)在炎症性肠病(IBD)肠粘膜组织中的表达及临床意义。方法免疫组织化学、荧光定量PCR方法检测ANXa2在54例溃疡性结肠炎(UC)、37例克罗恩病(CD)及15例正常肠粘膜组织中的表达,并分析其表达与IBD临床、病理及内镜... 详细信息

目的探讨膜联蛋白a2(ANXa2)在炎症性肠病(IBD)肠粘膜组织中的表达及临床意义。方法免疫组织化学、荧光定量PCR方法检测ANXa2在54例溃疡性结肠炎(UC)、37例克罗恩病(CD)及15例正常肠粘膜组织中的表达,并分析其表达与IBD临床、病理及内镜参数间的关系。结果 ANXa2在UC的阳性表达显著高于CD及正常对照组(Pa2在CD的表达较正常对照组低(P0.05)。与正常对照及CD相比较,ANXa2 mRNA表达量在UC中明显升高(Pa2可作为IBD的诊断与鉴别诊断指标,ANXa2表达在UC发生发展中可能起着重要作用,有望作为其早期诊断及靶向治疗的分子标记。

关键词：膜联蛋白a2 炎症性肠病溃疡性结肠炎克罗恩病

膜联蛋白a2质粒的构建及其在膀胱癌pumc-91细胞增殖和迁移中的作用

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西安交通大学学报（医学版） 2023年第4期44卷 511-517页

作者：孟倩张曼首都医科大学附属北京世纪坛医院检验科北京100038 北京大学第九临床医学院检验科北京100038 尿液细胞分子诊断北京重点实验室北京100038

目的膜联蛋白a2(annexin a2,Anxa2)在多种肿瘤细胞中具有调节生物活性的作用。本研究旨在探讨Anxa2蛋白的表达与膀胱癌pumc-91细胞增殖和迁移的相关性。方法扩增ANXa2序列,插入pcDNA3.1(+)载体,制备pcDNA3.1(+)-ANXa2质粒。用脂质体lipo... 详细信息

目的膜联蛋白a2(annexin a2,Anxa2)在多种肿瘤细胞中具有调节生物活性的作用。本研究旨在探讨Anxa2蛋白的表达与膀胱癌pumc-91细胞增殖和迁移的相关性。方法扩增ANXa2序列,插入pcDNA3.1(+)载体,制备pcDNA3.1(+)-ANXa2质粒。用脂质体lipo2000将pcDNA3.1(+)-ANXa2瞬时转染至pumc-91膀胱癌细胞中。Western blotting检测空白组、转染pcDNA3.1(+)空载的对照组和转染pcDNA3.1(+)-ANXa2质粒的实验组中Anxa2蛋白的表达。利用Cell Counting Kit-8(CCK8)检测pumc-91细胞的增殖能力,transwell实验检测pumc-91细胞的迁移水平。采用单因素方差分析或重复测量的方差分析比较各组间检测数据的差异。结果PcDNA3.1(+)-ANXa2质粒构建成功,测序完全正确。Western blotting检测显示,与空白组和对照组相比,实验组Anxa2蛋白表达水平增高。CCK8实验显示实验组增殖的pumc-91细胞数量相比于空白组(P27)也明显增多。结论Anxa2蛋白的表达上调可能在膀胱癌pumc-91细胞增殖和迁移中起重要作用。

关键词：膜联蛋白a2 膀胱癌 pcDNA3.1(+) 增殖迁移

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膜联蛋白a2基因对多发性骨髓瘤细胞的诱导凋亡作用及相关机制研究

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中国实验血液学杂志 2012年第6期20卷 1384-1388页

作者：包红雨王建宁侯艳秋宋敏张柳波孟庆齐阮长耿南京医科大学第二附属医院血液科江苏南京210011 苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215007

本研究探讨膜联蛋白a2(Anxa2)基因诱导骨髓瘤U266、RPMI8226细胞凋亡的作用及相关机制。采用Anxa2 siRNA转染人骨髓瘤U266、RPMI8226细胞,应用实时PCR和Western blot检测Anxa2基因和蛋白的表达。应用流式细胞术检测细胞凋亡,应用实时PC... 详细信息

