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腺病毒相关病毒介导基因治疗的研究进展

华西医学 2000年第4期15卷 502-504页

作者：王忠严律南华西医科大学附属第一医院外科实验室成都610041

基因治疗的载体可分为病毒载体和非病毒载体两类.常用的病毒载体有逆转录病毒、腺病毒及腺病毒相关病毒(AAV)等.腺病毒相关病毒是一个新的有前景的病毒载体,与逆转录病毒和腺病毒相比,具有以下优点:(1)宿主范围广,能感染哺乳类动物(人... 详细信息

基因治疗的载体可分为病毒载体和非病毒载体两类.常用的病毒载体有逆转录病毒、腺病毒及腺病毒相关病毒(AAV)等.腺病毒相关病毒是一个新的有前景的病毒载体,与逆转录病毒和腺病毒相比,具有以下优点:(1)宿主范围广,能感染哺乳类动物(人、鼠、猴、免)的多种类型的细胞.

关键词：腺病毒相关病毒基因治疗研究进展病毒载体基因结构靶向整合生物学特性

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中华老年医学杂志 2001年第4期20卷 275-278页

作者：高文谦李小鹰吴小兵李梁裴雪涛解放军总医院老年心内科北京市100853 中国预防医学科学院病毒学研究所军事医学科学院国家生物医学分析中心

目的　探讨充血性心力衰竭 (心衰 )及其他心脏疾病的基因治疗途径。　方法　构建携带人 β2 肾上腺素能受体 (β2 AR)和增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)双基因的腺病毒相关病毒 (adeno associatedvirus ,AAV)载体 ,感染大鼠的心肌细胞 ,检... 详细信息

目的　探讨充血性心力衰竭 (心衰 )及其他心脏疾病的基因治疗途径。　方法　构建携带人 β2 肾上腺素能受体 (β2 AR)和增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)双基因的腺病毒相关病毒 (adeno associatedvirus ,AAV)载体 ,感染大鼠的心肌细胞 ,检测心肌细胞 β2 AR、EGFP的表达及环腺苷酸(cAMP)的含量。　结果　Northern印迹杂交显示感染的心肌细胞表达人 β2 ARmRNA ;Western免疫印迹杂交分析表明感染的心肌细胞有人 β2 AR ;在荧光显微镜下可观察到心肌细胞表达EGFP ;放射性配基检测显示感染的心肌细胞 β AR密度〔(2 0 4 0± 6 4)fmol/mg蛋白〕明显高于未感染的心肌细胞〔(76 0± 2 8)fmol/mg蛋白 ,P <0 0 1〕 ;经 10 μmol/L异丙肾上腺素作用 ,感染的心肌细胞的cAMP含量〔(116 2± 5 8)pmol/ 10 6cells〕明显高于对照组〔(5 8 4± 4 6 )pmol/ 10 6cells,P <0 0 1〕。　结论　人β2 AR、EGFP基因经AAV载体导入心肌细胞后能有效地表达 ,且表达的人 β2

关键词：腺病毒相关病毒肾上腺素能受体荧光抗体技术基因治疗心肌细胞心脏病基因表达

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腺病毒及腺病毒相关病毒载体与基因治疗

国外医学（分子生物学分册） 1995年第3期17卷 123-126页

作者：郝秀娟军事医学科学院基础医学研究所北京100850

腺病毒及腺病毒相关病毒能感染增殖与静止的细胞,宿主范围广。其稳定、安全滴度高、转染效率高。腺病毒载体能承载较大的外源基因,腺病毒相关病毒载体能定向整合入靶细胞基因组内等特点,使腺病毒及腺病毒相关病毒载体成为体内用于基因... 详细信息

腺病毒及腺病毒相关病毒能感染增殖与静止的细胞,宿主范围广。其稳定、安全滴度高、转染效率高。腺病毒载体能承载较大的外源基因,腺病毒相关病毒载体能定向整合入靶细胞基因组内等特点,使腺病毒及腺病毒相关病毒载体成为体内用于基因治疗的理想运载系统。

关键词：腺病毒腺病毒相关病毒载体基因治疗

睾丸组织及异常精液样本的腺病毒相关病毒DNA

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国外医学（计划生育分册） 2002年第3期21卷 189-190页

作者：张晓晶

辅助病毒依赖性病毒相关病毒(AAV)可能通过性传播。虽然AAV本身可能并不致病,但女性生殖道持续性AAV感染有可能导致流产。从不育男性精液的精子中检出AAVDNA,精液中分离出AAV毒粒,均有报道。本研究AAV在正常精液及无精症睾丸中的检出率。

