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骆驼刺酸性多糖对小鼠脾脏淋巴细胞免疫增强作用的研究

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南京农业大学学报 2022年第6期45卷 1220-1226页

作者：特列克·阿依恒别克赛福丁·阿不拉萨比热·热夏提况玲德力拜尔·木拉提阿得力江·吾斯曼新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆维吾尔自治区动物疫病预防控制中心新疆乌鲁木齐830011

[目的]本文旨在探讨骆驼刺酸性多糖(acidic Alhagi sparsifolia Shap polysaccharide,aASP)对小鼠脾淋巴细胞的免疫增强作用。[方法]采用醇沉法提取骆驼刺多糖,采用柱层析法对骆驼刺多糖进行分离及纯化,采用苯酚硫酸法、硫酸-咔唑法和BC... 详细信息

[目的]本文旨在探讨骆驼刺酸性多糖(acidic Alhagi sparsifolia Shap polysaccharide,aASP)对小鼠脾淋巴细胞的免疫增强作用。[方法]采用醇沉法提取骆驼刺多糖,采用柱层析法对骆驼刺多糖进行分离及纯化,采用苯酚硫酸法、硫酸-咔唑法和BCA微孔酶标仪法,检测糖、糖醛酸和蛋白含量,采用红外光谱法鉴别多糖性质。采用MTT法确定aASP对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度,在安全浓度范围内500、125和31.25μg·mL^(-1)3个浓度下检测单独、协同脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和植物血凝素(phytoheamagglutinin,PHA)对脾淋巴细胞的增殖效果;流式细胞术检测aASP对淋巴细胞亚群分化的影响;ELISA法检测aASP对淋巴细胞细胞因子分泌的影响。[结果]骆驼刺多糖提取物中多糖含量为(81.8±1.2)%,糖醛酸含量为(17.34±0.75)%,蛋白含量为(0.54±0.08)%;红外光谱显示aASP在1746.53 cm^(-1)处有较强的吸收峰,结合糖醛酸含量判定aASP为酸性多糖。高、中、低浓度的aASP均可促进脾脏淋巴细胞增殖,协同LPS和PHA能够更显著促进B细胞和T淋巴细胞的增殖(P细胞术和ELISA检测结果显示aASP能够促进CD4^(+)和CD8a^(+)T细胞的分化,并促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-4。[结论]aASP可以增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,诱导小鼠脾脏T淋巴细胞产生Th1(helper T lymphocyte 1)及Th2(helper T lymphocyte 2)混合型免疫应答,免疫细胞偏向CD4^(+)T细胞分化。

关键词：骆驼刺酸性多糖脾脏淋巴细胞免疫增强细胞分化

胚胎植入期二硫化碳暴露对孕鼠脾脏淋巴细胞DNA损伤的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2013年第8期31卷 576-580页

作者：胡程霞张炳珍李春辉吴艳玲杨柳王志萍山东大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系济南250012 济南市天桥区卫生监督所

目的研究胚胎植入期二硫化碳（CS2）暴露对孕鼠脾脏淋巴细胞DNA损伤的影响，从免疫损伤角度探讨CS2致胚胎植入障碍的机制。方法分别建立不同暴露剂量和不同暴露时间2个动物模型：模型1为不同CS2暴露剂量，即在小鼠受孕第4天（GD4），分... 详细信息

目的研究胚胎植入期二硫化碳（CS2）暴露对孕鼠脾脏淋巴细胞DNA损伤的影响，从免疫损伤角度探讨CS2致胚胎植入障碍的机制。方法分别建立不同暴露剂量和不同暴露时间2个动物模型：模型1为不同CS2暴露剂量，即在小鼠受孕第4天（GD4），分别给予4组小鼠一次性腹腔注射低（0．1LD50，157．8mg／kg）、中（0．2LD50，315．7mg／kg）、高（0．4LD50，631．4mg／kg）剂量的CS2和橄榄油对照组；模型2为不同CS2暴露时间，即4组小鼠分别在GD3、GD4、GD5和GD6一次性腹腔注射CS2（0．4LD50，631．4mg／kg），各组设平行对照。两模型对照组均注射等体积橄榄油。实验终点，制备胚胎植入期小鼠脾脏淋巴细胞单细胞悬液，用台盼蓝法检测细胞活性，并进行碱性单细胞凝胶电泳（SCGE）试验，检测孕鼠脾脏淋巴细胞DNA损伤状况。结果（1）中、高剂量组的DNA损伤程度与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．01）；反映DNA损伤程度的各指标与暴露剂量之间均存在回归关系，且差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）GD3、GD4、GD5和GD6暴露组的DNA损伤程度与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01），且GD4暴露组DNA损伤程度最明显。结论胚胎植入期CS2暴露可导致孕鼠脾脏淋巴细胞的DNA损伤，并且呈明显的剂量反应关系；GD4可能是CS2暴露致孕鼠脾脏淋巴细胞DNA损伤的敏感时间点。