本研究探讨膜联蛋白a2(Anxa2)基因诱导骨髓瘤U266、RPMI8226细胞凋亡的作用及相关机制。采用Anxa2 siRNA转染人骨髓瘤U266、RPMI8226细胞,应用实时PCR和Western blot检测Anxa2基因和蛋白的表达。应用流式细胞术检测细胞凋亡,应用实时PCR检测凋亡相关基因的表达水平。结果表明,Anxa2siRNA转染U266和RPMI8226后,Anxa2基因和蛋白表达水平均明显下调;细胞凋亡率增高(P2、IL-6的表达(Pa2基因沉默在骨髓瘤细胞U266和RPMI8226凋亡中起促进作用。

关键词：膜联蛋白a2 siRNA 多发性骨髓瘤细胞凋亡

膜联蛋白a2表达下调在前列腺癌侵袭转移中作用机制的研究

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中华泌尿外科杂志 2013年第12期34卷 906-911页

作者：丁滔郑江花洪斌何春峰上海中医药大学附属普陀医院泌尿外科 200062 上海市复旦大学附属公共卫生临床中心医学检验科

目的探讨膜联蛋白（Annexin）a2表达下调在前列腺癌侵袭、转移中的作用机制。方法2010年1月至2012年6月我们采用蛋白质印迹法检测较高转移潜能的前列腺癌细胞C4．2B、较低转移潜能的前列腺癌细胞LNCaP和PC3中Annexina2表达水平。siRNA... 详细信息

目的探讨膜联蛋白（Annexin）a2表达下调在前列腺癌侵袭、转移中的作用机制。方法2010年1月至2012年6月我们采用蛋白质印迹法检测较高转移潜能的前列腺癌细胞C4．2B、较低转移潜能的前列腺癌细胞LNCaP和PC3中Annexina2表达水平。siRNA技术干扰前列腺癌PC3细胞中Annexina2表达后，噻唑盐（MTT）法检测细胞增殖情况，流式细胞技术检测细胞凋亡情况，蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9表达水平的变化，Transwell小室和划痕实验检测前列腺癌PC3细胞体外侵袭能力及迁移能力的变化。结果C4—2B细胞中Annexina2表达水平与内参比较的相对灰度值为0．22，明显低于LNCaP和PC3细胞的0．93和O．95，差异有统计学意义（P〈0．01）。将脂质体、Annexina2的siRNA干扰载体质粒和对照载体质粒分别转染到PC3细胞株，构建3个细胞株：PC3-Lip、PC3-ControlVector、PC3-ANXa2-siRNA。采用siRNA技术干扰Annexina2表达后，MTT法检测PC3-ANXa2-siRNA细胞生长速度快于PC3、PC3-Lip、PC3-ControlVector细胞，差异有统计学意义（P〈0．05）。流式细胞仪检测PC3-ANXa2-siRNA细胞的凋亡率为（6．2±2．6）％，与PC3的（2．3±1．9）％、PC3-Lip的（2．1±2．0）％、PC3-ControlVector的（2．0±1．8）％比较差异无统计学意义（P〉0．05）。蛋白质印迹法检测PC3-ANXa2-siRNA细胞的Annexina2表达水平明显降低，而MMP-2、MMP-9表达水平上调，Transwell小室和划痕实验发现PC3-ANXa2-siRNA细胞体外侵袭及迁移能力增加。结论下调Annexina2的表达能增加前列腺癌细胞的体外侵袭和转移能力，可能的作用机制是上调MMP．2和MMP-9的表达。

关键词：前列腺癌膜联蛋白a2 侵袭转移基质金属蛋白酶类

膜联蛋白a2在肿瘤生长调节与细胞骨架活动中的作用

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生理科学进展 2010年第6期41卷 457-460页

作者：李鹏鸽杨艳丽葛玉婷尹田乐侯颖春陕西师范大学生命科学学院西安710062

膜联蛋白a2(annexin a2,ANXa2)是一种钙/磷脂结合的多功能蛋白,参与包括信号转导、DNA合成、细胞增殖和凋亡、黏附、迁移等多种生物学行为。近来大量研究表明,ANXa2在多种肿瘤中表达失调,且其表达水平与肿瘤的发生、侵润、转移、临床分... 详细信息

膜联蛋白a2(annexin a2,ANXa2)是一种钙/磷脂结合的多功能蛋白,参与包括信号转导、DNA合成、细胞增殖和凋亡、黏附、迁移等多种生物学行为。近来大量研究表明,ANXa2在多种肿瘤中表达失调,且其表达水平与肿瘤的发生、侵润、转移、临床分期和预后密切相关。本文主要就ANXa2的生物学活性调节及其与肿瘤生长和细胞骨架活动的关系进行综述。