关键词：睾丸组织异常精液样本腺病毒相关病毒 DNA

人肝癌特异性HSV-TK/GCV重组腺病毒相关病毒质粒的构建与研究

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中国普外基础与临床杂志 2004年第3期11卷 234-237页

作者：李志辉严律南赵永恒刘智敏刘自明李玉四川大学华西医院普外科成都610041

目的　构建肝癌特异性HSV TK/GCV重组腺病毒相关病毒质粒并了解其在细胞内的表达。方法　以腺病毒相关病毒的质粒WAV2作为载体 ,将TK基因插在甲胎蛋白 (AFP)增强子 /白蛋白启动子 (AFP增强子/ALB启动子 )的调控基因的下游 ,重组成pWAV2 ... 详细信息

目的　构建肝癌特异性HSV TK/GCV重组腺病毒相关病毒质粒并了解其在细胞内的表达。方法　以腺病毒相关病毒的质粒WAV2作为载体 ,将TK基因插在甲胎蛋白 (AFP)增强子 /白蛋白启动子 (AFP增强子/ALB启动子 )的调控基因的下游 ,重组成pWAV2 /AFP ALB/HYTK质粒载体。同时构建质粒载体pEGFP 1/AFP ALB。然后将上述两种不同载体分别转入AFP阳性表达的HepG2细胞株以及阴性表达的 772 1、SPC和 790 1细胞株。结果　绿色荧光蛋白只在AFP阳性表达的HepG2细胞株表达 ,采用PCR技术 ,以HSV TK的引物扩增所抽提的总DNA中 ,只有AFP阳性表达的HepG2细胞株扩增出了 710bp的DNA片段。结论　pWAV2 /AFP ALB/HYTK质粒载体在体外实验中具有很好的靶向性。

关键词：肝癌特异性HSV-TK/GCV 腺病毒相关病毒重组质粒基因治疗

超声造影剂介导下增强腺病毒相关病毒心肌靶向转染率的实验研究

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超声造影剂介导下增强腺病毒相关病毒心肌靶向转染率的实验研究

腺病毒相关病毒携带低密度脂蛋白受体基因对实验性高胆固醇血症的治疗作用

第十届全国超声心动图学术会议

作者：穆玉明杨少玲王春梅徐娟新疆医科大学第一附属医院超声医学中心心脏超声诊断科

目的本研究旨在探讨超声微泡破裂法增强腺相关病毒载体(rAAV2-GFP)心肌靶向转染的转染效率及经尾静脉注射rAAV2-GFP的最佳滴度以及实验前后大鼠心功能的变化。方法同种属、同窝别、同年龄雌雄不限SD大鼠21只,随机分为7组,每组3只。根据r... 详细信息

目的本研究旨在探讨超声微泡破裂法增强腺相关病毒载体(rAAV2-GFP)心肌靶向转染的转染效率及经尾静脉注射rAAV2-GFP的最佳滴度以及实验前后大鼠心功能的变化。方法同种属、同窝别、同年龄雌雄不限SD大鼠21只,随机分为7组,每组3只。根据rAAV2-GFP滴度不同将实验组分为以下6组:1组,滴度为1.5×10vg/ml;2组,滴度为3.0×10vg/ml;3组,滴度为1.5×10vg/ml;4组,滴度为3.0×1010vg/ml;5组,滴度为1.5×10vg/ml;6组,滴度为3.0×10vg/ml。各实验组通过尾静脉注入携带上述不同滴度rAAV2-GFP的SonoVue微泡造影剂1.2 ml。对照组通过尾静脉注入1.2 ml的SonoVue。并进行体表心脏部位爆破心腔及心肌组织中的造影剂微泡,14 d后荧光显微镜下观察心肌内荧光的表达量代表腺相关病毒载体的转染量;其次将同种属、同窝别、同年龄雌雄不限SD大鼠20只,随机分为2组。对照组给予单纯尾静脉注射超声造影剂SonoVue并于体表心脏部位进行超声照射破坏造影剂微泡(不携带rAAV2-GFP);实验组给予尾静脉注射携带有rAAV2-GFP的SonoVue并于体表心脏部位进行超声照射。于实验前及实验后14 d采集大鼠二尖瓣水平短轴、乳头肌水平短轴及心尖短轴二维灰阶动态图。得出各节段及左室整体的应变、应变率、旋转角度、扭转角度、达峰时间参数。采用二维及M型超声心动图分别记录心率(HR)、左室舒张末期容积(EDV)、左室收缩末期容积(ESV)、左室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS);将SD大鼠60只随机分为6组:第一组给予单纯尾静脉注射超声造影剂SonoVue并进行超声照射爆破微泡造影剂;第二组给予单纯经尾静脉注射rAAV2-GFP,但不进行超声照射;第三组给予尾静脉注射rAAV2-GFP并进行超声照射爆破微泡造影剂;第四组先给予尾静脉注射超声造影剂再超声爆破造影剂微泡,再给予尾静脉注射rAAV2-GFP;第五组只给予尾静脉注射携带rAAV2-GFP超声造影剂,但不进行超声照射;第六组给予造影剂携带rAAV2-GFP尾静脉注射,并进行超声照射,爆破微泡造影剂。14 d后取心脏、肝脏、脑组织做冰冻切片荧光显微镜下进行荧光表达情况的观察。结果及结论超声及超声造影剂介导并进行定点爆破可以高效安全地促进腺相关病毒载体在心肌内的靶向转染。经尾静脉输入法超声介导下促进腺相关病毒心肌转染的最佳滴度为1.5×10vg/ml;超声介导下增强腺相关病毒心肌靶向转染对大鼠左心功能无影响。