关键词：二硫化碳 DNA损伤单细胞凝胶电泳脾脏淋巴细胞

苦丁茶冬青多糖对小鼠脾脏淋巴细胞的免疫调节和抗氧化作用

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食品工业科技 2022年第17期43卷 387-393页

作者：舒翔程明王辉朱红英谭乐和顾文亮朱科学中国热带农业科学院香料饮料研究所海南万宁571533 国家知识产权局专利局专利审查协作江苏中心江苏苏州215011 海南大学食品科学与工程学院海南海口570100 海南省特色热带作物适宜性加工与品质控制重点实验室海南万宁571533

本文通过体外培养小鼠脾脏淋巴细胞研究苦丁茶冬青多糖对正常小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节和抗氧化作用的影响。测定了不同浓度的苦丁茶冬青多糖(polysaccharide from Ilex kudingcha ***)对脾脏淋巴细胞体外增殖能力、抗氧化酶(SOD、T-AOC... 详细信息

本文通过体外培养小鼠脾脏淋巴细胞研究苦丁茶冬青多糖对正常小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节和抗氧化作用的影响。测定了不同浓度的苦丁茶冬青多糖(polysaccharide from Ilex kudingcha ***)对脾脏淋巴细胞体外增殖能力、抗氧化酶(SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT)活力、丙二醛(MDA)含量及炎性细胞因子(TNF-α、IFN-γ和IL-1β)分泌水平的影响。结果显示,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖与苦丁茶冬青多糖浓度呈正相关,在80和160μg/mL浓度时,吸光度值分别为0.38和0.41,与空白对照组(0.31)相比具有极显著差异(P脾脏淋巴细胞分泌TNF-α、IFN-γ和IL-1β。本研究结果表明苦丁茶冬青多糖可通过促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖、增强细胞抗氧化能力及诱导炎性细胞因子分泌等发挥其免疫增强活性,该研究可为苦丁茶冬青的开发和利用提供理论支撑。

关键词：苦丁茶冬青多糖脾脏淋巴细胞抗氧化活性细胞因子免疫调节

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇与玉米赤霉烯酮联合暴露对体外培养鸡脾脏淋巴细胞内环境稳态的影响

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动物营养学报 2017年第8期29卷 2836-2842页

作者：任志华王亚超邓俊良四川农业大学动物医学院成都611130 西南科技大学绵阳621010

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与玉米赤霉烯酮与(ZEA)联合暴露对体外培养鸡脾脏淋巴细胞内环境稳态的影响。分别以0.012 50μg/mL DON+0.006 25μg/mL ZEA、0.050μg/mL DON+0.025μg/mL ZEA、0.2μg/mL DON+0.1μg/mL ZEA、0.... 详细信息

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与玉米赤霉烯酮与(ZEA)联合暴露对体外培养鸡脾脏淋巴细胞内环境稳态的影响。分别以0.012 50μg/mL DON+0.006 25μg/mL ZEA、0.050μg/mL DON+0.025μg/mL ZEA、0.2μg/mL DON+0.1μg/mL ZEA、0.8μg/mL DON+0.4μg/mL ZEA对体外培养鸡脾脏淋巴细胞进行联合暴露培养,48 h后测定细胞膜ATP酶(Ca^(2+)-ATP酶、Na^+/K^+-ATP酶)活性以及细胞内pH、Ca^(2+)水平和钙调蛋白(CaM)的mRNA表达水平。同时设不添加毒素的空白对照组。结果表明:添加毒素的各试验组间,细胞内Ca^(2+)水平、CaM mRNA表达水平随毒素浓度的升高而增加,且添加毒素的各试验组均显著或极显著高于空白对照组(P细胞内pH以及细胞膜Ca^(2+)-ATP酶与Na^+/K^+-ATP酶活性均随毒素浓度的升高而降低,且添加毒素的各试验组均显著或极显著低于空白对照组(P脾脏淋巴细胞内酸化、离子平衡失调等一系列细胞内环境稳态失衡,且呈剂量依赖性。