关键词：膜联蛋白a2 细胞增殖细胞骨架肿瘤

膜联蛋白a2对肺炎支原体诱导的人气道上皮细胞EGFR/NF-κB信号转导及黏蛋白表达的影响

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中国当代儿科杂志 2017年第7期19卷 820-825页

作者：申冬冬袁飞侯江红河南省中医院儿科河南郑州450002

目的探讨沉默膜联蛋白a2(Anx a2)对肺炎支原体(MP)处理后人气道上皮细胞H292表皮生长因子受体(EGFR)/核因子κB(NF-κB)信号转导及黏蛋白表达的影响。方法将H292细胞分为对照组、MP组、NC-si RNA+MP组和Anx a2 si RNA+MP组。MP组上皮细... 详细信息

目的探讨沉默膜联蛋白a2(Anx a2)对肺炎支原体(MP)处理后人气道上皮细胞H292表皮生长因子受体(EGFR)/核因子κB(NF-κB)信号转导及黏蛋白表达的影响。方法将H292细胞分为对照组、MP组、NC-si RNA+MP组和Anx a2 si RNA+MP组。MP组上皮细胞采用5μg/m L MP抗原孵育2 h。NC-si RNA+MP组和Anx a2 si RNA+MP组细胞分别转染NC-si RNA和Anx a2 si RNA 24 h后用MP抗原刺激2 h。MTT法检测各组细胞活性;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测各组细胞中Anx a2 m RNA的表达水平;Western blot法检测各组细胞Anx a2、磷酸化EGFR(p-EGFR)、磷酸化p65 NF-κB(p-p65 NF-κB)的表达水平;酶联免疫吸附试验检测黏蛋白5AC(MUC5AC)和黏蛋白5B(MUC5B)的分泌。结果 MP组和NC-si RNA+MP组细胞活性低于对照组(Pa2 si RNA+MP组细胞活性高于MP组和NC-si RNA+MP组,但仍低于对照组(Pa2 m RNA和蛋白表达水平均明显高于Anx a2 si RNA+MP组(P蛋白表达水平均明显升高(Pa2 si RNA+MP组上述蛋白表达水平则低于MP组和NC-si RNA+MP组,但仍高于对照组(Pa2通过介导人气道上皮细胞EGFR/NF-κB信号活化和黏蛋白表达参与MP抗原诱导的气道病变。

关键词：膜联蛋白a2 肺炎支原体表皮生长因子受体核因子κB 气道上皮细胞

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膜联蛋白a2对人肝癌细胞生物学行为的影响

中国生物工程杂志 2010年第11期30卷 11-16页

作者：魏丽丽李润册强荣兵张楠楠刘月月张国芳杨梅侯颖春陕西师范大学生命科学学院肿瘤分子细胞生物学实验室西安710062

为了研究膜联蛋白a2(ANXa2)基因表达水平与人肝癌细胞生物学行为之间的关系,采用已优化转染条件的磷酸钙法将针对ANXa2的siRNA重组质粒导入人肝癌细胞SMMC-7721并观察对靶基因表达及细胞生物学行为的影响。以半定量RT-PCR和Western blot... 详细信息

为了研究膜联蛋白a2(ANXa2)基因表达水平与人肝癌细胞生物学行为之间的关系,采用已优化转染条件的磷酸钙法将针对ANXa2的siRNA重组质粒导入人肝癌细胞SMMC-7721并观察对靶基因表达及细胞生物学行为的影响。以半定量RT-PCR和Western blotting检测转染后不同时间(24h、48h、72h和96h)ANXa2mRNA及蛋白表达变化;以MTT法、Hoechast33258染色及体外损伤修复实验等分析抑制ANXa2表达后对SMMC-7721细胞生物学行为的影响。结果显示:所设计的四条siRNA序列均不同程度抑制了ANXa2的表达(pa2表达敲低程度呈正相关。结论:ANXa2的高表达水平与肝癌细胞的凋亡、生长及运动能力密切相关,以RNAi方法抑制该基因的表达可以有效地抑制肝癌细胞的恶性生物学行为。上述结果为肝癌的实验性基因治疗研究提供了新的思路和对策。

关键词：膜联蛋白a2 RNA干扰肝癌生长、凋亡及迁移