关键词：超声造影剂检查腺病毒相关病毒心功能,左

来源： cnki会议评论

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中国科学（C辑） 1998年第5期28卷 470-476页

作者：陈光慧宋良文朱小君张霄瑜张晨晖王泰玲汤健北京医科大学心血管基础研究所北京100083

低密度脂蛋白受体 (LDL R)对于血清胆固醇的清除和预防动脉粥样硬化的发生起重要作用 .用构建了含有LDL R基因的重组腺病毒相关病毒 ,通过腺病毒包被蛋白脂质体 (Adenosome) ,转移至食饵性高脂血症家兔的肝脏内 ,证明可以降低血浆胆固... 详细信息

低密度脂蛋白受体 (LDL R)对于血清胆固醇的清除和预防动脉粥样硬化的发生起重要作用 .用构建了含有LDL R基因的重组腺病毒相关病毒 ,通过腺病毒包被蛋白脂质体 (Adenosome) ,转移至食饵性高脂血症家兔的肝脏内 ,证明可以降低血浆胆固醇水平。

关键词：腺病毒相关病毒低密度脂蛋白高胆固醇血症

北京大学基础医学院教授鲁凤民：补上“免疫债”强化免疫屏障

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北京大学基础医学院教授鲁凤民：补上“免疫债”强化免疫屏障

医学科学报

作者：陈祎琪

今年冬天出现了呼吸道病毒的感染高峰，以儿童为主体，同时也包括成人。对此，公众认为近期呼吸道感染性疾病的高流行其实是在还“免疫欠债”。确实，我们有一个免疫的“欠债”。2023年年初，欧洲和美国出现了不明原因儿童急性肝炎的流... 详细信息

今年冬天出现了呼吸道病毒的感染高峰，以儿童为主体，同时也包括成人。对此，公众认为近期呼吸道感染性疾病的高流行其实是在还“免疫欠债”。确实，我们有一个免疫的“欠债”。2023年年初，欧洲和美国出现了不明原因儿童急性肝炎的流行。发病儿童的症状非常重，出现了比较......

关键词：北京大学基础医学院不明原因免疫屏障腺病毒相关病毒

来源： cnki报纸评论

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肌萎缩侧索硬化基因治疗研究进展

中华神经科杂志 2022年第3期55卷 260-265页

作者：马志赵慧慧牛琦南京医科大学第一附属医院老年神经内科南京210029

肌萎缩侧索硬化是由大脑和脊髓运动神经元丢失引起的神经退行性疾病,目前尚无有效的治愈方法。基因疗法可以通过传递转基因取代或纠正有缺陷基因,也可以传递神经营养因子的表达,为肌萎缩侧索硬化的治疗带来了希望。基因治疗载体包括病... 详细信息

肌萎缩侧索硬化是由大脑和脊髓运动神经元丢失引起的神经退行性疾病,目前尚无有效的治愈方法。基因疗法可以通过传递转基因取代或纠正有缺陷基因,也可以传递神经营养因子的表达,为肌萎缩侧索硬化的治疗带来了希望。基因治疗载体包括病毒载体和非病毒载体。慢病毒载体能够传递治疗序列至中枢神经系统的运动神经元,腺病毒相关病毒也可以有效地介导基因表达和神经营养因子的传递。此外,基因编辑和反义寡核苷酸疗法也是有希望的治疗方案。文中从基础实验和临床试验的角度概述了肌萎缩侧索硬化基因疗法的临床前景。

关键词：肌萎缩侧索硬化寡核苷酸类,反义基因治疗腺病毒相关病毒