关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇玉米赤霉烯酮联合暴露脾脏淋巴细胞内环境稳态

DON、ZEA联合染毒对体外培养鸡脾脏淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的影响

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浙江农业学报 2018年第7期30卷 1110-1115页

作者：张卓辜彦霏阳莎莎王亚超邓俊良任志华四川农业大学动物医学院四川成都611130 西南科技大学四川绵阳621010

旨在研究DON、ZEA联合染毒对体外培养鸡脾脏淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的影响。DON、ZEA联合染毒剂量为0.012 5μg·mL^(-1)和0.006 25μg·mL^(-1)、0.050μg·mL^(-1)和0.025μg·mL^(-1)、0.2μg·mL^(-1)和0.1μg·mL^(-1)、0.8μg·mL^(-1)和0.4μg·mL^(-1),进行DON、ZEA联合染毒48 h对鸡脾脏淋巴细胞上清液IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ含量及其mRNA表达的影响。结果表明,各染毒组细胞上清液IL-10和IFN-γ蛋白含量,细胞内IL-2、IL-4和IL-10 mRNA水平随毒素剂量的升高而增加(P细胞上清液IL-2和IL-4蛋白含量均随毒素浓度的升高而降低(P细胞内IFN-γmRNA表达量均随毒素浓度的升高而先升高后降低(P细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ分泌失衡,且呈剂量依赖性;DON、ZEA联合染毒鸡脾淋巴细胞上调或下降促炎性细胞因子的水平;Th1和Th2细胞因子平衡失调,因此造成细胞免疫损伤,从而对细胞产生毒性。

关键词： DON ZEA 联合染毒脾脏淋巴细胞细胞因子

包虫囊液体外诱导小鼠脾脏淋巴细胞TLR2和IDO表达的实验研究

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中国病原生物学杂志 2020年第6期15卷 649-654,660页

作者：冯凯高飞马钰涛郁邦兴李亮郭保平单骄宇新疆医科大学口腔医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第二临床医学院新疆医科大学第六临床医学院新疆医科大学第一附属医院包虫病研究所新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室

目的研究细粒棘球蚴囊液对体外培养小鼠脾脏淋巴细胞TLR2和IDO表达的影响。方法制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,接种于24孔培养板中进行培养,用不同浓度比的包虫囊液(1∶10、1∶100)进行干预。分别在干预后12、24、36 h收集2份细胞及1份细胞... 详细信息

目的研究细粒棘球蚴囊液对体外培养小鼠脾脏淋巴细胞TLR2和IDO表达的影响。方法制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,接种于24孔培养板中进行培养,用不同浓度比的包虫囊液(1∶10、1∶100)进行干预。分别在干预后12、24、36 h收集2份细胞及1份细胞培养上清,一份细胞用于Trizol法提取总RNA,通过实时荧光定量PCR检测TLR2、IDO、IL-5的mRNA相对表达水平,另一份细胞采用Western blot方法检测TLR2、IDO蛋白。细胞上清中的IL-6、TGF-β含量采用ELISA法检测。对小鼠脾脏淋巴细胞中IDO与TLR2 mRNA的表达进行线性相关分析。结果实时荧光定量PCR检测HCF为1∶10、1∶100时均可上调小鼠脾脏淋巴细胞TLR2、IDO、IL-5 mRNA的表达,其中1∶100稀释的HCF在24h时分别为0.282±0.144、0.218±0.036、0.648±0.148,与对照组0.006±0.003、0.002±0.000、0.008±0.001比较差异均有统计学意义(P细胞上清中的IL-6、TGF-β含量升高,其中在HCF1∶100时,相应含量分别为(296.495±12.495)pg/ml和(449.700±5.350)pg/ml,与对照组(67.328±5.839)pg/ml和(324.200±8.065)pg/ml比较差异均有统计学意义(P脾脏淋巴细胞IDO与TLR2 mRNA表达水平呈正相关(R^2=0.9887,P脾脏淋巴细胞TLR2和IDO的表达具有上调作用,故认为在CE慢性感染过程中TLR2和IDO共同发生负性免疫调控作用以促进Th2型反应,导致包虫感染过程中的免疫逃避。

关键词：包虫囊液脾脏淋巴细胞 Toll样受体2 吲哚胺2,3-双加氧酶免疫逃避

氦氖激光合用环磷酰胺对S180荷瘤鼠脾脏淋巴细胞IL-2诱生活性和增殖反应的影响

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畜牧兽医学报 2004年第5期35卷 570-574页

作者：黄保续王洪斌刘焕奇曲志娜程绍辉刘西锋东北农业大学动物医学院哈尔滨150030 农业部动物检疫所青岛266032

以S180腹水瘤小鼠为动物模型,应用11.00、14.67和22.00J/cm23种剂量氦氖激光照射荷瘤鼠哈德腺,同时联合应用化疗药物环磷酰胺,对S180荷瘤鼠脾脏淋巴细胞IL-2诱生活性和淋巴细胞增殖反应的影响作了系统地研究。结果表明:CYT/氦氖激光照... 详细信息

以S180腹水瘤小鼠为动物模型,应用11.00、14.67和22.00J/cm23种剂量氦氖激光照射荷瘤鼠哈德腺,同时联合应用化疗药物环磷酰胺,对S180荷瘤鼠脾脏淋巴细胞IL-2诱生活性和淋巴细胞增殖反应的影响作了系统地研究。结果表明:CYT/氦氖激光照射联合应用组IL-2诱生活性和淋巴细胞增殖反应均明显高于CYT对照组。CYT可对荷瘤体产生某种程度的免疫抑制效应,而氦氖激光照射则可在某种程度上改善这一效应。

关键词：氦氖激光照射环磷酰胺 S180腹水瘤小鼠脾脏淋巴细胞 IL-2诱生活性增殖反应细胞免疫

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镉致鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤的研究

畜牧兽医学报 2005年第4期36卷 362-364页

作者：李金龙熊永忠徐世文王秀荣李术东北农业大学动物医学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

应用片段化DNA定量分析法和碱性单细胞凝胶电泳法,检测了10μmol/L镉对体外不同时间培养的鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤的情况,结果表明:10μmol/L的镉能够明显损伤鸡脾脏淋巴细胞DNA,并且呈现时间效应。提示镉致淋巴细胞DNA损伤是镉对禽类免... 详细信息

应用片段化DNA定量分析法和碱性单细胞凝胶电泳法,检测了10μmol/L镉对体外不同时间培养的鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤的情况,结果表明:10μmol/L的镉能够明显损伤鸡脾脏淋巴细胞DNA,并且呈现时间效应。提示镉致淋巴细胞DNA损伤是镉对禽类免疫毒性的重要机制之一。

关键词：脾脏淋巴细胞 DNA损伤镉鸡凝胶电泳法定量分析法时间效应免疫毒性 mol 单细胞片段化禽类

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中药成分对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响

畜牧兽医学报 2005年第11期36卷 1210-1214页

作者：王德云胡元亮孔祥峰孙峻岭张宝康刘家国夏明龙南京农业大学中兽医学研究室南京210095 南京市浦口区兽医站南京211800

为筛选增强免疫作用较好的中药成分和研制新型复方中药成分免疫增强剂,比较了4种浓度的当归多糖(CAPS)、黄芪多糖(APS)、板蓝根多糖(IRPS)、淫羊藿多糖(EPS)、蜂胶多糖(PPS)、淫羊藿黄酮(EF)、蜂胶黄酮(PF)、黄芪皂苷(AS)和人参皂苷(GS)... 详细信息

为筛选增强免疫作用较好的中药成分和研制新型复方中药成分免疫增强剂,比较了4种浓度的当归多糖(CAPS)、黄芪多糖(APS)、板蓝根多糖(IRPS)、淫羊藿多糖(EPS)、蜂胶多糖(PPS)、淫羊藿黄酮(EF)、蜂胶黄酮(PF)、黄芪皂苷(AS)和人参皂苷(GS)9种中药成分对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明,多数中药成分能促进淋巴细胞增殖,其中APS、EPS、GS和AS等在一定浓度既能单独又能协同ConA或LPS刺激淋巴细胞增殖,以EPS和APS作用最强。同时根据浓度试验结果,选出各药的合适浓度,进一步比较它们作用的差异,发现EPS和GS效果最好。这些中药成分可以作为复方中药成分免疫增强剂的组分药。

关键词：中药成分鸡脾脏淋巴细胞增殖